硫酸镍在诱发大鼠鼻咽癌中的作用

本文报导我们再次应用一次低剂量的二亚硝基哌嗪作为起动因子,用硫酸镍作为促动因子,进行诱发大鼠鼻咽癌的实验。将90只成年大鼠分为四组,即:二亚硝基哌嗪 镍胶组,二亚硝基哌嗪 镍水组,镍胶组和二亚硝基哌啼组。实验进行270天以后,将全部大鼠处死作病理检查。结果表明,在二亚硝基哌嗪 镍胶组的22只大鼠中,有5例发生恶性肿瘤(鼻咽原位鳞癌和早期鳞癌各1例,鼻腔未分化癌和鳞癌各1例,硬腭鳞癌1例),其它组则未见肿瘤发生。这再次表明,微量元素镍在诱发大鼠鼻咽癌中有促癌作用。 本实验还表明,肿瘤不仅发生在鼻咽,而且也发生在鼻腔和硬腭,因此,二亚硝基哌嗪不仅对鼻咽有亲合力,对鼻腔和硬腭也是有亲合力的。     

二亚硝基哌嗪诱发的大鼠皮下恶性纤维组织细胞瘤

二亚硝基哌嗪诱发的大鼠皮下恶性纤维组织细胞瘤孙宁，唐慰萍，蔡琼珍，莫梅英广东医学院病理学教研室（湛江·５２４０２３）二亚硝基哌嗪（Ｄｉｎｉｔｒｏｓｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ，ＤＮＰ）对鼻咽上皮有很高的组织亲和性，少量多次或短期大量皮下注射、鼻咽局部给药都...     

微量元素镍在实验大鼠体内的分布

我们曾用阈下剂量的二亚硝基哌嗪作为起动剂,然后用硫酸镍作促癌剂,成功地诱发了大鼠鼻咽癌。为了解镍在实验大鼠体内,特别是在鼻咽部的分布,我们设计了本实验。 材料与方法 用25只雄性成年大鼠(体重约100g)分为实验组与对照组。 实验组:15只,除供给谷类与青饲料以外,每日从口腔内灌入1％硫酸镍溶液0.25ml,持续30天。停镍后第3天全部处死。     

化学诱癌过程中大鼠鼻咽上皮非典型增生与癌变的相关性分析

ＳＤ纯种大鼠８０只，皮下注射二亚硝基哌溱作鼻咽诱癌实验，３０只大鼠作对照，分批处死动物。结果大鼠鼻咽各种非典型增生４２例，各阶段癌３２例，其出现频率都随动物存活期延长而增加。癌变与鳞状上皮，柱状上皮和底层非典型增生呈正相关。几科所有发癌动物都同时伴随非典型增生。二者共存的比例很高，且有统计学意义。能看到癌变部位直接与非典型增生相的２３例中，癌旁病变全部是鳞状上皮非典型增生，其中１９例是基底层细胞非     

鼻咽鼻腔癌变化学预防的实验研究

本文用我们过去建立的鼻咽鼻腔癌前与癌变的模型研究中药抗癌乙、三合剂、维胺酯及芦笋对鼻咽鼻腔癌变的影响。用Wistar大鼠300只,雌雄各半,随机分为七组:(A)对照组;(B)三合剂预防组;(C)三合剂治疗组;(D)抗癌乙治疗组;(E)抗癌乙预防组;(F)抗癌乙+维胺酯联合作用组;(G)芦笋组。各组动物均按40mg/kg的二亚硝基哌嗪(DNP)剂量,每周两次皮下注射,共14次,诱发癌变,预防组在开始给DNP前一天给药,治疗组在注射DNP 14次,诱发鼻腔粘膜不典型增生后一天给药。(A)至(G)组分二批处死。结果表明:抗癌乙片对DNP诱发大鼠鼻腔癌变具有预防和治疗作用,癌变率由对照组60％下降至预防组36.5％和治疗组24.1％;抗癌乙片中的三成分组成的三合剂亦具有明显的抑制癌变的作用。癌变率由对照组60％下降至预防组46.0％和治疗组31.4％;抗癌乙和维胺酯对癌变具有协同抑制作用,作用效果比单纯用抗癌乙好,癌变率由对照组60％下降至29.1％;以上各组与对照组比均有统计学的显著意义,而芦笋原汁对癌变的抑制作用不及抗癌乙和三合剂。     

