氧化低密度脂蛋白对体外培养的肾小球系膜细胞的影响

我们观察了经氯化铜氧化修饰所形成的氧化低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞生长、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的作用。结果发现，Ｏｘ－ＬＤＬ刺激肾小球系膜细胞４８ｈ、７２ｈ以及１０６ｈ，均有抑制该细胞生长的作用。刺激４８ｈ时，细胞对ＭＴＴ的摄入量（以Ａ５７０表示），与Ｏｘ－ＬＤＬ的浓度成反比（ｒ＝－０．９９５，Ｐ＜０．０１）。刺激１８ｈ的细胞上清对Ｌ９２９细胞（ＴＮＦ敏感株）的杀伤能力有所增强，上清中的ＬＤＨ含量明显升高。与未修饰的低密度脂蛋白相比，Ｏｘ－ＬＤＬ对系膜细胞表现出明显的毒性，在高脂血症肾损伤时具有重要意义     

氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡及其分子学机制 …

目的 研究氧化低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）凋亡的机制。方法 采用电镜观察、Ｈｏｅｃｈｅｔ３３３４２染色、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ印迹分析法观察Ｏｘ－ＬＤＬ诱导ＶＳＭＣｓ调亡的效应及其分子学机制。结果Ｏｘ－ＬＤＬ作用ＶＳＭＣｓ２４ｈ后,电镜下ＶＳＭＣｓ出现凋亡的形态学特征：细胞核固缩、凋亡小体形成;Ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３３４２染色可见,凋亡的细胞核或细胞质内出     

加味黄芪赤风汤调节慢性肾小球肾炎系膜细胞凋亡作用机制的网络药理学及实验研究

[目的] 结合网络药理学及实验验证,探索加味黄芪赤风汤对慢性肾小球肾炎的潜在作用机制。[方法] 通过多个药物靶点数据库,构建加味黄芪赤风汤作用于慢性肾小球肾炎的“药物-成分-靶点”网络,并对作用靶点进行富集分析,并进一步进行实验验证。[结果] 加味黄芪赤风汤治疗慢性肾小球肾炎的“药物-成分-靶点”网络共包含184个疾病靶点基因,富集分析结果提示其作用靶点主要集中在细胞凋亡相关通路。系膜细胞经脂多糖诱导增殖后,使用加味黄芪赤风汤含药血清进行干预,透射电镜观察显示,在中药各剂量组系膜细胞中,均可观察到细胞器减少、聚集及染色质固缩等凋亡相关的超微结构变化。流式细胞仪检测发现中药干预组的系膜细胞凋亡率高于其他组,并呈现剂量依赖性。而免疫印迹实验结果也显示,中药干预组中抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的表达量显著减少(P＜0.01),而促凋亡的Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)蛋白和半胱氨酸蛋白酶-3的表达量显著升高(P＜0.01)。[结论] 加味黄芪赤风汤可通过调节细胞凋亡,控制系膜细胞的炎性增殖,从而缓解慢性肾小球肾炎的发生和发展。     

阿妥伐他汀对高糖培养肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的：观察阿妥伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增生的作用，并探讨其作用机制、方法：用不同浓度的阿妥伐他汀刺激高糖培养的系膜细胞．用4—甲基偶氮四唑蓝(tetrazolium salt，MTY)法观察其增殖情况，并通过流式细胞仪检测其细胞周期变化。结果：阿妥伐他汀在一定范围内以剂量依赖及时间依赖关系抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞过度增生，并使G0—G1期细胞比例增高，S期细胞数减少，促进过度增殖的系膜细胞凋亡。结论：阿妥伐他汀能够抑制高糖诱导的系膜细胞增生，这种作用可能是通过抑制细胞分裂、复制以及促进细胞凋亡实现的。     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征ＤＮＡ梯形图谱（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），研究了氧化修饰和低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ｏｘ－ＬＤＬ处理的细胞核发生固缩，染色体ＤＮＡ断裂的的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化的ＬＤＬ（Ｎ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞雕凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰     

