对甲型流感病毒的再认识

流感病毒的H抗原和N抗原容易发生变异,主要发生在甲型流感病毒。从北京、广州、天津急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物中分离到甲3型流感病毒。禽流感病毒有可能通过抗原变异或通过与人流感病毒发生基因重配,形成重配株,从而具备人传人的能力。当血凝素与抗原持续发生变异,逃避宿主免疫系统的识别与清除,从而能多次反复有效地突破人群的免疫屏障,引起新的流行。     

甲型H1N1流感病毒的分子特征

当前新型甲型H1N1流感病毒的暴发,引起全球的关注。本文对甲型H1N1流感病毒的分类地位、结构特征、基因复制、蛋白功能进行介绍,说明新型甲型H1N1流感病毒是甲型流感病毒通过抗原漂移和抗原转换所产生的,对奥塞米韦(达菲)敏感,但对金刚烷胺有抗药性。     

单纯疱疹病毒2型结构的生物学功能分析

单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus 2,HSV-2)是引起全球生殖器溃疡疾病的主要病原体之一.HSV-2病毒基因组庞大、结构复杂、编码蛋白种类繁多,这些蛋白分子不仅在机体免疫系统中作为病毒抗原参与宿主天然和适应性免疫过程,也能够作为结构分子和功能分子参与病毒的复制和宿主细胞的病理性反应.因此对该...     

基于病毒宿主相互作用的抗流感病毒宿主靶标的研究进展

流感病毒是严重危害人类健康与生命的主要病毒之一。流感病毒感染致病涉及到病毒与机体二者之间的相互作用,其复制和致病都需要宿主细胞因素的参与。病毒与宿主相互作用研究可为病毒性疾病的预防和治疗提供理论依据,有助于发现来源于宿主系统的抗流感病毒药物靶标。基于病毒与宿主相互作用,本文就流感病毒感染过程各环节中宿主细胞潜在药物靶标的研究进展做一综述。     

RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP)与非编码RNA(ncRNA)调控的研究进展

 RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRP)是一类以单链RNA为模板合成互补RNA链的聚合酶。根据其来源可分为病毒RdRP和细胞RdRP,病毒RdRP对病毒基因组复制及病毒引起的宿主免疫反应有重要作用,宿主细胞RdRP主要参与RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象。越来越多研究证明RdRP的功能与非编码RNA (non-coding RNA,ncRNA)密不可分,本文对病毒RdRP、细胞RdRP与ncRNA调控之间的关系作了较详细的阐述,同时对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)诱发的肝癌机制提出新的观点。     

人呼吸道合胞病毒非结构蛋白研究进展

病毒的非结构蛋白是一类由病毒基因组编码、存在于病毒培养液上清但不存在于病毒颗粒中的蛋白。有的病毒的非结构蛋白可直接参与病毒基因组的复制和表达调控,也有的可通过与宿主细胞组分相互作用,间接协助病毒复制和感染。人呼吸道合胞病毒（human respiratory syncytial virus,hRSV）是世界各地儿童严重呼吸道感染中最重要的病原,且能重复感染患者。hRSV是单股负链病毒目副黏液病毒科肺病毒属的成员之一,包括A和B两个抗原亚型。其基因变异快,目前A亚型含有11个基因型,B亚型含有22个基因型[1]。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在乙型肝炎病毒的转录与复制中的作用研究现状

<正>乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）属嗜肝DNA病毒,通过逆转录机制复制。HBV基因组转录生成3. 5kb HBV m RNA（前基因组RNA）是病毒复制过程中最关键的步骤[1]。多种细胞转录因子通过激活HBV核心启动子,促进病毒前基因组RNA的转录生成和病毒的逆转录复制[2-3]。在这些细胞转录因子中,肝富集转录因子最受关注,是调节前基因组RNA转录的<正>乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）属嗜肝DNA病毒,通过逆转录机制复制。HBV基因组转录生成3. 5kb HBV m RNA（前基因组RNA）是病毒复制过程中最关键的步骤[1]。多种细胞转录因子通过激活HBV核心启动子,促进病毒前基因组RNA的转录生成和病毒的逆转录复制[2-3]。在这些细胞转录因子中,肝富集转录因子最受关注,是调节前基因组RNA转录的     

HCV的新型体外细胞模型:复制子系统

自1989年丙型肝炎病毒(HCV)被分子克隆后,其流行病学、基因组学的相关研究取得了一定的进展,然而由于缺乏有效的体外细胞复制模型,HCV的研究长期以来受到阻碍. 1999年Lohmann等在Science上首先报道了选择性双顺反子亚基因组HCV RNA复制子系统,其被公认为是HCV RNA体外复制模型研究获得突破进展的里程碑. 复制子在人肝癌细胞株Huh-7细胞株中能高水平的自主复制. 研究发现复制子在细胞中复制对宿主细胞生长和代谢无明显影响,高水平复制与病毒基因组的适应性突变和宿主细胞的容受性有关. 这些研究结果为选择性HCV全序列基因组复制子的研究奠定了基础. 复制子系统的建立对HCV致病机制、治疗药物筛选及疫苗方面的研究具有重要的意义.     