人胚鼻咽粘膜异种移植及二亚硝基哌嗪的诱癌研究

人胚鼻咽粘膜移植于裸鼠皮下后可长期存活并保持其原有组织结构和功能,在此基础上用二亚硝基哌嗪皮下给药法诱发其癌变。在40周内,低剂量多次给药组(12例)见不典型增生6例次,原位癌1例,早期浸润癌1例;一次性给药组(11例)见不典型增生5例次,原位癌3例。用抗P_(21)单抗检测rasP_(21)蛋白表达,发现异型增生的基底细胞较正常基底细胞表达增强,可作为癌前病变的指标之一。     

鱼露促进大鼠鼻咽鼻腔粘膜增生癌变的初步观察

亚硝胺类致癌物诱发大鼠鼻咽及鼻腔癌,文献已有报导其中用较大剂量的二亚硝基哌吡嗪(15mg/kg)可引起鼻咽、鼻腔及食道的肿瘤,其发生率均较高;累积发癌概率分别达100％、85.5％和85.7％。鼻咽癌为鳞癌,而食管亦为鳞癌。肌氨酸乙酯亚硝胺,小剂量及中等剂量诱发大鼠的食管癌,而大剂量能引起大鼠食管癌外,并见前胃癌的发生。从亚     

肿瘤杂交细胞阻抑二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的实验研究

用灭活的肿瘤杂交细胞(融合细胞)免疫二乙基亚硝胺(DEN)诱发肝癌过程中的大鼠做实验。实验分三组:瘤苗免疫组、诱发对照组、空白对照组。实验全程均为18周。实验结果:瘤苗免疫组18只大鼠无一只发生肝癌,而诱发对照组16只大鼠中有10只发生肝癌,其余6只也出现了癌前期病变。结果提示:肿瘤杂交细胞在一定程度上能阻抑或延迟二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的发生。     

益气解毒方对DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔/鼻咽上皮癌前病变及p16和c-jun基因表达的影响

背景与目的: 有研究表明,益气解毒方中药可通过抑制细胞端粒酶的激活而阻断二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠鼻咽癌变和人胚鼻咽上皮细胞转化.本研究探讨益气解毒方对经DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠的鼻腔和鼻咽黏膜上皮增殖及C-jun和p16基因表达的影响,为益气解毒方的疗效和可能作用机制提供新的证据.方法:G4代5月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠20R,随机分为2组:①TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌中药组[中药组,10R,以12.91g/(kg·d)剂量灌胃益气解毒方药液]:②TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌0.9%氯化钠溶液对照组(氯化钠溶液对照组,10R,以15 ml/kg氯化钠溶液灌胃).另设阴性对照组(用野生型C57BL/6J小鼠10只,以15 ml/kg氯化钠溶液灌胃).用HE染色法观察各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征,比较癌前病变率;免疫组织化学染色法检测各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织c-jun和p16基因的表达水平,并采用WesternEO迹法验证.结果: 阴性对照组、氯化钠溶液对照组和中药组鼻腔和(或)鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、90%和10%,差异有显著性(JP<0.01).与氯化钠溶液对照组比较,中药组小鼠鼻腔和鼻咽的p16基因表达水平显著上调(鼻腔:157±,10 VS 132±10,鼻咽:155±12 VS 133±10,P值均<0.01),c-jun基因的表达水平显著下调(鼻腔:111±9 VS 161±10;鼻咽:1104±10 VS 159±10,P值均<0.01),趋于正常水平,与阴性对照组(鼻腔和鼻咽的p16表达灰度值分别为130±12和12±12,c-Jun分别为164±13和164±9)的差异无显著性(Jp值均>0.05).结论: 中药益气解毒方可阻逆DNP对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织癌前病变发生和发展的诱导作用,其干预作用与下调c-jun表达和上调p16基因表达密切相关.     