精-甘-天-丝四肽对肾小球系膜细胞凋亡相关基因的作用

目的探讨精氨酸－甘氨酸－天门冬氨酸－丝氨酸（ＲＧＤＳ）四肽对肾小球系膜细胞凋亡相关基因白细胞介素－１β－转化酶（ＩＣＥ）和ｂｃｌ－２表达的影响,为利用ＲＧＤＳ四肽调控系膜细胞的增殖与凋亡提供实验理论依据。方法合成ＲＧＤＳ四肽,采用经典的肾小球系膜细胞培养方法进行体外研究;碘化丙啶染色法观察凋亡细胞细胞核的固缩、碎裂现象;琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体ＤＮＡ的断裂现象;逆转录－聚合酶链反应技术检测凋亡相关基因ＩＣＥ和ｂｃｌ－２的表达变化。结果与ＲＧＤＳ四肽孵育１０小时后,肾小球系膜细胞出现了典型的凋亡征象,诸如细胞核固缩、碎裂和ＤＮＡ梯形条带等;同时,ＲＧＤＳ四肽处理组的ＩＣＥ和ｂｃｌ－２表达亦明显高于对照组。结论在ＲＧＤＳ四肽诱导的肾小球系膜细胞凋亡过程中,ＩＣＥ和ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡可能具有重要的调节作用。     

雷公藤多苷对肾小球细胞外基质以及TGF-β1的影响

肾小球系膜细胞 ( MC)增殖以及细胞外基质( ECM)积聚是多种肾小球疾病共有的病理学特征 ,而 ECM过多积聚最终导致肾小球硬化以致肾功能衰竭[1] 。ECM积聚是多种因素参与的一个复杂的生物学过程 ,其中转化生长因子 - β1 ( TGF- β1 )是促进 ECM积聚的一个重要调控因子 [2 ]。所以抑制 MC增殖 ,减少 ECM的积聚 ,是延缓肾小球疾病进展 ,防止肾功能衰竭的重要环节。雷公藤多苷( TW)是临床上治疗慢性肾炎的常用药物 ,现已证实TW对 MC增殖有明显抑制作用[3 ] ,而 TW对 MC分泌 ECM和 TGF- β1的作用 ,目前尚未见报道。本实验利用 …     

转化生长因子β与肾脏纤维化的关系

肾脏纤维化的特点是细胞外基质(ECM)成分的积累、肾小球硬化和肾小管间质纤维化的形成。转化生长因子β(TGF-β)是重要的致纤维化因子,它参与肾脏纤维化的各个环节。TGF-β诱导足细胞凋亡、肾小球系膜细胞肥大、增殖并最终凋亡,以及ECM的合成,还可诱导内皮细胞间质转化为肾小球肌成纤维细胞,引起肾小球硬化。TGF-β促进肾小管上皮间质转化,ECM生产和凋亡,导致肾小管间质纤维化。     

低密度脂蛋白对体外肾小球系膜细胞生长的影响

低密度脂蛋白对体外肾小球系膜细胞生长的影响王晓燕潘晓勤姜新猷低密度脂蛋白（ＬＤＬ）血症是肾脏疾病最常见的表现之一。为此，我们观察了人血浆ＬＤＬ对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）生长的影响。一、资料和方法１．ＬＤＬ分离：以依地酸抗凝的人血浆经超速离...     

miR-148a-3p对LPS诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症因子的影响

目的 探讨miR-148a-3p对LPS诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及炎症因子的影响及其机制.方法 以肾小球系膜细胞(HBZY-1)为研究对象,分为control组、LPS组(10 μg/mL)和miR-148a-3p inhibitor组3组;qPCR法检测各组细胞中miR-148a-3p的表达水平;克隆形成实验检...     

三氧化二砷对肾细胞作用的实验研究

对于肾脏疾病进展、肾间质纤维化病程 ,临床治疗手段还很有限。调控肾组织细胞的增殖与凋亡 ,可能是延缓病变发展的途径之一。目前 ,血液病领域研究已证实三氧化二砷是通过抑制增殖、诱导分化和促进凋亡达到治疗白血病的作用[1] 。本研究选择三氧化二砷作为实验药物 ,旨在通过体外实验观察了解三氧化二砷对来源于肾脏的多种细胞生长的影响 ,探讨砷剂是否有可能影响肾组织纤维化进程而介入临床肾脏病领域。材料与方法一、实验材料原代人肾间质成纤维细胞、系膜细胞株 (ＳＴＬ)、近端小管上皮细胞株 (ＯＫ ) ,三氧化二砷 (5ｍｍｏｌ/Ｌ ) ,Ｈ…     

