055 PI3K在T淋巴细胞活化与细胞毒效应中的作用

磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)是T淋巴细胞内重要的信号传导分子，具有促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进骨架蛋白重排、参与细胞胞吐与分泌颗粒、促进细胞间粘附等过程。PI3K的催化产物PI-3，4-P2和PI-3，4，5-P3可作为第二信使传递信号。近年来研究表明PI3K可通过激活PKB、Rac和Ca(2+)等信号途径参与T淋巴细胞的活化和细胞毒效应。     

PI3K在T淋巴细胞活化与细胞毒效应中的作用

磷脂酰肌醇 3激酶 (PI3K)是T淋巴细胞内重要的信号传导分子 ,具有促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进骨架蛋白重排、参与细胞胞吐与分泌颗粒、促进细胞间粘附等过程。PI3K的催化产物PI 3,4 P2 和PI 3,4 ,5 P3可作为第二信使传递信号。近年来研究表明PI3K可通过激活PKB、Rac和Ca2 +等信号途径参与T淋巴细胞的活化和细胞毒效应。     

PI-3K在哮喘大鼠T细胞中的表达及其与T细胞活化的相关性研究

TH2细胞过度活化产生的IL-4、IL-5等细胞因子与过敏性哮喘的产生、发展有密切关系。PI-3K是CD3途径活化TH2细胞的关键信号分子，并在T细胞的增殖和抗凋亡过程中具有极为重要的作用。已有研究表明在哮喘小鼠模型中应用PI-3K的负性调节亚基可以明显降低肺泡灌洗液中IL-4、IL-5的表达。因此，为探讨其对哮喘TH2细胞的调控作用，我们检测了哮喘大鼠T细胞内PI-3K的表达，并观察其与T细胞活化分泌IL-4是否存在一定的联系。     

白细胞介素-4对哮喘大鼠T淋巴细胞磷脂酰肌醇-3激酶表达的影响

磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)是T淋巴细胞内重要的信号转导分子,它通过催化底物磷脂酰肌醇发生磷酸化而将活化信号传人细胞内。有研究显示PI3K途径介导了生理情况下IL-4受体诱导的T细胞增殖。IL-4是否通过对哮喘T细胞PI3K通路的作用影响了T细胞的增殖目前尚不清楚。通过对IL-4处理的不同组之间T细胞PI3K表达的研究,探讨IL-4对哮喘T细胞PI3K的影响。     

P2Y嘌呤受体活化的PI-3K信号通路在前列腺癌细胞生长和侵袭中的作用

目的研究P2Y嘌呤受体激动剂对前列腺癌细胞PI-3K信号通路的激活及对肿瘤细胞生长和侵袭的影响。方法以高转移的人前列腺癌细胞系1E8为研究对象,以Western blot法,用特异性识别磷酸化Akt的抗体检测PI-3K信号通路的活化情况;以细胞计数、流式细胞术、Matrigel侵袭实验等方法检测P2Y受体激活的PI-3K／Akt信号通路在前列腺癌细胞生长和侵袭中的作用。结果P2Y嘌呤受体激动剂以时间和剂量依赖的方式激活了1E8细胞中的PI-3K／Akt信号通路。其持续刺激导致的生长抑制作用主要通过将细胞阻滞在S期实现（刺激组S期细胞分数比对照组提高22．3％）。应用特异性抑制剂LY294002阻断PI-3K通路明显影响1E8细胞的生长,但不能逆转P2Y受体介导的生长抑制作用。P2Y受体瞬时激活对前列腺癌细胞体外侵袭的促进作用主要通过增强细胞的运动能力（刺激组划痕修复率比对照组提高21．2％）,而非提高基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的酶解活性实现,且此促侵袭作用可被LY294002明显抑制。结论P2Y嘌呤受体可以激活人前列腺癌细胞的PI．3K信号通路,并通过这条通路促进肿瘤细胞的运动能力进而促进侵袭;该通路是前列腺癌细胞生长的重要调节通路,但不参与P2Y嘌呤受体对前列腺癌细胞生长抑制的调节。     

PI-3K／Akt信号传递途径与T细胞反应

PI-3K／Akt信号传递途径是T细胞最为重要的信号转导途径之一，与T细胞的增殖、分化、活化和抗病毒能力等密切相关，其功能主要表现为与CD28协同刺激信号一道促进T细胞活化；调节周期蛋白和促T细胞增殖因子等表达使T细胞周期正常进行；通过调控凋亡信号转导相关激酶活性和凋亡调控因子表达以拮抗P53、Fas等诱导的T细胞凋亡以及增强T细胞的抗病毒能力等。     

CD28协同刺激信号传导的研究进展

T细胞表面分子 CD2 8介导的协同刺激信号在 T细胞的激活、增殖、抗凋亡及促进多种细胞因子的分泌中起重要作用。有关其活化信号在 T细胞内的传导已成为免疫学研究的热点。近年的研究表明 ,CD2 8在 T细胞内可通过多种信号传导分子 ,如 PI3K、Grb2、A- SMase、PKC- θ等传导活化信号 ,亦可通过 Itk、MKP等传导活化抑制信号 ,从而调控 T细胞的活化、增殖等作用     

NGF诱导PC12细胞分化机制的研究进展

神经生长因子诱导 PC12细胞分化是一个复杂的信号调节过程 ,其中有诸多因子和信号传导途径参与NGF可通过不同信号途径诱导 PC12细胞分化。本文在 Ras/ MAPK途径、PI- 3K信号途径及细胞周期等方面的研究作一综述     

TCR/CD3介导T细胞活化的信号途径

T淋巴细胞经特异抗原刺激后，由于TCR／CD3的介导作用，使细胞骨架蛋白及核内转录因子活化，并引起细胞形态改变、生长因子分泌、细胞黏附性改变等免疫应答，使细胞发生活化或激活诱导的细胞死亡（Activation—induced cell death，AICD）。T细胞活化需要两种信号，一种是TCR／CD3与抗原提呈细胞（Antigen presenting cells，APCs）表面特异的MHC-抗原肽复合物结合产生的特异性抗原刺激信号；另一种是非特异性抗原刺激信号，如：CD2、CD28、CD80、LFA-1（Lymphocyte function associated antigen-1）和ICAM（Intercellular adhesion moleculel）等与各自相应配体结合而产生的协同刺激信号。如果只有TCR／CD3复合物存在，没有协同刺激信号参与，则不能有效地激活T细胞，而可能导致T细胞产生不应性（Anergy），甚至细胞凋亡（Apoptosis）。T细胞特异性抗原或TCR／CD3的特异性抗体可引起T细胞跨膜受体以及膜附近的其它信号分子的活化或抑制，调节T细胞的增殖、分化或凋亡，这个过程涉及一系列下游信号传导和基因表达调控。近几年对TCR／CD3近膜区的信号复合体的形成、相关信号分子的磷酸化、细胞骨架重组、NF—κB活化、以及与多个信号通路密切相关的蛋白分子，如PI-3K和PKCθ等，在信号通路中的作用有了更深刻的了解，本文就这方面的进展作一简要综述。     

PI3K在TCR和CD28协同激发的γδT细胞活化信号转导中的作用

目的 探讨CD28协同结核杆菌（M.tb)低分子多肽激活人外周血γδ^ T细胞时，其胞内信号的传递经过磷酸肌醇3激酶（PI3K）的介导作用。方法 用激发型抗CD28单抗模拟第二信号，与M.tb抗原一起刺激纯化的T细胞，同时用特异性PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K的活性，用流式细胞仪分析γδ^ T细胞上CD69分子的表达及γδ^ T细胞的增殖效应。结果 随着LY294002浓度的增加，γδ^ T细胞表面CD69分子的表达率降低，其增殖效应亦被不同程度地阻断。结论 抗CD28单抗可协同M.tb抗原激活γδ^ T细胞，綦知化信号在γδ^ T细胞内的转导经过PI3K的介导。     