二亚硝基哌嗪诱发移植于裸鼠的人胚鼻咽粘膜癌变的研究

人胚鼻咽粘膜移植于裸鼠皮下后可长期存活，并保持其结构和功能，用二亚硝基哌嗪（ＤＮＰ）皮下给药法诱发其癌变。实验分四组，一次性给药组（１１例），低剂量多次给药组（１２例），大剂量多次给药组（１２例），大剂量ＤＮＰ＋促癌剂ＰＭＡ组（１１例）。在４０周内，分别见不典型性增生及异型鳞状化生５、６、６及７例次，原位癌依次为３、１、１及１例，而大剂量ＤＮＰ＋ＰＭＡ组及低剂量多次给药组各诱发浸润癌一例。     

Smo、Gli1在大鼠肝癌中的表达及维生素D3对Smo、Gli1的抑制

背景与目的:研究表明Sonic Hedgehog(Shh)信号通路与肿瘤的发生有重要联系,本实验通过检测大鼠肝癌模型中Smo、Gli1的表达,探讨其与肝癌发生发展的关系,了解维生素D3(Vitamin D3,VitD3)对Smo、Gli1的作用.方法:取48只5～6周龄的健康雄性SD大鼠,并随机分组.对照组:一般饲养的8只大鼠;DEN组:二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)诱癌的20只大鼠;DEN+VitD3组:DEN+VitD3干预的20只大鼠;分别于实验12周和20周处死各组一半数量的大鼠,采用Western blot检测大鼠肝脏中Smo、Gli1蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测两种蛋白mRNA的表达.结果:对照组中12周和20周大鼠肝脏的Smo、Gli1的mRNA及蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05);DEN组或DEN+VitD3组中20周的Smo、Gli1表达高于12周(P＜0.05);相同实验周期:DEN的Smo、Gli1表达高于VitD3组(P＜0.05);与其他两组相比,对照组表达最低(P＜0.01).结论:Smo、Gli1可能参与肝癌的发生发展,VitD3对Smo、Gli1具有一定抑制作用.     

二亚硝基哌嗪诱发人胚鼻咽上皮姊妹染色单体交换的观察

本实验用间接致癌物二亚硝基哌嗪(dinitrosopiperazine DNP)处理人胚鼻咽上皮细胞,以人胚肾上皮为对照,观察不同组织内DNP诱发的姊妹染色单体交换(Sistar Chromatid exchanges SCEs)的频率。结果表明:人胚鼻咽上皮可以活化DNP,表明诱发的SCE濒率增加,具量效关系;相同剂量DNP处理后,鼻咽上皮内诱发的SCEs频率明显高于肾脏上皮细胞,表现器官特异性的SCE反应,证实了人胚鼻咽上皮细胞有活化DNP酶系的性能。     

羧乙基锗倍半氧化物对亚硝基哌嗪诱导大鼠鼻咽癌早期增生病变…

羧乙基锗倍半氧化物（Ｇｅ－１３２）在多种体外及动物试验系统中均已证实具有抗致癌作用。本研究在亚硝基哌嗪（ＤＮＰ）诱导大鼠鼻咽癌癌前增生病变（Ⅱ级）模型中，再次证实了Ｇｅ－１３２这类作用。所用ＤＮＰ剂量为３０ｍｇ／ｋｇ，皮下注入每ｗｋ２次，共６ｗｋ，分别在实验的第１２０、２２０、２７０及３００ｄ杀鼠作病理形态及组化检查。随着时间加长，ＤＮＰ引起鼻咽部非典型加重。由柱状上皮转化为圆形储备细胞出现多层增     

TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽粘膜上皮细胞增殖与p16 c-jun基因表达的关系

目的:研究TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖与p16、c-jun基因表达的关系.方法:TgN(p53mt-LMPI)/HT小鼠和野生型C57BL/6J小鼠分别分为诱癌组和对照组,即TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌组(TI)、TgN(p53mt-LMP1)/HT对照组(TC)、C57BL/6J诱癌组(CI)和C57BL/06J对照组(CC)4组,H-E染色法观察各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖特征,比较癌前病变率;免疫组织化学染色法检测各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织中p16、c-jun基因的表达水平.结果:TI组小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮细胞非典型性增生明显,TI、TC、CI和CC组小鼠鼻腔和/或鼻咽黏膜上皮癌前病变卒分别为90%、10%、0和0.与TC、CI和CC组相比,TI组鼻腔和鼻咽上皮细胞p16基因表达水平显著降低(P＜0.01)和c-jun基因表达水平显著增高(P8＜0.01);与CC组相比,TC组两基因的表达也具有同样的变化趋势(P＜0.01).结论:TgN(p53mt-LMPI)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖活性增加,二亚硝基哌嗪可提高TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞的增殖活性,而细胞增殖活性增加与p16基因表达水平下调和c-jun基因表达水平上调密切相关.     

