肝纤维化的胶原代谢及其相关治疗的研究

肝纤维化是大多数慢性肝病所共有的病理特征 ,其本质是肝内细胞外基质合成大于降解而导致过度沉积。胶原是细胞外基质的主要组成成分 ,因此 ,有效抑制胶原的合成、促进胶原降解是抗肝纤维化的一条重要途径。本文就肝纤维化的胶原代谢和抗肝纤维化治疗作一综述。     

关于肝纤维化防治的研究现状

肝纤维化是多种慢性肝病共有的病理改变.在西方国家,酒精性肝损害是造成肝纤维的主要原因,而在我国则为肝炎病毒,特别是乙肝和丙肝病毒的持续感染.近年来,随着分子生物不技术的进步,对肝纤维化发生机理的进一步研究提供了条件,从而推动了肝纤维化防治的深入探讨. 1肝纤维化发生机理 肝纤维化是肝脏受到慢性损伤时肝内以胶原为主的细胞外间质成份(ECM)过量沉积的不良结局.近年研究证实,肝炎形细胞(贮脂细胞HSC)是肝损伤时ECM的主要产生细胞[1],它在细胞外基质的代谢和肝脏各种介质的产生过程中处于中心地位.它的表型激活是肝纤维化形成过程的关键[2][3].HSC激活、增生、转化和分裂,导致大量胶原、蛋白多糖,糖蛋白等细胞外基质的合成.同时,HSC的表型激活在调节ECM降解中也起关键作用,通过产生基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)与α2-巨球蛋白,抑制胶原酶的降解作用而增加胶原沉积[2].另外,肝细胞因子中转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生的生长因子(PDGF)等通过激活和增殖HSC,促其产生ECM,在肝纤维化形成中同样发挥着重要作用.     

赤芍对肝纤维化因子ECM等的影响

肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的共同病理学基础,其主要表现为肝组织内细胞外基质（ECM）的过度沉积,分布异常。ECM包括胶原、非胶原性糖蛋白及蛋白多糖等,其可由肝脏中多种细胞合成和分泌,不仅具有支架作用,而且可影响细胞的增殖、分化等生物行为,而其合成和降解又受多种细胞因子的调控。抗肝纤维化治疗的目标在于抑制肝纤维化进一步发展及逆转肝纤维化,改善患者肝脏的结构与功能,延缓肝硬化及其失代偿期的发生,延长患者生存期,改善生命质量。     

清热活血补益方影响肝脏胶原代谢的分子生物学机制

目的 :从分子生物学水平研究中药复方清热活血补益方 (肝纤方 )如何影响大鼠肝脏的胶原合成及降解。方法 :运用血清药理学方法制备中药含药血清 ,将之作用于从SD大鼠肝脏分离培养的肝星状细胞 ,并测定Ⅰ型胶原含量、Ⅰ型前胶原mRNA的表达和胶原酶活性。结果 :与对照组相比 ,含药血清组Ⅰ型胶原含量降低 ,Ⅰ型前胶原mRNA的表达受到抑制 ,胶原酶的活性增加 (P <0 .0 5 )。结论 :清热活血补益方通过抑制Ⅰ型前胶原mRNA的表达来减少胶原的合成 ,通过提高胶原酶的活性来促进胶原的降解 ,这可能是其多位点抗肝纤维化的部分分子生物学机制。     

赤芍对肝纤维化因子ECM等的影响

肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的共同病理学基础,其主要表现为肝组织内细胞外基质(ECM)的过度沉积,分布异常.ECM包括胶原、非胶原性糖蛋白及蛋白多糖等,其可由肝脏中多种细胞合成和分泌,不仅具有支架作用,而且可影响细胞的增殖、分化等生物行为,而其合成和降解又受多种细胞因子的调控.抗肝纤维化治疗的目标在于抑制肝纤维化进一步发展及逆转肝纤维化,改善患者肝脏的结构与功能,延缓肝硬化及其失代偿期的发生,延长患者生存期,改善生命质量.     

扶正化瘀方抗肝纤维化的主要作用机制与效应物质

扶正化瘀方是治疗肝纤维化的有效中药复方,本文综述了扶正化瘀方抗肝纤维化的主要作用机制及其效应物质,包括该方影响肝脏多种细胞的功能及细胞外基质代谢,其入血成分、活性物质及其组织分布代谢特征。     

反义核酸技术在受胶原基因表达调控的肝纤维化研究中的应用

肝纤维化是慢性肝损伤的修复反应，以胶原为主的细胞外基质（ECM）在肝内大量沉积的病理过程。其形成机制较为复杂，各种细胞因子彼此相互作用，形成细胞因子网络，共同调控肝纤维化的发生、发展。抗肝纤维化治疗策略主要包括调控HSC活化增殖或促其凋亡、抑制胶原合成或促其降解、细胞因子治疗和间充质干细胞治疗等。反义核酸技术是一种发展迅速并极富应用前景的基因控制技术。它是利用DNA或RNA分子通过Watson Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合，通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译，从而抑制目的基因的表达，主要包括反义寡核苷酸技术、RNA干扰技术和三股螺旋结构寡核苷酸技术。本文综述了应用反义核酸技术调控相关基因的表达来防治肝纤维化的研究现状。     

肝纤维化的治疗和展望

当前由病毒性肝炎、酗酒、过度肥胖导致的肝纤维化急剧增高，肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的必由之路，主要表现为细胞外基质成分，即胶原、非胶原的糖蛋白和蛋白多糖过度积聚在细胞外间隙，肝纤维化的治疗迄今仍处在探索阶段，还无特效药问世，其治疗主要包括去除致病因素的治疗和抗肝纤维化治疗.     

熊果酸和齐墩果酸抗肝脂肪变和纤维化作用研究进展

熊果酸和齐墩果酸的抗氧化作用能对抗各种原因引起的氧化应激所致的肝组织脂质过氧化反应、炎性损伤、脂肪变和纤维化。熊果酸和齐墩果酸通过阻断两面神激酶2-信号传导及转录激活因子3（JAK2-STAT₃）信号转导,抑制还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（NOX）活化,阻止静息态肝星状细胞活化、增殖,促进活化态肝星状细胞凋亡,从而减少胶原生成、增加细胞外基质降解,产生防治肝纤维化的作用。熊果酸和齐墩果酸诱导肝脏去毒酶和外排转运体表达,降低胆汁淤积动物血清胆汁酸、胆红素水平和肝脏胆汁酸水平,减轻胆汁淤积性肝损伤和纤维化;还可通过降血脂作用抑制肝外脂质在肝脏沉积、抑制肝脏脂质生物合成和促进脂质代谢,阻滞肝脂肪变的发生和发展。     

姜黄素阻断大鼠肝纤维化及其影响转化生长因子-β_1表达的研究

<正>肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变,其本质是细胞外基质合成增多而降解相对减少,导致细胞外基质在肝内过度沉积[1]。转化生长因子(TGF)-β1是目前研究最深入的与肝纤维化密切相关的细胞因子,被认为在调控肝纤维化发生发展中起重要作用[2]。姜黄素为姜黄的     

柴胡对大鼠实验性肝纤维化的预防作用

目的研究中药柴胡对肝纤维化的预防作用。方法采用四氯化碳(CCL4)诱发大鼠肝损伤,辅以高脂、低蛋白饲料和一定浓度乙醇饮料,复制肝纤维化模型,柴胡预防给药,观察其对大鼠血清及肝组织生化指标的影响。结果柴胡预防给药可显著降低四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠血清ALT、AST和肝组织MDA、HyP,提高肝组织SOD活性。病理组织学观察显示,柴胡可使肝组织变性、坏死程度减轻。结论柴胡能预防四氯化碳致大鼠肝纤维化的发生与发展。     

肝纤维化病程中Kupffer细胞分泌的细胞因子对肝星状细胞活化增殖、凋亡的调控

肝纤维化是对慢性肝损伤的愈合反应,为一个可逆的过程。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝脏分泌细胞外基质(extra cellular matrixc,ECM)的主要细胞,在肝纤维化的发展机制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆转肝纤维化的进程是抗肝纤维化研究的重点之一。在肝纤维化病程中,一系列细胞因子通过旁分泌和自分泌方式作用于邻近的HSC,影响其增殖、趋化、代谢及凋亡。鉴于Kupffers细胞为细胞因子的主要来源,其在肝纤维化病程中对HSC细胞的活化增殖、凋亡发挥着重要的调控作用。HSC、Kupffers细胞及细胞因子与肝纤维化的发生发展关系极为密切,阐明其关系,有助于以HSC为靶点的肝纤维化方面的研究,现就其关系综述如下。     

育阴软肝颗粒剂对大鼠肝纤维化的治疗作用

目的　研究育阴软肝颗粒剂对大鼠肝纤维化及其阴虚证的治疗作用。方法　采用多因素复制肝纤维化动物造模,通过观测大鼠肝纤维化指标(ALT、AST、肝指数、肝组织病理学、羟脯氨酸及胶原蛋白等)与阴虚指标(进食与饮水量、自主活动、体重、cAMP、cGMP等),研究育阴软肝颗粒剂对实验性肝纤维化大鼠的防治作用。结果　6.2~24.8g·kg-1 剂量范围内的育阴软肝颗粒剂能降低纤维化大鼠血清ALT、AST及肝指数,降低肝组织羟脯氨酸及胶原蛋白的含量,缓解肝组织纤维化病理学变化;同时,育阴软肝颗粒剂能降低肝纤维化大鼠的饮水量,增加体重,减少活动次数与站立次数,降低cAMP及cAMP/cGMP,缓解阴虚症状。结论　多因素复制的肝纤维化大鼠模型有一定的阴虚症状;育阴软肝颗粒剂对肝纤维化及其阴虚证有一定的防治作用。     

Current drugs in early development for treating hepatitis C virus-related hepatic fibrosis

Introduction: More than 100 million people worldwide are infected with hepatitis C virus (HCV), which is responsible for chronic liver disease accompanied by progressive fibrosis of hepatic tissue, often leading to liver cirrhosis. Novel therapeutic options are able to clear the virus in almost all diagnosed patients. However, even after successful treatment, hepatic fibrosis may persist in many of them. There is no registered therapy specific for liver fibrosis, but numerous molecules are currently in development.

Areas covered: In this review, the authors look at drugs in early development for the treatment of HCV-related hepatic fibrosis. Their mechanism of action is based on the inhibition of hepatic inflammation, the modulation of cellular sources of extracellular matrix (ECM), the stimulation of ECM degradation and prevention of collagen crosslinking. Importantly, significant antifibrotic effects have been demonstrated with both IFN-based and IFN-free anti-HCV regimens.

Expert opinion: Successful future therapy is likely to be based on sequential administration of drugs leading initially to HCV clearance, followed by treatment for the possible reversal of liver fibrosis. The primary consideration with clinical trials carried out in patients with advanced liver disease is safety. Indeed, the evaluation of anti-fibrotic therapy depends on reliable noninvasive techniques for quantification of liver fibrosis, such as transient or shear-wave elastography or serologic tests which are able to replace liver biopsy.     

大黄虫丸对实验性肝纤维化大鼠肝组织病理学及其细胞凋亡的影响

目的观察大黄䗪虫丸对肝纤维化模型大鼠肝组织病理学及其细胞凋亡的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和大黄䗪虫丸组,后两组行CCl4诱导肝纤维化造模,8周后大黄虫丸组大鼠ig大黄䗪虫丸0.45 g/kg,另两组给予等量生理盐水,同时称体质量。连续ig 4周后,断头处死各组大鼠,摘取肝脏,观察色泽、质地并称重,计算肝脏指数(LI);采用HE染色、Masson染色法光镜下观察各组肝组织病理改变,采用纤维化半定量计分系统结合测量胶原纤维面积密度,评估肝纤维化程度;采用TUNEL法检测肝脏细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果大黄䗪虫丸组大鼠肝的色泽和质地介于对照组和模型组之间。与模型组比较,大黄组虫丸组大鼠的LI、炎症活动度半定量、纤维化半定量评分、胶原纤维面积密度和细胞凋亡指数(AI)明显下降,两组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。HE染色显示大黄虫丸组大鼠的肝小叶结构破坏较轻,肝索排列紊乱、肝细胞变性得到改善,汇管区增生不明显。Masson染色显示大黄䗪虫丸组大鼠肝小叶结构紊乱有所改善,汇管区胶原纤维沉积和小叶内纤维间隔明显减少。FITC荧光标记染色显示大黄虫丸组肝小叶结构较清晰,可见少量凋亡细胞。结论大黄䗪虫丸可以降低大鼠的LI、炎症活动度半定量、纤维化半定量评分和胶原纤维面积密度,可能通过抑制肝细胞凋亡来改善大鼠肝纤维化程度。     

