固体培养基螺旋接种和涂布接种方法比较研究

目的评价固体培养基螺旋接种代替涂布接种方法的可能性。方法以国内外6个厂家的7种固体培养基(麦康凯琼脂、亚硫酸铋琼脂、HE琼脂、沙门菌显色培养基、平板计数琼脂、营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂),分别用螺旋平板法与传统的涂布平板法对7株不同菌株(鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、福氏志贺菌)进行比对测定。结果对用2种接种方法在各培养基上生长的菌落数进行方差统计,金黄色葡萄球菌菌株在平板计数琼脂和营养琼脂上差异有统计学意义(P0.05),其余各菌株基本上在7种培养基上差异均无统计学意义(P0.05)。结论对大部分菌株的接种,螺旋平板法可代替传统的涂布平板的接种方法。     

禽类中的多种药物抗性DT104型鼠伤寒沙门菌

在美国 ,沙门菌病是主要的食源性疾病之一。近年来 ,鼠伤寒沙门菌确定类型 1 0 4( definitive type1 0 4,DT1 0 4)由于其多种药物抗性 ,越来越受到人们的重视。 DT1 0 4通常可以抗氨苄青霉素、氯霉素、链霉素、磺胺与四环素 ,这种抗药性类型称为 R型 AC-SSu T。作者对 1 995至 1 997年分离于明尼苏达州各地禽类的 5 0株鼠伤寒沙门菌中DT1 0 4型的流行情况进行了评价 ,并对各鼠伤寒沙门菌分离株的噬菌体型、抗药性和基因相关性进行了分析。取 37℃过夜培养菌液 5 0 0 μl,以无菌玻棒均匀涂布于 Mueller- Hinton琼脂平板上。用 1 2 - ca…     

人参细粉的鼠伤寒沙门菌基因回复突变试验

目的体外观察人参细粉能否诱发鼠伤寒沙门菌组氨酸营养缺陷型突变株的回复突变。方法 Ames试验用TA97、TA98、TA100、TA102菌株并分加与不加肝微粒体酶活化系统(+/-S9)试验。结果人参细粉各剂量组对4个菌株的诱发回变菌落数都未超过自然回变菌落数,Ames试验结果为阴性。结论未见人参细粉对鼠伤寒沙门菌的致突变性。     

自人体检出哈达尔与格罗斯特卢浦沙门菌

哈达尔沙门菌 (Ｓ .ｈａｄａｒ)和格罗斯特卢浦沙门菌 (Ｓ .ｇｉｏｓｔｎｕｐ )均系少见菌型 ,2 0 0 0年烟台市芝罘区卫生防疫站对烟台市市区从业人员健康查体时 ,从 2名健康人肛拭标本中分别检出上述菌型各 1株。1　分离鉴定取肛拭标本接种亚硒酸盐胱氨酸增菌液 ,37℃ 18ｈ培养后分离于ＳＳ琼脂平板 ,37℃ 2 4ｈ培养 ,挑取可疑菌落接种克氏双糖铁和营养琼脂平板 ,进行肠杆菌科噬菌体裂解试验 ,经 18～ 2 4ｈ培养 ,观察结果。 2株菌在克氏双糖上均发酵葡萄糖产酸、硫化氢阳性 ,不发酵乳糖。肠杆菌科噬菌体裂解试验均被沙门菌Ｏ Ⅰ噬菌体裂解…     

发现沙门菌一种新的H抗原变异方式报告

沙门菌鞭毛抗原 (H抗原 )经常发生变异 ,目前文献[1] 报道有H -O变异、位相变异和R相三种。笔者在 2 0 0 1年的一次质控考核实验中发现鼠伤寒沙门菌H抗原出现一种新的变异方式。该质控菌株的纯培养物中 ,一些菌落的H抗原第 1相(特异相 )为i抗原 ,另一些菌落却为e ,h抗原 ,菌落的第二相均为H2。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　 2 0 0 1年攀枝花市卫生防疫站发放的质控菌株。该菌是 1998年四川省卫生防疫站发给市站的质控标准菌株一鼠伤寒沙门菌。其后 ,曾经用陈旧半固体琼脂保存 ,无污染。1 2　培养基　缓冲蛋白胨水、SC…     