HBV在人肾小球系膜细胞内的表达及对其凋亡的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)在人肾小球系膜细胞内的表达及对细胞凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将C基因型重组全长乙型肝炎病毒(PHY106-CHBV)转染至人肾小球系膜细胞。收集24、48和72 h细胞培养上清液,进行HBsAg与HBeAg的定量检测;应用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞增殖率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果实验组细胞培养上清液中可检测到HBsAg和HBeAg的高表达;观察细胞形态学变化发现,转染PHY106-CHBV后可诱导人肾小球系膜细胞凋亡;MTT结果显示细胞增殖受抑;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率增加。结论 HBV可在人肾小球系膜细胞内表达,且能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

肾必宁、冲剂对肾小球系膜细胞凋亡及bcl—2、ICE基因表达的影响

为探讨肾必宁冲剂对肾小球系膜细胞凋亡及凋亡相关基因ICE和Bcl-2表达的影响,阐明治疗系膜增生性肾病的机制,35只大鼠随机分为空白组(A)、中药高剂量组(B)、中药中剂量组(C)、中药低剂量组(D)、环磷酰胺(CTX)组(E),每组各7只,分别予生理盐水(A组)、肾必宁冲剂(B、C、D组)、CTX胃饲,8d后分别处死取血清,采用肾小球系膜细胞培养方法进行体外实验研究,测定系膜细胞增殖指数,观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象,并检测其ICE和bcl-2的变化.结果加入肾必宁冲剂血清16h后,系膜细胞出现了典型的凋亡征象,凋亡率显着高于A组(P《0.01);B、C、D组ICE表达明显高于A组(P《0.01),而bcl-2基因各组均表达不明显(P》0.05).提示肾必宁冲剂可诱导系膜细胞凋亡,促进肾小球增殖性病变消散,并可能通过调控ICE和bcl-2基因影响凋亡.     

肾小球系膜细胞与糖尿病肾病

糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症之一,也是导致终末期肾病的主要原因。糖尿病肾病的基本病理改变为细胞外基质聚集,基膜增厚,晚期出现弥漫性肾小球硬化,最终导致肾衰竭。在肾小球疾病中,系膜细胞是重要的靶细胞及效应细胞,是糖尿病肾病重要的病理改变。因此,研究肾小球系膜细胞的功能,对糖尿病肾病发病机制及临床诊疗具有重要的意义。     

选择性环氧合酶抑制剂对高糖诱导系膜细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究选择环氧合酶抑制剂N S-398对高糖诱导的系膜细胞抑制作用。方法:不同浓度选择性环氧合酶抑制剂N S-398(5、10、20、40μm o l/L)加入高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GM C)中,分别共同培养0h、12h、24h、48h、72h,用[3H]-亮氨酸掺入法检测细胞蛋白质的从头合成情况,用流式细胞仪分析检测细胞G0-G1周期分布的变化,观察选择性环氧合酶抑制剂N S-398对系膜细胞增殖的影响。结果:高糖刺激的GM C的[3H]-亮氨酸掺入量是明显增加,用不同浓度的N S398共同培养高糖系膜细胞,观察不同时间[3H]-亮氨酸掺入量,选择性环氧合酶抑制剂N S-398在5~40μm o l/L浓度范围内,随着时间的延长、浓度的增加,明显可抑制M C[3H]-亮氨酸掺入,且呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测实验组细胞G0-G1周期百分比(67.5%±1.7%)较对照组(78.1%±2.5%)有显著差异。结论:选择性环氧合酶抑制剂能抑制高糖诱导系膜细胞增殖,促进细胞凋亡。     

