4a亚型猪戊型肝炎病毒对猕猴致病性

目的 研究4 a亚型猪戊型肝炎病毒(HEV)对猕猴的致病性。方法 用1株从广西壮族自治区农村地区幼猪粪便中分离并已经基因测序确定为4 a亚型的猪HEV静脉注射感染猕猴,通过检测粪便HEV RNA、血中HEVRNA、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平、HEV抗体及肝组织分别进行病理学和电镜检查确定HEV致病性。结果 猪HEV株实验感染猕猴后,出现粪便排毒、病毒血症、ALT升高及HEV抗体阳转,活检肝组织切片呈现典型的急性病毒性肝炎的病理变化,电镜下观察到肝细胞中散在有大量病毒样颗粒。结论 广西4 a亚型猪HEV能够跨物种感染猕猴并引起戊型肝炎。     

戊型肝炎病毒感染动物模型应用于抗-HEV试剂评价的初步研究

目的应用实验室戊型肝炎病毒（HEV）感染恒河猴动物模型对抗-HEV诊断试剂进行初步的评价。方法用1和4基因型的HEV静脉注射分别感染4只恒河猴，检测实验猴的丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测粪便标本中HEVRNA，抗-HEVIgG试剂（GL-IgG，wT-IgG）分别检测实验猴系列血清抗体水平。结果HEV感染的8只实验猴均出现粪便排毒，1和4基因型HEV感染的实验猴分别有1只和2只出现ALT升高，GL-IgG试剂检测1型HEV实验感染猴有2只抗体阳转，4型HEV实验感染猴有1只抗体阳转；而wT-IgG试剂检测1、4型HEV实验感染猴的抗体均阳转。两种试剂检测感染猴窗口期抗体阳转时间相近，GL-IgG试剂抗体阳性持续到12周，wrT-IgG试剂在16周观察期内均阳性。结论两种试剂均可检测出感染实验猴的抗体，但wT-IgG试剂具有检测灵敏度较高的特点。     

婴儿接种首剂三价口服脊髓灰质炎疫苗后

为了观察婴儿接种首剂三价口服脊髓灰质炎(脊灰)疫苗(TOPV)后疫苗病毒排毒状况,采用Hep-2、RD、L20B三种细胞,对接种首剂TOPV的健康婴儿粪便标本进行了初步调查.结果显示脊灰疫苗病毒在人体内具有较好的增殖能力,83.9%的婴儿粪便排毒≥4周.随时间延长,混合多型别向单型别转移,但Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰疫苗病毒均无明显型别优势.采用两种细胞联合检测脊灰疫苗病毒优于一种细胞单独检测;而RD+L20B细胞联合又优于Hep-2+RD细胞和Hep-2+L20B细胞.北京市疫苗相关麻痹型脊灰(VAPP)服苗病例脊灰疫苗病毒检出率主要受使用细胞种类、采集粪便标本时间等多因素影响,预计正常情况检出率应≥90%;分离株以Ⅲ型脊灰疫苗病毒为主,则可能是Ⅲ型脊灰疫苗病毒的固有性质所决定;要巩固无脊灰成果,必须坚持使每个新出生儿童完成全程免疫和对流动儿童实行适时的强化免疫.从健康婴儿分离的Ⅲ型脊灰疫苗病毒,多数为疫苗型间基因重组株且具多样性,这是否会影响VAPP发生率或带来其它负面影响正在进一步研究中.     

戊型肝炎患者的病毒血症、粪便排毒及抗体反应

有关戊型肝炎病毒(HEV)感染的病毒血症、粪便排毒及抗体反应的报道很少。为了更好地了解HEV感染的特征,作者对67例急性戊型肝炎(HE)住院患者进行了研究。 研究对象为1993年8～12月在加德满都传染病院住院的67例急性戊型病毒性肝炎患者,经PCR或ELISA法检测到HEVRNA或IgM抗-HCV而确诊。在患者入院时收集血清和粪便标本,2～3天后收集第2次血清,有18例在发病第27～100天收集第3次血清。以99例登革热病毒感染儿童的双份血清作为阴性对照。所有待检血清分别用PCR、ELISA、FABA检测HEV RNA、IgM     

