导入Rb,p53,p16和H—ras反义RAN对人胃癌细胞恶性增殖的影响

构建Ｒｂ，ｐ１６，ｐ５３，Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体，利用脂质体介导和病毒感染的方法将其分别转入－存在Ｒｂ基因部分缺失，ｐ１６低表达，ｐ５３缺失和Ｈ－ｒａｓ点突变的胃癌细胞系。观察这些基因对该细胞生长及致瘤性的影响，探讨肿瘤相关基因在人胃癌发生，发展过程中的作用。     

食管癌Rb基因启动子甲基化状态和甲基苄基亚硝胺对其影响的研究

目的分析Ｒｂ基因表达异常原因,研究Ｒｂ基因启动子甲基化状态和甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）对Ｒｂ基因启动子的影响。方法采用限制性核酸内切酶酶切和ＰＣＲ扩增方法。结果３３．３％的食管癌组织Ｒｂ基因启动子存在ＭｓｐⅠ型高甲基化,４０．０％的食管癌组织Ｒｂ基因启动子存在ＨｐａⅡ型高甲基化。１例标本存在ＭｓｐⅠ和ＨｐａⅡ两种类型的高甲基化。恒河猴１次灌喂３０ｍｇ／ｋｇＮＭＢｚＡ后１,２,３天,其食管上皮Ｒｂ基因启动子ＨｐａⅡ、ＭｓｐⅠ类型甲基化逐渐增强;第５天其Ｒｂ基因启动子ＨｐａⅡ、ＭｓｐⅠ类型甲基化程度明显下降。结论食管癌组织中Ｒｂ基因表达异常可能与启动子高甲基化有关,ＮＭＢｚＡ通过启动子甲基化对Ｒｂ基因调控产生影响。     

人骨肉瘤中的Rb和p53基因mRNA的表达

目的：研究Ｒｂ和ｐ５３基因与国人骨肉瘤的关系。方法：用原位杂交技术检测Ｒｂ和Ｐ５３基因ｍＲＮＡ在３０例国人骨肉瘤标本中的表达。结果 ＲｂｍＲＮＡ阳性１６例，阴性１４；Ｐ５３ｍＲＮＡ阳性１５例（５０％），阴性１５例（５０％）。此外，骨肉瘤中Ｒｂ和ｐ５３ｍＲＮＡ表达呈正相关。结论：Ｒｂ和ｐ５３基因异常与骨肉瘤发生有关。     

E1A与凋亡的关系及其对肿瘤放射敏感性的影响

在我国约 70 %的肿瘤患者需要放射治疗 ,但是 ,放射治疗对多数肿瘤的可治愈性仍然较低。为了提高肿瘤的放射可治愈性 ,人们就如何提高肿瘤的放射敏感性进行了大量探索。随着分子生物学的发展 ,人们越来越多的认识到 ,肿瘤的放射敏感性与其内在的分子生物学机制密切相关。目前 ,已发现许多癌基因和抑癌基因的异常表达或过度表达可影响肿瘤细胞的程序性死亡、放射敏感性和预后 ,如 ｐ5 3基因的状态、Ｒｂ基因的表达状态、核转录因子ＮＦ κＢ以及外源性基因Ｅ1Ａ等。但是 ,有些基因与肿瘤的放射敏感性和预后的确切关系还不清楚。因此 ,有必要…     

腺病毒介导HSV-tk联合野生型p53 基因对直肠癌细胞的杀伤作用

应用自杀基因治疗肿瘤是一种有效的手段和方法 ,但ｐ53基因突变的肿瘤细胞可以对抗自杀基因转换前药对瘤细胞的杀伤作用。为克服突变ｐ53对自杀基因杀伤作用的影响 ,我们用腺病毒介导单纯疱疹病毒编码的胸苷激酶 (ＨＳＶ ｔｋ)基因和人野生型ｐ53基因共转染ＳＷ83 7直肠癌细胞 ,该细胞ｐ53基因第 2 4 8密码子发生了突变 ,观察ＨＳＶ ｔｋ/ＧＣＶ系统和ｐ53基因联合对肿瘤细胞的杀伤作用。将ＨＳＶ ｔｋ、人野生型ｐ53ｃＤＮＡ插入ｐＡｄＣＭＶ Ｌｉｎｋ1穿梭质粒多克隆位点 ,构建ｐＡｄＣＭＶ Ｌｉｎｋ1 (ｔｋ/ｐ53 ) ,ｐＡｄＣＭＶ Ｌｉｎ…     

