滴管式超薄切片染色法

超薄切片染色是电镜生物样品制备过程中的重要环节,染色的好坏直接影响到电镜观察。在常规铅染色过程中常因空气中微量的二氧化碳介入,与染液中的铅反应,形成颗粒大小不等的碳酸铅沉淀附着在超薄切片上污染切片、污染严重时甚至无法观察。为此,人们为了克服超薄切片的污染问题采用了一系列措施,但这些措施各有不足之处。我们在工作实践中,并在有关文献的启示下,制作了一种封闭式超薄切片染色器,经近1年的使用,效果良     

LKB超薄切片机照明方法的改进

随着生物医学超微结构研究工作的深入开展,超薄切片技术的应用日益广泛。瑞典LKB公司生产的超薄切片机因其设计合理、操作方便、性能稳定而被大家广泛采用。但其不足之处是照明亮度不够。在制作超薄切片过程中,检查玻璃刀的质量、调整标本块与刀刃的距离和平行度、切片、切片的展开、捞片等步骤都要在显微     

电镜超薄切片技术实践的探讨

在21世纪的今天 ,电子显微镜技术早已在工业、农业、地矿、环境科学尤其在生物医学、计量医学、远程病理诊断等方面得到普遍的应用。在整个电子显微镜技术中 ,超薄切片技术是技术的难点与关键 ,因电镜下观察样品制备的优劣直接反映在超薄切片上。影响切片质量的因素很多 ,不论什么样的组织 ,不论何种病变基础 ,不论标本块包埋的软硬度如何 ,超薄切片者保证要切出良好的切片 ,否则将给电镜观察者带来很多困难。现根据多年来超薄切片技术的经验 ,浅谈切片缺陷的产生及对策。1超薄切片的常见问题切片缺陷大致可分为10种。有刀痕、颤痕、皱褶、…     

非生物标本的电镜样品制备及超切技术的探讨

目的：探讨非生物标本的电镜样品制备及超薄切片技术。方法：选择无色透明纤维，黑色纤维及无色透明薄膜等材料，进行脱水，环氧树脂包埋，超薄切片。结果：切出满意切片，并在电镜下拍摄出高质量的照片。结论：根据非生物标本的特性成功地进行了电镜样品制备及超薄切片，使材料科学的超微结构研究成为可能。     

影响透射电镜生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术.但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像,客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等.笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下.     

用于超微病理诊断样品的几种制备方法

超微病理诊断是对光镜诊断加以补充和说明 ,因而日益引起临床工作者的重视 ,如无色素性黑色素瘤靠组织学检查难以作出诊断 ,如果做电镜检查 ,由于在肿瘤细胞内能证实贫于色素沉着或无色素沉着小的黑素体 ,可以确诊。而送检标本的来源条件各不同 ,如有些标本已制成石蜡块或石蜡切片 ,这就要求我们把由诊断价值的信息保留下来 ,制成超薄切片 ,供电镜观察诊断。1　常规电镜样品制备方法适用于活检、手术及需要病检的软组织标本。主要分组织处理、超微切片和电子染色三个阶段。2　大体病理标本、石蜡块或石蜡切片转制成超薄切片样品方法2 .1　大…     

影响透射是生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm 以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术。但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等。笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下。1 具有性能良好的超薄切片机一台性能良好的超薄切片机是切出没有刀痕与颤痕的优质超薄切片的重要保证。我们电镜室1997年购置的德国徕卡牌超薄切片机,就是性能优…     

提高职业院校学生组织切片制作质量的操作技巧

职业院校，对于学生动手能力，实践操作能力，是有很高的要求的。在平时的实践工作以及对学生的教学工作中，总结了一些组织切片的制作技巧和方法，能够有效的提高组织切片的制作质量。首先，待切样品的质量是关键因素，而样品质量取决于前期处理工作的准确无误。其次，在常规组织制片中，切片是最重要的技术之一，其质量好坏直接影响标本的观察效果。如果学生能掌握这些技巧，可以提高学夲制作切片的质量。     

提高职业院校学生组织切片制作质量的操作技巧

职业院校,对于学生动手能力,实践操作能力,是有很高的要求的。在平时的实践工作以及对学生的教学工作中,总结了一些组织切片的制作技巧和方法,能够有效的提高组织切片的制作质量。首先,待切样品的质量是关键因素,而样品质量取决于前期处理工作的准确无误。其次,在常规组织制片中,切片是最重要的技术之一,其质量好坏直接影响标本的观察效果。如果学生能掌握这些技巧,可以提高学夲制作切片的质量。     

微型超薄切片染色器

超薄切片染色的好坏直接影响电镜观察效果。特别是在枸橼酸铅染色过程中,常常由于空气中的二氧化碳介入,切片被碳酸铅沉淀污染,使电镜观察不能达到满意结果。为此,许多电镜工作者,在避免切片被污染方面采取了多种措施。我们也根据自己工作中的一些体会,并参考有关资料,研制了一种微型超薄切片染色器。兹将制作和使用方法介绍如下: 制作方法     

透射电镜超薄切片法与负染法探讨

透射电镜生物样品超薄切片技术是医学生物学研究中常用的方法。其它一些制备技术如免疫电镜、电镜细胞化学、放射自显影等,都必须进行超薄切片;而超薄切片所显示的生物样品的微细结构,也是识别扫描电镜图像、冷冻蚀刻复型及其他电镜图像的基础。负染色是相对正染色而言...     

