粪便隐血质控品的制备和评价

目的制备较理想的粪便隐血质控品,以保证粪便隐血检验质量。方法将红细胞溶血后配制成1 000 mg/L Hb溶液并梯度稀释,用化学法和胶体金法进行隐血试验,选择粪便隐血质控品的最佳Hb浓度;用不同防腐剂防腐,观察结果的稳定性。结果最终选择Hb 100 mg/L为粪便隐血质控品配制浓度,同时可作为化学法质控品浓度、胶体金法质控品高值浓度。选取Hb 1 mg/L为胶体金法粪便隐血质控品低值浓度。甲苯防腐的Hb溶液在5个月内结果最稳定,可用于粪便隐血试验室内质控。结论初步制备了较理想的粪便隐血质控品,可用于粪便隐血检验的质量控制。     

全血微量元素液体质控品的制备及性能评价

目的:探讨自制全血铁(Fe)、锌(Zn)、铜(Cu)微量元素液体质控品的稳定性及作为原子吸收分光光度法室内质控品的可行性。方法:收集标本测试完后血型相同的乙二胺乙二酸(EDTA)抗凝新鲜全血,加入溶血剂,用蒸馏水稀释制备两个水平全血Fe、Zn、Cu微量元素检测用液体质控品,分装,-20℃保存,对自制全血微量元素液体质控品进行性能评价。结果:自制两个水平全血微量元素液体质控品3个项目,批内、批内天间不精密度均小于基于生物学变异导出的质量规范,符合质量控制要求,-20℃保存24个月,自制液体质控品性能稳定、可靠,差异无统计学意义(P>0.05),瓶间差CV符合美国国会颁布临床实验室修正案(CLIA'88修正案)关于质控品的技术规格的要求。结论:自制两个水平全血微量元素液体质控品,性能稳定,制作方法简单,可满足临床实验室室内质控的要求。     

同型半胱氨酸检测试剂盒性能评价

目的：评价国内某公司同型半胱氨酸（Hcy）试剂性能指标,探讨其临床应用价值。方法利用奥林巴斯 Au640生化仪对 Hcy 试剂盒进行准确度、重复性、稳定性、线性范围等方法学评价。结果正常值质控和病理值质控测定相对偏倚分别为0.2％和4.9％,远小于试剂说明书要求的小于15％;批内变异百分率分别为2.6％和2.3％,小于试剂说明书要求的小于5％;天间变异百分率分别为4.4％和4.1％,小于试剂说明书要求的小于10％。在0～66μmol／L 浓度范围内,复相关系数 r2为0.997,说明预期值与测量值之间相关性极好;斜率 b1＝0.9799,在0.97～1.03范围内,从经验上判断,斜率与1之间无差异,截距 b0＝0.1518,与0之间无差异,表明该试剂在实验所涉及的浓度范围内（0～66μmol／L）检测结果呈线性。结论国内某公司 Hcy 试剂各方面性能指标优异,适于临床应用。     

血糖即时检验室间质控品的制备和评价

目的：配制血糖即时检验室间质控品并做评价。方法：准备肝素抗凝全血标本，取部分全血即刻分离血浆在日立7600-110全自动生化仪上测定作为对照组，剩余的全血联合加入多种抗糖酵解剂，并在室温（22℃）保存2、8、24、48小时后测定血中葡萄糖的浓度，在日立7600-110全自动生化仪、雅培MediSenseOptium^TM快速血糖仪、强生SureStep^TMPlus稳步型血糖仪、罗氏GLUCOTREND2乐康全血糖仪上测定，并将各仪器各时间段的结果作组间比较。结果：含有复合抗酵解剂的全血标本，可使血中葡萄糖浓度在24小时内保持稳定，24小时内各时间段之间的结果差异无显著性意义（F=1．52，P〉0．05），48小时的血糖结果有所下降，与对照组结果比较，有显著性差异（P〈0．01）。结论：自制的全血血糖室间质控品配制简单，血糖浓度24小时内保持稳定，且不会干扰快速血糖仪的测定，符合血糖即时检验室间质控要求。     

