FGF-2对人肺腺癌细胞株A549增殖的影响

目的:观察不同浓度成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)对体外培养的人肺腺癌细胞株A549增殖的影响.方法:以体外培养的人肺腺癌细胞株A549为研究对象,采用MTT比色法测定不同浓度(0,12.5,25,50,75,100 ng/mL)的FGF-2对A549细胞增殖活性的影响.结果:与对照组相比,不同浓度的FGF-2处理组细胞的OD值、增殖比均明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01).FGF-2浓度为75 ng/mL时细胞增殖比最高,为对照组的183％.结论:FGF-2促进A549细胞增殖,FGF-2对肺腺癌的发生发展具有重要作用.     

槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

目的研究槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞增殖的影响.方法槲皮素联合奥曲肽作用于体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7,MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,免疫细胞化学法检测生长激素、胰岛素及端粒酶的表达.结果槲皮素与奥曲肽在较高浓度水平联用抑制MCF-7细胞增殖.结论槲皮素联合奥曲肽对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,其机制与阻滞细胞周期,抑制生长激素、胰岛素及端粒酶的表达有关.     

奥曲肽对人胃癌细胞株抑制作用机制的实验研究

目的　研究奥曲肽 (OCT)对人胃癌细胞株MKN45生长的调控机制。方法　采用流式细胞术分析OCT1 0 -3 g L对MKN45细胞的周期分布的影响。结果　 1 0 -3 g L这一浓度可诱导MKN45出现G0 G1 阻滞 ,于加入OCT后 6h开始 [(63 .67± 3 .92 ) % ] ,2 4h最显著 [(75 .0 5± 3 .42 ) % ] (P <0 .0 5) ,36h已消失 ;与对照组 [(7.0 3±0 .54) % ]相比 ,2 4hG2 M期细胞比例亦减少 [(2 .41± 1 .97) % ] ,但OCT未改变亚二倍体细胞的比例。结论　OCT可抑制人胃癌细胞株MKN45的生长 ,其作用机制之一是诱导细胞出现G0 G1 阻滞     

榄香烯诱导人肺癌细胞株A549凋亡研究

目的:探索榄香烯对体外培养人肺癌细胞株的作用及其原因.方法:设不同浓度(0.5、1、2、8、16μmoi/L)的榄香烯实验组和一个空白阴性对照组,应用MTT方法分析榄香烯对肺癌细胞株A549生长的影响.免疫细胞化学及流式细胞仪检测bcl-2、p53表达.结果:榄香烯能明显抑制肺癌细胞生长.透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化;流式细胞仪检测到Bcl-2蛋白表达降低,p53蛋白表达增多;RT-PCR检测bcl-2 mRNA水平下降.结论:榄香烯能诱导肺癌细胞凋亡,其作用机制可能与癌基因bcl-2表达减少、抑癌基因p53表达增多有关.     

蝙蝠葛活性成分对人白血病K562及肺癌A549细胞株的抑制增殖作用

[目的]探讨蝙蝠葛活性成分对体外人白血病K562及肺癌A549细胞株的抑制增殖作用.[方法]利用倒置显微镜及HE染色方法观察给予20mg/L蝙蝠葛活性成分处理后的体外人白血病K562细胞株的形态学变化;采用血清药理学实验方法观察含药(20mg/L蝙蝠葛活性成分)血清对体外人肺癌A549细胞株的抗增殖作用.[结果]倒置显微镜观察结果显示,给予20mg/L蝙蝠葛活性成分后早期K562细胞出现凋亡形态学变化,细胞膜鼓泡,凋亡小体形成,晚期K562细胞出现膜破裂坏死.HE染色结果显示,给予20mg/L蝙蝠葛活性成分后,K562细胞出现典型凋亡形态学变化,凋亡小体形成,细胞核浓缩呈蓝黑色,胞浆呈淡红色,核染色质浓缩呈碎块状.血清药理学实验结果显示,终质量分数分别为10%,20%,25%的灭活的含药大鼠血清对人肺癌A549细胞株的增殖抑制率分别为29.03%,30.55%,41.67%,与空白对照组比较明显增高(P<0.05).[结论]蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株具有抑制增殖和诱导凋亡的作用;含蝙蝠葛活性成分血清对体外人肺癌A549细胞株具有抑制增殖作用.     