野鼠自然和实验感染戊地病毒的研究

目的：研究3种鼠（小白鼠A，草原兔尾鼠B，子午沙鼠C）对戊肝病毒（HEV）的反应，方法：检查疫区捕获的小林姬鼠；对人工饲养繁殖后的B，C鼠实验感染HEV：第1次用已证实含HEV．RNA的人粪便悬液攻击A，B，C3种鼠；第2次用已感染HEV的小林姬鼠和B鼠肝组织攻击，观察各种反应。结果：第1次攻击后临床表现少而轻，仅20％B鼠出现鼠神萎靡，A，B，C鼠全部有酶血病，C鼠排毒HCV，RNA占25％，肝组织普遍有病理反应（占30％－100％），感染后死亡仅见B鼠（占50％），结论：实验用3种鼠均可感染HEV，应重视其在传播中的作用，并可从中筛选动物模型。     

甲肝灭活疫苗接种安全性及免疫效果观察

目的观察甲型肝炎灭活疫苗的安全性及免疫效果.方法挑选甲肝抗体阴性、丙氨酸转氨酶(ALT)正常的健康的恒河猴10只.随机分为5组,每组2只,每只接种1ml甲肝疫苗,分别接种甲肝灭活疫苗吕8株(Lu8)、H₂株及史克疫苗.方案:0、4周接种.接种3天内,每天观察有无局部及全身反应.首次注射后每周采静脉血1次,加强1针后每2周采血1次检测抗HAV及ALT,14周后改为每4周采血1次直至46周.每周采粪便2次,连采4周,用KMB17细胞进行病毒分离.4、8周肝组织穿刺作病理学检查.结果接种疫苗后3天内,所有猴子均无局部及全身反应.ALT正常,4、8周肝脏穿刺无特殊组织病理改变.首次注射后2周100%抗体阳转,4周效价为374.8mIU/ml～937mIU/ml.加强1针后抗HAV效价有10倍以上升高,抗体最高达14992mIU/ml,到46周抗体水平持续在2998.4mIU/ml～7496mIU/ml之间,GMT为31.2～34.2.大便传代2次无排毒.结论4批国产甲肝灭活疫苗接种恒河猴具有很好的安全性和可靠的免疫效果.     

婴儿接种首剂三价口服脊髓灰质炎疫苗后疫苗病毒排毒状况观察

为了观察婴儿接种首剂三价口服脊髓灰质炎 (脊灰 )疫苗 (TOPV)后疫苗病毒排毒状况 ,采用Hep 2、RD、L2 0B三种细胞 ,对接种首剂TOPV的健康婴儿粪便标本进行了初步调查。结果显示 :脊灰疫苗病毒在人体内具有较好的增殖能力 ,83 9%的婴儿粪便排毒≥ 4周。随时间延长 ,混合多型别向单型别转移 ,但Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰疫苗病毒均无明显型别优势。采用两种细胞联合检测脊灰疫苗病毒优于一种细胞单独检测 ;而RD L2 0B细胞联合又优于Hep 2 RD细胞和Hep 2 L2 0B细胞。北京市疫苗相关麻痹型脊灰 (VAPP)服苗病例脊灰疫苗病毒检出率主要受使用细胞种类、采集粪便标本时间等多因素影响 ,预计正常情况检出率应≥ 90 % ;分离株以Ⅲ型脊灰疫苗病毒为主 ,则可能是Ⅲ型脊灰疫苗病毒的固有性质所决定 ;要巩固无脊灰成果 ,必须坚持使每个新出生儿童完成全程免疫和对流动儿童实行适时的强化免疫。从健康婴儿分离的Ⅲ型脊灰疫苗病毒 ,多数为疫苗型间基因重组株且具多样性 ,这是否会影响VAPP发生率或带来其它负面影响正在进一步研究中。     