同型半胱氨酸检测方法性能评价研究

目的对比高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、循环酶法与酶比色法在同型半胱氨酸检测中的性能,了解和评价同型半胱氨酸检测方法。方法对HPLC、ELISA、循环酶法与酶比色法4种检测方法的线性范围、准确度、精密度以及抗干扰能力等指标进行分析。结果 HPLC回归方程为Y=1.21×10~5 X-7.00×10~4,R~2=0.999 8;ELISA回归方程为Y=0.991 X+0.603 1,R~2=0.999 6;循环酶法回归方程为Y=0.998 X+0.605 5,R~2=0.996;酶比色法回归方程为Y=0.993 X+0.605 7,R~2=0.999 4。HPLC、ELISA、循环酶法、酶比色法试剂实际测试精密度变异较小。胆红素(200mg/L)、乳糜微粒(0.5%)、血红蛋白(1.5g/L)、抗坏血酸(300mg/L)均不会对HPLC、ELISA、循环酶法与酶比色法造成干扰。HPLC平均回收率为91.4%;ELISA平均回收率为86.0%;循环酶法平均回收率为89.9%;酶比色法平均回收率为80.2%。4种方法测定结果具有较好一致性。结论在同型半胱氨酸检测中,4种方法线性范围有所不同,精密度较佳,回收率较高,且有着较强的抗干扰能力。     

葡萄糖即时检验院内室间质控品的制备和评价

目的 配制葡萄糖即时检验室间质控品并做评价.方法 肝素抗凝全血即刻分离血浆,在日立7600-110生化仪上测定葡萄糖作为对照组,剩余的全血联合加入多种抗糖酵解剂,并在室温（22℃）保存2、8、24、48 h后测定葡萄糖的浓度,在生化仪、雅培MediSense Optium^TM快速血糖仪、强生SureStepTM Plus稳步型血糖仪、罗氏Glucotrend 2乐康全血糖仪上测定,并将各仪器各时间段的结果作组间比较.结果 含有复合抗酵解剂的全血标本,可使血中葡萄糖浓度在24 h内保持稳定,24 h内各时间段之间的结果差异无显著性意义（F=1.52,P＞0.05）;48 h的葡萄糖结果有所下降,与对照组比较,有显著性差异（P＜0.01）.结论 自制的葡萄糖即时检验室间质控品配制简单,葡萄糖浓度24 h内保持稳定,且不会干扰快速葡萄糖仪的测定,符合葡萄糖即时检验室间质控要求.     

输血相容性检测室内质控品制备技术优化与性能评价

目的优化自制输血相容性检测室内全血质控品制备技术,检测其保存过程中综合性能指标的变化,确定合理的处理流程、保存期限并评价其应用价值。方法选择多人份采集时间≤10 d的B型RhD阴性健康献血者标本,将其混合后离心留取上清血浆,再将混合浓缩红细胞分成2组,MAP组:使用MAP红细胞保养液洗涤2次;Saline组:使用生理盐水洗涤2次。将2组洗涤后的红细胞分别与MAP红细胞保存液、对应混合血浆按照1∶2∶3的体积比混合。选择商品化IgG抗-D试剂做抗-D效价测定,确定出现最后1个2+凝集强度的稀释倍数,并按照此稀释倍数分别在2组质控品中填加相应体积的IgG抗-D。将2组混合悬液分装在硬质塑料试管中盖帽4℃保存,每天在室温放置1 h,分别在保存的0、35、42、49 d检测质控品标本红细胞与标准抗-B的凝集强度、IgM抗-A与反定A细胞的凝集强度、IgG抗-D与RhD阳性O型红细胞的凝集强度、上清液中Na+、K+、LDH、乳酸、FHb浓度、红细胞形态变化以及质控品中细菌繁殖情况。结果保存过程中2组质控品红细胞B抗原、IgG抗D抗体反应活性均无明显变化(P>0.05),IgM抗A抗体反应活性虽出现波动(P<0.01),但凝集强度变化均在1+范围内;2组质控品K+、乳酸浓度均随保存时间延长明显增高(P<0.01),但保存35、42d时2组各指标之间无明显差异(P>0.05);2组质控品FHb浓度均随保存时间延长而增高,但相同保存时间2组之间比较无明显差异(P<0.01)。保存49 d时MAP组和Saline组FHb浓度分别为(857.1±301.5)mg/L和(595.3±334.9)mg/L,与保存0d相比均明显升高(P<0.01),MAP组部分质控品FHb浓度已经超过中度溶血标准(1 000 mg/L);2组质控品保存末期(≤42 d)红细胞都会出现一定程度的皱缩并形成棘突,但2组之间无明显差异;2组质控品保存过程中都未见细菌生长。结论本室采用2种方法自制的全血质控品质量无明显差异,保存期都能达到42 d,且管间差异小、抗原抗体反应活性稳定,能够满足输血相容性检测室内质控的相关要求,适合在输血相容性检测实验室推广。     

