雌激素对乳腺癌细胞的生长及p185蛋白和表皮生长因子受体表达的影响

为了研究乳腺癌的发展过程中雌二醇（Ｅ＿２）的作用机制及参与因素，作者使用流式细胞仪观察了人乳腺癌细胞株ＳＫ－ＢＲ－３在Ｅ＿２作用下的生长特征及ｐ１８５蛋白和表皮生长因子（ＥＧＦ）受体的表达．结果表明，乳腺癌细胞生长加快，ＤＮＡ合成增加，Ｓ期百分率升高（Ｅ＿２组２６．７±２．５，对照组２１．２±２．１，Ｐ＜０．０５）．在Ｅ＿２的作用下，乳腺癌细胞的ｐ１８５蛋白表达降低（Ｅ＿２３５±５．６，对照组６１±１３．１，Ｐ＜０．０５）而ＥＧＦ受体表达升高（Ｅ＿２３９±６．９，对照组２１±５．４，Ｐ＜０．０５），提示ＥＧＦ在乳腺癌的早期发展中可能发挥更主要的作用．     

表皮生长因子治疗慢性萎缩性胃炎

取人胃粘膜上皮细胞置ＲＰＭＩＩ６４０培养液中培养，表皮生长因子（ＥＧＦ）组加ＥＧＦ，对照组加培养液，结果显示ＥＧＦ有促进细胞ＤＮＡ合成作用Ｐ＜０．０００１）。９７例慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）随机分为治疗组（５５例）和对照组（４２例），治疗组用ＥＧＦ＋得乐治疗、对照组单用得乐治疗。６个月后经胃镜和病理活检复查，结果：治疗组对ＣＡＧ及肠化疗效明显优于对照组（Ｐ＜０；０１）。ＥＧＦ无毒副作用。     

肝细胞生长因子／扩散因子、转化生长因子-β在结核性胸腔积液中的表达

目的：探讨肝细胞生长因子／扩散因子（ Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ）、转化生长因子β（ Ｔ Ｇ Ｆβ）在结核性胸腔积液（ Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ）中的表达,寻找诊断结核性胸膜炎的特异性标记。方法：用 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 药盒和生物法测定３２ 例胸腔积液中 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ和 Ｔ Ｇ Ｆβ水平,并对 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ组中１０ 例病人同时作血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ检测。结果： Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中为７．５±７．３ ｎｇ／ｍ ｌ,高于非 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ的０．９８±０．８８ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．０５）。１０ 例 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ者的胸水和血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ含量分别是１０．９±６．６ ｎｇ／ｍ ｌ和１．９±１．７ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００２）。 Ｔ Ｇ Ｆβ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中含量为２７．３±１１．１ ｎｇ／ｍ ｌ,高于其在血清中的含量３．９±３．３ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００１）,也高于对照血清的１．８７±１．０５ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中存在高水平 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ。这可能与结核性肉芽肿形成有关,可能在促进胸膜纤维化及组织修复中有重要作用     

表皮生长因子与膀胱肿瘤关系的探讨

采用放射免疫分析法测定了３５例正常人群和３０例膀胱肿瘤患者尿中表皮生长因子（ＥＧＦ）水平，结果显示：膀胱肿瘤患者尿中表皮生长因子水平明显低于正常人群，Ｐ＜０．０５。提示：ＥＧＦ参与膀胱肿瘤细胞的代谢，对肿瘤细胞的生长起促进作用，尿中ＥＧＦ水平降低可能与ＥＧＦ在膀胱肿瘤细胞内降解有关。     

表皮生长因子受体在原发性胆囊癌中的表达及其预后意义

目的：探讨表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在原发性胆囊癌中的表达及其预后意义。方法：３８例原发性胆囊癌石蜡包埋标本，免疫组织化学ＳＰ法。结果：ＥＧＦＲ在原发性胆囊癌中表达的阳性率为（５７．６±３６．７）％，表达呈异质性，ＥＧＦＲ计数与术后生存期呈显著负相关（Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦＲ高值组生存期与低值组比较有显著差异（Ｐ＜０．０５），ＥＧＦＲ计数与肿瘤的分化程度、浸润深度呈显著相关关系（Ｐ＜０．０５）），与病理类型及淋巴结转移，无显著相关性。结论：ＥＧＦＲ表达对判断原发性胆囊癌的预后有一定的参考价值。     