分值计算法在营养琼脂的质量检测中的应用

营养琼脂是微生物实验室应用最广泛的干燥培养基 ,它的质量好坏直接影响实验结果的准确性 ,本次实验采用3株指示菌在普通营养琼脂上生长的菌落直径、菌落差和生长率与质控数据比较的计算分值法对 2个厂家生产的 4个不同批次培养基进行鉴定评价和方法验证 ,现报告如下。材料与方法1材料　 4批不同营养琼脂 (本实验室购买某 2个厂家不同的 4个批次的营养琼脂 ) ,按要求称量配制 ,12 1℃灭菌 15分钟 ,每只平皿倾注 2 0ｍｌ,对照培养基 1号 (浙江省疾控中心消杀科提供 )。2　菌落计数与直径测量　试验菌为鼠伤寒沙门氏菌(ＡＴＣＣ ,5 0 0 13)。…     

CHROMagar显色培养检测沙门菌的方法探讨

沙门菌(Salmonella)是一种能引起人伤寒或副伤寒的常见肠道致病菌，主要通过食物、饮水经口感染，引发食源性疾患。国标检验方法是利用沙门菌不能分解乳糖，而肠杆菌科中绝大部分非致病菌能分解乳糖产酸使中性红指示剂变红的原理，通过挑选SS琼脂平板上无色的沙门菌菌落进行筛选、分离与鉴定。该法存在操作繁琐、检测特异性低等缺点。     

河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分子流行特征研究

目的 了解河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分布及其分子学特征。方法 对我省监测到的历史鼠伤寒沙门菌进行血清学复核，使用双重PCR法鉴定第2相鞭毛缺失菌株并对其进行脉冲场凝胶电泳分析。结果1 576株沙门菌中有401株鼠伤寒沙门菌，经双重PCR方法鉴定出113株鼠伤寒沙门菌单相变异株，分别占沙门菌和鼠伤寒沙门菌的7.17%和28.18%,其中79.64%(90例)来源于<2岁的婴幼儿。113株鼠伤寒沙门菌单相变异株经XbaⅠ酶切后，共分为88种带型，各带型包含菌株数为1～5株，带型相似度在58%～100%，带型无明显的地域、时间聚集特征。结论 河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株检出率较高，且人群分布不均，分子分型表现出较大的多样性，没有形成较大规模的流行。     

沙门-志贺菌增菌培养基的研究

目的采用分值计算法研制沙门、志贺菌增菌培养基和制订质量标准。方法分值计算法。结果大肠埃希菌菌落平均菌落直径为0.99 mm,S=0.17;生长率为15.7%,δρ=3.12;痢疾志贺菌菌落平均菌落直径为1.48mm,S=0.29;生长率为70.2%,δρ=8.98;鼠伤寒沙门菌菌落平均菌落直径为1.65 mm,生长率为99.2%δρ=3.41。三株指示菌菌悬液浓度用沙门-志贺增菌培养基稀释10-8~10-12,培养6 h后计数结果:大肠埃希菌10-10稀释度为1.0cfu/ml;痢疾志贺菌10-11稀释度为1.0 cfu/ml;鼠伤寒沙门菌10-11稀释度为3.0 cfu/ml。质量分值结果表明:大肠埃希菌质量分值≥29.9(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥14.90;生长率分值≥5.00)。痢疾志贺菌质量分值≥13.05(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-1.95;生长率分值≥5.00)。鼠伤寒沙门菌质量分值≥11.65(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-3.35;生长率分值≥5.00)。结论沙门、志贺菌增菌培养基对大肠埃希菌具有较好的抑制作用;对痢疾志贺菌达到促生长的作用;对鼠伤寒沙门菌的生长未受到不良的影响。     

食源性沙门菌的分离鉴定及血清分型能力验证

目的验证本实验室在国家食品安全风险监测中检测沙门菌的能力及实验室的质量控制水平。方法按照考核方作业指导书对实验样品进行前处理,参照GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行沙门菌的检验,将全自动微生物生化鉴定仪鉴定为沙门菌的阳性菌株进行血清学鉴定和分型。结果 1号和3号样品在沙门氏+菌显色平板等3种选择性分离平板上均长出典型沙门菌特征的菌落,2号样品在3种分离平板上均无菌落生长;1号和3号样品中的可疑菌落经生化鉴定后结果与阳性对照菌株的一致,均符合沙门菌典型的生化反应特征;通过对可疑沙门菌进行血清分型,1号样品血清鉴定结果为肯塔基沙门菌,3号样品血清鉴定结果为鼠伤寒沙门菌,2号样品中未检出沙门菌。3个样品的能力验证结果与考核方一致,本实验室取得满意结果。结论参加能力验证是提高检验检测机构实验室质量控制最有效的手段之一,通过参加本次能力验证,能有效提高本实验室出具检测数据的准确性和可靠性,同时也能有效提升本实验室从事食品检验的能力和质控水平。     