广西地区动物HEV基因型及亚型分布

目的 了解广西地区猪、鼠、狗、猕猴和鱼5种动物戌型肝炎病毒(HEV)基因型和亚型分布.方法 对广西地区猪、鼠、狗HEV抗体阳性血清170份,鼠肝组织150份,3月龄以下狗粪便标本80份,鱼胆汁标本120份,3月龄以下猪粪便标本129份,龙虎山自然景区猴粪便标本130份,用巢式逆转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测戊型肝炎病毒核糖核酸(HEV RNA),对RT-nPCR阳性扩增产物进行克隆测序,用Vector NTI Suite 9.0和Treeview软件与目前新分型方法所选参考序列进行核苷酸序列相似性比较和生物进化树分析.结果 广西地区170份猪、鼠和狗血清HEV RNA检测均为阴性.在150份鼠肝组织,120份鱼胆汁标本,80份狗和130份猕猴粪便标本中均未检出HEV RNA;3月龄以下猪粪便标本HEV RNA阳性率10.08(13/129).对13株猪HEV开放读码框架(ORF)1区部分核酸序列进行分析,其与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型HEV的相似性分别为73%～77%,76%～79%,76%～81%,82%～97%;与6个亚型的相似分别为4a:82%～94%;4b:82%～98%;4c:82%～87%;4d:81%～87%;4f:84%～86%;4g:81%～84%,其中2株与N a亚型相似性是高为82%～94%,11株与Ⅳ b亚型相似性最高为82%～98%.结论 广西地区猪HEV均为基因型4,2株属于基因型Ⅳ a,Ⅱ株为Ⅳb.HEV在猪、鼠、狗血清、鼠肝组织、鱼胆汁、狗和猕猴粪便标本中均未检出.     

北京市郊区八种动物戊型肝炎病毒抗体流行率调查及病毒基因型研究

目的 调查北京地区与人密切接触的猪、牛、羊、马、驴、犬、鸡、鸭8种动物血清中戊型肝炎病毒(HEV)抗体流行率及该地区猪HEV基因型和亚型.方法 收集8种动物的血清标本及幼猪粪便标本,用双抗原夹心ELISA法检测血清中抗-HEV;用巢式反转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测HEV RNA;对部分PCR产物进行克隆和测序,并对测序结果进行基因分型.结果 在8种动物中抗-HEV阳性率分别为猪80.43%(481/598),其中成猪(>6月龄)为87.86%(369/420),幼猪(2～3月龄)为62.92%(112/178);牛15.02%(52/346);马14.29%(40/280);驴0(0/26);羊9.88%(33/334);犬0(0/21);鸭3.03%(7/231);鸡2.53%(8/316).RT-nPCR检测3月龄以下猪粪便标本HEVRNA阳性率为66.67%(74/111).HEV RNA阳性的标本测序后可归为6株(分别命名为bjsw1、bjsw2、bjsw3、bjsw4、bjsw5和bjsw6),6株HEV开放读码框2(ORF2)部分核苷酸序列的相似性为94.5%～99.6%,与1、2、3、4型HEV的相似性分别为75.6%～78.6%、75.6%～76.2%、77.1%～80.7%和83.7%～94.5%.6株HEV与人HEV 4d亚型的同源性最高,为90.0%～94.5%.结论 北京市郊区猪、牛、马、羊、鸭、鸡中均存在HEV感染,其中猪抗-HEV流行率最高,驴、犬抗-HEV的流行率最低;6株猪HEV属于基因4型、4d亚型.     

戊型肝炎病毒感染ZCLA长爪沙鼠的实验研究

目的:确定ZCLA长爪沙鼠作为戊型肝炎病毒感染动物的可能性。方法:选取鉴定含有戊型肝炎病毒的患者粪便,PBS混匀制成10%的粪悬液后10-1原液浓度腹腔接种ZCLA长爪沙鼠100μl,分别收集实验第0,7,14,21,28,35,42,49天的粪便,荧光定量PCR测定接种粪悬液以及收集的粪便所含戊型肝炎病毒滴度。结果:ZCLA长爪沙鼠腹腔接种的粪悬液所含戊型肝炎病毒滴度为4.1×103 copies/g,实验第7天ZCLA长爪沙鼠出现粪便排毒现象并持续至第35天,第7天粪便中戊型肝炎病毒滴度最高,为1.9×103 copies/g,随着实验进程时间推移HEV滴度逐渐降低。呈现下降趋势,第42天和第49天粪便HEV检测均为阴性。对照组粪便HEV检测均为阴性。结论:ZCLA长爪沙鼠能够感染戊型肝炎病毒,可以考虑进一步应用于戊型肝炎病毒动物感染研究。     