奥曲肽抑制人胃癌细胞株MKN45的生长

目的 探讨奥曲肽（Octreotide,OCT)对人胃癌细胞株MKN45生长的调控作用。方法 采用MTT比色分析法分别测定OCT对生长于无血清培养基及含10％胎牛血清（FBS）培养基中MKN45细胞的调控作用。结果 OCT10^-2,10^-3,10^-4g/L对培养于无血清培养基中的MKN45的生长均有抑制作用，以10^-3g/L浓度的抑制作用最显著，为10．4％；而OCT10^-2,10^-3,10^-4,10^-5,10^-6g/L对生长于含10％FBS培养基中的MKN45均未显示出抑制作用。结论 OCT可抑制无血清培养基中的MKN45的生长。胎牛血清中可能含有可快速降解OCT的肽酶，使得OCT未显示出对生长于含10％FBS培养基中的MKN45的抑制作用。     

胰岛素对人肺腺癌细胞株A549影响的体外研究

目的：探讨用胰岛素提高人肺腺癌细胞A549生长代谢水平及其机制。方法：采用MTT比色法,分析胰岛素对肺腺癌A549细胞代谢的影响,用流式细胞仪作细胞周期分析,用Western Blot印迹方法检测细胞周期蛋白CyclinA和CyclinD1的表达情况。结果：胰岛素（2.0～32.0mU/mL）可促进人肺腺癌细胞A549的增殖（P〈0.05）,细胞周期结果显示胰岛素（8mU/mL）可使S期细胞增多。Western Blot印迹方法检测结果显示胰岛素（8mU/mL）后CyclinD1的表达明显增强,CyclinA的表达变化不明显。结论：胰岛素能促进人肺腺癌细胞株A549增殖,并且其增殖作用是可逆的。胰岛素主要作用于人肺腺癌细胞株A549细胞的S期。CyclinD1的表达增强在胰岛素促增殖机制中起着重要作用。     

奥曲肽对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的 探讨生长抑素类似物奥曲肽对人脐静脉内皮细胞增殖的影响及其机制。方法 以奥曲肽作用于人脐静脉内皮细胞，通过四噻氮唑盐法(MTT法)和流式细胞术进行分析。结果 在体外，奥曲肽(10^-5～10^-8mol／L)对人脐静脉内皮细胞可以产生抑制作用，并见饱和现象；10^-8mol／L时产生G0／G1期细胞阻滞，且出现细胞凋亡峰。结论 奥曲肽对人脐静脉内皮细胞具有抑制效应，影响细胞周期和诱导细胞凋亡是其作用机制之一。     

吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的实验研究

目的：研究吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的影响。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测和培养肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株,待24 h、48 h、72 h后采用不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU进行单用和联用处理,流式细胞术检测细胞凋亡率,分析药物的增效效果。结果联合用药对肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株可起到协同抑制作用,与单独用药组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。联合用药组的肺癌敏感 A549、耐药A549/GR 细胞株培育48 h 后的IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8） mg/L,单药组IC50=（20.1±1.2）、（20.3±1.4） mg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株后凋亡率差异明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论吉非替尼联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用,对其他肺癌的治疗也具有一定的效果。     

奥曲肽对人胃癌细胞SGC-7901增殖及P-糖蛋白表达的影响

目的：观察不同浓度的奥曲肽(octreotide)单药或联合氟尿嘧啶(Fu)对人胃癌细胞SGC-7901生长的影响及能否阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡；同时探讨其对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法：分别或联合应用奥曲肽或Fu作用于SGC-7901细胞，应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察细胞生长抑制，应用流式细胞技术检测细胞周期、凋亡及P-gp的表达。结果：奥曲肽可抑制SGC-7901细胞生长，其抑制作用呈浓度和时间依赖性，并具有饱和性；各浓度组奥曲肽均未引起细胞周期阻滞和凋亡；联合用药产生拮抗作用；奥曲肽能显著下调SGC-7901细胞P-gp的表达。结论：奥曲肽可能通过非凋亡途径抑制SGC-7901细胞增殖，由于拮抗作用因而不主张与Fu合用，奥曲肽有可能通过下调肿瘤细胞P-gp的表达而逆转耐药。     

