游泳池肉芽肿皮损中分离出海分支杆菌的报告

目的　报告一例从游泳池肉芽肿患者皮肤组织标本中分离出一株海分支杆菌。方法 标本的分离培养采用碱处理后接种酸L—J培基,置28℃和37℃两种条件下培养;药物敏感性测定采用绝对浓度法;菌种鉴定采用形态学观察、鉴别培基(PNB、TCH、5%NaCl、葡萄糖琼脂、麦康盖琼脂)的鉴别及细胞生物化学反应的方法进行鉴定。结果 该菌株在28℃中的生长明显优于37℃培养;并对INH、SM耐药,对RFP、EM敏感;经光照后可产生明显的黄色色素,耐热触酶(+),硝酸还原(-)。结论 根据鉴定结果,确定其为海分支杆菌。     

丙酮酸钠对促进牛型结核菌生长的研究

本文报道应用丙酮酸钠(丙培基)和改良罗氏(罗培基)两种培养基,对牛型结核菌进行分离培养比较和菌型鉴别研究。结果:1571头牛中的214份标本丙培基阳性20份(9.4%)、罗培基阳性7份(3.27%),差异有显著性。12株菌型鉴别;人型2株、牛型5株、戈登氏及淋巴结核分枝杆菌各2株、未定型1株。该7株结核菌皆在丙培基上单独生长。证实丙酮酸钠有促进生长作用。在结核病细菌学诊断、流行病学调查、以及人、牛结核相关的研究,均有重要意义。 。     

溶血离心培养法检测肺结核患者外周血分支杆菌？…

目的 建立一种自血液中分离分支杆菌及其Ｌ型的新方法。方法 肺结核患者的外周血直接或溶血离心后取沉淀种入９２－３ＴＢ和９２－３ＴＢＬ液体培养基培养，培养物用免疫酶染色（ＡＢＣ法）鉴定。结果 ６５份标本分支杆菌和分支杆菌Ｌ型血培养的阳性率、总检出率分别为１５％、２６％、３２％；溶血离心培养法的阳性率明显高于直接培养法（Ｐ〈０．０５）；相应痰培养中，抗酸杆菌和抗酸菌Ｌ型的阳性率、总检出率分别为３８％、２     

母牛分支杆菌菌苗在难治性肺结核治疗中的作用

观察和评价母牛分支杆菌菌苗的在难治性肺结核免疫治疗中的疗效及安全性。方法采用随机配对分组法将９０例菌阳难治性肺结核患者分入微卡菌苗治疗组（Ｍ组,２８例）和对照组（Ｃ组,２８例）,另设自身对照组（Ｓ组,３４例）。Ｍ组化疗６个月加用微卡菌苗治疗６个月,Ｃ组化疗６个月,不用微卡菌苗。     

BACTEC法检测分支杆菌的临床应用分析

本文对１９９３年４月～１９９４年５月间３００份临床标本的检测结果进行分析。结果：分支杆菌检测阳性率２５．０％，培养阳性平均报告时间为８．４天，两周内报告阳性的病例占８１．４％；污染率为４．０％。在检出的７５株分支杆菌中结核分支杆菌占６８株（９０．７％），非结核分支杆菌７株（９．３％），平均报告时间为４．２天。药敏试验采用最低抑菌浓度法，其平均报告时间为４．６天，本文结果表明ＢＡＣＴＥＣ法快速检测分支杆菌与常规法相比具有初代分离率高、快速、简便、易于操作及质控等特点，是目前分支杆菌快速培养、鉴定和药敏试验的优选方法。     

鉴别人型及牛型结核分支杆菌的方法比较

本文对４４７株结核分支杆菌，用ＴＣＨ鉴别培养基、硝酸还原和烟酸试验３种方法进行人型及牛型结核分支杆菌的鉴别比较，３种方法的鉴别结果有明显统计学差异，（Ｐ＜０．０５～０．０１）。提示应用一种方法进行鉴别的准确性不可靠。因此，鉴别时，可使用ＴＣＨ鉴别培养基和烟酸试验两种方法，当结果不一致时应补作硝酸还原试验。这样可提高鉴别的可靠性。     