胃癌组织中p16、p53、Rb和增殖细胞核抗原的表达与临床病理特征的关系

目的：研究胃癌中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ蛋白及ＰＣＮＡ表达与临床病理的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法对６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ和ＰＣＮＡ进行检测。结果：６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ和ＰＣＮＡ进行检测。结果：６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ蛋白和ＰＣＮＡ表达阳性率分别为６３．５％、６０．３％、６５．６％和７１．４％。ｐ１６蛋白阳性表达随着肿瘤分化程序降低、恶性程度增加和浸润深度的     

多种肿瘤抑制基因在视网膜母细胞瘤中存在状态的研究

目的 深入研究视网膜母细胞瘤（ＲＢ）内多种肿瘤抑制基因的存在状态。方法 综合利用ＳＳＣＰ分析、ＤＮＡ序列测定以及多重ＰＣＲ等技术,检测分析ＲＢ肿瘤内Ｒｂ、ｐ５３,ｐ１６,ｐ１５及ｐ１２等肿瘤抑制基因是存在缺失与点突变。结果 约７４％的ＲＢ肿瘤有Ｒｂ基因点突变,１６％显示,ｐ１６基因缺失,但ｐ５３及ｐ２１基因除多态性外未检测到真正的点突变。结论 ＲＢ的发病和病变的进展主要是由于以Ｒｂ基因为核心的代谢     

Rb2／p130与肺癌

ｐＲｂ蛋白家族 (ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａｐｒｏｔｅｉｎｆａｍｉｌｙ)又称口袋蛋白家族 (ｐｏｃｋｅｔｐｒｏｔｅｉｎｆａｍｉｌｙ) ,由三个成员组成 :视网膜母细胞瘤易感基因 (Ｒｂ)的产物Ｒｂ/ｐ10 5、ｐ10 7和Ｒｂ2 /ｐ13 0。人类Ｒｂ2 /ｐ13 0基因由 3 85 3个核苷酸构成 ,包含一个编码 113 9个氨基酸的可读片断 ,分子量 13 0× 10 3ｕ ,有 2 2个外显子 ,位于 16ｑ12 .2 [1 ] 。国外资料显示Ｒｂ2 /ｐ13 0是一个典型的抑癌基因 ,在人体内的各种正常组织中具有广泛的表达 ,与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本文将对Ｒｂ2 /ｐ13 0…     

外源性p16基因表达可抑制人胃癌细胞的恶性增殖

目的探讨ｍｔｓｌ／ｐ１６基因在肿瘤发生发展过程中的作用及在临床基因诊断和基因治疗中的应用前景。方法构建ｍｔｓｌ／ｐ１６基因的表达载体并导入表达水平下调的ＰＡＭＣ８２细胞,用ＰＣＲ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、ｍＲＮＡ原位杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交对获得Ｇ４１８抗性的细胞进行外源性ｍｔｓｌ／ｐ１６基因整合及表达的鉴定。对导入外源性ｐ１６基因的细胞进行裸鼠致瘤能力及病理学特性分析。结果转染ｐ１６基因的ＰＡＭＣ８２细胞（命名为ＰＡＭＣｐ１６）有外源性ｍｔｓｌ／ｐ１６基因的整合及表达,在裸鼠中的致瘤性显著降低。肿瘤组织病理分析结果显示,ＰＡＭＣｐ１６细胞形成的肿瘤,其分化程度优于ＰＡＭＣ８２细胞。结论导入外源性ｍｔｓｌ／ｐ１６基因可抑制肿瘤细胞的恶性增殖和促进细胞分化。     

食管癌组织多种肿瘤抑制基因微卫星多态位点的杂合丢失和不稳定

目的：研究ｐ５３,ｐ１６,Ｒｂ,ＤＣＣ,ＡＰＣ等多种已知抑癌基因在食管癌组织中的缺失及与临床病理的关系。方法：采用ＰＣＲ银染技术,检测高发区３６例配对的食管癌标本１４个微卫星ＤＮＡ多态位点的杂合丢失和不稳定性。结果：分别与ｐ５３,ｐ１６及Ｒｂ连锁的Ｄ１７Ｓ２６１,Ｄ９２Ｓ１６２,Ｄ９２Ｓ１７１,ＩＦＮＡ和Ｄ１３Ｓ１７０均有高频率的杂合丢失;两个以上的位点异常者占８６％,ｐＴＮＭⅢ期患者微卫星ＤＮＡ     