AS-miR-21对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及对PTEN/PI3K/Akt信号通路的作用

目的 探讨miR-21的反义寡核苷酸(AS-miR-21)对非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞增殖和迁移能力的影响及对PTEN/PI3K/Akt信号通路的调控作用机制.方法 将NSCLC A549细胞分为3组,分别为AS-miR-21组、miR-NC组和Blank组,前两组分别应用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000瞬时转染AS-miR-21及阴性对照miRNA(miR-NC),后者未进行任何干预.应用qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLCA549细胞中miR-21表达的影响;应用MTT检测NSCLC A549细胞增殖抑制率;Giemsa染色检测NSCLCA549细胞克隆形成;细胞划痕实验检测NSCLCA549细胞迁移潜能;qRT-PCR检测AS-miR-21对NSCLC A549细胞中PTEN mRNA表达水平的影响;蛋白质免疫印迹法检测AS-miR-21对NSCLC A549细胞中PTEN、PI3K、Akt蛋白表达水平的影响.结果 与miR-NC组和Blank组比较,AS-miR-21组miR-21表达水平下调(P ＜0.05);AS-miR-21显著抑制NSCLCA549细胞增殖能力(P＜0.05),显著减少NSCLCA549细胞克隆形成(P＜0.01)和迁移率(P＜0.01);AS-miR-21显著上调NSCLC A549细胞中PTEN蛋白表达水平(P＜0.01),而显著下调PI3K和Akt蛋白表达水平(P＜0.01).结论 AS-miR-21能抑制NSCLCA549细胞增殖及迁移,此外,AS-miR-21通过负调控PTEN/PI3K/Akt信号通路有可能成为NSCLC治疗新靶点.     

Human decorin regulates proliferation and migration of human lung cancer A549 cells

Background Decorin is a small leucine-rich proteoglycan and it plays an important role in regulation of cell growth and migration in various tumor cell lines. Decorin was found down-regulated in non-small cell lung cancer tissue and may be involved in regulation of lung cancer development. Methods In this study, lentivirus-mediated RNA interference and over expression were employed to change the expression levels of decorJn Jn lung cancer A549 cells. We tested the cell cycle of A549 cells and the expression of transforming growth factor （TGF）-[31, cyclin D1, epidermal growth factor receptor （EGFR）, P53, and P21. Results We found that up-regulation of decorin could inhibit proliferation, block cell cycle at G1 and decrease invasive activity of A549 cells. Moreover, we also show that up-regulation of decorin induced significant decreases of TGF-131, cyclin D1 expression, phosphorylation of EGFR, and increases of P53 and P21 expression. Opposite results were observed in A549 cells with down-regulation of decorin. Conclusion Our results suggest that decorin is a key regulator involved in proliferation and migration ofA549 cells.     

Torin2对人非小细胞肺癌A549细胞生长和迁移的影响

目的 观察Torin2对人非小细胞肺癌A549细胞生长和迁移的影响,初步探讨其作用机制.方法 实验分为空白对照组、阴性对照组和Torin2加药组,CCK-8检测Torin2对各组A549细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞的凋亡及周期;Transwell检测细胞的迁移;Western blot检测相关蛋白的表达.结果 Torin2对A549细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈明显的剂量依赖性,IC50为214.96 nmol/L;流式细胞仪检测对照组、加药组200 nmol/L和400 nmol/L细胞凋亡率分别为(4.51±1.32)％、(9.56±2.34)％、(16.40 ±3.57)％;各加药组凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),且加药组与对照组比较:G1期细胞比例显著增多(P＜0.05),S期显著减少(P＜0.05).Transwell实验结果显示加药组(200 nmol/L和400 nmol/L)的A549细胞迁移能力较对照组显著下降.Western blot结果显示A549细胞经Torin2加药处理后,p-Akt473、p-4EBP1、Cyclin D1蛋白表达明显降低,Caspase 9蛋白酶切片段表达显著增加.结论 Torin2可以抑制A549细胞增殖,引起细胞周期G1/S期阻滞,抑制细胞迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与Torin2抑制了PI3K/Akt/mTOR信号通路以及周期相关蛋白Cyclin D1的表达有关.     

雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长及增殖的影响

目的探讨雷帕霉素对人非小细胞肺癌细胞株A549生长和增殖的影响。方法分别以0(阴性对照组)、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1、5μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)24、48、72 h,MTT比色法检测细胞活力。分别以0(阴性对照组)、0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L雷帕霉素干预A549细胞(雷帕霉素干预组)48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,PI单染流式细胞仪分析细胞周期。结果 MTT比色法检测结果显示:雷帕霉素干预组细胞生长抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),其中以5μmol/L雷帕霉素干预72 h组的细胞生长抑制率最高。与阴性对照组比较,经不同浓度雷帕霉素干预48 h后的A549细胞变圆缩小,伪足缩短,细胞间距增大;细胞周期检测结果显示:与阴性对照组比较,雷帕霉素干预组G0/G1期细胞百分率明显增加,S期细胞百分率显著减少(P<0.05)。结论雷帕霉素对人肺癌细胞株A549的生长和增殖具有明显抑制作用,并呈现一定的时间和浓度依赖性。     

鸦胆子油自微乳剂对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

鸦胆子[Brucea javanica (L.) Merr.]为苦木科植物鸦胆子的干燥成熟果实,是一种常用中药,主要分布在我国福建、云南、广东等地及台湾地区.《医学衷中参西录》中写道:“鸦胆子,性善凉血止血,兼能化疲生新.凡痢之偏于热者用之皆有捷效,而以治下鲜血水之痢,则尤效,又善清胃腑之热,胃院有实热充塞,噤口不食者,服之即可进食”.鸦胆子油主要成分为脂肪酸,内含少许挥发油.鸦胆子油对多种肿瘤的生长有一定的抑制作用而少有肝功能损伤[1-2],临床应用亦证实在原发和转移性肿瘤的治疗中,鸦胆子油制剂也显示出较好的疗效[3].本实验利用体外培养肺癌A549细胞的方法,研究新型制剂鸦胆子油自微乳剂对人肺癌细胞株A549增殖的影响,为临床应用提供新的治疗思路和实验依据.     

蟾蜍灵联合阿霉素对人肺癌A549细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：探讨天然药物蟾蜍灵、阿霉素以及两者联用对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影 响。方法：采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT )法观察蟾蜍灵、阿霉素以及两者联用对A549细胞增 殖的影响;采用赫斯特(Hoechst 33342)染色法观察细胞核形态变化;采用流式细胞仪检测蟾蜍灵、阿霉素以及两者联 用对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;采用Western印迹检测凋亡蛋白的表达。结果：蟾蜍灵和阿霉素单独用药均能 抑制A549细胞的增殖,且呈剂量与时间依赖关系;与蟾蜍灵和阿霉素单独用药相比,1,20,100 nmol/L蟾蜍灵分别 与1.0 μg/mL阿霉素联合作用A549细胞24,48,72 h的抑制率显著升高(均P<0.05)。蟾蜍灵和阿霉素均可在一定程度上 诱导细胞凋亡,两药联用后诱导细胞凋亡作用显著增强。蟾蜍灵和阿霉素联用可将细胞周期阻滞在S期,并上调凋亡 蛋白caspase-3的表达。结论：蟾蜍灵联合阿霉素可显著抑制A549细胞的增殖,其抗肿瘤的机制可能与诱导细胞凋亡、 细胞周期S期阻滞及凋亡蛋白caspase-3的上调有关。     