骨髓增生异常综合征细胞增值活力的研究

用流式细胞仪（ＦＣＭ）ＤＮＡ单参数和ＤＮＡ／膜抗原双参数法对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者和１０例良性血液病病人骨髓细胞的增殖活力进行了研究。ＭＤＳ骨髓细胞Ｇ０／Ｇ１期百分率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期百分率明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），（Ｓ＋Ｇ２）／Ｍ期细胞中ＣＤ２＋细胞比例在原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ）较难治性贫血（ＲＡ）明显降低（Ｐ＜０．０５）。     

表皮生长因子受体在胃癌中的表达及意义

采用免疫组化Ｓ－Ｐ法对７５例胃粘膜标本进行表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的检测。结果显示：正常胃粘膜ＥＧＦＲ均为阴性：ＥＧＦＲ的阳性率中重度异型增生组高于轻度异型增生组（Ｐ＜０．０５）．进展期胃癌组高于早期胃癌组（Ｐ＜０．０５）。癌旁异常组织组高于癌旁正常组织组（Ｐ＜０．０５）,有转移组高于无转移组（Ｐ＜８．０６）;ＥＧＦＲ的表达与胃癌的组织学类型有关。结果提示,ＥＧＦＲ参与了胃癌的发生、发展,是胃癌前病变的一项有意义的标志物,并有助于判断胃癌预后。     

膀胱移行细胞癌血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子与膀胱癌浸润及复发的关系。方法：应用ＬＳＡＢ免疫组织化学技术检测４０例膀胱移行细胞癌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达。结果：膀胱癌细胞ＶＥＧＦ的表达率为５５％（２２／４０）,浸润性癌组ＶＥＧＦ的表达显著高于表浅性癌组（Ｐ＜０．０１）,有淋巴结转移癌组显著高于无转移癌组（Ｐ＜０．０５）,复发性癌组较初发性癌组差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论：ＶＥＧＦ可作为判断膀胱癌生物学行为的指标之一。     

结、直肠癌上皮生长因子受体与雌激素受体的表达及相互关系

用免疫组化ＡＢＣ法检测Ｚ７例结、直肠癌的上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和雌激素受体（ＥＲ）。结果：ＥＧＦＲ阳性１６例（５９．３％），ＥＲ阳性８例（２９．６％），ＥＧＦＲ、ＥＲ均阳性７例（２５．９％），均显著性高于正常对照组（Ｐ＜０．０５），ＥＧＦＲ、ＥＲ表达与Ｄｕｄｅｓ分期有关，ＥＧＦＲ的阳性率在癌组织中显著高于ＥＲ（Ｐ＜０．０５）。１１例淋巴结转移腺癌中，ＥＧＦＲ阳性８例（７２．７％），ＥＲ阳性７例（６３．６％），两者均阳性５例（４５．５％）。结果提示：ＥＧＦＲ、ＥＲ与结、直肠癌有关，表皮生长因子在肿瘤的发生发展中的作用远较雌激素重要。     

人绒毛膜促性腺激素对小鼠颌下腺、血清表皮生长因子的影响

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）与颌下腺、血清表皮生长因子（ＣＧＦ）之间的相互调节机制,为内分泌免疫调节网络提供实验依据。方法 ＩＣＲ雄性小鼠切除颌下腺和给予ＨＣＧ前后应用放射免疫方法测定颌下腺和血清ＥＧＦ。结果 假手术给药且颌下腺ＥＧＦ含量与假手术组相比明显升高（Ｐ〈０．０５）,去颌下腺组血清ＥＧＦ与假手术组相比差别无显著性,去颌下腺给药组血清ＥＧＦ与去颌下腺组相比明显（Ｐ〈０．０５）,假     