p73基因研究进展

人们在研究中发现癌基因和抑癌基因多以家族形式存在 ,例如ｍｙｃ家族的ｃ ｍｙｃ ,Ｎ ｍｙｃ和Ｌ ｍｙｃ ,Ｒｂ家族的ｐ10 7及ｐ130。ｐ5 3作为广泛存在的、与人类恶性肿瘤相关性最高的抑癌基因 ,是否具有家族中的其它成员呢 ?1997年 ,Ｋａｇｈａｄ等报道发现了一个新基因—ｐ73[1] 。ｐ73基因的表达产物ｐ73蛋白与ｐ5 3蛋白功能上相似 ,序列上具有同源性。因此 ,ｐ73作为ｐ5 3基因家族的一个新成员 ,作为候选的抑癌基因 ,受到人们的广泛关注。一、ｐ73的定位、结构和表达　 1997年 ,法国科学家Ｋａｇｈａｄ在胰岛素信号中介体 (ＩＲＳ 1)…     

抑癌基因p16与肿瘤

 近几年来 ,随着分子生物学技术的迅速发展 ,细胞增殖周期及其调控机制的研究有了长足的进展。越来越多的证据表明 ,细胞周期调节失控是肿瘤发生的重要机制 ,细胞增殖周期受细胞周期素依赖激酶(ＣＤＫｓ)调节 ,ＣＤＫｓ与细胞周期素 (ｃｙｃｌｉｎｓ)结合后被活化 ,促进细胞增殖 ,ＣＤＫｓ受到其抑制因子 (ＣＤＫＩｓ)的作用而失活 ,阻止细胞的分裂。细胞周期素Ｄ和ＣＤＫＩｓ表达异常均可导致肿瘤发生。在已知的ＣＤ ＫＩｓ中 ,ｐ16做为一种新型的抑癌基因 ,受到人们的广泛重视。它直接作用于细胞周期抑制细胞分裂 ,形成对“ＣＤＫ4 ｃｙｃｌｉｎＤ Ｒｂ Ｅ2Ｆ”环路的负反馈调控。一旦ｐ16基因发生变异 ,上述环路将无限止进行下去 ,最终导致肿瘤发生。本文就细胞周期及其分子调节机制以及抑癌基因 ｐ16与肿瘤发生的关系做一综述。1　ｐ16抑制肿瘤生长的分子生物学证据　　 1992年 ,Ｔｒａｖｉｓ等人在研究寻找皮肤黑色素瘤的易感基因时 ,发现染色体 9ｐ2 1区位存在一个等位基因丢失和另一个存留等位基因突变 ,常伴有相邻区域的杂合性丢失 ,推测此区域至少是一种多肿瘤抑制基因的所在地 ,此区的突变在很多种肿瘤中都存在。随后...     

胃癌及大肠癌Rb、p53基因改变及临床意义

作者采用ＰＣＲ方法对１７例胃癌、２２例大肠癌及癌旁组织ｐ５３及Ｒｂ基因进行了检测。胃癌及大肠癌ｐ５３扩增阴性率分别为６４．７１％、４５．４５％；胃癌及大肠癌Ｒｂ扩增阴性率分别为３５．２９％、４０．９１％。胃癌及大肠癌的癌旁组织，其ｐ５３及Ｒｂ扩增均有一定的阴性率。检测结果说明ｐ５３、Ｒｂ基因变化出现在胃癌、大肠癌早期。     

NMBzA对人胎儿食管上皮组织中多种抑癌基因作用的研究

流行病学研究表明，食管癌与环境中亚硝胺致癌物有密切关系。为了从分子水平阐明亚硝胺致癌物诱发食管癌癌变机制，作者应用ＰＣＲ扩增分析发现甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）诱发的人胎儿食管癌组织有抑癌基因Ｒｂ、ｐ５３、ＡＰＣ和ＭＣＣ损失。ＮＭＢｚＡ处理２４小时和３周的人胎儿童管上皮细胞中未发现这些基因的缺失；但ＰＣＲ直接测序分析发现ＮＭＢｚＡ体外处理３周的人胎儿食管上皮组织在ｐ５３、Ｒｂ和ＭＣＣ基因突变。以上     

FHIT基因与肺癌

癌基因的激活在肺癌发生中起重要作用 ,但现有的激活方式并不能完全解释肺癌的发生。近年来 ,发现了另一类基因 ,由这类基因突变或缺失所引起的失活可最终导致肿瘤的发生 ,表明这类基因在正常情况下具有抑制肿瘤形成或生长的作用 ,被称为肿瘤抑制基因 ,如ｐ5 3、Ｒｂ、ｐ16等。但是 ,近年的研究发现上述肿瘤抑制基因在肿瘤发生的初始阶段常处于一种野生型功能状态 ,而仅在肿瘤的中晚期才发生功能和结构的异常。因此 ,人们一直试图寻找一种新的在肿瘤的初期 ,甚至在癌前期就有功能和结构异常的基因。1996年由Ｏｈｔａ等发现的ＦＨＩＴ(ｆｒａ…     