雷公藤多甙对系膜增生性肾炎大鼠肾组织系膜区系膜细胞凋亡及其调控基因BCL-2的影响

目的：观察雷公藤多甙（TⅡ）对系膜增生性肾炎肾组织中系膜细胞凋亡及其相关调控基因BCL-2表达的影响。方法：复制慢性血清病性系膜增生性肾炎大鼠模型，以不同剂量雷公藤多甙片治疗，实验结束后取骨组织，观察肾组织内系膜细胞的凋亡及其调控基因BCL-2表达情况。结果：TⅡ对大鼠体内肾组织系膜区系膜细胞的凋亡有明显的诱导作用，能明显抑制BCL-2基因的阳性表达。结论：TⅡ可诱导体内系膜细胞凋亡、下调BCL-2基因表达，促进肾小球增殖性病变消散。其与既往体外细胞培养实验的结果一致^[1-2]。     

川芎嗪对转化生长因子β1诱导的人肾小球系膜细胞增殖及Ⅳ型胶原分泌的影响

目的观察川芎嗪对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小球系膜细胞增殖及Ⅳ型胶原分泌的影响。方法采用TGF-β1诱导肾小球系膜细胞增殖和Ⅳ型胶原表达以模拟肾脏疾病中的细胞纤维化,实验分为5组:空白组,对照组,川芎嗪高、中、低剂量(终浓度分别为100、30、10μg/ml)组。MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖抑制率,ELISA法检测肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原的表达。结果川芎嗪高剂量(100μg/ml)能够抑制TGF-β1诱导的肾小球系膜细胞增殖(P<0.01);川芎嗪可抑制TGF-β1诱导的肾小球系膜细胞中Ⅳ型胶原的表达,以高剂量组(100μg/ml)效果最为显著(P<0.01)。结论川芎嗪可抑制TGF-β1诱导的肾小球系膜细胞增殖及Ⅳ型胶原分泌。     

海昆肾喜对肾小球系膜细胞增殖及表达PDGF-BB mRNA的影响

目的:探讨海昆肾喜对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及表达血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)mRNA的影响。方法:制备大鼠含药血清,MTT比色法检测海昆肾喜对脂多糖诱导下肾小球系膜细胞(GMCS)增殖的影响,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测海昆肾喜对GMCS表达PDGF-BB mRNA的影响,设苯那普利为对照组。结果:MTT实验各时间点海昆肾喜组OD值均显著低于LPS组(P<0.05),RT-PCR实验海昆肾喜组PCR产物电泳条带较脂多糖组明显减弱(P<0.05),且均呈量效依赖关系,海昆肾喜大剂量组作用优于小剂量组。结论:海昆肾喜抑制脂多糖诱导的肾小球系膜细胞增殖并显著下调肾小球系膜细胞表达血小板源性生长因子-BB mRNA,可能是其防治肾小球硬化的作用机理之一。     

生脉注射液对高糖和糖化终末产物诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响

目的 观察生脉注射液对高糖和糖化终末产物(AGEs)诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响.方法 用高糖和AGEs 作为刺激因子,诱导体外培养的牛肾小球系膜细胞增殖,并用MTT 比色法测定生脉注射液对系膜细胞增殖的影响.结果 生脉注射液能拮抗高糖和AGEs 诱导的肾小球系膜细胞的增殖(P<0.01).结论 生脉注射液治疗糖尿病肾病的主要靶细胞之一是肾小球系膜细胞,其对肾小球系膜细胞增殖的抑制可能是其治疗作用的重要机制.     

细胞凋亡在脑胶质瘤中的地位和作用

细胞凋亡是由基因编码按特定程序有规律的细胞死亡。凋亡有独特的生化及形态学特点。细胞凋亡与肿瘤发生关系密切。以前人们主要关注的是对肿瘤细胞增殖机制的研究。自有人发现Ｔ( 14:18)染色体易位的Ｂ淋巴细胞瘤中的原癌基因ＢＣＬ -2 [1] 后。人们才发现肿瘤发生是细胞增殖过度与凋亡减少导致过量蓄积的结果[2 ,3] 。Ｒｉｅｇｅｒ[4 ] 等认为肿瘤治疗新方法应从能否诱导细胞凋亡着手。诱导肿瘤细胞凋亡已成为肿瘤治疗的新靶点。本文对脑胶质瘤进行化疗、放疗、热疗、免疫治疗、基因治疗与细胞凋亡的关系作一简要介绍。1　化学药物与胶质…