胶质细胞源性神经营养因子/PI3K/AKT通路参与电针促进面神经压榨损伤模型兔的面神经再生

文题释义： 胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor，GDNF)：是于1993年发现的由二硫键结合的同源二聚体蛋白质，含有134个氨基酸，分子质量为33-35 kD，是神经营养因子中的一种，属于转化生长因子超家族的远系成员，在全身各组织中均有表达，尤其在中枢神经系统内分布较广，具有显著的提高多巴胺能神经元存活与分化、抑制运动神经元凋亡、营养外周神经元、调整细胞间信息等作用。 PI3K：是由Sugimoto和Macara等(1984)发现的一种胞内磷脂酰肌醇激酶，由一个催化亚基(110 kD，p110 )和一个调节亚基(85 kD，p85 )构成，可特异地使肌醇环上的3位羟基磷酸化，其产物是在3位上有磷酸根的多磷酸肌醇脂，包括3，4-二磷酸磷脂酰肌醇(PI-3，4-P2)和3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PI-3，4，5-P3)等，它们都是位于质膜上的第二信使。PI3K是许多生命活动中关键的信号分子，PI3K介导的信号转导通路调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动。 背景：多穴位电针治疗周围性面瘫的机制不明。胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor，GDNF)是促进体外运动神经元存活的最有效因子，PI3K/AKT信号通路在保护受损神经元方面发挥着重要作用。目前暂没有GDNF/PI3K/AKT通路参与电针促进兔周围面神经再生的研究。 目的：观察电针对周围面神经压榨损伤后再生的影响，并从GDNF/PI3K/AKT介导的信号通路角度探讨电针对面神经元的保护机制。 方法：成年健康新西兰大白兔由西南医科大学动物实验中心提供，随机分成正常组和模型组。模型组制备右侧面神经颊支压榨性损伤的病理模型，造模成功后随机分为模型对照组和电针组，模型对照组自然康复，电针组取右侧翳风、颊车、四白、地仓、阳白、颧髎穴位进行电针治疗，1次/d，每次30 min。观察动物面瘫症状的改善情况并进行评分；正常组直接取材，模型组分别于术后 1，4，7，14，28 d取含面神经元的脑桥组织，进行苏木精-伊红染色观察神经元形态，尼氏染色观察尼氏小体，免疫组化测定GDNF的阳性表达，Western blotting检测3组各时间点面神经元组织中GDNF、PI3K、AKT、P-AKT的蛋白表达。实验方案经西南医科大学动物伦理学委员会批准，批准号为20170120001。 结果与结论：①与模型对照组相比，电针组动物的面瘫症状(患侧口角歪斜下垂，触须倒伏且运动减弱，眼睑上抬不能)恢复较快且完全；②电针组面神经元形态学改变、尼氏体变化均较模型对照组病理变化轻；③术后各时间点，面神经元GDNF免疫反应较强，阳性细胞数多于模型对照组(除术后1 d，其余各时间点P < 0.001)，且面神经元组织中GDNF、PI3K和P-AKT蛋白表达明显增高(P < 0.05/0.01/0.001)。提示：电针可有效治疗由压榨面神经颊支引起的周围性面瘫，促进面神经元形态恢复，其面神经元保护机制可能与上调GDNF在面神经元中的表达，激活PI3K/AKT信号通路有关。 ORCID: 0000-0002-9531-7400(李雷激) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程     

PI-3K/Akt信号传递途径与T细胞反应

PI 3K/Akt信号传递途径是T细胞最为重要的信号转导途径之一 ,与T细胞的增殖、分化、活化和抗病毒能力等密切相关 ,其功能主要表现为与CD2 8协同刺激信号一道促进T细胞活化 ;调节周期蛋白和促T细胞增殖因子等表达使T细胞周期正常进行 ;通过调控凋亡信号转导相关激酶活性和凋亡调控因子表达以拮抗P5 3、Fas等诱导的T细胞凋亡以及增强T细胞的抗病毒能力等。     

Ghrelin活化人T细胞翻译起始分子通过mTOR信号转导通路

目的:探讨Ghrelin活化人T细胞翻译起始分子的信号转导机理。方法:采用微柱法分离人外周血T细胞,采用Western blot方法检测mTOR信号通路分子和蛋白质翻译调控分子的磷酸化状态和含量。采用mTOR抑制剂:雷帕霉素,PI3KⅠ抑制剂:LY294002,PI3KⅢ抑制剂:3-甲基腺嘌呤,Ghrelin拮抗剂:Des-Lys-3-GHRP6和AKT抑制剂:A443654和Ghrelin研究相应信号通路。结果:①人T细胞表面有Ghrelin受体(GHSR1a)表达。②Ghrelin与GHSR1a结合后可活化mTOR。③Ghrelin磷酸化两个mTOR下游靶分子4E-BP-1和P70 S6K,P70 S6K进一步磷酸化核糖体S6蛋白。④Ghrelin磷酸化蛋白质翻译起始帽子结构的两个重要分子eIF4E和eIF4G。结论:Ghrelin促进人T细胞mRNA翻译起始的机理是活化mTOR信号转导通路。     

NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白

目的:研究NADPH氧化酶4(NOX-4)调控PI3K信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的作用及分子机制。方法:体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class I催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓(DPI)预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class I催化亚基表达和PI3K信号通路活化。结果:TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class I催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化。NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen Ⅰ表达升高;抑制NOX-4并不影响TGF-β1诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度。结论:NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen Ⅰ的分子机制。TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen Ⅰ的表达中发挥了调控作用。     

NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达I型胶原蛋白

 目的：研究NADPH氧化酶4（NOX-4）调控PI3K信号通路在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导肺癌细胞表达I型胶原蛋白（collagen I）的作用及分子机制。方法：体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen 家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class I催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓（DPI）预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后 collagen I的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class I催化亚基表达和PI3K信号通路活化。结果：TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和collagen I的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class I催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化。NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen I表达升高;抑制NOX-4并不影响TGF-β1诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度。结论：NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen I的分子机制。TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen I的表达中发挥了调控作用。     