大肠癌患者血清p53抗体检测的临床意义

ｐ5 3基因突变及蛋白表达在大肠肿瘤发生、发展中的作用及临床意义已得到广泛研究 ,但伴随着 ｐ5 3基因改变 ,大肠癌患者血清 ｐ5 3抗体状况的研究 ,国内未见报道。本研究采用酶联免疫吸附法 (ＥＬＩＳＡ )及免疫组化法 (ＩＨＣ ) ,分别检测大肠癌患者及健康人群血清 ｐ5 3抗体及肿瘤组织中 ｐ5 3蛋白表达状况 ,探讨 ｐ5 3抗体作为 1种非侵袭性肿瘤标记物 ,替代组织中ｐ5 3蛋白表达的特异性及其在大肠肿瘤早期诊断中的作用和临床意义。1　材料与方法1.1　肿瘤标本随机收集安徽医科大学第一附属医院 1998年 9月～ 1999年 5月间病理活检证实为…     

X—刀治疗后脑胶质瘤中PCNA和p53基因表达的变化及意义

为了探讨经Ｘ－刀治疗后脑胶质瘤中ＰＣＮＡ和ｐ５３基因表达的变化，作者采用组织免疫组化ＡＢＣ法，检测３６例经Ｘ－刀治疗后脑胶质瘤和３０例对照组的标本，分别计算增殖细胞核抗原标记率（ＰＣＮＡ－ＬＩ）和ｐ５３基因表达标记率（ｐ５３－ＬＩ）。结果表明，治疗组的ＰＣＮＡ－ＬＩ明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），治疗组的ｐ５３－ＬＩ明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；治疗组和对照组内ＰＣＮＡ与ｐ５３基因的表达均呈显著性正相关关系。作者认为，ＰＣＮＡ和ｐ５３基因的表达可作为脑胶质瘤对放射敏感性和恶性程度的标志之一。     

慢粒急变与基因异常

本文介绍了近年来对慢性粒细胞性白血病发生急性变的分子机制方面的研究进展，认为慢粒急变与多种基因的异常相关，如肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６和Ｒｂ，原癌基因ｒａｓ、ｍｙｃ及转化基因Ｅｖｉ－１和降钙素基因等。     

ｍｉｃｒｏＲＮＡ影响抗肿瘤药物敏感性相关研究进展

ｍｉｃｒｏＲＮＡ是一类长度为２ｌ～２５ｎｔ非编码蛋白ＲＮＡ,以干扰ｍＲＮＡ翻译的方式负向调控基因的表达。研究发现,ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ在肿瘤发生、发展过程中可能发挥癌基因或抑癌基因样作用,并表现为不同类型的肿瘤有其特异的ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达谱。多种ｍｉｃｒｏＲＮＡ与肿瘤发生、分化程度及预后等密切相关。随着ｍｉｃｒｏＲＮＡ家簇与肿瘤的联系逐渐被揭示,越来越多的证据表明肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性也受ｍｉｃｒｏＲＮＡ的影响。现对ｍｉｃｒｏＲＮＡ在影响抗肿瘤药物敏感性方面的一些研究做一综述。     

肺癌穿刺标本p16基因mRNA表达的研究

ｐ16基因作为调控细胞周期的抑癌基因[1] ,在肺癌发生发展中起重要作用 ,其与Ｒｂ基因有可能共同构成肺癌基因分型诊断的基础[2 ] 。肺癌早期病理诊断一直是国内外医学界的难题 ,采用肺癌早期诊断立体定位仪[3] ,能为 1ｃｍ左右肺小病灶快速准确三维立体定位穿刺进行细胞病理诊断。我们采用ＲＴ ＰＣＲ方法 ,研究肺癌微小量穿刺标本中ｐ16基因的ｍＲＮＡ表达情况 ,并与我们前期研究的肺癌标本ｐ16基因表达异常情况进行对比 ,探索ＲＴ ＰＣＲ在肺微小量穿刺标本ｐ16基因ｍＲＮＡ表达检测中的作用 ,以及肺癌穿刺标本ｐ16基因ｍＲＮＡ表达在肺…