制备电镜超薄切片的技巧

超薄切片是电镜技术中基本而关键的步骤,想获得一张完美的切片,要在实际工作中不断摸索、总结并提高。初学者在实际操作中常遇到种种困难。为此,笔者将工作实践中掌握的一些操作技巧予以介绍。１切片前的准备工作１．１包埋块制备迅速准确地取材及固定是制样中首要步骤...     

电镜超薄切片常见问题产生的原因及对策

超薄切片技术是透射电镜样品制备技术的中心环节,然而在此过程中,常常会出现刀痕、震颤、空洞、皱褶等许多问题,严重影响超薄切片质量,无法观察到组织细胞超微结构。作者就这些常见问题进行探讨。     

超薄切片玻璃刀“废刀”的再用

在电镜观察生物样品中,以超薄切片最为常用。要研究细胞超微结构必须用超薄切片机,将标本切成适宜于电镜观察厚度的超薄切片。目前国内外电镜实验室在制作超薄切片时,除少数采用钻石刀外,绝大多数是用玻璃刀来切片。此种制刀的玻璃要求较高,制成的刀口要锋利平整,但玻璃刀一般在切过一个组织块后就不能再用,因此制刀玻璃的耗量较大。有些电镜单位为了寻找合用的玻璃,要花不少代价,甚至向国外进口,有时因找不到适用的玻璃,而影响科研工作的开展。为了适应科技工作要大干快上的形     

介绍一种免疫电镜标本定位方法

免疫电镜标本制备方法有:组织块免疫染色法,冰冻切片免疫染色法,超薄冰冻切片法。其中以冰冻切片法最常用,免疫电镜成功与否受很多因素影响,标本块的定位十分重要。国外多用半簿切片定位,即先切一、二张0.5～2μ的大面积切片,在光学显微镜观察,找出免疫酶反应部位。然后将标本与切片对照,进行修块,再制超薄切片。最近我们开展对免疫电镜研究,发现用上法对冰冻切片免疫染色的电镜标本定位不     

介绍一种游离细胞电镜样品的制作方法

标本制备是电镜技术的重要组成部分,它的好坏对整个实验有很大影响。在研究观察游离细胞的形态时,如何对这些微小样品进行包埋、切片,是电镜工作者比较关心的问题。本文仅以血细胞为例,介绍一种制备     

悬液电镜标本制备的改进方法

电镜标本制备中会遇到性质不同的各类标本，诸如针吸穿剌标本及切取的软组织标本，有的是查找含有肿瘤细胞的胸、腹水或其他渗出液、虫卵等。而对多样化的检查材料，需采用不同的标本固定方法和制备供超薄切片的包埋块。在以往的悬浮制备方法中，有时经离心后组织细胞不易...     

胶原原纤维间横纹对位与侧向连接牢固程度关系的形态学观察

为了将胶原纤维光镜和透射电镜所见结合起来研究胶原纤维的细微结构,曾将一些胶原纤维的石蜡切片和冰冻切片作光镜观察,再原位环氧树脂重包埋做超薄切片电镜观察。因制片过程步骤繁多,标本受理化因素等影响,胶原纤维结构多被破坏。但在这些不成功的电镜照片中,却观察到残留下来的胶原纤维多是原纤维间横纹对位比较好的地方。由此想到原纤维间横纹对位与侧向连接牢固程度间的关     

应用Spurr树脂包埋剂结合多次离心技术制备血液电镜标本

目的：探讨Spurr树脂包埋剂是否适合制备血样电镜样品。方法：多次离心技术制备血样，并对原始的Spurr配方进行改良。改变增塑剂乙二醇二甘油醚的量，调节包埋块的硬度，使其适合制备体液样品的电镜超薄切片。结果：超薄切片上红、白细胞排列紧密，每个视野可见多个细胞。与常规的Epon树脂包埋剂相比，明显增加了可供观察的信息量。细胞的结构清晰，未见明显的聚合损伤以及人工假象等。结论：Spurr树脂包埋剂是制备血样电镜标本的良好包埋剂。     

培养细胞超薄切片制备方法改进

目的探讨培养细胞超薄切片的制备方法。方法取肝癌患者手术标本进行原代培养后分为常规组和改良组,比较2组培养细胞的超微结构特征。结果常规组细胞结构模糊,有大量细胞自溶、皱缩和挤压现象。改良法超薄切片显示细胞结构清晰可见,自溶及皱缩现象少。结论改良法能更好地显示细胞的超微结构,是制备培养细胞超薄切片的好方法。