Notch信号通路与T淋巴细胞发育

Notch信号通路在器官、细胞发育及肿瘤发生等病理生理过程中起重要作用。近年研究表明，Notch信号通路尤其是Noteh1对T淋巴细胞发育的各个阶段均有作用。Notch1能促进进入胸腺的淋巴样前体细胞向T淋巴细胞分化，抑制其向B淋巴细胞分化，并使T淋巴细胞表达TCRαβ，促进前T细胞向αβT细胞发育。此外，Notch1信号的活化可促进CD4^ CD8^ 双阳性胸腺细胞向CD8^ 单阳性细胞分化。本文综述了Notch信号通路的组成、活化，及其在T淋巴细胞发育中的作用。     

PI3K-ERK信号在胰岛素诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的： 探讨胰岛素促血管平滑肌细胞增殖的分子机制。方法: 原代培养的SD大鼠血管平滑肌细胞为研究对象,［3H］-TdR掺入实验观察胰岛素刺激后血管平滑肌细胞的增殖,免疫印迹分析PI3K－ERK信号在平滑肌细胞增殖中的作用。结果: 胰岛素明显促进血管平滑肌细胞增殖,该作用呈现剂量依赖性关系,PI3K抑制剂LY294002、MAPK抑制剂PD98059可抑制胰岛素的促增殖作用,［3H］-TdR掺入分别下降48.8%、43.6%,抑制PI3K可下调胰岛素刺激的磷酸化ERK1/2蛋白表达和ERK活性,分别下降112％、127％。结论: PI3K－ERK1/2信号通路参与了胰岛素促平滑肌细胞增殖过程。     

脂多糖调控PD-L1介导树突状细胞免疫麻痹的机制研究

目的探讨细菌脓毒症所致免疫麻痹中脂多糖(LPS)调控树突状细胞(DCs)免疫共抑制分子PD-L1表达的潜在机制。方法采用流式细胞术、免疫荧光技术检测细菌脂多糖对树突状细胞PD-L1表达的影响。采用BrdU细胞增殖实验和γ-干扰素酶联免疫斑点实验分别检测脂多糖所致树突状细胞PD-L1表达对抗原特异性T细胞增殖反应及细胞毒性T细胞反应的影响。通过PD-L1封闭抗体和PI3K抑制剂LY294002分别探究PD-L1分子和PI3K-Akt信号在细菌LPS调控树突状细胞(DCs)免疫麻痹中的作用。结果 LPS显著上调DCs免疫共抑制分子PD-L1表达,并抑制DCs介导的T淋巴细胞免疫反应(P0.000 1)。LPS显著激活DCs的PI3K和AKT信号。PI3K抑制剂LY294002显著降低LPS所致PD-L1的高水平表达。PD-L1封闭抗体和抑制剂LY294002均能显著逆转细菌内毒素LPS诱导的DCs抗原特异性T淋巴细胞免疫反应的抑制现象(P0.000 1)。结论细菌脂多糖所致树突状细胞免疫共抑制分子PD-L1的高表达引起细菌脓毒症中T细胞免疫反应低下的麻痹现象。阻断PD-L1或阻断PI3K-AKT信号有助于改善脂多糖所致PD-L1高表达介导的树突状细胞免疫麻痹。     

PI3K/AKT信号通路与艾滋病相关的研究进展

PI3K/AKT信号通路不仅在众多肿瘤疾病的发生发展中发挥重要作用,其在艾滋病(AIDS)的相关研究中也具有重要作用.通过对近年来与AIDS相关的PI3K/AKT信号通路的研究进行检索、整理,发现PI3K/AKT信号通路不仅对HIV-1的各种靶细胞,包括单核-巨噬细胞、胶质细胞、淋巴细胞、树突状细胞等的感染发挥重要作用...     

PTEN基因对T细胞生物活性影响的研究进展

PTEN基因能够影响T淋巴细胞的一系列生物学功能,尤其在生长、发育、增殖、分化、活化以及细胞因子分泌等方面.PTEN作为抑癌基因已被大家熟知,可以直接拮抗PI3K信号.然而PTEN基因的改变常常导致T细胞应答的异常甚至自身免疫性疾病以及T细胞恶性肿瘤的发生.通过对T细胞特异性缺失PTEN的小鼠模型分析,可使PTEN参与调节不同阶段T细胞信号功能以及在T细胞恶性肿瘤的发生过程中发挥的作用更加清晰明了.因此,对PTEN在T细胞中的作用进行研究具有重要的意义.