耐多药结核分支杆菌三种耐药基因检测

报道聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法检测耐多药结核分支杆菌ｒＰＯＢ、ｒＰＳＬ和ＫａｔＧ基因突变情况。材料和方法（１）菌株：结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ参考菌株购自中国菌种保存中心；１０２株结核分支杆菌临床分离株取自本市肺结核患者，常规进...     

结核分支杆菌与非结核分支杆菌快速鉴别的实验研究

目的 探讨提供一种从菌种水平快速检测和鉴别分支杆菌的方法。方法 应用三对分别对应于分支杆菌(分子量65000)表面抗原、结核分支杆菌插入序列IS6110及人类β-珠蛋白基因的部分序列的特异性寡核苷酸引物对受试菌种及临床标本中的DNA进行多重PCR扩增，其扩增产物分别为439bp、268bp及123bp，并对439bp进行BstE Ⅱ和Hae Ⅲ两种限制性内切酶消化，同时，将135例临床标本进行培养、涂片，和多重PCR联合限制性片段长度多态性分析(mPCR-RFLP)检测。结果 mPCR-RFLP方法可将12种受试的标准菌种分别区分到种及亚种水平。本方法在临床实验中亦体现出较高的灵敏性及特异性。结论 mPCR-RFLP分析是对结核分支杆菌与非结核分支杆菌进行菌种分类鉴定的一种快速有效的方法。     

ahpC基因突变与结核分支杆菌耐异烟肼的研究

目的了解我国结核分支杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ａｈｐＣ编码基因及其启动子突变情况，研究其与ＩＮＨ耐药关系。方法通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法分析６２株结核分支杆菌临床分离株ａｈｐＣ及其启动子基因。以Ｈ３７ＲＶ标准株为对照。结果３２株结核分支杆菌药物敏感株ａｈｐＣ及其启动子基因ＳＳＣＰ均泳动正常；３０株耐ＩＮＨ分离株ａｈｐＣ编码基因ＳＳＣＰ也未见异常；１２株高度耐ＩＮＨ分离株中，５株ａｈｐＣ启动子ＳＳＣＰ泳动异常；１８株低度耐ＩＮＨ分离株的ａｈｐＣ启动子泳动正常。结论结核分支杆菌ａｈｐＣ编码基因与耐ＩＮＨ无关；ａｈｐＣ启动子突变是结核分支杆菌ｋａｔＧ改变、过氧化氢酶缺乏的代偿性变化，也许能作为结核分支杆菌高度耐ＩＮＨ的间接指标。     

左氧氟沙星等四种氟喹诺酮类药物对四种革兰阴性杆菌的体外抗 …

氟喹诺酮类药物在我国合成并用于临床已经10余年,新品种不断问世,为了解近期革兰阴性杆菌对该类药物的敏感性,我们对1998年临床分离的4种细菌进行了体外抗菌活性测定。一、材料和方法1细菌来源:1998年临床分离菌,取自患者血、尿、粪便、痰、骨髓等标本。2抗菌药物:左氧氟沙星(ＬＶＬＸ)、环丙沙星(ＣＰＬＸ)、氧氟沙星(ＯＦＬＸ)、氟罗沙星(ＦＬＸ),标准品购自中国药品生物制品检定所。3方法:测定抗菌药对革兰阴性杆菌的最小抑菌浓度(ＭＩＣ),采用琼脂平皿双倍稀释法,ＭＨ琼脂培养基,多点接种器接种,大肠杆菌ＡＴＣＣ25922为质控菌。二、结…     

PCR—SSCP方法用于痰标本中结核分支杆菌rpoB基因突变检测

本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法直接检测痰标本中结核分支杆菌ｒｐｏ基在变，评价此方法用于结核分支杆菌利福平耐性试验的意义，以期建立一种直接检测分支杆菌耐利福平的快速方法。本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析了３０例结核病人和２０例非结核性肺部疾病病人痰标本。３０份肺结核病人的痰用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测痰中结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变：２１份痰ＰＣＲ扩增阳性，其中１３份ＳＳＣＰ图谱与参考株Ｈ３７ＲｖＳＳＣＰ图谱有     

结核病房空气中结核分支杆菌检测方法研究

目的探索空气中结核分支杆菌检测的有效方法。方法选用ＬＷＣ－Ⅰ型空气微生物采样器，对菌阳肺结核病房进行空气采样，３０份采样标本分别用不同方法检测结核分支杆菌。结果聚合酶链反应（ＰＣＲ）阳性１４份，阳性率４７％；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交阳性１８份，阳性率６０％；动物接种实验组３０只豚鼠有２只结核分支杆菌培养阳性，另１只病理组织学检查阳性，而对照组１０只豚鼠脏器培养及病理组织学检查全部阴性；罗氏培养和ＢＡＣＴＥＣ快速培养均呈阴性。结论用空气采样的方法进行空气中结核分支杆菌的监测是可行的。ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交最敏感，动物实验也可提供有意义的参考。     

分支杆菌快速分离培养技术研究进展

近１０余年来,分支杆菌感染尤其是结核病的发生率在发达国家呈上升趋势,且仍然是发展中国家严重的公共卫生问题。分支杆菌诊断技术的发展远远不能满足临床实验室的需要。传统培养技术如Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ－Ｊｅｎｓｏｎ（Ｌ－Ｊ）和Ｍｉｄ－ｄｌｅｂｒｏｏｋ琼脂固体培养基虽可直接获取培养结果,但其敏感性不高且耗时较长。分子生物学方法用于临床诊断分支杆菌仍在探索和研究中。近２０年发展起来的半自动放射性ＢＡＣＴＥＣ４６０快速检测结核分支杆菌系统可在短时间内分离培养出分支杆菌,但其操作复杂费时,价格较为昂贵,且存在放…     

结核分支杆菌链霉素耐药基因的检测

目的了解结核分支杆菌链霉素（Ｓｍ）耐药基因突变情况，建立快速检测耐药突变株的方法。方法通过聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析了２２株结核分支杆菌临床分离株的ｒｐｓＬ基因，并应用ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）进一步分析其突变的部位和性质。结果以Ｈ３７Ｒｖ标准株为对照，５株敏感株的ｒｐｓＬ基因未见ＳＳＣＰ泳动异常、有ＭｂｏⅡ酶切位点；１３株耐Ｓｍ株中，１１株（８６％）有ｒｐｓＬ基因泳动异常、无ＭｂｏⅡ酶切位点；４株耐其它抗结核药物株中，也有１株ＳＳＣＰ泳动异常、并无ＭｂｏⅡ酶切位点。结论大多数结核分支杆菌Ｓｍ耐药分离株有ｒｐｓＬ突变，而突变位点大多位于第４３位密码子。应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰ可能成为快速检测结核分支杆菌耐药突变株的新方法。     

利用7H12B液体培养基快速鉴别人型和牛型结核分支杆菌

应用含ＴＣＨ１μｇ／ｍｌ的７Ｈ１２Ｂ培养基检测人型和牛型参比株各１株，１３种常见非结核分支杆菌参比株各１株，临床标本检出的１５６株结核分支杆菌，１２株非结核分支杆菌。结果与含ＴＣＨ５μｇ／ｍｌ的罗琼氏培养基鉴定结果完全一致，且所需时间明显缩短，仅需２～４天。     