β-Arrestin2 deficiency attenuates oxidative stress in mouse hepatic fibrosis through modulation of NOX4

Hepatic fibrosis is a disease characterized by excessive deposition of extracellular matrix (ECM) in the liver. Activation of hepatic stellate cells (HSCs) is responsible for most of ECM production. Oxidative stress and reactive oxygen species (ROS) may be important factors leading to liver fibrosis. NADPH oxidase 4 (NOX4) is the main source of ROS in hepatic fibrosis, but the mechanism by which NOX4 regulates oxidative stress is not fully understood. β-Arrestin2 is a multifunctional scaffold protein that regulates receptor endocytosis, signaling and trafficking. In this study, we investigated whether β-arrestin2 regulated oxidative stress in hepatic fibrosis. Both β-arrestin2 knockout (Arrb2 KO) mice and wild-type mice were intraperitoneally injected with carbon tetrachloride (CCl₄) to induce hepatic fibrosis. Arrb2 KO mice showed significantly attenuated liver fibrosis, decreased ROS levels and NOX4 expression, and reduced collagen levels in their livers. In vitro, NOX4 knockdown significantly inhibited ROS production, and decreased expression of alpha-smooth muscle actin in angiotensin II-stimulated human HSC cell line LX-2. Through overexpression or depletion of β-arrestin2 in LX-2 cells, we revealed that decreased β-arrestin2 inhibited ROS levels and NOX4 expression, and reduced collagen production; it also inhibited activation of ERK and JNK signaling pathways. These results demonstrate that β-arrestin2 deficiency protects against liver fibrosis by downregulating ROS production through NOX4. This effect appears to be mediated by ERK and JNK signaling pathways. Thus, targeted inhibition of β-arrestin2 might reduce oxidative stress and inhibit the progression of liver fibrosis.     

当归对CCl4致大鼠肝纤维化胶原蛋白含量的影响

目的：本实验的目的是观察当归对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化肝胜胶原蛋白含量的影响。方法：通过灌胃给当归于CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型，相当于原生药的6g／kg、4g/kg和2g/kg,10周后，观察当归对肝脏胶原蛋白含量及肝胖组织病理学的影响。结果：当归组的胶原蛋白含量低于模型组，组织病理学也显示当归能减轻肝纤维化。结论：当归可抵抗肝纤维化，其机理可能与其抑制成纤维细胞的增殖和减少胶原纤维合成有关。     

大麻素受体在肝星状细胞活化中的作用及姜黄素干预效应

目的探究大麻素受体在肝星状细胞(HSCs)活化中的作用及姜黄素的干预效应,为阐明肝纤维化发生发展机理及姜黄素抗肝纤维化机制提供依据。方法 MTT法检测CBR1激动剂NADA与拮抗剂AM251,CBR2激动剂JWH015与拮抗剂AM630对HSCs增殖的影响;Western blot实验检测AM251对HSCs中ERK、JNK、p38蛋白表达及磷酸化水平的影响;Western bolt与细胞免疫荧光检测了姜黄素对HSCs中两种类型大麻素受体CBR1与CBR2蛋白表达的影响;Western bolt检测在姜黄素对CBR1激动剂与拮抗剂的刺激下HSCs产生的细胞外基质(ECM)成分α1(I)collagen和Fibronectin的影响。结果激动CBR1可促进HSCs的增殖,相反拮抗CBR1后则可以抑制HSCs的增殖(P<0.05);而激动CBR2也可抑制HSCs的增殖(P<0.05),但抑制CBR2对HSCs的增殖没有明显的影响(P>0.05)。CBR1拮抗剂AM251能够明显抑制ERK与JNK的磷酸化,并呈剂量依赖性的关系(P<0.05,P<0.01),但对p38蛋白表达的影响较小(P>0.05)。姜黄素可抑制HSCs中CBR1的表达(P<0.05),对CBR2蛋白表达的影响则差异没有统计学意义(P>0.05)。姜黄素可呈剂量依赖性的抑制CBR1激动剂导致的ECM成分表达的上升,并可协同CBR1拮抗剂抑制HSCs表达ECM成分的作用(P<0.05,P<0.01)。结论大麻素受体在HSCs的增殖活化过程中具有重要作用,姜黄素可能通过干预大麻素受体信号通路这一途径达到治疗肝纤维化