流感病毒抗原快速检测与real-time RT PCR的比较

目的介绍一种可同时检测甲型、乙型流感病毒的快速方法,便于及早确诊流感病原体。方法采用快速抗原法对2014年1月—2015年12月收集的632份流感样患者标本进行甲型、乙型流感病毒抗原检测,并对其中102份进行real-time RT PCR检测。结果快速抗原法检测到样本中甲型流感病毒阳性14例,乙型流感病毒阳性10例。real-time RT PCR法检测到甲型流感病毒阳性15例,乙型流感病毒阳性12例。快速抗原法针对甲型流感病毒诊断灵敏度93.3%,特异度100.0%;针对乙型流感病毒,诊断灵敏度83.3%,特异度100.0%,耗时15 min,明显少于real-time RTPCR法的3 h。结论采用快速抗原法可及早筛查甲型、乙型流感标本。     

乙型肝炎病毒e抗原的研究进展

乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)是乙型肝炎核心抗原的可溶性成分,为HBV复制和具有传染性的标志。HBeAg可与人白细胞抗原协同,并调节宿主的免疫应答,在HBV病毒的清除中发挥重要作用。同时HBeAg对HBV DNA的复制具有调节作用。在临床实践中,HBeAg的检测对指导乙型肝炎的诊断和治疗也具有十分重要的临床意义。HBeAg变异后出现的HBeAg阴性慢性乙型肝炎具有特殊的临床特征,使其越来越受到重视。     

数株我国主要流行的流感病毒血凝抑制试验抗原性变异的分析

本文报道用血凝抑制试验对部分世界范围内流行的流感病毒株进行了抗原变异性分析。1993～1994年的三价流感灭活疫苗A/Beijin/32/92(H3N2),A/Texas/36/91/(H1N1),B/Panama/45/90株与其他前流行株之间有明显抗原变异。1989年中国分离的三株甲3型之间也有抗原变异,提示在国内不同流行区可能应使用不同的三价疫苗。流感病毒的分离监测,国内应推广使用MDCK细胞系。实验结果对流感监测,疫苗应用有一定参考价值     

流感百年:20世纪流感大流行的回顾与启示

流感病毒(Influenza virus)是一股负单链分节段的RNA病毒,其表面抗原HA和NA易发生变异是导致其引起世界大流行的原因.20世纪曾暴发3次流感大流行,即1918年"西班牙流感"、1957年"亚洲流感"和1968年"香港流感",每一次流感大流行都给全球公共卫生、经济造成极大破坏.本文从流感的百年流行史及流感流行波与季节性、各年龄段的死亡率等流行病学特征进行深入探讨,为全面认识流感、正确面对流感大流行,并为流感大流行的科学防控提供借鉴.     

流感病毒RNA聚合酶的分离与纯化

目的：建立分离、纯化流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA 3P蛋白的有效方法,为进一步研究3P蛋白的结构和功能奠定基础。方法：用甘油、CsCll及CsTFA不同介质的密度梯度超速离心法进行分离,用SDS-PAGE电泳及Western blot法检测3P蛋白,用尿素变性PAGE检测vRNA。结果：用甘油密度梯度离心,可从病毒粒子中分离由NP、3P和RNA组成的RNP。将纯化的RNP用CsCl和甘油双组分不连续密度梯度离心,可形成NP和3P-RNA两部分,使NP与3P-RNA分离。进一步将3P-RNA在CsTFA-甘油双组分不连续密度梯度介质中进行超速离心,可有效地将3P与RNA分离,获得较纯的3P蛋白。3P位于离心管的上半部分,而RNA则位于离心管的近底端部可有效地将3P与PNA分离,获得较纯的3P蛋白。3P位于离心管的上半部分,而RNA则位于离心管的近底端部分。结论：用甘油、CsCl-甘油和CsTFA-甘油分步超离心法可有效地从流感病毒粒子中纯化出离纯度的流感病毒RNA聚合酶。     

