正常人外周血中CD8+CD25+T细胞亚群的数量及其细胞因子表达的初步研究

目的:研究正常人外周血CD8 CD25 T细胞亚群的数量及其表达IFN-γ、IL-10和TGF-β的细胞数量情况,以期得到一组该亚群细胞正常数值范围,为研究CD8 CD25 T细胞亚群在自身免疫性疾病、过敏性疾病和器官移植中的变化及其临床意义提供参考.方法:分离正常人外周血单个核细胞,利用三色流式细胞术分别检测CD3 T细胞中CD8 CD25 、CD8 CD25-、CD8-CD25 和CD8-CD25-亚群的比例,并计算其细胞数量;并对经过或未经过离子霉素(ionomycin)、佛波醇乙酯(PMA)联合刺激5 h的CD8 CD25 T细胞检测表达IFN-γ、IL-1O及TGF-β的细胞数量情况.结果:正常人外周血CD3 T细胞中CD8 CD25 细胞亚群约为2.52%.数量达37.09×106/L,经离子霉素、佛波醇乙酯联合刺激培养5 h后其比例、数量均略有降低;CD8 CD25 T细胞表面TGF-β阳性率达到93.8%,刺激对其表达无明显影响;但刺激后IFN-γ T细胞明显增多,而IL-10 的T细胞未见明显升高.结论:正常人外周血CD3 T细胞中存在少量的CD8 CD25 细胞亚群,该细胞表面稳定地高表达TGF-β,可对刺激呈现IFN-γ反应,但不对刺激产生增殖反应.     

原发性干燥综合征患者T细胞亚群及CD4~+CD25~+ T细胞检测的意义

目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在原发性干燥综合征(PSS)患者中的检测意义。方法用流式细胞仪检测18例PSS患者以及20例健康体检者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节T细胞水平。结果 PSS患者与正常对照组比较,CD3+CD4+细胞亚群的百分率明显升高(P<0.05);CD4+/CD8+与对照组比较有明显升高(P<0.05);CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分率明显降低(P<0.01),其它T细胞亚群无明显变化。结论 PSS患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的。T细胞亚群的比例异常与疾病的病程和临床表现相关联。CD3+CD4-CD8-和CD4+CD25+调节性T细胞水平降低导致机体自身免疫反应抑制功能减弱,免疫耐受状态被打破,可能是引发PSS发生发展的重要因素。     

CD4+CD25+Foxp3+:与SLE疾病相关的Treg标志

目的:研究与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)病理活动相关的调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)标志?方法:分离正常人和SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs),用三色流式细胞术(flowcytometer,FCM)检测CD4和CD8 T细胞亚群的CD25?Foxp3表达,分析T细胞Foxp3+/CD4+T?CD25+Foxp3+/CD4+?Foxp3+/CD4+CD25+?Foxp3+/CD8+?CD25+Foxp3+/CD8+?及Foxp3+/CD8+CD25+的比值变化,及其与SLE疾病活动指数(SLE disease activity index,SLEDAI)?抗-dsDNA阳性?补体C3/C4水平降低?血清IgG水平增高?肾脏损害?关节病变?白细胞减少?疾病初/复发的关系?结果:①与正常人相比,SLE患者T细胞CD4+CD25+/CD4+比值无明显改变,但中/重度SLE患者外周血T细胞Foxp3+/CD4+?CD25+Foxp3+/CD4+?及Foxp3+/CD4+CD25+比值均显著下降,并与SLEDAI呈负相关;其中CD25+Foxp3+/CD4+比值还与SLE的抗-dsDNA阳性?补体C3/C4水平降低?血清IgG水平增高相关,在疾病初发?肾脏损害?白细胞减少患者该比值下降更为显著;②SLE患者CD8+ T细胞中CD25+?Foxp3+亚群比例未见明显减少,仅中/重度活动性SLE患者Foxp3+/CD8+CD25+比例减少,但与SLEDAI无相关性?结论:以CD25+Foxp3+作为Treg标志,可以明显反映出SLE患者CD4+ Treg存在数量缺陷,并与疾病活动性?免疫功能紊乱和病理损害密切相关,故将CD4+CD25+Foxp3+作为标志进行Treg检测对辨明SLE患者免疫系统功能状态具有一定的临床参考价值?     

