BD Affirm TM VPⅢ DNA探针法在阴道炎病原体检测中的应用

目的分析BD Affirm TM VPⅢDNA探针法在阴道炎诊断中的临床应用价值。方法选取该院2019年1—9月收治的357例阴道炎患者为研究对象,同时采用BD Affirm TM VPⅢDNA探针法,细菌、真菌、滴虫培养法检测,比较4种方法的检测结果。结果与细菌、真菌、滴虫培养法的检测结果比较,BD Affirm TM VPⅢDNA探针法检测结果的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均在80%以上。BD Affirm TM VPⅢDNA探针法对加德纳菌、念珠菌、滴虫检测的灵敏度分别为95.08%、82.26%、93.10%;特异度分别为87.93%、97.00%、99.70%;阳性预测值分别为89.23%、93.58%、96.43%;阴性预测值分别为94.44%、91.13%、99.40%。结论BD Affirm TM VPⅢDNA探针法在阴道炎检测中具有较高的灵敏度及特异度,操作简便,能够在1 h内快速有效地检测出病原体,值得临床推广使用。     

阴道微生物芯片技术在阴道分泌物念珠菌检测中的应用

目的分析阴道微生物芯片检测技术在阴道分泌物样本念珠菌检测中的临床价值。方法收集233例疑似念珠菌性阴道炎患者的阴道分泌物样本,分别采用常规湿片镜检、真菌显色培养和阴道微生物芯片法进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果以真菌显色培养法为标准,常规湿片镜检法和阴道微生物芯片法的Kappa值分别为0.415和0.821,受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.73和0.91。结论阴道微生物芯片技术操作方便,报告及时、准确,对念珠菌性阴道炎的诊断具有较高的价值。     

白带盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原检测的对比分析

目的：比较分析白带盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）检测白念珠菌/阴道毛滴虫的价值。方法采用盐水涂片法与白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）两种方法对186例阴道分泌物进行检测。结果盐水涂片法滴虫、真菌检出率分别为22.6%和47.3%,白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）滴虫、真菌检出率分别为21.5%和51.6%。两者滴虫检出率之间无统计学意义（P〉0.05）,真菌检出率差异之间有统计学意义（P〈0.05）。结论白念珠菌/阴道毛滴虫抗原二联检测试剂盒采用乳胶免疫层析法检测标本中有白念珠菌及阴道毛滴虫抗原,使阴道分泌物检查及结果更客观,且易于标准化。     

湿片菌群法在细菌性阴道病诊断中的初步应用

目的评价湿片菌群法在细菌性阴道病(BV)诊断中的诊断效能。方法湿片菌群法是指在高倍镜下观察分泌物中微小短杆菌群分布形态从而诊断BV的方法。采用随机双盲、金标准对照的临床诊断实验设计,收集阴道分泌物异常的有效标本137例,每份标本制作成拭子、涂片,分别用Amsel标准法、湿片菌群法和Nugent评分法检测,并评价其诊断效能。结果137例标本用Amsel标准法检出BV 49例(35.8%);用Nugent评分法检出BV 56例(40.9%);用湿片菌群法检出BV 60例(43.8%)。以Nugent评分+Amsel标准为诊断BV的"串联金标准"时,检出BV 44例,占统计样本的36.7%。湿片菌群法检出BV阳性率与Amsel标准法有统计学差异(χ2=5.882,P<0.05),但与Nugent评分法及"串联金标准"均无统计学差异(χ2=0.643,χ2=0.571,P均>0.05)。当以Nugent评分法为金标准,湿片菌群法诊断敏感性为91.07%,特异性为88.89%,Youden指数为0.799 6;以Amsel标准为金标准,湿片菌群法诊断敏感性为93.88%,特异性为84.09%,Youden指数为0.779 7。当以Nugent评分+Amsel标准为诊断BV的"串联金标准"时,湿片菌群法诊断敏感性为95.45%,特异性为93.42%,Youden指数为0.888 7。结论湿片菌群法是一种诊断效能较高的BV诊断方法,其快速简便、安全价廉,适宜作为BV的常规筛查试验。     

细菌性阴道病四联快速检测卡的临床应用及意义

目的探讨阴道分泌物BV四联快速检测在诊断细菌性阴道病（BV）中的临床价值及在其他阴道炎中应用。方法对妇科门诊接受阴道分泌物检查的1051例标本采用0.9%氯化钠溶液直接涂片法观察清洁度及霉菌、滴虫感染情况,同时用Amsel法、Nugent革兰染色法和BV快速检测卡法进行比对检测。结果与传统的Amsel法相比,BV四联快速检测法诊断细菌性阴道病的敏感性为93.07%,特异性为95.51%,一致性为94.67%。与Nugent革兰染色法相比较,BV快速检测卡法敏感性为94.46%,特异性为96.23%,一致性为95.62%。结论 BV四联快速检测法是一种简便、快速的检测BV的方法,结合显微镜滴虫、霉菌检查,提高了妇科阴道炎的诊断率,及早和准确地诊断各种阴道病。     

1753例阴道分泌物检测结果分析

目的了解门诊患者阴道分泌物中病原体的感染分布状况及早期诊治的意义。方法对1 753例阴道分泌物进行妇科白带常规检查和细菌性阴道病(BV)快速检测卡检测。结果 1 753例标本中,清洁度Ⅰ~Ⅱ度844例,其中BV、念珠菌、滴虫的感染率分别为10.19%、9.12%和1.07%。Ⅲ~Ⅳ度909例,其中BV、念珠菌、滴虫的感染率分别为36.74%、26.4%和7.7%。结论该地区妇女阴道炎病原体主要为念珠菌及细菌性阴道病。在白带常规分析中,应注意查找病原体,防止漏检,对阴道炎的早期治疗及控制并发症的发生具有重要的价值。     

细菌性阴道病3种检测方法对比分析

目的比较细菌性阴道病（BV）3种不同检914方法（Amsel＇s法、BVBlue法及革兰染色Nugent评分法）的敏感性和特异性,为临床诊断治疗提供帮助。方法采用BV快速诊断试剂和Amsel金标准法对1134例阴道分泌物进行BV检测。结果1134例检查者中,Amsel＇s法检测出BV307例,阳性率为27．1％;BVBlue法检测出BV200例,阳性率为17．6％;革兰染色Nugent评分法检测出513例,阳性率为45．2％。3种方法差异有统计学意义（P〈0．05）。结论革兰染色Nugent评分法是一种简便、准确的诊断方法,优于其他2种方法,缺点是对中间态的标本不能确认。     

胶体金阴道滴虫试纸条检测阴道滴虫的临床评价

目的 探讨胶体金阴道滴虫试纸条(以下简称阴道滴虫试纸条)检测阴道分泌物中阴道滴虫的临床应用.方法 采用生理盐水涂片法、培养法和阴道滴虫试纸条法检测45例无阴道炎症状、59例有阴道炎症状和87例临床怀疑为滴虫阴道炎妇女阴道分泌物中的阴道滴虫.结果 191例阴道分泌物中生理盐水涂片法检测出滴虫51例,培养法法检测出滴虫阴道滴虫69例,试纸条法检测出真阳性66例,假阳性2例,假阴性5例(培养法为金标准方法).阴道滴虫试纸条法与生理盐水涂片法经配对χ2检验,其χ2=13.0667,P=0.0003,P＜0.01,因此两种方法比较有显著差异;阴道滴虫试纸条法与培养法经配对χ2检验,其χ2=0.5714,P=0.4497,P＞0.05,因此两种方法比较无差异.结论 用阴道滴虫试纸条测定阴道分泌物中阴道滴虫操作简单、快速、具有较高的特异性、敏感性、有效性、阳性预测值和阴性预测值,适宜临床应用.     

膜芯片技术对结核分枝杆菌耐药性检测的研究

目的 验证膜芯片技术在结核分枝杆菌对利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）耐药性检测中的应用价值.方法 收集393例临床标本（包括痰液、尿液、胸腔积液、腹水标本）,根据结核分枝杆菌耐药位点的DNA序列,设计用于检测rpoB、katG、inhA、rpsL和embB基因常见突变类型的膜芯片,对上述临床标本进行检测,并将其与传统微生物敏感性试验结果进行比较,对不相符结果用聚合酶链反应产物直接测序（PCR-DS）进行验证.结果 以常规培养法为金标准,膜芯片法扩增结核分枝杆菌的敏感性、特异性、准确性分别为90.4%、98.8%和95.7%,其对结核分枝杆菌RFP、INH、SM和EMB耐药性检测的敏感性分别为92.3%、83.3%、68.8%和83.3%;准确性分别为98.6%、97.3%、96.6%、和98.5%;特异性均达到100.0%.结论 膜芯片法检测结核分枝杆菌耐药性具有较高的敏感性、特异性和准确性,可作为常规微生物敏感性试验的补充.     

胶体金法在检测外阴阴道念珠菌中的临床意义

目的探讨胶体金念珠菌试纸条(以下简称胶体金法),在检测外阴阴道分泌物中外阴阴道念珠菌(VVC)中的临床应用。方法用生理盐水涂片法、革兰染色涂片法、培养法、胶体金法同时检测300例妇女阴道分泌物中的念珠菌。结果300例阴道分泌物中生理盐水涂片法检出念珠菌90例,革兰涂片染色法检出念珠菌101例,培养法检出念珠菌110例,胶体金检出念珠菌108例。胶体金法检出阳性率与培养法相比,差异无统计学意义(χ2=0.125,P0.05)。胶体金法的敏感性为95.5%,特异性为98.4%,约登指数为0.939,阳性预测值为97.4%,阴性预测值为97.2%。结论用胶体金法检测外阴阴道分泌物中的阴道念珠菌操作简便、快速和结果可靠。具有较高的特异性,敏感性,有效性。作为外阴阴道念珠菌筛查的一种常规检测方法,值得临床应用推广。     

阴道感染三种病原菌多重PCR检测方法的建立及其应用研究

目的 探讨阴道感染病原体多重PCR快速检测白念珠菌、加德纳菌和阴道滴虫的方法建立及其临床应用。方法 根据白念珠菌EO3基因、加德纳菌ITS-23srRNA基因及阴道滴虫TVK3～TVK7基因设计特异性PCR引物,采用加热煮沸裂解法制备DNA模板,进行多重PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测分析,在同一体系内完成三种阴道常见病原体的快速检测。结果 经特异性试验证明所建立的方法能特异地检测出白念珠菌125 bp,加德纳菌433 bp和阴道滴虫300 bp的目的片段,而其它非目的菌株均不能扩增出相应片段; 敏感性试验证实白念珠菌为10 cfu/ml,加德纳菌为10 cfu/ml,阴道滴虫为20 cfu/ml; 对30份已知临床标本和10份模拟混合标本进行检测均可检测出相应的病原体。结论 实验证明该研究所建立的白念珠菌、加德纳菌和阴道滴虫的多重PCR体系,具有灵敏度高、特异度强,可一步同时检测阴道分泌物中三种病原体,用于阴道感染的早期快速诊断。     

唾液酸酶活性测定快速诊断细菌性阴道病

目的:评估唾液酸酶活性测定在细菌性阴道病(BV)快速诊断中的应用价值。方法:选取360例妇科门诊病人,采集阴道分泌物,分别行唾液酸酶活性检测和Amsel标准诊断,所得结果进行统计分析。结果:以Amsel为金标准,唾液酸酶活性检测法诊断BV的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值分别为94.8%、90.3%、87.9%和95.9%,二法比较,符合率为92.2%,Kappa=0.842(P<0.05),结果高度一致,且不受阴道毛滴虫、阴道念珠菌、淋球菌和支原体等感染的影响。结论:唾液酸酶活性检测法诊断BV具有简便、快速、准确等优点。     

快速乳胶凝集试验在检测外阴和阴道念珠菌感染的应用

目的评价快速乳胶凝集试验诊断阴道念珠菌病的价值.方法用乳胶凝集法对临床拟诊念珠菌感染的119例妇女阴道分泌物进行检测,同时与阴道分泌物直接镜检法和培养法相比较.结果凝集法对阴道念珠菌感染的检出率为58.8%,高于培养法(56.3%)和直接镜检法(31.1%). 与培养法比较,快速凝集法的诊断敏感性为89.6%,特异性为80.8%.结论凝集法能快速诊断外阴阴道念珠菌病.虽成本略高于直接镜检法和培养法,但凝集法能缩短检测时间,且操作简便,可对念珠菌感染做初步诊断.     

不同方法对细菌性阴道病检出效果的研究

目的研究湿片镜检法、干化学酶法、乳胶免疫层析法、核酸杂交法等方法对检测阴道分泌物标本中细菌性阴道病(BV)检出效果。方法选取妇科门诊有临床症状患者的阴道分泌物分别使用上述方法进行检测,并以革兰染色Nugent评分法为金标准,对数据进行汇总统计。结果湿片镜检法、干化学酶法、乳胶免疫层析法及核酸杂交法的灵敏度分别为63.89%、66.67%、52.78%和80.56%;特异度分别为100.00%、100.00%、86.29%和95.43%。这4种方法与革兰染色Nugent评分法相比,Kappa值(一致性检验)分别为0.746、0.768、0.363和0.752;相对于革兰染色Nugent评分法,曲线下面积(AUC)分别为0.819、0.833、0.695和0.880,核酸杂交法AUC值最大,乳胶免疫层析法AUC值最小;诊断符合率分别为93.83%、94.31%、80.57%和92.89%。4种方法与革兰染色Nugent评分法的总符合率为64.90%。结论 4种方法中核酸杂交法对BV检出效果最佳,湿片镜检法和干化学酶法次之,乳胶免疫层析法效果很不理想;湿片镜检法与其他3种方法分别联合检测,可提高BV的检出率。     

快速乳胶凝集试验在检测外阴和阴道念珠菌感染的应用

目的　评价快速乳胶凝集试验诊断阴道念珠菌病的价值。方法　用乳胶凝集法对临床拟诊念珠菌感染的 119例妇女阴道分泌物进行检测 ,同时与阴道分泌物直接镜检法和培养法相比较。结果　凝集法对阴道念珠菌感染的检出率为 5 8.8% ,高于培养法 (5 6 .3% )和直接镜检法 (31.1% )。与培养法比较 ,快速凝集法的诊断敏感性为 89.6 % ,特异性为 80 .8%。结论　凝集法能快速诊断外阴阴道念珠菌病。虽成本略高于直接镜检法和培养法 ,但凝集法能缩短检测时间 ,且操作简便 ,可对念珠菌感染做初步诊断。     

不同方法对外阴阴道假丝酵母菌病的检出效果

目的探讨湿片镜检、革兰染色镜检、阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检、核酸杂交和真菌培养等方法对阴道分泌物标本中外阴阴道假丝酵母菌(即念珠菌)的检出效果。方法同时使用上述方法检测211例阴道分泌物标本,并以真菌培养法为金标准对数据进行统计分析。结果湿片镜检、革兰染色镜检、阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检及核酸杂交法检测外阴阴道假丝酵母菌(即念珠菌)的灵敏度分别为43.48%、58.70%、63.04%、34.78%和71.74%,特异度分别为98.79%、98.18%、79.39%、96.36%和98.79%,诊断符合率分别为86.73%、89.57%、75.83%、82.94%和92.89%;5种方法分别与真菌培养法比较,Kappa值(一致性检验)分别为0.521、0.650、0.374、0.384和0.772;相对于真菌培养法,曲线下面积(AUC)分别为0.711、0.784、0.712、0.656和0.853,核酸杂交法AUC值最大,阴道炎抗原三联检AUC值最小;5种方法总符合率为60.66%。结论 5种方法中,核酸杂交法对念珠菌的检出效果最佳,革兰染色镜检法和湿片镜检法次之,阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检效果很不理想,不建议单独使用;5种方法间总体符合率非常低,不建议不同实验室和不同方法间进行比较。     

PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速培养鉴定药敏试剂)进行药敏试验;采用PCR-反向点杂交法(深圳亚能念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测试剂)进行菌种鉴定和耐药基因突变检测;采用PCR及测序方法进行耐药基因的检测。分别以培养鉴定法、MIC法、核酸序列测定法为对比方法,评价PCR-反向点杂交法念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的敏感性、特异性及准确性。结果与培养鉴定法相比,PCR-反向点杂交法检测6种念珠菌菌种的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为95%、96%、96%、98%、97%以上,2种方法检测6种念珠菌(白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和季也蒙念珠菌)结果的差异无统计学意义(χ~2值分别为0.44、0、0、0、0和0,P均0.05),一致性较好(Kappa均0.9)。与MIC法相比,PCR-反向点杂交法检测白念珠菌耐药的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为98%、88%、98%、88%和96%,2种方法检测结果的差异无统计学意义(χ~2=0.17,P0.05),一致性较好(Kappa0.8)。PCR-反向点杂交法与核酸序列测定法相比,对6种白念珠菌耐药基因突变位点的检测结果完全一致。结论PCR-反向点杂交法在念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测上与培养鉴定法以及核酸序列测定法的一致性高,比传统检测方法更早期更快速,可应用于外阴阴道念珠菌病(VVC)的辅助诊断。     

两种方法联合应用在阴道分泌物检测中的意义

目的探讨氯化钠溶液涂片法、BV检测两种方法联合应用对感染性阴道疾病的诊断价值。方法对455例阴道分泌物标本进行氯化钠溶液涂片法和BV检测。了解氯化钠溶液涂片法中滴虫、真菌的感染情况及判断阴道清洁度,了解BV检测的阳性情况,以及与滴虫、真菌感染和阴道清洁度的关系。并分析氯化钠溶液涂片法与两种方法联合应用对阳性标本检出率的差异。结果 455例标本氯化钠溶液涂片法检出滴虫11例（2.4%）,真菌27例（5.9%）,清洁度异常（Ⅲ、Ⅳ度）217例（47.7%）,其中未检出滴虫真菌而清洁度异常186例（40.9%）。BV检测阳性161例（35.4%）,其中清洁度正常（Ⅰ、Ⅱ度）未检出滴虫真菌的标本BV检测阳性者65例（14.3%）。结论氯化钠溶液涂片法是最常规、最简便快速的检测方法,BV检测提高了细菌性阴道病的检出率。两种方法联合应用对提高感染性阴道疾病的诊治有十分重要的作用。     

女性生殖道念珠菌病病原体检测方法探讨

目的比较不同检验方法在女性生殖道念珠菌病诊断中的价值。方法收集门诊高度怀疑女性生殖道念珠菌病就诊者的阴道分泌物标本640例,分别采用直接真菌涂片法、实时荧光PCR定性法和念珠菌显色培养法进行检测,并以显色培养法为金标准对试验数据进行统计分析。结果直接真菌涂片阳性198例,实时荧光PCR定性检测结果真菌阳性296例,其中白色念珠菌234例,光滑假丝酵母菌39例,热带假丝酵母菌23例,白色念珠菌合并热带假丝酵母菌5例;显色培养法检测结果阳性287例,其中白色念珠菌229例,光滑假丝酵母菌36例,热带假丝酵母菌22例,白色念珠菌合并热带假丝酵母菌3例。三种方法检出率比较,直接真菌涂片法低于显色培养法和实时荧光PCR定性法(P0.05),实时荧光PCR定性法与显色培养法比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论直接真菌涂片检测虽然操作简单、快速,但漏检率高;念珠菌显色培养检出率高,但耗时长;实时荧光PCR定性法简单快速,特异性强,灵敏度高,检出率高,是女性生殖道念珠菌病诊断值得推广应用的首选方法。     

白念珠菌环介导等温扩增法的建立及其应用价值

目的建立一种简单快速检测白念珠菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并评价其临床价值。方法采用Primer Explorer 5.0软件,针对白念珠菌RPS0基因设计4条引物,对LAMP反应体系和反应条件进行优化,评价检测特异性和检测限;收集123例外阴阴道念珠菌病(VVC)组和42例正常对照组的女性阴道拭子,平行进行真菌培养、LAMP检测、PCR检测、1.79 mol/L KOH镜检,真菌培养作为VVC诊断参考方法;组间检测方法阳性率的比较采用Pearsonχ~2检验,LAMP、PCR、镜检与培养法的一致性采用Kappa检验,P0.05为差异有统计学意义;应用ROC曲线分析法评价LAMP、PCR在VVC诊断中的价值。结果 LAMP技术的最适反应温度为61℃,且特异性高,与其他常见菌株无交叉反应,检测限为103copies/μL; VVC组和正常对照组的LAMP、PCR、镜检阳性率差异有统计学意义(LAMP,χ~2=68.576; PCR,χ~2=64.918;镜检,χ~2=50.076,P0.01)。LAMP和PCR与培养法有较好的一致性(κ=0.744,0.720),镜检与培养法一致性较差(κ=0.533); LAMP对VVC的诊断敏感性为87.62%,特异性为88.33%,阳性预测值为92.93%,阴性预测值为80.30%。LAMP、PCR诊断VVC的ROC曲线下面积分别为0.873、0.888,两者的诊断效能差异无统计学意义(Z=0.849,P=0.395 6),但LAMP检测时间短于1 h。结论建立的检测白念珠菌的LAMP技术快速可靠、敏感性好、特异性高,综合筛查性能优于实验室常规方法,可用于白念珠菌感染的辅助诊断和疗效监控。