前列腺特异抗原质控品的制备与评价

目的制备性能稳定的前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)质控品,用作PSA定量检测试剂临床检测的质量控制。方法将人源PSA蛋白以不同稀释配方稀释成低、中、高3个浓度,制备液体和干粉两种形式的质控品,用Abbott定量检测试剂进行活性检测,考察PSA质控品的稳定性能。结果 PSA液体质控品使用未灭活血清稀释,制备过程简单,瓶间差较低,冷藏保存可至少稳定8个月,冷冻保存可至少稳定18个月;PSA干粉质控品使用含有10%人血清、50 g/L甘氨酸和4g/L人血清清蛋白的PBS制备,冻干粉外观均匀,复溶后澄清透明,干粉在37℃和复溶后25℃可稳定放置4周,冷藏保存至少稳定12个月。结论制备的PSA液体质控品和干粉质控品使用方便,稳定性能够满足室内质控要求,具有较好的市场前景。     

血浆表皮生长因子受体基因突变检测质控品的制备及 性能评价

摘要：目的：制备模拟临床血浆样本的EGFR基因突变检测质控品，对其进行应用评估，作为日常检测中质量控制的保证。 方法：收集病理标本中EGFR基因E19del、L858R、T790M主要位点突变的阳性标本，提取DNA后，用正常献血者的报废血浆混匀分装成每管0.5ml，灭活，小量分装保存于-80℃。每次进行EGFR基因突变检测时，随常规标本同时提取扩增分析，评估其均一性及稳定性。 结果：保存于-80℃的自制EGFR突变质控品复融后常规测定, 结果显示其有较好的重复性和稳定性，无明显的批内、瓶间差异。 结论：制备的低浓度EGFR突变质控品能满足临床EGFR突变检测室内质控要求，可以作为日常EGFR突变检测质量控制的有效手段。     

11种同型半胱氨酸检测系统的性能评价

目的评价11种同型半胱氨酸(Hcy)循环酶法商品化试剂的检测性能。方法选取11种Hcy循环酶法商品化试剂,分别与HITACHI 7180全自动生化分析仪组成11种检测系统。参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2、EP6-A文件及我国医药行业标准YY/T 1258—2015,验证11种检测系统的实验室内精密度、正确度、线性范围和9种检测系统的试剂批间差。结果 11种检测系统的实验室内精密度均符合要求[低于室间质量评价(EQA)标准的1/3(6.67%)]。除1种检测系统测定中、高水平样本的批间差10%(EQA标准的1/2)外,其他检测系统的试剂批间差均符合要求(10.00%)。11种检测系统中有4种未通过正确度验证,有3种线性范围验证判定为非线性。结论 11种检测系统在测定Hcy时各项检测性能存在一定的差异。各临床试验室应在开展Hcy检测时对检测系统进行性能验证。     

特种蛋白室内质控品制备及应用评价

目的自制特种蛋白室内质控品并对其应用进行评价。方法选择符合条件的正常人及患者血清、尿液经过灭活、离心、稀释等处理后定值、分装和保存,从质控效果和稳定性两方面进行评估。结果自制特种蛋白室内质控品方法简便。经8个月室内质控效果和稳定性与仪器原厂质控品比较,差异无统计学意义。结论自制特种蛋白室内质控品可用于特种蛋白检测的常规室内质控。     

特种蛋白室内质控品制备及应用评价

目的自制特种蛋白室内质控品并对其应用进行评价。方法选择符合条件的正常人及患者血清、尿液经过灭活、离心、稀释等处理后定值、分装和保存,从质控效果和稳定性两方面进行评估。结果自制特种蛋白室内质控品方法简便。经8个月室内质控效果和稳定性与仪器原厂质控品比较,差异无统计学意义。结论自制特种蛋白室内质控品可用于特种蛋白检测的常规室内质控。     