甲型肝炎减毒活疫苗(H_2株)的开发研究

1992年我国研究开发成功甲型肝炎 (甲肝 )减毒活疫苗 (H2 株 )。十几年中建立了普通狨猴动物模型 ;将细胞-病毒培养系统的生产工艺做了重大改进 ;对 1989～ 1997年生产的 16批疫苗做了现场人体观察 ,未见不良反应及血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)升高 ,接种后抗体阳转率为 81 8%～ 10 0 0 % ,几何平均滴度 (GMT)为 1∶2 1～ 1∶5 0。K7疫苗病毒为IB基因亚型 ,经体内外多次传代或从接种者排出的病毒做序列分析 ,其与K7株的同源性达99 3%～ 10 0 0 % ,显示减毒性质、遗传稳定性不变。易感者接种疫苗后粪便排毒率为 85 7%～ 90 3% ,接触者为6 3 6 %～ 71 9% ,说明活疫苗接种后有次传播能力 ,但毒株均显弱毒性质 ,无毒力返祖现象。结果表明 :H2 株甲肝减毒活疫苗的安全性、免疫原性良好 ,应该继续推广使用     

戊型肝炎病毒中国XT-179株系S蛋白基因组cDNA克隆及其免疫原性表位的血清学研究

本文报道对中国新疆东部一起戊型肝炎(HE)流行中2例HE患者粪便中分离到的HEV中国XT-179株系基因组进行cDNA分子克隆和其免疫原性表位的血清学研究结果。cDNA序列分析表明中国XT-179株与缅甸ET1.1株之间有94.3％的核苷酸和99.6％的氨基酸具有同源性。但也有5.7％的核苷酸区别于其他HEV地理株和散发株,提示在中国流行型HEV可能存在独特的基因型,可将此毒株序列作为鉴别HEV不同毒株的病毒学依据之一。本研究还按上述HEV地理株之间共有的免疫原性表位氨基酸序列合成了多肽抗原,用于检测来自中国XT-179株系流行区的29例HEV感染者和8例正常人血清抗-HEV,与应用HEV中国XT-179株系颗粒抗原相比,两组血清抗-HEV阳性和阴性的符合率分别为92.6％和100％。证实本项研究所克隆的HEV基因组可用于制备HEV重组基因疫苗和免疫诊断制剂。     

子午沙鼠感染戊肝病毒传代的实验研究

目的：子午沙鼠实验感染HEV的传代研究。方法：选健康子午沙鼠腹腔接种含HEV的人类便悬液,接种后观察43－50d,分别记录临床表现、酶血症和排毒结果、肝组织学改变。第1代7只,第2、3代各20只,依次进行逐代感染,连续3代。结果：临床表现不明显,酶血症反应3代基本一致,第6d开始,50d渐复常,呈双峰型;肝组织学改变：经光镜和电镜检查显示,与人戊肝病理改变相似。结论：实验证实子午沙鼠可连传3代,有与人类戊肝相似的特征,具动物模型的条件。     

福建省脊髓灰质炎Ⅱ型疫苗重组株病毒特性与分析

对福建省脊髓灰质炎 (脊灰 )Ⅱ型病毒基因的VP1区和 3D区进行PCR -RFLP分析 ,结果有 5株为脊灰Ⅱ型疫苗重组株病毒 ,均表现为VP1区为Ⅱ型疫苗株 ,3D区为Ⅲ型疫苗株 ,有 4株在VP1区出现不同于标准脊灰Ⅱ型疫苗株病毒的变异。流行病学资料揭示 ,分离出脊灰Ⅱ型重组株病毒的急性弛缓性麻痹 (AFP)病例大多具有脊灰的症状 ,且发病表现出明显的季节性 ;而从“零”剂次免疫儿童或近 6个月从未服过脊灰疫苗儿童的粪便标本中 ,只分离到此病毒。这表明福建省自然环境中存在脊灰Ⅱ型疫苗重组株病毒循环 ,此病毒可能是这类AFP病例的致病因子。在我国保持无脊灰状态下如何控制脊灰Ⅱ型重组株病毒的致病 ,适时采取相应对策对今后的工作提出了新的挑战。     

接种重组新型冠状病毒疫苗后的不良反应

目的 探讨接种重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)后的不良反应及对其进行相应的护理措施.方法 将2021年2-3月期间在某院接种重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)的1212例接种者作为研究对象,观察其在接种重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)后出现的不良反应,并探讨对其进行相应的护理措施.结果 1212例接种重组新型冠状病...     