姜黄素对大鼠膀胱肿瘤的预防与治疗作用

目的:建立以N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱发膀胱癌的Wistar大鼠模型,研究姜黄素对诱发膀胱癌的化学干预作用,并探讨其可能的作用机制。方法:采用膀胱灌注MNU(1.5 mg/次)的方法诱发Wistar大鼠膀胱肿瘤(MNU灌注时间为第0、2、4、6和8周);实验分为2组,在诱癌的同时(第1、3、5、7和9周时,预防组)或者诱癌成功后(第10、12、14、16和18周时,治疗组)予以膀胱灌注姜黄素溶液(160 μmol/L)0.2 mL/只;分别在第13周时处死预防组大鼠,第23周时处死治疗组大鼠,获得的膀胱组织行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察病理变化,Hoechst 33258荧光染色法检测肿瘤组织中细胞的凋亡情况。结果:在预防组中,第13周时姜黄素处理组膀胱癌的发生率为23.1%(3/13),其中浅表性癌3例,无肿瘤侵犯肌层;对照组肿瘤的发生率为66.7%(8/12),浅表性癌6例,肿瘤侵犯肌层2例,与对照组相比肿瘤的发生率、分期之间差异均有统计学意义。治疗组病理检测结果显示,肿瘤发生后再用姜黄素处理不能降低肿瘤分期,但能显著增加膀胱肿瘤细胞的凋亡。结论:姜黄素可抑制膀胱灌注MNU诱导的大鼠膀胱癌的发生与进展,其机制可能与诱导膀胱肿瘤细胞凋亡有关;但对于已经成瘤的大鼠膀胱癌无明显疗效。     

曲古霉素A抑制SD大鼠胰腺癌的发生及其分子机制的探讨

目的:建立SD大鼠胰腺癌模型,观察曲古霉素A(TSA)对二甲基苯茾蒽(DMBA)诱癌的抑制作用,探讨Ezrin、HGF和C-met表达与胰腺癌发生发展的相关性.方法:90只SD大鼠随机分为3组,DMBA置入胰腺实质内(A组+B组),B组每周腹腔注射TSA1μg;A组和B组于3～5个月内处死,对照组(C组)于第5个月处死.Ezrin、HGF和C-met染色方法均为石蜡切片EnVisionTM>免疫组化法.结果:1)A组癌发生率为48.7%;B组癌发生率为33.3%;A组胰腺癌最大径均值>B组,P<0.05;C组胰腺和A、B两组胰腺外主要脏器均未见明显病理改变;2)A组+B组胰腺导管癌Ezrin、HGF和C-met阳性表达率明显高于A组+B组非癌胰腺组织,P<0.01;A组胰腺导管癌Ezrin、HGF和C-met阳性表达率明显高于A组非癌胰腺组织(P<0.05),C组胰腺和2例纤维肉瘤Ezrin、HGF和C-met均为阴性表达;Ezrin、HGF和C-met在胰腺导管癌中表达呈一致性,P<0.05.结论:较大剂量DMBA置入胰腺实质内可获得较高胰腺癌发生率;Ezrin、HGF和C-met在DMBA诱癌过程中可能有重要促癌发生作用;TSA能抑制胰腺癌发生和生长,其机制可能与抑制Ezrin、HGF和C-met表达有关.     

金铎逆癌散对甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌的影响

目的 观察金铎逆癌散(JDNAS)对甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发大鼠食管癌的影响。方法 120只大鼠MBNA 3 mg/(kg·d)灌胃连续3个月,诱发大鼠食管癌变,根据处理方式不同分为6组,每组20只。空白组仅给予溶剂灌胃;环磷酰胺组给予环磷酰胺5 mg/kg腹腔注射,每周2次;JDNAS高、中、低剂量组给予JDNAS灌胃。3个月后处死大鼠,比较观察各组食管癌变。结果 JDNAS各剂量组对MBNA诱发大鼠食管原位癌及浸润癌均有明显抑制作用。结论 JDNAS能降低食管癌变发生风险,具有潜在抗肿瘤作用,值得进一步研究。     