一种基于适配体识别和酪胺信号放大的鼠伤寒沙门菌检测方法

目的 针对鼠伤寒沙门菌全菌细胞,建立了一种基于适配体识别和酪胺信号放大技术的鼠伤寒沙门菌检测方法。 方法 利用适配体的特异性识别作用将鼠伤寒沙门菌进行捕获并且通过亲和素和生物素的连接作用将其固定到酶标板的底部,然后利用酪胺信号放大技术对信号进行放大,再依次加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素、3,3′,5,5′ - 四甲基联苯胺(TMB),最后加入终止液,在室温下放置 20 min 后,产生的黄色产物就可以利用酶标仪进行检测。 结果 在最优的检测条件下,鼠伤寒沙门菌浓度在 10 cfu/ ml ～ 10⁷cfu/ ml 内,A₄₅₀的值与平板计数法得到的菌落个数的对数值具有良好的线性关系(r= 0. 998 8),检测限为 9 cfu/ ml。 结论 本方法能够能够实现对样品中鼠伤寒沙门菌的快速、灵敏的检测。     

一起由副溶血性弧菌引起食物中毒的报告

2004年7月,烟台市下属的某县防疫站发生1起食物中毒事件,报道如下。1临床表现病人潜伏期14 h,病人症状轻微,主要有腹痛,腹泻,呕吐,体温在36~37.5℃之间,少数人有头痛的症状。2鉴定与方法[1]现场用无菌棉试采患者粪便0.5 m l,以无菌操作接种普通肉汤管中,37℃24 h培养,肉汤管混浊,取肉汤管划线TCBS平板,血平板,SS平板,营养琼脂平板37℃培养。营养琼脂平板菌落涂片染色,该菌呈革兰阴性无芽孢的球杆菌,有的呈杆状菌,有的呈弧形菌,光学显微镜下呈多形态性。3菌落形态患者粪便检出1株可疑菌株。可疑菌株在TCBS呈2~3mm大小的较扁平,圆正,光滑,…     

双指示剂SS琼脂检测肠道菌效果的观察

目的：在SS琼脂上易于识别沙门菌、志贺菌与大肠埃希菌。方法：在SS琼脂中加入溴麝香草酚蓝指示剂（简称改良SS琼脂）。结果：沙门菌、志贺菌及大肠埃希菌在SS琼脂上及改良SS琼脂上的生长率基本一致，沙门、志贺菌落在SS琼脂上为淡蓝色、半透明或带黑心；大肠埃希菌为桃红色。结论：该方法用于肠道菌检测可使沙门菌、志贺菌落在SS琼脂上为淡蓝色、半透明，大肠埃希菌为无色或桃红色，菌落间色泽反差鲜明，易于选择和识别。     

HE琼脂和SS琼脂用于肠道致病菌分离的比较

目的：HE琼脂和SS琼脂用于肠道致病菌分离的比较。方法：HE琼脂的配制及使用，与SS琼脂同时测定102例临床粪便标本。结果：HE琼脂和SS琼脂分离的伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌结果一致；HE琼脂培养分离出7株宋内氏志贺菌，而SS琼脂培养仅分离出3株。结论：HE琼脂用于粪便标本培养优于SS琼脂，可替代使用。     

上海市鼠伤寒沙门菌流行特征及分子分型研究

[目的]研究上海市2006—2007年鼠伤寒沙门菌腹泻病例株的分子流行病学特征。[方法]追溯2002—2007年食品中分离的鼠伤寒沙门菌来源,比较鼠伤寒沙门菌食源株与腹泻株的抗生素耐药性;对全球沙门菌监测(GSS)病例和食品中分离的鼠伤寒沙门菌进行血清、耐药表型和脉冲凝胶电泳(PFGE)分子分型。[结果]经培养确认的鼠伤寒沙门菌腹泻病例数,在2006—2007年本市非伤寒沙门菌型病例构成中仅次于肠炎沙门菌,食品菌株多源于禽(64.4%)和畜肉制品(17.8%),其多重耐药菌株显著高于腹泻株(P0.05)。PFGE将7株食品株和44株腹泻株分为23种带型,优势型为1型(8株)、2型(6株)、29型(4株)、49型(8株)和6型(4株),与食源菌株完全匹配的仅有49型、6型共7个病例(15.9%,7/44)。PFGE-1型腹泻株在2006和2007年分别为2例和6例,2型分别为4例和2例。[结论]上海市鼠伤寒沙门菌腹泻病例存在高度散发和分散爆发的流行特征,没有与本地食品菌株相匹配的优势克隆型分别是PFGE 2型和1型,与市售生鲜类肉食品污染株之间的遗传同源性低。推测传染源可能由输入性传染源对食品等媒介形成二次污染所致。建议加强流行病学调查,以揭示潜在的传染源和传播途径。     

