胃炎消对胃癌癌前病变P16mRNA水平表达的影响

目的:观察胃癌癌前病变(PLGC)组织中P16抑癌基因mRNA水平的表达及胃炎消的调控作用.方法:采用原位分子杂交标记技术检测胃炎消治疗组及维酶素对照组共35例胃癌癌前病变患者治疗前后p16mRNA转录水平.结果:抑癌基因P16mRNA表达阳性率均随着胃粘膜病变的进展逐渐递减.胃炎消能使抑癌基因P16mRNA的表达上调.结论:胃炎消对PLGC有良好的治疗作用,该作用可能与本方上调PLGC组织中与细胞周期调控因子相关抑癌基因P16mRNA的表达有关.     

胃癌癌前病变p16抑癌基因表达及胃炎消的调控作用

目的:观察胃癌癌前病变(PLGC)组织中p16抑癌基mRNA水平的表达及胃炎消的调控作用.方法:胃镜病理证实为PLGC病例共40例,分为胃炎消治疗组25例,维酶素对照组15例,治疗前、后胃黏膜固定部位活检标本采用原位分子杂交标记的方法,做p16 mRNA转录水平的检测.结果:胃炎消组症状总有效率84.00%,病理疗效以中度异型增生为好,作用优于对照药维酶素;在PLGC 组织中,p16抑癌基因在mRNA水平有表达的缺失,且其随病变的进展而表达逐渐下降;胃炎消能使p16抑癌基因mRNA的表达上调.结论:胃炎消对PLGC有良好的治疗作用,该作用可能与本方上调PLGC组织中与细胞周期调控因子相关p16抑癌基因mRNA的表达有关.     

化痰消瘀方通过调节自噬对大鼠癌前病的改善作用

目的探究化痰消瘀方通过调节自噬对大鼠癌前病的改善作用。方法构建大鼠PLGC模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、胃复春组(0.5 g/kg)及化痰消瘀方低、高剂量组(5、10 g/kg),灌胃给药4个月。记录大鼠在治疗过程的生存状况、体质量;HE染色观察胃窦部组织病理状态,免疫组化、Western blot及RT-PCR检测LC3、Raptor、Beclin-1蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,化痰消瘀方提高PLGC大鼠体质量(P0.05),抑制PLGC大鼠胃组织LC3、Raptor、Beclin-1蛋白及mRNA表达(P0.05),以上三者蛋白均在细胞核或细胞中表达,化痰消瘀方能改善PLGC大鼠胃窦部组织病理状态。结论化痰消瘀方能改善PLGC大鼠胃窦部组织病理状态,其可能机理在于降低胃组织LC3、Raptor、Beclin-1自噬相关蛋白及mRNA表达。     

消癌解毒方对胆囊癌患者细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨消癌解毒方治疗胆囊癌与Ki67基因、Fas基因表达的关系。方法:将46例原发性胆囊癌患者随机分为对照组23例和治疗组23例。治疗组口服消癌解毒方和化疗药物,2次/d;对照组入院后仅使用化疗药物,剂量与治疗组一致。2组患者均连续治疗6周,治疗后进行手术,术中均取瘤体。用免疫组化SP法检测肿瘤组织中Ki67、Fas基因的表达水平。结果:治疗组胆囊癌患者组织Fas阳性率明显高于对照组(P0.05);治疗组Ki67的阳性表达率明显低于对照组(P0.05)。结论:消癌解毒方可抑制胆囊癌细胞的增殖,促进癌细胞凋亡,这可能是消癌解毒方治疗原发性胆囊癌的作用机制。     