二亚硝基哌嗪诱癌过程中大鼠外周血各类白细胞的改变

目前人们利用亚硝胺类化合物诱发动物肿瘤研究方面已经进行了大量工作,但对其诱癌过程中动物的全身反应报道甚少。本实验采用二亚硝基哌嗪(Din-itrosopiperazine,DNP)诱发大鼠肿瘤,在给药前后不同阶段检测动物血液中白细胞,尤其淋巴细胞及其亚群数量的变化,以观察DNP对动物免疫状态的影响。     

己烯雌酚对Wistar大鼠乳腺癌发生的干预作用

背景与目的:作为一类人工合成雌激素药物,二乙基己烯雌酚(diethyl-stilbestrol,DES)被广泛应用于治疗雌激素不足所致的更年期综合征及骨质疏松症等,但其对乳腺上皮细胞作用的研究有待进一步探讨。本研究通过建立与人相似的Wistar大鼠乳腺癌发生的模型,并用DES进行干预,观察DES在Wistar大鼠乳腺癌发生过程中的作用。方法:利用不同剂量的DES干预二甲基苯蒽[7,12-dimethylben(a)anthracene,DMBA]诱导Wistar大鼠乳腺癌模型,研究其对乳腺上皮细胞的作用。实验分为6个组:对照组、DES1组、DMBA组、DES1+DMBA组、DES2+DMBA组和DES3+DMBA组,其中DES1、DES2和DES3中DES剂量分别为:0.1mg·kg-1·d-1、0.2mg·kg-1·d-1和0.4mg·kg-1·d-1喂养大鼠,观察44周处死大鼠,取乳腺组织作常规病理分析以及核仁组成区相关嗜银蛋白(silver-binding nucleolar organizer regions,AgNOR)计数、PCNA染色强度指数(proliferating cell nuclear antigen staining intensity index,PCNA SII)、Bcl-2和C-erbB-2蛋白表达测定。结果:DMBA组和DES1+DMBA组分别有13只和2只Wistar大鼠发生癌变;单纯DES1组大鼠乳腺上皮细胞AgNOR计数及PCNASII水平上升,Bcl-2及C-erbB-2的表达提高,但未导致癌变;与其他组相比,DES2+DMBA组大鼠乳腺上皮细胞的AgNOR计数和PCNASII水平下降,Bcl-2及C-erbB-2的表达降低(P<0.05);DES3+DMBA组上述指标与DES1+DMBA组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单纯小剂量DES可导致大鼠乳腺上皮细胞增生,但不导致乳腺组织癌变;在DMBA诱发大鼠乳腺上皮细胞癌变过程中,小剂量DES可以促使乳腺导管上皮细胞增生、乃至癌变;而中等剂量DES可以明显抑制大鼠乳腺上皮细胞增生,加大DES剂量,抑制作用不增强。     

霉菌与食管癌关系的研究 一、发霉食物诱发大鼠食管癌的初步观察 二、发霉食物与亚硝胺协同致癌的实验观察

 一、在林县现场以发霉的玉米面作食物,对16只Wistar大鼠进行诱癌实验。340天以前死亡的11只动物,其中8只食管无明显病变,3只有不同程度的增生性病变。喂饲445～649天自行死亡的5只大鼠,3只发生了食管癌。均为雌性大鼠。其中2例为早期浸润癌。1例为广泛浸润癌。癌均发生在食管下段。全为鳞状细胞癌。癌的发生部位和组织像与人的食管癌相似。两例未发生食管癌的大鼠,其中一例发生了食管中段的内生性上皮瘤和舌根部早期乳头瘤。另一例食管上皮发生内生性和外生性乳头状增生。从实验结果,我们认为,霉菌与人类食管癌可能有关。应开展这方面的研究。二、发霉食物与甲基苄基亚硝胺协同致癌;实验用Wistar大鼠60只。分为实验组和对照组。各组动物相同。均喂以同量的甲基苄基亚硝胺100天。实验组喂发霉食物。对照组喂未经发霉处理的食物。实验在林县现场共进行176天。结果:实验组动物的食管上皮各种类型的增生、乳头状瘤的发生率和发生的数目、癌的发生率,均高于对照组。差别显著或极显著。舌和咽部乳头状瘤和癌的发生率亦高于对照组。结果表明:在林县自然环境中发霉的食物(玉米面馍)与甲基苄基亚硝胺在大鼠的食管、舌和咽的致癌过程中,有协同作用。诱癌时间缩短,诱癌率升高。