营养琼脂斜面法在沙门菌“H”抗原位相变异中的应用

在不同浓度的营养琼脂上作沙门菌＂H＂抗原位相变异试验,并与GB/T 4789.4-2008中＂玻管法和简易平板法＂相比较,发现应用50%浓度的普通营养琼脂制成的斜面培养基,＂H＂抗原位相变异试验中一次诱导成功率较高。     

沙门菌培养基的研制与分析

目的：选择抑制大肠埃希菌、枸橼酸杆菌生长的物质,制成培养基供沙门菌检验专用,提高沙门菌的分离效率。方法：采用大肠埃希菌噬菌体、枸橼酸杆菌噬菌体和结晶紫作为抑菌剂,研制出一种新型的沙门菌固体琼脂培养基。结果：60株各型沙门菌试验菌株均可在新型培养基上生长。与SS琼脂培养基配对,对537份健康人粪便检验,沙门菌的检出率前者为2．42％,后者为0．93％（X^2=6．125,P〈0．025）,且保存一周后的培养基不影响沙门菌的检出率;新型培养基对已知大肠埃希菌和构橡酸杆菌的抑制率分别为94．74％和46．43％;在琼脂平板上就能够区别迟缓发酵乳糖的菌株,沙门菌的菌落特征明显,易于辨认。结论：沙门菌专用培养基明显优于SS琼脂,对提高沙门菌检出率起到一定的作用。     

从变形杆菌蔓延生长中分离气单胞菌的方法探讨

目的了解不同培养基对变形杆菌、气单胞菌的生长情况的影响,为2种细菌在混合感染时分离纯化气单胞菌提供方法依据。方法选取实验室常用平板培养基分别划线接种变形杆菌和气单胞菌进行分离培养,观察2种细菌在不同平板上菌落生长形态和生化反应结果。结果实验室常用普通培养基对变形杆菌蔓延生长无抑制作用;接种SS、TCBS、EMB、沙门菌显色培养基、弧菌显色培养基能够抑制变形杆菌蔓延生长,但对气单胞菌生长有抑制作用;XLD平板能够有效抑制变形杆菌蔓延生长,变形杆菌在XLD平板上呈现中等大小、黄色、中心有黑色或无黑色菌落,而XLD平板对气单胞菌无抑制,培养基上出现中等偏大、无色半透明的扁平状菌落。结论变形杆菌和气单胞菌混合生长时,接种XLD平板得到2种不同生长形态的菌落,从而可以有效分离2种菌。     

武汉沙门菌琼脂的pH值范围及应用探讨

WS琼脂(原名：武汉沙门菌琼脂)配方中采用十二烷基硫酸钠为抑菌剂，引入HE琼脂的指示系统制成，为一种弱选择性培养基，用于沙门菌的分离。其效果优于HE琼脂且成本低廉。1994年列入食品卫生国家标准检验方法微生物学部分。由于沙门菌、志贺菌在该培养基上形成蓝绿色菌落(产生H2S的菌株可在16h左右出现黑色中心)而大肠埃希菌呈桔红(桔黄)色菌落，     

舟山市2018—2020年肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌 PFGE分子分型特征分析

目的 了解舟山市肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特征,为聚集性暴发事件溯源追踪提供依据。方法 用Pulse Net网络实验室标准方法对肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌进行PFGE分子分型,并进行聚类分析。结果 舟山市2018—2020年分离到106株肠炎沙门菌和60株鼠伤寒沙门菌,性别比1.1∶1和0.9∶1,集中于每年6～8月(78.3%和80.0%),主要以0～5岁年龄组居多(37.7%和66.7%)。106株肠炎沙门菌分12种带型,菌株间条带相似度84.0%～100.0%;优势带型为P1、P6和P7。60株鼠伤寒沙门菌分53种带型,菌株间条带相似度56.0%～100.0%;各带型包含1～4株菌,B1为优势带型。结论 舟山市肠炎沙门菌PFGE分子分型有明显优势带型,遗传同源性较高;鼠伤寒沙门菌PFGE分子型别众多,条带分散,呈遗传多样性。