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)的开发研究

1992年我国研究开发成功甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗(H2株).十几年中建立了普通狨猴动物模型;将细胞-病毒培养系统的生产工艺做了重大改进;对1989～1997年生产的16批疫苗做了现场人体观察,未见不良反应及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高,接种后抗体阳转率为81.8%～100.0%,几何平均滴度(GMT)为12.1～15.0.K7疫苗病毒为IB基因亚型,经体内外多次传代或从接种者排出的病毒做序列分析,其与K7株的同源性达99.3%～100.0%,显示减毒性质、遗传稳定性不变.易感者接种疫苗后粪便排毒率为85.7%～90.3%,接触者为63.6%～71.9%,说明活疫苗接种后有次传播能力,但毒株均显弱毒性质,无毒力返祖现象.结果表明H2株甲肝减毒活疫苗的安全性、免疫原性良好,应该继续推广使用.     

乙型肝炎基因重组疫苗与血源疫苗接种易感人群抗体应答比较

比较国产乙肝基因重组疫苗和血源疫苗免疫效果.用乙肝基因重组疫苗接种47人,接种剂量5μg×3,乙肝血源疫苗接种74人,接种剂量10μg×3;均按0,1,2月程序接种;以SPRIA检测免疫对象HBV血清学标志物.结果,两组接种对象均未出现严重的副反应;完成3针免疫接种后6个月时,基因重组疫苗组抗HBs阳转率(44.7%)显着小于血源疫苗组阳转率(987%);基因重组疫苗组抗.HBsS/N值显着小于血源疫苗组.结果提示国产乙肝基因重组苗安全性是好的,但免疫效果较血源疫苗差.     

华东和华南地区商品猪戊型肝炎病毒携带率和基因分型分析

目的 了解华东和华南地区商品猪戊型肝炎病毒(HEV)的携带率和基因分型.方法 2007-2009年收集华东和华南地区5家屠宰场商品猪胆汁600份,应用巢式RT-PCR方法检测HEVRNA,测序后做系统进化分析.结果 600份猪胆汁中有47份(7.83%)分离出HEVRNA.基于HEV ORF2区域内150-nt序列的系统进化分析结果,分离的47份HEV病毒株均属于Ⅳ型,与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型参考病毒株的核苷酸同源性分别为75.0%～83.4%、75.0%～84.6%、71.9%～80.7%和88.1%～91.5%,且大部分病毒株按采样地区来源表现出地区聚集性.结论 HEV在华东和华南地区的商品猪中广泛存在,应加强对商品猪食用安全问题的关注.     

高迁移率族蛋白B1对人乳头瘤病毒重组腺病毒载体疫苗免疫效果的影响

目的：评价高迁移率族蛋白B1（HMGB1）分子对接种HPV16型重组腺病毒载体疫苗实验小鼠免疫应答和抗肿瘤生物学效应的影响。方法通过TC-1细胞移植诱导建立小鼠肿瘤模型,在接种HPV16型重组腺病毒载体疫苗的同时,给予外源性HMGB1及其特异性拮抗剂HMGB1 A box注射,进行肿瘤抑制试验、肿瘤细胞挑战实验、特异性IFNγ的诱导检测。结果肿瘤抑制试验表明,与单独接种不同剂量疫苗组相比,注射HMGB1后小鼠成瘤率显著提高（2/10 vs 9/10, P<0.05）;而注射了A-box则减低了小鼠成瘤率（7/10 vs 1/10, P<0.05）。TC-1肿瘤细胞挑战试验显示,10只先接种疫苗的小鼠中有8只免受TC-1肿瘤细胞的攻击,而HMGB1仅能保护2只,且小鼠成瘤时间提前,肿瘤更大,同时HMGB1还使疫苗诱导特异性IFNγ的能力显著降低。结论 HMGB1分子可以削弱HPV16型重组腺病毒载体疫苗在小鼠模型上的免疫效果,而其拮抗剂A box蛋白具有一定程度增强作用。     

山东省某地屠宰场猪肝内戊型肝炎病毒感染状况研究

目的研究商品猪肝脏内戊型肝炎（戊肝）病毒（HEV）的检出状况及其基因分型。方法采集35份山东省某个人屠宰场和某城镇大型屠宰场内的猪肝，处理后采用逆转录．巢式聚合酶链反应（nested RT·PCR）方法检测HEV RNA。并与GenBank中登录的HEV全长序列进行同源性分析。结果35份猪肝标本中共有3份检出HEVRNA，阳性率为8．57％。同源性分析显示这3株病毒均为Ⅳ型HEV。结论即将上市的商品猪肝脏内存在HEV感染，其基因型与中国大陆HEV流行株相同，均为基因Ⅳ型。