人尿路变移上皮种子细胞的体外培养与鉴定

目的对人尿路变移上皮细胞进行原代和传代培养,探讨并建立细胞的培养体系,用于泌尿系统组织工程种子细胞的相关研究。方法采集人。肾脏手术标本的。肾盂、输尿管正常上皮组织利用组织块法,使用添加附加表皮生长因子（EGF）及牛垂体提取物（BPE）成分的角朊细胞无血清培养液（KSFM）进行细胞原代培养,用含EGF及BPE的KSFM进行传代培养。观察培养细胞的形态和增殖情况,经HE染色和免疫细胞化学sP法染色进行鉴定。结果培养制备的人尿路上皮细胞呈现典型的变移上皮细胞形态特征,原代培养9—12d时细胞汇合可达80％。免疫细胞化学染色显示细胞角蛋白（CKAE1/AE3）阳性。分离培养的为单一的人尿路变移上皮细胞,无成纤维细胞混杂。结论采用组织块法分离培养的人尿路变移上皮细胞在添加EGF及BPE的KSFM培养液中可维持良好的生物学特性,并具有一定的增殖传代能力。该培养体系所获得的细胞可用于人泌尿系统的基础研究及组织工程的进一步研究。     

精神分裂症外周血中BDNF、MIF、EGF水平及其与认知功能关系

目的探讨精神分裂症病人血清脑源性神经营养因子(BDNF)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、表皮生长因子(EGF)水平及其与认知功能关系。方法选择54例精神分裂症病人作为观察组,另选取同期健康体检者58名作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测2组BDNF、MIF、EGF水平,阳性和阴性症状量表(posi tive and negative syndrome scale,PANSS)评估病人临床症状,认知功能成套测验共识版(MCCB)测评认知功能,Pearson直线相关分析评价血清BDNF、MIF、EGF水平与认知功能关系。结果观察组BDNF水平明显低于对照组(P < 0.01),MIF、EGF水平明显高于对照组(P < 0.01)。BDNF水平与PNASS评分呈负相关关系(P < 0.05),MIF水平与PNASS评分呈正相关关系(P < 0.05),EGF水平与PANSS评分无明显相关性(P>0.05)。观察组连线测验评分明显高于对照组(P < 0.01),符号编码、视觉记忆、言语记忆和语义流畅性评分均明显低于观察组(P < 0.01)。观察组血清MIF、EGF水平与视觉空间记忆均呈正相关关系(P < 0.05)。结论精神分裂症病人血清MIF、EGF水平与其临床表现和部分认知功能障碍密切相关。     

体外诱导犬骨髓间充质干细胞向上皮样细胞分化的初步研究

目的:探讨体外诱导犬骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向上皮样细胞分化的可行性和基本条件.方法:抽取成年健康杂种犬的骨髓,用密度梯度离心及贴壁培养法分离纯化BMSCs,培养扩增后,取第2代BMSCs在以下不同培养液中诱导培养:K-SFM EGF BPE、DMEM EGF、K-SFM BPE、DMEM FBS,观察细胞形态的变化,绘制细胞的生长曲线,诱导培养后第7、14天,用免疫细胞化学染色和流式细胞仪鉴定上皮细胞特异性标志物细胞角蛋白(cytokeratin, CK)和上皮膜抗原(epithelial membrane antigen, EMA)的表达.结果:K-SFM EGF BPE组诱导培养第7天,少量细胞形态变为圆形或椭圆形,有突起,第14天圆形或椭圆形细胞明显增多;诱导培养过程中DMEM EGF、K-SFM BPE、DMEM FBS组细胞形态无明显变化.CK免疫细胞化学染色结果提示:K-SFM EGF BPE组诱导培养第7天,少量细胞呈阳性表达,第14天,阳性细胞明显增多;DMEM EGF、K-SFM BPE、DMEM FBS组细胞均呈阴性表达.流式细胞仪检测发现K-SFM EGF BPE组诱导培养第14天,部分细胞CK和EMA呈阳性表达(>7%),DMEM EGF、K-SFM BPE、DMEM FBS组细胞均为阴性.结论:本实验提示K-SFM EGF BPE联合培养液能够在体外诱导犬BMSCs向上皮样细胞分化.     