昆明山海棠总生物碱对肺腺癌A549细胞株增殖抑制作用的实验研究

目的观察昆明山海棠总生物碱(alkaloids from tripterygium hypoglaucum hutch,THHa)对人肺腺癌细胞系A549体外生长的影响.方法采用MTT比色法检测THHa对A549细胞生长的抑制作用,测定其吸光度D(490)值;用倒置和荧光显微镜观察药物作用后A549细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果随着THHa浓度的增加和作用时间的延长,A549细胞增殖受到抑制,抑制率逐渐升高,具有浓度和时间依赖性.流式细胞仪结果显示,随着处理浓度和作用时间的增加,细胞的凋亡率逐渐升高.结论THHa能明显抑制A549细胞增殖,并可诱导A549细胞凋亡.     

硼替佐米对A549细胞增殖及p21、p27表达的影响

目的研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对人肺癌A549细胞增殖、细胞周期及在体成瘤的影响。方法采用不同浓度的硼替佐米(0、100、200 nmol/L)作用于A549细胞4 h,观察其对蛋白酶体活性的影响。用硼替佐米(0、100、200 nmol/L)处理A549细胞48 h,采用MTT法、3H-TdR掺入法检测细胞增殖;流式细胞术PI染色检测细胞周期;Westernblot检测p21、p27表达水平的变化;连续注射观察硼替佐米对裸鼠A549细胞移植瘤体积及质量的影响。结果硼替佐米可显著抑制A549细胞的蛋白酶体活性。MTT法、3H-TdR法检测显示,100 nmol/L处理组细胞较对照组增殖率分别降低24.5%、29.5%,200 nmol/L处理组进一步显著下降(P<0.05);细胞周期分析显示,100、200 nmol/L处理组G0/G1期较对照组明显增加(P<0.05)。Western blot检测显示,48 h时100、200 nmol/L处理组p21、p27蛋白表达较对照组明显增加,且呈浓度依赖(P<0.05),48 h蛋白质水平高于24 h。连续注射硼替佐米后裸鼠移植瘤的质量抑制率达(36.0±12.4)%。结论硼替佐米可抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡及发生G0/G1期阻滞,在体注射可抑制裸鼠成瘤,其抗肿瘤活性可能与抑制细胞周期蛋白p21、p27的降解有关。     

Effect of Antisense RNA Targeting Polo-like Kinase 1 on Cell Growth in A549 Lung Cancer Cells

In order to investigate the effect of Polo-like kinase-1 （Plk1） depletion on cell cycle progression and cell growth in lung cancer cells, a recombinant plasmid containing antisense RNA targeting Plk1 （pcDNA3-Plk1） was transfected into A549 cells by lipofectine. RT-PCR and Western-blot were used to detect the Plk1 gene expression. Cell proliferation was evaluated by direct cell counting and bromodeoxyuridine （BrdU） labeling. Cell cycle distribution and apoptosis were examined by flow cytometry, and the inhibition rate （IR） by vinorebline （NVB） was determined by MTF assay. The results showed that after transfection of pcDNA3-Plk1 into A549 cells, the expression levels of Plk1 mRNA and protein were greatly decreased. In pcDNA3-Plk1 transfected groups, abnormal morphological changes of cells and growth inhibition were observed, and the BrdU labeling index was significantly lower than in the control groups （P〈0.05）. Cells in pcDNA3-Plk1 transfected groups were arresed in G2/M phase and apoptosis was detectable 72 h post transfection. IR induced by vinorebline in pcDNA3-Plk1 transfected groups was significantly higher than in other groups. These data suggested that antisense RNA targeting Plk1 could suppress the Plk1 expression, and therefore, significantly inhibit cell proliferation and induce cell cycle arrest and apoptosis. Moreover, it sensitized lung cancer cells to chemotherapy.     

ATRA对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其机制研究

目的探讨全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其可能的分子机制。方法ATRA处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,Western blot检测CDK4、Rb、p-ERK1/2蛋白的表达,荧光定量PCR法检测CyclinD1mRNA水平。结果ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平的作用。结论ATRA可能通过下调A549细胞p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖。