灵芝体外抗肿瘤成分的提取与分离

灵芝作为一种重要的传统滋补中药,现代医学对其有效化学成分的分析、药理及临床应用研究已经取得了较大进展［１～３］。动物实验表明,灵芝多糖可明显提高机体免疫功能,从而抑制Ｓ－１８０肉瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌和结肠癌等多种肿瘤生长［４,５］。最近,我们发现灵芝孢子醇提物能够抑制体外培养的人子宫癌ＨｅＬａ细胞的生长［６］,灵芝子实体醇提物亦有相似的作用（待发表资料）,表明灵芝中含有体外抗肿瘤成分。笔者报道这些抗肿瘤成分的提取及初步分离。１　材料与方法１．工材料：灵芝子实体由北京同仁堂饮片厂生产,干燥捣碎成粉。…     

灵芝孢子的开发和应用

灵芝,作为药食品在民间被视作神草仙药。我国最早的药学专著《神农本草经》将灵芝列为上品药收录于书中。以后,历代医家对灵芝均有所记载,但临床应用并不广泛。究其原因,可能与当时灵芝的数量稀少有关。近数十年来,由于科学技术的发展,人工培植灵芝技术的成功,使灵芝的产量大大提高,从而促进了对灵芝的深入研究和广泛应用。与此同时,对灵芝菌发育周期中的另一形态———灵芝孢子开发应用的研究也正在进行中。以下笔者特介绍灵芝孢子开发应用中的一些情况。１生物学性状灵芝是真菌类植物,在植物分类上属于非褶菌目（Ａｐｈｙｌｌｏｐｈｏｒａ…     

灵芝抗肿瘤组分的分离

目的 从具有直接抑制肿瘤生长的灵芝ZL83子实体中分离具有抗肿瘤作用的活性组分.方法 采用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取灵芝水提液浸膏,并将这3个萃取部位进行体内外抗肿瘤实验,将筛选得到的具有较好抗肿瘤活性的部位进行硅胶柱层析分离,并采用MTT法对各个分离获得组分的体外抗肿瘤活性进行比较.结果 通过体内抗S180和体外抗LoVo及MGC - 803肿瘤细胞实验表明,正丁醇萃取部位具有较好抗肿瘤活性.通过硅胶柱分离,获得6个组分,通过MTT法发现这6个组分中,甲酸乙酯与乙醇混合洗脱及乙醇单独洗脱所得到的2个组分具有体外抗肿瘤活性,其中甲酸乙酯与乙醇洗脱组分具有更好杀伤作用,对LoVo细胞及MGC-803细胞的IC50分别为53.225μg/ml和94.078μg/ml.结论 从具有直接抑制肿瘤生长的灵芝ZL83中分离得到两种具有抗肿瘤作用的活性组分.     

灵芝孢子胶囊的制备与临床应用

目的研究灵芝孢子胶囊的制备及其用于机体免疫力低下、白细胞减少症,急肿瘤等临床疗效。方法原料药经醇提、浓缩、干燥、粉碎、过筛,按比例加破壁灵芝孢子粉混合,制粒、分装成胶囊剂,口服每次2～4粒,每日3次,用于临床。结果神经衰弱、失眠者132例,白细胞减少症100例,肿瘤52例。总有效率为94.11%。     

灵芝甾醇类活性成分及其抗肿瘤作用机制的研究进展

目前关于灵芝抗肿瘤的研究,多集中在多糖和三萜类成分的研究,甾醇类成分很少引起人们的注意,但笔者认为甾醇、三萜和多糖共同构成灵芝抗肿瘤的物质基础。甾醇的抗肿瘤作用不容忽视,多种甾醇类单体成分报道具有抗肿瘤活性,如麦角甾醇、过氧化麦角甾醇等;在甾醇组分(多个有效单体成分构成)层次上研究灵芝抗肿瘤物质基础,更符合中医药理论体系。文章对近年来灵芝中发现的甾醇类活性成分及其抗肿瘤作用的机制进行了综述。     

复方灵芝孢子霜的制备及质量控制

灵芝是我国一种名贵的药材，早就有“仙草”之称，长期被视为吉祥草，《神农本草经》列为上品，誉之有长生不老的功效。灵芝提取物含有三萜类、脂肪酸、维生素B、甘露糖醇、多糖类、微量元素等多种活性成分，还有大量的酶。灵芝能增强心脏功能，促进血液循环，为延长寿命的有效补药。近代研究表明，灵芝提取液具有清除体内自由基的生理活性，对皮肤具有保湿、美白、防皱、抗衰老等作用。     

灵芝三萜与灵芝多糖抗肿瘤作用及其机制研究进展

随着人口老龄化程度的加剧,肿瘤患者的发病率和死亡率持续上升。目前肿瘤的治疗方法包括手术、化疗、放疗、靶向治疗、免疫治疗,然而大部分化疗药物可引起严重的副作用和耐药性。因此中医药治疗作为一种替代疗法可以有效地改善肿瘤患者的临床症状,提高生活质量,抑制或稳定肿瘤的发展,延长患者生存期限。由于中药具有良好的安全性,其抗癌潜力日益受到关注。灵芝是一种药用真菌,在我国有着两千多年的历史,是我国中草药宝库中的一个珍品。迄今为止,有许多研究已经提出了灵芝的抗癌特性。灵芝具有广泛的药理作用,如抗肿瘤、调节免疫、保肝、降血糖血脂、抗动脉粥样硬化、保护心脏、抗衰老等。灵芝的化学成分较为复杂,目前已知含有多糖、三萜类、生物碱、核苷类、氨基酸及各种微量元素,灵芝多糖和三萜类化合物的抗肿瘤机制主要通过诱导细胞凋亡、免疫调节、抗血管生成、阻滞细胞周期等来实现。已广泛应用于肺癌、肝癌、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等多种肿瘤的辅助治疗。该文通过对近年来灵芝三萜和灵芝多糖的生物活性及作用机制的相关文献进行归纳汇总,重点综述其抗肿瘤作用及作用机制,以期为灵芝抗肿瘤的进一步开发利用提供参考和借鉴。     

灵芝抗肿瘤作用机制的研究概述

目的对近年来关于灵芝抗肿瘤作用机制的研究做整理分析。方法查阅近年的国内外文献,进行全面综合、整理和归纳。结果综述了灵芝抗肿瘤的作用机制,重点阐述其在抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞死亡、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移以及免疫调节等多个方面的研究现状。结论灵芝具有潜在的抗肿瘤作用,但作用机制复杂,亟待进一步研究。     

灵芝免疫活性多糖的化学研究

从灵芝中分离得到免疫活性多糖BN₃B,进一步分离纯化得到4个多糖均一体,对其中主要成分BN₃B₁及BN₃B₃进行化学研究证明,BN₃B₁为含β-(1→6)及(1→3)甙键的葡聚糖,BN₃B₃为含β-(1→6)及(1→3)甙键的阿拉伯半乳聚糖。     

赤芝孢子粉破壁前后多糖释放能力比较研究

目的 :探讨一种较准确测定中草药中水溶性多糖的分析方法。方法 :改良苯酚 硫酸法测定多糖释放能力。结果 :37℃、沸水浴及水煮条件下 ,破壁比未破壁孢子的多糖释放能力分别强 118.4% ,87.5%和 69.6% ;多糖含量的测定RSD<1.3%。结论 :该法适用于中草药或保健品的多糖含量测定。     

赤灵芝段木栽培新技术研究

短段木仿野生栽培灵芝是近年发展起来的灵芝人工栽培新法,应用于大规模生产。本文将栽培要点归纳为:熟材短段木断面接种室内培菌(野外)大棚覆土栽培。     

灵芝抗癌活性及放化疗对HL-7702细胞的保护作用

目的：研究灵芝精粉（灵芝醇提物+水提物）、灵芝精粉氯仿提取物、氯仿提取后的醋酸乙酯提取物、2次提取后的剩余物对肝癌BEL-7402和胃癌MGC-803细胞的抑制效果及其对HL-7702细胞顺铂损伤、⁶⁰Coγ射线辐射损伤的修复与保护作用。方法: 采用MTT法检测灵芝抗癌活性及放化疗时对HL-7702细胞保护作用。结果: 灵芝氯仿提取物的抗癌活性为最强：在0.125 mg·mL^-1时,对癌细胞的抑制率已超过50％。对已受顺铂损伤的HL-7702细胞,4种提取物未能显示出修复作用,但氯仿提取物预处理可显著降低其损伤程度。对受辐射的HL-7702细胞,仅氯仿提取物对中、高剂量照射下的辐射损伤体现一定的修复作用；但4种提取物预处理均可降低其辐射损伤的程度。结论: 灵芝氯仿提取物对癌细胞的抑制作用,对正常细胞放化疗损伤的保护作用,均体现了显著的效果。     

灵芝多糖肽中单糖的组成

目的从灵芝Ganoderma lucidum子实体中分离得到的GL-PPT2、GL-PPT3和GL-PPT43种多糖肽,对其单糖组成和摩尔比进行比较。方法多糖肽经三氟乙酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡啶啉酮(PMP)衍生化,在高效液相245nm紫外检测,使用KH2PO4(pH5.0)-乙腈(83.5∶16.5)等度洗脱,9种单糖的色谱峰分离清晰,大多呈基线分离。结果经实验确定GL-PPT2、GL-PPT3和GL-PPT4均由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖和葡萄糖醛酸等9种单糖组成。结论灵芝子实体活性成分多糖肽中的核糖系属首次报道。     

超临界CO2萃取灵芝子实体中的三萜类成分

目的：筛选超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件。方法：采用RP-HPLC测定灵芝酸B的含量、可见分光光度法测定灵芝总三萜含量，设计正交试验优化超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的工艺条件。结果：超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件：萃取压力为25 MPa，萃取温度为45 ℃，萃取时间为1.5 h，夹带剂(95%乙醇)用量为3 mL·g^-1。结论：超临界CO₂萃取灵芝子实体中三萜类成分具有萃取效率高、萃取时间短、操作简单等优点，其方法可靠，切实可行。     

泰山赤灵芝肽多糖的化学研究

从泰山赤灵芝中分离得到7个肽多糖,对主要成分化学研究证明TGLP-2分子量20.9×10⁴,为β-(1→3)(1→4)连接的甘露葡聚糖肽,TGLP-3分子量4.5×104,为β-(1→3)(1→4)(1→6)甙键连接的葡聚糖肽,并有α-甙键存在,TGLP-6分子量32×10⁴,为β-(1→3)(1→4)甙键相连的葡聚糖肽,TGLP-7分子量10×10⁴,为β-(1→3)(1→4)(1→6)糖甙键的半乳聚糖肽。     

基于GC-Q-Exactive-MS的灵芝孢子油化学成分定性分析

目的 利用高分辨气相色谱-四级杆-静电轨道阱质谱法（GC-Q-Exactive-MS）定性分析灵芝孢子油的化学成分。方法 采用GC-Q-Exactive-MS,在电子轰击（EI）源下获取化合物的全扫描质谱数据,通过总结脂肪酸类、萜类、甾醇类及醛类化学成分的质谱裂解规律,并检索NIST、MassBank、HMDB、PubChem在线数据库及查阅相关文献,对灵芝孢子油的各类化学成分进行鉴定。结果 从灵芝孢子油中共鉴定了22个化学成分,包括3个脂肪酸类、4个萜类、4个甾醇类、4个醛类及7个其他类化合物。结论 研究结果为灵芝孢子油质量控制和中药弱极性化学成分定性分析提供了参考。     

赤芝子实体化学成分的研究

从多孔菌科灵芝属植物赤芝子实体中分离得到1个化合物,经化学和光谱方法鉴定为麦角甾-7,22(E)-二烯-3-酮。     

灵芝及其近缘种高效薄层色谱指纹图谱的研究

 目的 以赤芝为基础建立灵芝三萜类化合物高效薄层荧光色谱指纹图谱,并与赤芝的近缘种无柄灵芝、 平盖灵芝 等的指纹图谱进行比较分析。 方法 硅胶 GF₂₅₄ 高效预制薄层板,以 正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 2 ∶ 0.2 ）为展开剂展开,展至约 5 cm ,再以正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 1 ∶ 0.2 ）为展开剂进行二次展开, 10% 硫酸乙醇溶液显色后获得 薄层荧光色谱指纹图谱,经指纹图谱系统解决方案软件（ Chromafinger^TM ）生成共有模式,并进行相似度和主成分分析。 结果 赤芝薄层荧光色谱指纹图谱由 9 个特征荧光条斑组成。荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析比较,建立了赤芝指纹图谱模式。赤芝与紫芝、无柄灵芝、 平盖灵芝、薄树芝、黑芝 等在三萜类化合物方面区别较大。 结论 通过指纹图谱考察,当前市场灵芝类型主要是赤芝、紫芝为主流,但两者区别较大,其他灵芝的近缘种均为代用品,不可做灵芝使用,应加以区别。