扶正消癌方对乳腺癌患者癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的:探讨扶正消癌方对乳腺癌患者癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响,并研究凋亡分子机制。方法:66例乳腺癌患者随机分为对照组30例和治疗组36例,对照组患者接受化疗药物表阿霉素和环磷酰胺治疗,治疗组患者在对照组基础上加用扶正消癌方,日1剂,连服9周;2组患者治疗结束后接受手术,术中留取瘤体组织。用免疫组化法检测乳腺癌组织中Ki67、MMP2、Fas基因的表达水平,Western blotting分析凋亡分子Bax、Bcl-2的蛋白表达情况。结果:治疗组乳腺癌组织Fas阳性率明显高于对照组(P0.05);治疗组乳腺癌组织Ki67、MMP2的阳性表达率明显低于对照组;Western blotting结果显示治疗组乳腺癌细胞Bax蛋白表达显著多于对照组,而Bcl-2蛋白表达明显少于对照组,差异比较均有统计学意义(P0.05)。结论:扶正消癌方可抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭转移,促进癌细胞凋亡,这可能是扶正消癌方治疗乳腺癌的作用机制。     

健脾消癌方抑制结肠癌增殖的作用机制

目的:观察健脾消癌方对结肠癌HCT116细胞中微小RNA-21(microRNA-21,miR-21),第10号染色体丢失的磷酸酶基因(phasphatase and tensin homo-log deleted in chromosome 10,PTEN)表达的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:10%,15%,20%健脾消癌方含药血清处理HCT116细胞后,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测miR-21,PTEN mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,健脾消癌方低剂量组miR-21 mRNA相对表达量降低,PTEN mRNA相对表达量升高,但差异无统计学意义;健脾消癌方中剂量组miR-21mRNA相对表达明显降低,PTEN mRNA相对表达明显升高(P0.05);健脾消癌方高剂量组miR-21 mRNA相对表达量显著降低,PTEN mRNA相对表达量显著升高(P0.01);与健脾消癌方中、低剂量组比较,健脾消癌方高剂量组miR-21 mRNA相对表达量明显降低,PTEN mRNA相对表达量明显升高(P0.05)。与空白组比较,健脾消癌方中、低剂量组PTEN蛋白相对表达量升高,差异无统计学意义;与空白组比较,健脾消癌方高剂量组PTEN蛋白相对表达量明显上升(P0.05);与健脾消癌方中、低剂量组比较,健脾消癌方高剂量组PTEN蛋白相对表达量明显升高(P0.05)。结论:健脾消癌方可能通过降低miR-21的表达,上调miR-21靶基因PTEN蛋白表达抑制结肠癌的增殖。     

消萎汤辨证加味对胃癌前病变疗效及COX-2表达的影响

目的:研究分析消萎汤辨证加味治疗胃癌前病变(precancerous lesions of gastriccancer,PLGC)的临床效果以及对环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响作用。方法:研究纳入对象为医院从2014年2月—2016年3月收治的74例PLGC患者,遵照随机分配原则进行分组,从1~74给患者排序,单数纳入对照组,双数纳入治疗组,对照组患者给予常规西药治疗,治疗组患者应用消萎汤辨证加味治疗,对比分析两组患者的临床治疗效果以及COX-2的表达变化。结果:治疗组临床疗效优于对照组,组间治疗总有效率差异明显(P0.05);胃镜及病理效果显示,治疗组患者病理疗效远高于对照组,组间评分差异有统计学意义(P0.05);治疗前两组患者COX-2阳性表达率无明显差异(P0.05),治疗后对照组显著高于治疗组(P0.05);两种治疗方法均安全有效,治疗后血常规、尿常规、便常规、肝肾功能以及心电图显示正常。结论:消萎汤治疗PLGC的效果显著,临床治疗效率大大提高,通过对COX-2高表达的抑制达到改善患者病变的目的,且治疗方法安全稳定,可将其作为临床PLGC的首选方案。     

加味香砂六君子汤对大鼠胃癌前病变胃黏膜Bax、Bcl-2、P53mRNA表达的影响

目的:加味香砂六君子汤在胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜的Bax、Bcl-2、P53mRNA表达方面的影响及作用机理研究。方法:120只健康Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白对照组和模型组、维霉素组、加味香砂六君子汤高、中及低剂量组,造模后给予药物干预治疗,通过免疫组化法,检测Bcl-2、Bax及P53mRNA表达水平。结果:加味香砂六君子汤各剂量组Bcl-2蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组显著降低(P0.05),各剂量组Bax蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组明显增高(P0.05)。各干预组p53mRNA蛋白表达不同程度降低,且明显低于模型组(P0.05);其中加味香砂六君子汤中剂量组的作用效果最显著,与其他各组相比,差异显著(P0.05)。结论:加味香砂六君子汤可调控胃癌前期病变大鼠胃黏膜Bcl-2、Bax表达水平,降低p53mRNA的表达,具有治疗PLGC的作用。     

丹参注射液对氧诱导幼鼠视网膜增生变性的保护作用

目的探讨丹参注射液对氧诱导幼鼠视网膜凋亡相关基因的表达及其外周血血管内皮生长因子(VEGF)的影响,以明确其抑制视网膜增生变性的作用机制。方法将100只出生7 d的SD幼鼠随机分为对照组、模型组及丹参注射液4,2,1 g/kg组,每组20只。对照组幼鼠生活在正常氧环境下,其余4组幼鼠均制成视网膜病变模型。模型组给予腹腔注射生理盐水,丹参注射液4,2,1 g/kg组分别给予腹腔注射相应剂量的丹参注射液,连续注射5 d后处死幼鼠,经右侧眼球取静脉血检测VEGF浓度,取出眼球用RT-PCR法检测视网膜中bax与bcl-2 mRNA表达水平。结果模型组幼鼠视网膜组织中bax mRNA表达水平明显低于对照组(P0.05),而血清VEGF浓度与视网膜组织中bcl-2 mRNA表达水平均明显高于对照组(P均0.05)。丹参注射液2 g/kg组血清VEGF浓度及视网膜组织中bcl-2 mRNA表达水平均明显低于丹参注射液1 g/kg组(P均0.05),高于丹参注射液4 g/kg组(P均0.05);视网膜组织中bax mRNA表达水平明显高于丹参注射液1 g/kg组(P0.05),低于丹参注射液4 g/kg组(P0.05)。bax mRNA表达水平与bcl-2 mRNA表达水平间存在显著负相关关系(r=-0.653,P0.05)。结论丹参注射液能抑制氧诱导的幼鼠视网膜细胞增生。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因Igfbp-3mRNA表达的影响

目的:比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Evegreen实时荧光RT-PCR技术定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-3(Igfbp-3mRNA)在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法:(1)差异表达基因的筛选;(2)荧光定量RT-PCR的检测。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的Igfbp3mRNA进行报道。糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因Igfbp3mRNA表达下调,中药复方肾消康治疗组心肌组织基因Ig-fbp3mRNA表达上调。结论:Igfbp-3mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

胃康舒宁对胃癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡及其相关调控基因表达的影响

目的:探讨胃康舒宁对大鼠胃癌前病变(PLGC)的治疗机制,为临床应用提供依据。方法:将60只Wistar大鼠随机分为4组(正常组、模型组、维酶素组和胃康舒宁组),采用饮用N-甲基-N-亚硝基-N-硝基胍(MNNG)建立大鼠胃癌前病变模型,用维酶素和胃康舒宁治疗12周后,观察各组实验大鼠胃黏膜细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax蛋白表达情况及Bcl-2/Bax比值的变化。结果:与模型组大鼠相比,用药组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数和Bax蛋白表达明显提高,而Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值显著降低,胃康舒宁组明显优于维酶素组。结论:胃康舒宁通过调节病变细胞Bcl-2和Bax蛋白的异常表达,改变Bcl-2/Bax比值,使细胞凋亡趋于正常,而对大鼠胃癌前病变具有良好的治疗和逆转作用,其疗效优于维酶素。     

CDX2基因在胃癌癌前病变不同中医证型中的表达

目的通过检测胃癌癌前病变（PLGC）不同中医证型患者胃黏膜组织CDX2基因的表达,探讨不同中医证型与CDX2基因表达之间的相关性及CDX2表达与不同病理类型之间的关系。方法将24例健康人及120例PLGC患者分为健康对照组、脾虚气滞证组、阴虚有热证组、胃络瘀阻证组,每例取新鲜胃黏膜6块,包括胃体、胃角和胃窦各2块,经免疫组织化学染色观察CDX2基因的表达。结果 CDX2基因阳性表达在脾虚气滞证中为16.67%（6/36）,阴虚有热证中为52.17%（24/46）,胃络瘀阻证中为63.16%（24/38）,健康对照组无表达;其在Ⅰ型肠化生表达为33.33%（18/54）,Ⅱ型肠化生表达为25.93%（14/54）,Ⅲ型肠化生表达为27.78%（15/54）,异型增生表达为12.96%（7/54）。结论 CDX2基因的表达与病理类型有关,在不同中医证型的表达有统计学意义,可为PLGC的中医证型客观化提供依据。     

中药治疗胃癌癌前病变的相关药理作用机理

中药通过增强胃黏膜屏障、调节胃肠运动、阻止胆汁反流、抗幽门螺旋杆菌感染、调节免疫功能、调节细胞周期调控因子的表达、抑制胃癌癌前病变组织细胞过度增殖、阻断胃癌前期病变近一步向胃癌转化、上调相关抑癌基因的表达、下调相关癌基因的表达、降低ICAM-1蛋白表达等多种作用机制，能够显著改善胃癌癌前病变患者的征状，逆转其病理改变。积极治疗胃癌癌前病变，阻断其向胃癌发展，对于降低胃癌发病率其有重要的意义。     

茵陈五苓散抗大鼠动脉粥样硬化作用机理探讨

目的探讨茵陈五苓散对动脉粥样硬化大鼠的作用机理。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、茵陈五苓散组、绞股蓝组。采用高脂饲料喂饲法复制大鼠动脉粥样硬化模型,治疗1个月后分别检测血脂、血液流变学、主动脉组织学及超微结构变化、血管平滑肌细胞(VSMC)bcl-2 mRNA的表达。结果茵陈五苓散降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇,升高高密度脂蛋白胆固醇,降低血液黏度、红细胞压积、血小板黏附率,维持主动脉组织结构,下调基因bcl-2 mRNA的表达均优于绞股蓝。结论茵陈五苓散具有良好的抗动脉粥样硬化作用,其下调相关基因bcl-2 mRNA的表达可能是其作用机理。     

胃灵颗粒对胃癌前病变患者血清生长激素影响的研究

目的:观察胃灵颗粒治疗胃癌前病变(PLGC)的临床疗效及其对胃癌前病变患者血清生长激素(GH)水平的影响,探讨胃灵颗粒对胃癌前病变的可能作用机理。方法:将60例胃癌前病变患者随机分为治疗组与对照组各30例,治疗组予胃灵颗粒,对照组予胃复春片治疗,对两组患者治疗前后的临床症状、胃镜病理和血清GH水平进行比较、分析及评价。结果:胃灵颗粒能显著改善胃癌前病变患者的临床症状,治疗3月后临床症状、综合疗效的总有效率分别为96.67%、90.00%,与胃复春组比较有统计学意义(P<0.05)。治疗前后血清GH测定结果显示,胃灵颗粒使患者血清GH水平显著升高(P<0.01),与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。临床试验中两组均未见不良反应。结论:胃灵颗粒治疗胃癌前病变疗效肯定,能显著改善胃癌前病变患者的临床症状,提高患者血清GH水平。     

龟鹿二仙胶抵抗化疗小鼠脾T淋巴细胞凋亡的实验研究

目的 探讨龟鹿二仙胶对化疗小鼠的抗凋亡作用及作用机理。方法 将荷瘤昆明种小鼠72只随机分为环磷酰胺（CTX）加龟鹿二仙胶高、中、低3个剂量组,CTX组,单纯中药组,生理盐水组6组。给药9天后处死小鼠取脾组织,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡;RT PCR法检测bcl 2、Caspase 3 mRNA的表达。结果 CTX组荧光素标记的膜联蛋白阳性（FITC+Annexin V）/碘化丙啶(PI)染色阴性比例（FITC+/ PI－）T细胞较生理盐水组增高,差异有统计学意义（P<0.05）;CTX加用龟鹿二仙胶的3个剂量组FITC+/ PI－T细胞比例较CTX组明显降低（P<0.05）。CTX组bcl 2 mRNA表达量较生理盐水组减少（P<0.05）;CTX加用龟鹿二仙胶的3个剂量组其表达量较CTX组明显升高（P<0.05）。Caspase-3 mRNA表达量CTX组升高（P<0.05）;CTX加用龟鹿二仙胶的3个剂量组表达量较CTX组明显减少。结论 龟鹿二仙胶能有效抑制化疗小鼠淋巴细胞凋亡。上调bcl-2 mRNA表达、下调Caspase-3mRNA表达可能是其作用机理之一。     

银杏叶提取物金纳多心停跳液对人心肌细胞bcl-2和bcl-xL基因表达的影响

目的探讨银杏叶提取物金纳多（简称金纳多）对体外循环人心肌细胞抗凋亡基因bcl-2和bcl—xL表达的影响。方法择期先天性心脏病患儿30例,随机均分为两组,治疗组在灌注St Thomas’停搏液（4℃）中加入金纳多（0．5mg／kg）,心脏完全停跳后开始心内手术;对照组单纯灌注StThomas’停搏液（4℃）。在手术结束开放升主动脉前取心肌组织,采用RT—PCR技术在凝胶电泳成像基础上半定量检测bcl-2和bcl—xL基因的表达水平。结果治疗组bcl-2和bcl—xL基因的表达显著高于对照组（P〈0．05）。结论银杏叶提取物金纳多可促进人心肌细胞抗凋亡基因bel-2和bel—xL的表达。     

绿原酸对阻塞性黄疸大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制

目的探讨绿原酸(CGA)对阻塞性黄疸大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制。方法将72只SD雄性大鼠随机分为对照组(SO组),胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS组),胆总管结扎+CGA组(BDL+CGA组)。分别于术后7、14和21天用RT-PCR法和Westernblot法检测bcl-2、Bax在mRNA水平和蛋白水平的表达。用RT-PCR法检测I、III型胶原mRNA的表达。结果与BDL+NS组比较,胆总管结扎7天、14天时,BDL+CGA组可以提高Bax/bcl-2的比值,减少I、III型胶原RNA的表达。结论 CGA在大鼠阻塞性黄疸早、中期有促进HSC凋亡作用,减轻了阻黄时肝的纤维化,减轻了阻黄时肝的损伤。     

基于蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白通路观察化浊解毒方对胃癌前病变大鼠肿瘤血管新生机制的影响

目的基于胃黏膜组织蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)通路观察化浊解毒方对胃癌前病变(PLGC)大鼠肿瘤血管新生机制的影响。方法将48只雄性SD大鼠按随机分组法分为正常组、模型组、维甲酸组、化浊解毒组,每组12只。采用胃癌前病变模型的建立法复制PLGC模型成功后,模型组、正常组给予0.9%氯化钠注射液10 mL/kg,维甲酸组予维甲酸药液40 mg/kg、化浊解毒组予化浊解毒方水煎液10 g/kg,均每日1次灌服,连续16周。采用免疫组织化学法,检测化浊解毒方对PLGC大鼠胃黏膜组织AKT、mTOR的影响。结果给药16周后,模型组AKT、mTOR表达高于正常组,比较差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,化浊解毒组、维甲酸组AKT、mTOR的表达均有不同程度下降,比较差异有统计学意义(P0.05);化浊解毒组与维甲酸组比较,AKT、mTOR表达明显降低,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论化浊解毒方可能是通过降低AKT、mTOR的表达,从而调控AKT/mTOR通路,达到抗肿瘤血管新生以逆转PLGC的治疗效果。