588株分支杆菌菌鉴定

本文对５８８例肺结核病人痰标本进行分离培养，鉴定出８种分支杆菌菌株，其中人型结核分支杆菌占９２．３％；牛型结核分支杆菌占３．４％；非典型占４．３％。１例胞内分支杆菌病。     

尿液抗原及唾液抗体在包虫病免疫学诊断中的应用

１研究对象与方法１．１对象由新疆吉木乃县卫生防疫人员组织，在牧区随机抽取４０１人，对每个被检者询问既往包虫病史，逐一填写调查表，井用Ｘ线胸部透视和Ｂ超腹部检查的方法进行体检，查出包虫病人２８例，患病率为６．９８％。此外，每人采集唾液ＺｍＬ，尿液ｓｍＬ。１．２方法夹心法测抗原按参考文献＊'进行，１：３２００的ＭＣＡｂ１００ＰＬ包被，置４Ｃ过夜，用ＰＢＳ-Ｔ洗涤４次，加待测标本１００ｐＬ置３７ｔ，Ｚｈ，同上洗板，加１：２００的ＨＲＰ-ＭＣＡｂ，置３７Ｃ，Ｚｈ，再洗板，加底物ＯＰＤ置３７Ｃ，３０ｍｉｎ，…     

聚合酶链反应－冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌rpoB基因突变

目的评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应－冷单链构象多态性（ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ）方法对８７株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性为１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，属于分支杆菌特异。所有分离菌的ｒｐｏＢ基因ＰＣＲ扩增均为阳性。采用套式ＰＣＲ可使扩增敏感性提高１００倍。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ对８７株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为８９．６％及１００％。２２份涂阳培阳痰标本中套式ＰＣＲ扩增阳性的６份均为高度利福平耐药，其ＳＳＣＰ结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变快速、简便、易行，适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性，该技术可望用于临床标本直接检测     

聚合酶链反应－单链构象多态性用于耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的研究

目的研究结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变及其与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析了４０株结核分支杆菌临床分离株。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法由ＰＣＲ扩增和扩增产物ＤＮＡ单链多态性分析组成。结果两对引物ＰＣＲ扩增产物分别为４１１和２５８ｂｐ，其敏感性分别为５ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ和１ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ；均为属特异性。４０株结核分支杆菌临床分离株２５８ｂｐ扩增片段ＳＳＣＰ图谱的特点：以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，１０株敏感株均无区别；单耐ＲＦＰ或包括ＲＦＰ多种抗结核药３０株，除３株外，其余２７株ＳＳＣＰ图谱有明显的区别；检测阳性率为９０％，特异性为１００％。结论ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可检测出耐ＲＦＰ结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变；该基因是ＲＦＰ的药物靶编码基因，它的突变与ＲＦＰ耐药性有密切关系，这有助于结核分支杆菌耐药性的快速检测和研究     

43例肺科病人痰BACTEC法培养结核分支杆菌时污染菌种的分析

目的　探讨肺科病人痰BACTEC法培养污染菌种分布特点,以期更好地控制污染,降低污染率。方法 对1997年10月至1999年1月收治的650例肺科病人痰标本BACTEC法培养污染标本,用常规普通细菌培养鉴定方法进行分离鉴定,并对结果进行分析。结果 650例肺科病人痰BACTEC法培养标本中,污染43例,总污染率为6.6%(43/650)。对43例污染标本进行普通细菌培养鉴定,共分离出12种菌株,其中4例培养出2～3种菌株,共得48株。以枯草杆菌和微球菌为主,分别为16株(33.3%),9株(18.8%)。另外,还分离出金黄色葡萄球菌6株(12.5%),白色念珠菌3株(6.2%)以及革兰阴性杆菌14株(29.2%),且分为7种细菌。结论 (1)实验室污染仍为主要污染源,应加强严格的无菌操作。(2)革兰阴性杆菌、金黄色葡萄球菌及白色念珠菌共占到47.9%(23/48),提示与肺部感染及口咽部病原菌污染有关^[1],建议临床加强肺部炎症控制。