多发性骨髓瘤患者外周血CD4~+CD2~5+Treg细胞的表达和β_2微球蛋白水平分析

目的检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量、比例的变化和血清β2微球蛋白水平,探讨其细胞免疫功能状态及其关系。方法流式细胞术(FCM)检测31例MM患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T regs的比例、比浊法测定血清β2微球蛋白水平,并分析比较。结果初治、复发组CD4+T细胞比例较缓解期组下降,初治组及复发组CD8+T细胞比例较缓解期组升高,差异有统计学意义;初治组及复发组CD4+CD25+细胞比例均高于缓解组,差异有统计学意义;血清β2微球蛋白水平与CD4+CD25+水平有一定相关性。结论多发性骨髓瘤患者外周血CD4+T细胞比例降低,调节性T细胞比例增高,他们的比例与β2微球蛋白水平与疾病临床状态、病情进展相关,对指导治疗有一定的帮助。     

自身免疫性疾病患者外周血CD8~+调节性T细胞的表达及临床意义

目的研究自身免疫性疾病(AID)患者外周血CD8+调节性T细胞的表达及其临床意义。方法对53例系统性红斑狼疮(SLE)患者和55例类风湿性关节炎(RA)患者及38例健康者(对照组)外周血以双抗体标记流式细胞术测定CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞亚群比例及CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值,分析检测数据与疾病活动变化的关系。结果 SLE患者稳定期CD8+CD28-T细胞亚群比例较活动期及对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);活动期CD8+CD28+T细胞亚群比例较稳定期和对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28-/CD8+CD28+细胞间比值较稳定期和对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SLE活动性指数评分(SLEDAI)与CD8+CD28+T细胞亚群比例负相关(P=0.001,r=-0.56),与CD8+CD28-/CD8+CD28+比值正相关(P=0.002,r=0.51)。RA患者稳定期CD8+CD28-T细胞较活动期和对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05),CD8+CD28+T细胞及CD8+CD28-/CD8+CD28+比值RA活动期和稳定期患者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AID患者存在CD8+T细胞亚群比例的改变,反映机体细胞免疫功能紊乱。     

胶质瘤切除术对神经胶质瘤患者外周血淋巴细胞亚群及CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的检测神经胶质瘤患者胶质瘤切除前后外周血淋巴细胞亚群及CD4+CD25+调节性T细胞,以期提供胶质瘤治疗的新思路。方法采用流式细胞术检测神经胶质瘤患者胶质瘤切除前后及正常人外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4/CD8、CD3-CD16+/CD56+、CD3+HLA-DR+和CD4+CD25+调节性T细胞水平。结果与对照组比较,胶质瘤组CD4+/CD8+比值、CD3+CD4+、CD3-CD19+、CD3-CD16+/CD56+和CD3+HLA-DR+细胞百分比明显降低(P<0.05),CD3+细胞及百分比降低,但无显著性差异(P>0.05),CD3+CD8+细胞有所升高,但无显著性差异(P>0.05),CD4+CD25+明显升高(P<0.05);与胶质瘤切除术前组比较,术后组CD4+/CD8+比值、CD3+CD4+、CD3-CD16+/CD56+、CD3+HLA-DR+细胞百分比明显升高(P<0.05),CD3+细胞及CD3-CD19+百分比升高,但无显著性差异(P>0.05),CD3+CD8+、CD4+CD25+明显降低(P<0.05)。结论手术切除胶质瘤能明显降低CD4+CD25+调节性T细胞水平,减少对其他淋巴细胞的抑制作用,如同时辅以CD25抗体来清除掉一部分调节细胞也许会更进一步减少其对机体免疫功能的抑制,这或许为胶质瘤的治疗提供了一个新途径。     