生长因子和雌激素对大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素？…

目的 观察外源性生长因子和雌激素对离体正常大鼠垂体前叶细胞增殖活性及催乳素基因表达的影响,并探讨生长因子与雌激素作用的关系。方法 应用无血清原代培养的大鼠垂体前叶细胞,分别采用荧光染色细胞ＤＮＡ的激光扫描共聚焦显策镜扫描,以及原位杂交方法,观察了１７β－雌二醇,表皮生长因子及转化生长因子β１对大鼠垂有叶细胞增殖活性和催乳素基因表达的影响。结果 生长因子或雌激叶细胞增殖活性和催乳素基因表达的影响。结     

单克隆抗体C225对乳腺癌干细胞的抑制作用

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(C225)对乳腺癌细胞系MCF-7中乳腺癌干细胞的抑制作用。方法 MTT法检测C225对MCF-7细胞增殖的影响。将MCF-7进行微球体培养,根据培养液中是否加入表皮生长因子(EGF)和C225分为对照组、C225组、EGF组、EGF+ C225组;培养13 d,观察四组微球体形成大小及数量,计算微球体形成率(MFE);流式细胞术检测微球体细胞及常规培养MCF-7中CD44+CD24－细胞比例。结果 MCF-7细胞增殖抑制率随C225质量浓度的增加而上升。与对照组比较,C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24－细胞比例明显降低,分别为(0.61±0.04)% vs (1.44±0.09)% (P<0.01)和(3.50±0.29)% vs (9.07±0.52)% (P<0.01)。与EGF组比较,EGF+C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24－细胞比例明显降低,分别为(0.68±0.04)% vs (1.61±0.05)% (P<0.01)和(4.00±0.58)% vs (10.47±0.79)% (P<0.01)。常规培养MCF-7中CD44+CD24－细胞比例为（2.03±0.15）%,与EGF组和对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）。EGF组与对照组微球体形成大小、MFE以及微球体中CD44+CD24－细胞比例的比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 C225对MCF-7中CD44+CD24－细胞有明显抑制作用。     

平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑后表皮生长因子蛋白表达的影响

目的 通过测定哮喘大鼠气道重塑后表皮生长因子蛋白的表达,探讨平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑的作用机理.方法 将90只Wistar大鼠分为6组,每组15只,A、B组予以生理盐水灌胃,C组予0.5 mg布地奈德雾化吸入(2次/d),D、E、F组给予中药低4.01 g/(kg?d)、中8.01 g/(kg?d)、高16.02 g/(kg?d)剂量灌胃.各组均于末次激发24 h后处死,取大鼠左肺中下段,切成1 mm3左右,并将其用2.5%戊二醛固定,以备电镜用.大鼠右肺切取后,先用PBS漂洗,吸干后置于液氮罐中速冻,之后保存于-80℃冰箱,用于RT-PCR检测.结果 平喘颗粒(低、中、高)组、布地奈德组和模型组的EGF mRNA蛋白表达均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).平喘颗粒(低、中、高)组和布地奈德组EGF mRNA蛋白的表达较模型组明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05).平喘颗粒(中、高)组EGF mRNA蛋白的表达较布地奈德组降低,差异有统计学意义(P<0.05).平喘颗粒低剂量组EGF mRNA蛋白的表达较布地奈德组降低,但差异无统计学意义.结论 平喘颗粒可以改善和控制气道重塑过程中气道高反应和气道阻塞的状态,并且可抑制EGF mRNA的表达,从而保护肺部组织细胞,减轻哮喘发作.     

EFFECTS OF EPIDERMAL GROWTH FACTOR, GLUCAGON AND INSULIN ON THE HEPATOCYTES AFTER EXPERIMENTAL LIVER CELL NECROSIS IN VIVO STUDIES WITH MONOCLONAL ANTI-BROMO_DEOXYURIDIME STAINING

The effects of epidermal growth factor (EGF), glucagon and insulin on the DNA synthesis of hepa- tocytes after experimental hepatocellular necrosis in rats wew studied in v:ivo with the monoclonal anti- btomodeoxyuridine antibody technique. The results showed that EGF could substantially stimulate the DNA synthesis of the damaged liver cells induced by CCli. When EGF was administered in combination with glucagon and insulin, they could rcsult in a dramatic increase in the DNA synthesis. In con- trast to primary culture of hepatocytes and cells after partial hepatectomy, glucagon could also sffinu- Iate the regeneration of damaged liver cells. In- sulin, when used alone, did not show apparent ef fect on hepatic regeneration. It is suggested that EGF and EGF.glucagon-insulin therapy may be use- ful in the treatment of acute hepatic failure.     