检测同型半胱氨酸的方法学进展和评价

同型半胱氨酸是甲硫氨酸代谢过程中的主要中间产物，体内血浆半胱氨酸水平与心血管等疾病有着密切的关系。目前，有多种检测半胱氨酸的方法，其中以新推出的循环酶法测定血浆半胱氨酸最为方便、准确、便宜，值得推广使用。     

自制糖化血红蛋白质控品及其性能评价

目的探讨自制溶血液作为乳胶增强免疫比浊法室内质控品的可行性。方法选择糖化血红蛋白(HbAlc)值分别为低值和高值的两个水平肝素抗凝血各1份,按试剂说明书,配制成测定用溶血液,分装、-20℃保存。使用Roche公司质控品做好室内质控,对溶血液进行性能评价。结果两个水平的溶血液的批内不精密度均小于2.5%,批内天间不精密度均小于5%;-20℃保存稳定期可达3个月(P>0.05),瓶间差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制两个水平值的糖化血红蛋白质控品是可行的,能够满足实验室室内质控的要求。     

自制血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C质控品在室内质控中的应用及质量评价

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（cystatin C,CysC）的检测已在各级实验室中开展。但由于试剂质量不一,且开瓶后稳定性难以掌握,特别是不同生产厂家之间、同一厂家不同批号之间的试剂检测结果的可比性必须有严格的室内质量控制保证措施及稳定的室内控制品作保证,因此需要严格规范检验质控管理的各项规章制度,     

循环酶法检测血清同型半胱氨酸的分析性能评价

目的：评价循环酶法检测血清同型半胱氨酸（Hcy）的分析性能,以建立适合本实验室的相关标准。方法依据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）颁布的系列 EP文件,分别对北京九强公司生产的循环酶法 Hcy检测试剂盒进行精密度评价、线性评价、参考区间分析、抗干扰实验分析和回收实验分析。结果批内变异系数为2．28％,批间变异系数为1．62％,天间变异系数为1．28％,总变异系数为3．04％;线性范围为3～52μmol/L;健康者参考区间（95％置信区间）为5．4～16．5μmol/L;血清标本总胆红素浓度不超过296．67μmol/L、三酰甘油浓度不超过4．74 mmol/L、血红蛋白浓度不超过6．00 g/L时,对 Hcy检测结果的干扰偏差不超过10％;平均回收率为94．72％。结论循环酶法检测 Hcy精密度好、线性范围宽、抗干扰能力强、回收率较高,是目前临床实验室值得推广应用的常规检测方法。     

DADE Moni-Trol临床化学质控品的应用性能评价

目的了解DADE Moni-Trol临床化学质控品的瓶间差和不同贮存条件下的稳定性,为实验室正确使用提供参考依据.方法运用连续测定多瓶样品结果的变异表示的总不精密度与用同一瓶样品进行连续测定结果的变异表示的分析不精密度之差计算质控品的瓶间差.对贮存在4°C或-15°C的2种水平质控品的稳定性用t检验进行统计分析.结果高浓度的水平2的平均瓶间差比低浓度的水平1要小,它们分别为1.0%和2.1%.2个水平的大部分评价项目在4°C和-15°C贮存条件下分别可以稳定7 d和30 d,但质控品水平1、水平2的TG在4°C保存条件下第4天起测定值有上升趋势,水平2的TBIL在-15°C贮存条件下第29天起测定值有下降趋势.结论实验室在使用该冻干质控品时必须严格按照说明书复溶要求操作贮存.     

人心肌肌钙蛋白I冻干质控品的制备及评价

目的制备性能稳定、具有良好免疫反应性的冻干人心肌肌钙蛋白I亚基(cTnI),用作cTnI定量检测试剂的质控品。方法利用基因工程方法构建表达载体,转化大肠埃希菌后,诱导表达重组cTnI,经纯化后制备冻干质控品,同时考察该质控品的稳定性。结果成功诱导表达可溶性cTnI蛋白,其冻干品与标准参考物质SRM 2921具有相同的免疫反应性,且该质控品用于检测具有良好的精密度和稳定性。结论制备的冻干cTnI使用方便、结果稳定,可以满足室内质控要求,适合作为cTnI定量试剂盒的质控品。     