CD8+调节性T细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中分布的初步研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD8 CD28-调节性T细胞和CD8 CD28 效应性T细胞的比例,以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间的比值及其临床意义。方法:对37例SLE患者及15例健康对照新鲜外周全血以双抗体标记流式细胞术测定CD8 CD28-、CD8 CD28 T细胞亚群比例,计算CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值,并分析以上数据与SLE活动度、SLE活动性评分(SLEDAI)、免疫球蛋白增高或补体下降或肾损害的关系,观察激素治疗对以上数据变化的影响。结果:(1)稳定期SLE患者外周血CD8 CD28-T细胞群比例较正常对照及活动性SLE显著升高,而高活动性SLE患者CD8 CD28 T细胞群比例显著降低,同时CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(2)SLEDAI与CD8 CD28 T细胞亚群比例存在负相关(P<0.05),与CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值存在正相关(P<0.05);(3)SLE患者中补体水平降低者较补体水平正常者、有肾损害者较未发生肾损害者CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(4)对10例活动性SLE患者进行追踪,经激素治疗达到稳定期后,其CD8 T细胞、CD8 CD28-T细胞比例及CD8 CD28 T细胞比例均显著增高。结论:SLE患者体内免疫系统紊乱可表现在CD8 T细胞亚群比例改变上,其中CD8 CD28 T细胞群比例以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值改变可能反映了细胞免疫功能的紊乱,而CD8 CD28-调节性T细胞比例增高与病情活动的控制有关;CD8 CD28-/CD8 CD28 比值与病情活动性和补体异常及肾损害相关,可以作为病情监测的指标。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞与自身免疫性疾病

CD4+CD2+5调节性T细胞是一群具有免疫调节或免疫抑制功能的细胞。越来越多的实验证明,CD4+CD25+调节性T细胞在维持外周免疫耐受中起重要作用,这种T细胞的数量减少或功能缺失可导致自身免疫性疾病的发生。本文就CD4+CD25+调节性T细胞及其在自身免疫性疾病中作用的研究进展进行综述。     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义的研究#

目的：研究系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。 方法：分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞（PBMCs）,以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术（FCM）检测CD4+和CD8+T细胞中CTLA-4+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数（SLE Disease Activity Index,SLEDAI）和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。 结果：SLE患者刺激前的CD4+和CD8+T细胞中、主要是CD25+T细胞中CTLA-4+细胞的比例较正常人显著增高,且与SLEDAI呈正相关;而其CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4+CD25+T细胞、CD8+CD25+T细胞或CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论：SLE患者新鲜分离的T细胞（CD4+及CD8+）中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化的能力减弱有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义

目的：研究系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。方法：分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48 h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术（FCM）检测CD4+和CD8+T细胞中CTLA-4+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数（SLEDAI）和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。结果：SLE患者刺激前的CD4+和CD8+T细胞且主要是CD25+T细胞中CTLA-4+细胞的比例较正常人显著增高,与SLEDAI呈正相关;而其CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4+CD25+T细胞、CD8+CD25+T细胞或CD8+CD28-T细胞中CTLA-4+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8+CD28-T细胞中CTLA-4+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论：SLE患者新鲜分离的T细胞（CD4+及CD8+）中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化能力减弱有关。     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+T细胞亚群的初步研究

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的比率改变.方法采用微量全血三色标记法,以流式细胞技术检测SLE患者外周血CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群,分析阳性细胞百分率和平均荧光强度(Mean fluorescence intensity,MFI).结果SLE患者外周血中CD4+T细胞百分率,活动期(29.29%±8.86)%和非活动期(29.55±8.96)%均低于正常对照(37.41±3.29)%(P均＜0.05);CD4+CD25+T细胞百分率SLE活动期(10.30±5.60)%显著高于正常对照(5.39±1.43)%(P＜0.05),非活动性SLE病人组(5.63±2.49)%和正常组差异无显著性(P＞0.05);CD4+CD25+CD45RO+T细胞百分率SLE活动期(3.96±3.51)%显著高于正常对照(1.39±0.63)%,非活动期(0.75±0.66)%显著低于正常对照(P均＜0.05).平均荧光强度分析表明SLE患者组和正常组的CD25和CD45RO抗原密度差异并无显著性(P均＞0.05).结论SLE患者外周血中存在CD4+CD25+及CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群比率异常增高,且与病情活动性相关.     