RNA编辑酶ADAR1对EV71感染及变异的影响

 目的 研究RNA编辑酶腺苷酸脱氨酶 (adenosine deaminase acting on RNA,ADAR1)对新型肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染及变异的影响。方法  运用RNAi技术筛选ADAR1基因沉默稳定细胞株,通过MTT分析病毒感染后细胞活力变化、噬斑形成分析病毒滴度及细胞对病毒的敏感性,以及Western blot测定病毒蛋白表达水平等,分析ADAR1对EV71感染的影响。由于ADAR1介导的RNA编辑可使基因形成A-G或T-C突变,为确定ADAR1影响EV71感染是否与其编辑EV71基因组导致病毒变异有关,对EV71流行区EV71的突变特征进行分析;并利用EV71感染ADAR1基因沉默细胞,通过对病毒基因组测序分析,研究ADAR1是否直接编辑EV71基因组。结果   ADAR1基因沉默后,与对照细胞相比,病毒感染细胞的存活率下降更快,并形成更多、更大的噬斑。病毒感染细胞中的VP1蛋白和细胞培养基上清中的病毒滴度均明显增加。EV71突变特征分析表明,虽然A-G和T-C之间的变异是病毒突变的主要类型,但EV71感染实验初步证明,ADAR1并不直接编辑EV71病毒基因组。结论ADAR1可能具有抗EV71感染的作用,但ADAR1可能并不直接编辑EV71基因组。     

Suramin Inhibits the In Vitro Expression of Encephalitis B Virus Proteins NS3 and E

ThemortalityofepidemicencephalitisBvirusinfectionisveryhigh ,accountingforonethirdofalltheinfectedpatients[1] .Therefore ,itisofurgencytofindaneffectivewaytopreventandtreatthedisease .AlthoughtheinactivatedvaccineagainstencephalitisBvirusiswidelyused ,sofarnoefficaciousdrughasbeenfoundforthedisease .Suramin ,asananti trypanosomedrug ,camein tousein 192 0 ,the pharmacologicalmechanismofwhichremainsunclear .Apartfrombeingrichinan ions ,Suraminisuniqueintermsofitschemicalstruc ture .Itisassumed…     

冷盐沉淀同步分离dsRNA病毒基因组和结构多肽的方法

目的 :探索一条既能获得dsRNA病毒全基因组 ,又能同时获得该病毒完整结构多肽的方法。方法 :将分别感染了蓝舌病毒 (BTV)和人轮状病毒 (HRV)的培养细胞分别破碎以释出病毒后 ,结合应用差速离心和蔗糖梯度离心技术 ,获得了这两种病毒的纯化粒子 ;再用 1%的SDS裂解病毒 ,0 .2 5mol/L的KCl沉淀其结构蛋白 ,而病毒基因组悬于上清。结果 :所沉淀的蛋白用PBS(pH 7.8)适当稀释后 ,即可用作抗原 ;上清用酚∶仿抽提 1次后 ,即可用于核酸分子生物学研究。结论 :此方法为一套既能有效同步分离dsRNA病毒核酸和结构多肽等活性生物大分子 ,又能节约实验材料和时间的有效方法。     

黄热病毒及靶向治疗药物的研究进展

黄热病毒(YFV)属于黄病毒科黄病毒属,是一类有包膜的单正链RNA病毒。YFV引起的黄热病主要在美洲、非洲地区流行,目前尚无特异性治疗药物。尽管疫苗能有效预防黄热病毒感染,但普及率较低,难以彻底阻断YFV的传播。针对YFV蛋白的靶向治疗药物是降低黄热病病死率的重要措施。本文综述YFV感染过程中发挥重要作用的病毒蛋白的结构和功能,并对目前针对这些靶点研发的抗YFV药物进行介绍,为防治黄热病毒感染提供参考。     

Suramin inhibits the<Emphasis Type="Italic">In Vitro</Emphasis> expression of encephalitis B virus proteins NS3 and E

Summary In this study, the mechanism by which Suramin inhibits the replication of epidemic encephalitis B virus was explored to provide a theoretical basis for its further application in clinical practice. After viral infection of HepG2 and IMR-32 cells, different concentrations of Suramin were added to the culture media, and then the cultural supernatants and infected cells were collected 48 h later. For the evaluation of the curative effect, cytopathic effect (CPE), virus titers, the expression of viral protein and viral RNA were determined by Western blot RT-PCR andin vitro RNA synthesis, respectively. At the concentration of 50 μg/ml of Suramin, HepG2 and IMR-32 infected with epidemic encephalitis B virus decreased by 51.8% and 0.03% respectively, as compared with controls. It was suggested that expression of encephalitis B virus proteins NS3 and E was notably reduced by Suramin. This is especially true of E protein. At RNA level, however, no difference in RNA virus was found between Suramin-treated virus and non-treated cells. Our results suggest that Suramin can inhibit viral replication by blocking the production of viral proteins. XU keshu, male, born in 1961, Associate Professor This project was supported by the fund of Chinese Service Center for Scholarly Exchange (No. 1999-363).