走具有中国特色的支气管哮喘防治研究之路

从 1999年 11月第三届全国支气管哮喘 (简称哮喘 )学术会议至今已经过 3个年头了。 2 0 0 2年 11月份举行的第四届全国哮喘学术会议 ,尽管文章不比上一届多 ,但会议的代表明显增多 (110 0多名 ) ,特别是从事基础研究的队伍不断壮大 ,令人欣慰。更重要的是 ,创新性的、具有特色的防治研究增多了。在基础研究领域 ,除了紧跟目前国外热门的课题 ,如共刺激信号、ＣｐＧ寡核苷酸序列、β2 肾上腺受体基因多态性、各种转录因子 [活化蛋白 1(ＡＰ 1)、ＮＦ κＢ、ＧＡＴＡ 3、ＧＡＴＡ 4 ]、磷酸激酶、蛋白激酶、金属基质蛋白及细胞因子 [白细胞介…     

携带免疫刺激DNA序列的载体及人工合成免疫刺激DNA对HBV核心区基因免疫的影响

为慢性ＨＢＶ感染的防治寻求新的高效基因免疫策略。分别构建携带免疫刺激ＤＮＡ序列及不携带免疫刺激ＤＮＡ的ＨＢＶ核心区基因真核表达载体 ,并人工合成免疫刺激ＤＮＡ寡核苷酸 ,分组免疫Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 :( 1)Ｖ ＨＢｃ ＣｐＧＯＤＮ组 ;( 2 )Ｖ ＨＢｃ 非ＣｐＧＯＤＮ对照组 ;( 3)Ｖ ＨＢｃ/ＣｐＧ。观察各组小鼠体液免疫应答及细胞免疫应答。结果表明 ,3组免疫鼠血清ＨＢＶ抗体均阳性 ,体外ＣＴＬ活力检测 3组小鼠脾细胞对转染ｐＲＳＣ ＨＢＶ的ＳＰ2 / 0细胞的细胞毒活性明显高于其他组 (Ｐ <0 .0 5) ,荷瘤试验显示第 3组免疫小鼠注…     

恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白基因在BCG中的表达

卡介苗 (ＢＣＧ)由于其广泛应用的安全性和免疫佐剂作用 ,因而近年来以ＢＣＧ为载体的重组疫苗研究日益受到重视[1] 。环子孢子蛋白 (ｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ ,ＣＳＰ)分子量为 4 0～ 6 0ｋＤａ,是一种覆盖于子孢子表面的蛋白 ,是目前已鉴定的子孢子特异性抗原分子 ,也是疟疾疫苗候选抗原之一[2 ] 。本研究将克隆有ＣＳＰ基因的重组大肠杆菌 分枝杆菌穿梭表达质粒ｐＢＣＧ/ＣＳＰ通过电穿孔转化法导入ＢＣＧ ,观察其在ＢＣＧ中的表达情况。1　材料与方法1.1　主要试剂、载体及宿主菌　丙烯酰胺、Ｎ′,Ｎ′ 丙烯酰胺…     

HBV反义全基因真核细胞表达载体的构建及在肝癌细胞内的表达

１．材料与方法：乳哺动物细胞表达载体ｐＢＫ－ＣＭＶ,长约４．５ｋｂ,带有Ｔ_７公用序列。ｐＣＰ１０是ｐＢＲ３２２ＥｃｏＲＩ位点中插入双拷贝头尾相接的ＨＢＶａｙｗ亚型全基因ＨＢＶＤＮＡ重组质粒。ＰＣＲ引物ＸＩ１：１４２８－１４４８ｎｔ５'ＣＧＴ　ＣＣＣＧＴＣ　ＧＧＣＧＣＴＧＡＡＴＣＣ３',ＸＩ_２：１６７２－１６５３ｎｔ５'ＡＧＴＣＣＡＡＧＡＧＴＣＣＴＣＴＴＡＡＧ３'。人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１,出上海细胞所提供。将ＥｃｏＲＩ酶切后回收的全基因ＨＢＶ片段。在Ｔ_４ＤＮＡ连接酶作用下,与ＥｃｏＲＩ酶切…     

多肽生长因子在大鼠哮喘模型中的表达及地塞米松的影响

近年来的一些研究提示 ,多肽生长因子亦可能在哮喘气道重塑中起重要作用 ,为此我们观察血小板衍生生长因子(ＰＤＧＦ Ｂ)、转化生长因子 (ＴＧＦ β1)在大鼠哮喘模型的表达变化及地塞米松对ＰＤＧＦ Ｂ、ＴＧＦ β1表达的影响。材料与方法　选健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 4只 ,雌雄不拘 ,体重15 0～ 180ｇ ,随机分成三组 :正常组、哮喘模型组、地塞米松干预组 ,每组 8只 ,哮喘模型的制备见参考文献 [1],常规留取肺组织备做免疫组化和逆转录多聚酶链式反应 (ＲＴ ＰＣＲ)。免疫组化ＳＡＢＣ染色 :按武汉博士德公司ＳＡＢＣ免疫组化试剂盒说明操作…     

含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）基因DNA重组质粒 …

目的 观察裸ＤＮＡ重组质粒ｐＣＤ－ＳｊＦＡＢＰｃ在体外转染ＨｅｐＧ２细胞以及质粒ＤＮＡ免疫鼠肌组织中的表达，为进一步应用该质粒进行ＤＮＡ免疫实验奠定基础。方法 用脂质体介导ＤＮＡ转染法将ｐＣＤ－ＳｊＦＡＢＰｃ转染贴壁细胞ＨｅｐＧ２，Ｇ４１８加压筛选获得阳性克隆细胞并传代培养，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定目的基因在ＨｅｐＧ２细胞中的表达，将ｐＣＤ－ＳｊＦＡＢＰｃ质粒肌注免疫ＢＡＬＢ     

日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S—转移酶DNA疫苗的研究及其保 …

本文对大陆株日本血吸虫２６ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶（Ｓｊ２６ＧＳＴ）的ＤＮＡ疫苗进行研究，并观察了其免疫保护效果。分别构建含Ｓｊ２６ＧＳＴ基因的重组质粒ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６，采用脂质体介导的基因转移将ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６分别导入ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞，用免疫荧光法（ＩＦＡ）证实Ｓｊ２６ＧＳＴ在真核细胞中的表达。分别将ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６及ｐＢＫ－ＣＭＶ肌注     

哮喘时糖皮质激素的应用

自从认识到哮喘是以嗜酸细胞和肥大细胞浸润为主的气道变应性炎症、气道高反应性（ＢＨＲ）为特征的疾病，气道炎症是ＢＨＲ的基础，应用肾上腺皮质激素（ＧＣｓ）治疗哮喘便成为最主要的手段。ＧＣｓ以扩散方式透过细胞膜与肾上腺皮质激素受体（ＧＣＲ）结合而发挥作用。ＧＣＲ为一细胞内可溶性蛋白、与ＧＣｓ呈高度亲合力和与一性，它一个类固醇结合并单位和二个Ｈｓｐ９０（热休克蛋白）亚单位组成。类固醇亚单位从羧基端到氨基端分别有类固醇结合区、ＤＮＡ结合区和免疫结合区，ＨＳＰ９０覆盖着ＤＮＡ结合区、使ＧＣＲ处于无活性状态，…     

CD137在过敏性哮喘患者中的表达及其意义

支气管哮喘 (哮喘 )是一种慢性气道炎性疾病 ,涉及Ｔ细胞活化、增殖等 ,我们的研究观察了 5 0例过敏性哮喘患者外周血淋巴细胞表面ＣＤ137、ＣＤ40Ｌ、ＯＸ40等Ｔ细胞活化的第二信号 (共刺激分子 )表达的变化 ,探讨其在哮喘中的发病机制。对象与方法　根据 1997年中华医学会呼吸病学分会制定的“支气管哮喘防治标准”[1] ,选择符合哮喘诊断标准且至少对粉尘螨过敏的我院及苏州大学附属第一医院门诊、住院的过敏性哮喘患者 ,5 0例患者分为两组。急性发作期组 30例 ,男 19例 ,女 11例 ,平均年龄 (35± 16 )岁。缓解期组 2 0例(指症状消失 ,病…     

小鼠HCV皮下移植瘤的建立及使用DNA疫苗的治疗作用

建立小鼠丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)皮下移植瘤 ,并以其为ＨＣＶ感染动物模型 ,观察ＨＣＶ核心 (Ｃ)基因ＤＮＡ疫苗 ( ｐｃＤＮＡ ＨＣＶ Ｃ)在体内对ＨＣＶ感染的治疗作用。将 ｐｃＤＮＡ ＨＣＶ Ｃ用脂质体 (Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ)法转染ＢＡＬＢ/ｃ小鼠骨髓瘤ＳＰ2 /0 (Ｈ 2 ｄ)细胞 ,经Ｇ4 18筛选获稳定表达ＨＣＶＣ抗原之后 ,以 5× 10 5个细胞 /10 0 μｌ注射ＢＡＬＢ/ｃ小鼠右肋皮下 ,3ｄ后 30只试验小鼠分成 3组 ,即 :生理盐水对照组、ｐｃＤＮＡ3对照组和 ｐｃＤＮＡ ＨＣＶ Ｃ治疗组。观察并记录成瘤时间、肿瘤大小及小鼠存活时…