表皮生长因子对气道上皮细胞VIP分泌及VIPR表达的影响

有放射免疫法检测支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞血管活性肠肽的分泌,放射配基法测定ＢＥＣ的ＶＩＰ受体表达,观察表皮生长因子的调控效应。提示气道上皮存在ＶＩＰ的自分泌或旁分泌,其保护效应受局部生长因子的调控。     

负压封闭引流技术结合表皮生长因子治疗深度烧伤病人效果

目的探讨负压封闭引流（VSD）技术结合表皮生长因子治疗深度烧伤病人效果。方法选取100例Ⅱ度烧伤病人,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。2组病人创面清洗完成后,采用VSD装置对创面进行封闭,对照组采用0.9%氯化钠注射液,观察组采用表皮生长因子溶液冲洗吸引装置及病人的创面。比较2组病人的创面愈合情况和炎症应激反应情况。结果治疗5 d后,2组创面愈合率差异无统计学意义（P>0.05）,观察组的白细胞介素-1和肿瘤坏死因子-α、去甲肾上腺素、肾上腺素、肾素均显著低于对照组（P < 0.01）。治疗10 d、15 d后2组创面愈合率均显著升高,且观察组高于对照组（P < 0.05）。观察组创面愈合时间、瘢痕愈合数及感染数均低于对照组（P < 0.05~ P < 0.01）。结论VSD技术结合表皮生长因子能促进深度烧伤病人的创面愈合,减轻病人的炎症应激反应,值得临床推广。     

表皮生长因子受体对苯并芘诱导的人支气管上皮细胞SIRT1活化的影响

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）在调控苯并芘（B[a]P）诱导人支气管上皮BEAS-2B细胞沉默信息调节因子1（SIRT1）活化中的作用,阐明EGFR/SIRT1信号转导通路与肺癌发生发展的关系。方法：MOTIF Search^TM分析软件预测SIRT1启动子序列上转录DNA结合位点。培养BEAS-2B细胞,设不加苯并芘的细胞为对照组,苯并芘组细胞暴露于苯并茈（8 μmol·L^-1）不同时间（6、12、24和48h）,RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测各组细胞中EGFR mRNA和蛋白表达水平。将SIRT1启动子荧光素酶报告载体转染入BEAS-2B细胞中,采用人表皮细胞生长因子（hEGF）和酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein处理细胞24h,倒置显微镜观察各组BEAS-2B细胞形态表现,荧光素酶报告基因技术检测SIRT1荧光素酶活性。收集相关肺组织临床标本,免疫组织化学法检测肺组织中EGFR蛋白表达水平。结果：SIRT1启动子序列上含有表皮细胞生长因子（EGF）、铁氧还蛋白（2Fe-2S）和血管性血友病因子（vWF）3个转录因子的DNA结合位点。与对照组比较,苯并芘组细胞中EGFR mRNA表达水平升高（P < 0.05）,且在12h达到峰值,同时EGFR蛋白表达水平均不同程度升高（P < 0.05）。与对照组比较,hEGF组和苯并芘组BEAS-2B中细胞SIRT1荧光素酶活性明显增加（P < 0.05）,hEGF联合苯并芘组BEAS-2B细胞中SIRT1荧光素酶活性增加更为明显（P < 0.001）;Genistein大于30 μmol·L^-1时,细胞排列逐渐稀疏,形态改变明显;Genistein（30 μmol·L^-1）能够抑制苯并芘诱导的SIRT1荧光素酶活性的增加,与苯并芘组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。免疫组织化学法,肺癌组织中EGFR蛋白表达水平明显高于正常肺组织（P < 0.001）。结论：苯并芘暴露下,EGFR能够促进SIRT1的表达,从而诱导肺慢性炎症反应,EGFR/SIRT1信号转导通路在肺癌的发生发展过程中发挥一定的作用。