SLE患者T细胞亚群及CD4+CD25+T细胞的检测及意义

目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4 CD25 T细胞在SLE病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了68例SLE患者(其中活动期病人38例,稳定期病人30例)以及30例健康体检者外周血CD3 CD4 、CD3 CD8 、CD4 CD45RA 、CD8 CD28 、CD8 CD28-T细胞亚群以及CD4 CD25 T细胞水平。结果与正常对照组相比,活动期SLE病人CD3 CD4 、CD4 CD45RA 细胞亚群的百分率明显降低(P=0.000,P=0.001),CD3 CD8 、CD8 CD28-细胞亚群的百分率明显升高(P=0.000,P=0.000)。稳定期患者CD8 CD28 细胞水平明显高于活动期和对照组(P=0.011,P=0.435),CD3 CD4 、CD4 CD45RA 水平高于活动期,但无显著性差异(P=0.067,P=0.081),CD8 CD28-T细胞亚群无明显变化(P=0.997)。活动期病人CD4 CD25 T细胞百分率明显低于正常对照组及稳定期病人(P=0.000,P=0.000),稳定期病人与对照组之间无显著性差异(P=0.572)。结论SLE患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的。病人外周血CD8 CD28-T细胞亚群的比例升高与疾病的病程和临床表现相关联,它的升高在疾病的稳定中起重要作用。CD4 CD25 T细胞水平降低可能是导致机体抑制自身免疫反应的功能减弱并引发SLE发生发展的重要因素。     

放射损伤对恶性肿瘤外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的:观察放射治疗过程中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的变化.并探讨其临床意义.方法:用流式细胞仪检测放射治疗中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的水平,并进行分层分析.结果:放疗剂量为30GY、50GY时,恶性肿瘤患者CD3 、CD4 、CD8 T细胞比例及CD4 /CD8 比值与放疗前相比,差异无统计学意义,而早期(Ⅰ、Ⅱ)、进展期(Ⅲ、Ⅳ)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的水平与放疗前相比,差异有统计学意义(F=4.66,P=0.041),且与剂量呈正相关.结论:放疗可能对恶性肿瘤患者的免疫功能有一定的损害,尤其是患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平升高,且它与剂量呈正相关;放疗后外周血CD4 CD25 调节性T细胞比例比CD4 /CD8 比值更能敏感反应免疫功能状态,可能成为恶性肿瘤患者的更敏感的免疫监测指标.     

ART治疗对HIV感染者CD4+FoxP3+T细胞水平的影响

目的:探索抗逆转录病毒疗法(ART)治疗在HIV-1疾病进程中对调节性T细胞(Treg细胞)的影响,并探讨Treg细胞频率在HIV-1疾病进程中的作用.方法:抽取114例(男96例、女18例)HIV-1阳性患者及17例健康对照者外周血,应用流式细胞术检测Treg细胞,并分析其表达水平(频率和绝对数)在 HIV-1疾病进程中的变化趋势及其与CD4+细胞绝对数之间的相关性.结果:随着HIV-1感染者病情进展,患者外周血中Treg细胞绝对数趋向下降并且与CD4+T细胞绝对数呈正相关,而Treg细胞频率趋向升高并且与CD4+T细胞绝对数呈负相关.Treg细胞频率及绝对数在ART治疗无症状HIV-1阳性感染者中显著降低,而在AIDS患者中却显著升高.结论:Treg细胞参与艾滋病免疫发病过程,并且在HIV-1感染的不同阶段,ART治疗对Treg细胞水平具有一定的影响,提示通过控制Treg细胞的水平可能有助于HIV-1感染疾病的临床控制.     

CD4~+ D25~+调节性T细胞在晚期食管癌中的表达及临床意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)在食管癌中的表达及其临床意义。方法:应用流式细胞术分析60例食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,与20例健康对照组比较。结果:食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞数量增加(15.9±4.1)%,表达高于正常人(5.91±3.7)%(P<0.001)。食管癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关(P>0.05),但与淋巴结转移和组织学分化程度有关(P<0.01)。结论:Treg细胞在食管癌患者中比率明显升高,是患者免疫功能紊乱的一个证据。     

白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测及意义

目的检测白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平变化及免疫调节剂对其表达的影响,进一步明确其在白癜风免疫治疗中的意义。方法白癜风患者36例,进展期24例,稳定期12例。采用流式细胞术检测不同病期白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平,并与20例正常人进行对照。对进展期白癜风患者给予免疫调节剂等进行综合治疗。结果进展期患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量低于正常对照组(P<0.05);稳定期患者与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);经卡介菌多糖核酸治疗后,进展期患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量高于治疗前(P<0.05),略低于正常对照组(P>0.05),稳定期患者与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白癜风患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的数量存在异常,使体内免疫功能处于失衡状态,卡介菌多糖核酸可能通过调节CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达水平,调节白癜风患者的细胞免疫功能,从而发挥治疗作用。