基因重组人铁蛋白轻链质控品的制备与评价

目的 构建人铁蛋白轻链基因的原核表达载体,并评价与探讨能在大肠埃希菌(E.coli)中过表达的人铁蛋白轻链所制备的基因rFL质控品的均匀性、稳定性和精密度以及应用价值.方法 采用RT-PCR从人新鲜全血总RNA克隆铁蛋白轻链(ferritin L)基因,构建亚克隆质粒pGM-T/ferritin L;用测序鉴定后,将重组质粒pET-30a/ferritin L转化E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导rFL表达;采用SDS-PAGE对rFL进行鉴定,用WB分析其抗原性,ACCESS免疫分析仪测定其浓度.同时,采用随机数表从制备的rFL质控品中抽取15支,用单因素方差分析评价质控品的均匀性;用一元线性回归分析评价质控品的稳定性,再根据评价结果计算均匀性和稳定性的不确定度,然后进行精密度评价.结果 构建的铁蛋白轻链原核表达体系经测序显示,扩增的ferritin L基因片段与GenBank中的ferritin L编码序列(NM_000146.3)一致;PCR扩增出与ferritin L DNA的527 bp相符的片段;用IPTG诱导表达后,可得到表达量高的相对分子质量为19 000的rFL,WB证明其具有良好的抗原性;用ACCESS测定rFL稀释1 000倍后的浓度为(1 115.84±38.38) ng/ml.均匀性评价结果显示,高低2个浓度基因rFL质控品样本内和样本间的差异均无统计学意义(高浓度和低浓度基因rFL质控品的F值分别为2.336、0.730,P均>0.05).稳定性结果表明,质控品样本随贮存时间(5个半月)变化的线性趋势差异无统计学意义(F=1.755,P>0.05).精密度评价为高浓度基因rFL质控品批内CV为2.06%,批间CV为2.12%,日间CV为0%,总CV为2.96%;低浓度基因rFL质控品批内CV为2.03%,批间CV为2.08%,日间CV为0%,总CV为2.90%.结论 基因rFL质控品的均匀性、稳定性及精密度符合临床检测要求,可成为具有我国自主知识产权的铁蛋白质控品,同时也为铁蛋白混合质控品的制备提供了原料.

Abstract：

Objective To construct a prokaryotic expression system of human ferritin L which could be overexpressed in E.coli, and then prepare quality control materials of rFL and evaluate the homogeneity, stability, precision and application value of the rFL.Methods RT-PCR was used to clone ferritin L gene with total RNA from peripheral blood.Ferritin L gene was inserted into plasmid pGM-T to construct subclone plasmid pGM-T/ferritin L, which was identified by sequencing.The recombinant plasmid pET-30a/ferritin L was transformed into E.coli BL21 (DE3) and efficiently expressed under IPTG induction.rFL was identified by SDS-PAGE, and its antigenicity was examined by WB.The concentration of rFL was measured by ACCESS immunoassay system.Fifteen control samples were randomly selected using random number table.The homogeneity and stability of rFL were evaluated by one-way analysis of variance (ANOVA) and a linear regression model, respectively.The uncertainties of homogeneity, stability and the precision were evaluated.Results A prokaryotic expression system of ferritin L was successfully constructed.Sequence analysis showed that the ferritin L gene inserted was identical with the one from GenBank(NM_000146.3).The PCR products were 527 bp long, in complete agreement with length of ferritin L gene.The molecular weight of rFL highly expressed in E.coli induced by IPTG was 19 000 Da.The WB analysis indicated that this rFL protein had good antigenicity.The concentration of rFL(1 000 times dilution) measured by ACCESS immunoassay system was (1115.84±38.38) ng/ml.Homogeneity evaluation of low-concentration QC sample and high-concentration QC sample of rFL showed that there were no statistical significances in the within-groups and between-groups (for high-concentration F=2.336, P>0.05 and for low-concentration F=0.730, P>0.05).A linear regression based on the stability test indicated that there was no statistically significant trend of instability in five and a half months (F=1.755, P>0.05). Precision analysis showed the within-run CV, the between-run CV, the between-day CV and the total CV of high-concentration QC sample were 2.06%, 2.12%, 0% and 2.96% respectively; the within-run CV, the between-run CV, the between-day CV and the total CV of low-concentration QC sample 2.03%, 2.08%, 0% and 2.90%, respectively.Conclusion This rFL for quality control materials with independent intellectual property rights could meet the clinical requirement of homogeneity, stability and precision, and could provide raw materials for preparation of mixed ferritin for quality control.