去甲硫氨酸环境加化疗药物 对人胃癌原代细胞生长的阻抑

目的：探讨人胃癌原代细胞在体外去除甲硫氨酸（Met)但含同型半胱氨酸（Hcy)的培养基（Met-Hcy^ ）中能否正常生长和去Met状是否增加化疗药物对胃癌细胞的杀伤作用。方法：将40例新鲜人胃癌组织制成单细胞悬液,分别置于Met-Hcy^ 和Met＋Hcy^－（含Met不含Hcy)的培养其中培养48h,利用MTT等方法检测各组细胞增殖情况以及在不同培养基中分别加入ADM、DDP、5－FU、MMC和MTX化疗药物后对各组细胞增殖的抑制程度。结果：①人胃癌原代细胞在Met＋Hcy^－培养基中表现为细胞总数减少;②Met-Hcy^ 培养基分别与ADM、DDP、5－FU、MMC和MTX联合时,可显著提高各化疗药物对胃癌原代细胞的杀作用。结论：①人胃癌原代细胞在体外培养中表现对Met的依赖性; ②Met-Hcy^ 培养环境联合应用各化疗药物,可对人胃癌原代细胞的杀伤作用;③MTT法是检测“Met饥饿法”联合个体化疗药物敏感性的有效手段。     

MACC1蛋白在胃癌组织中的表达以及与5-Fu为主方案化疗疗效的相关性

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)蛋白在胃癌组织中的表达以及与5-氟尿嘧啶(5-Fu)为主方案化疗疗效的关系。方法选取2016年1月-2018年1月我院病理科保存的胃癌组织标本68例,同时选取癌旁组织作为对照,采用免疫组化染色检测MACC1蛋白表达。结果胃癌组织MACC1蛋白阳性表达比例为70.59%,明显高于癌旁组织(P0.05);中低分化、有淋巴结转移和TNM分期Ⅳ期患者MACC1蛋白阳性表达率分别为86.36%、83.33%和94.74%,明显高于高分化、无淋巴结转移和Ⅲ期患者(P0.05);MACC1蛋白阴性患者化疗疗效明显优于MACC1蛋白阳性表达患者(P0.05),其完全缓解(CR)+部分缓解(PR)比例达到55.00%;MACC1蛋白阳性表达患者中位无进展生存时间和总体生存时间分别为7个月和12个月,明显低于MACC1蛋白阴性表达患者(P0.05)。结论 MACC1蛋白在胃癌组织中的高表达与临床病理特征具有一定的相关性,同时与5-Fu为主方案化疗疗效及患者预后有关。     

LIVIN、PTEN在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 分析凋亡抑制蛋白LIVIN和磷酸酯酶基因PTEN在胃癌组织中的表达情况,探讨其与多个临床病理因素的关系以及二者之间的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测65例胃癌标本黏膜组织中LIVIN、FIEN在胃癌组织中的表达,另选取15例癌旁正常胃黏膜组织作为对照.结果 LIVIN在胃癌组织中的阳性表达率为73.85%(48/65),明显高于正常胃黏膜组织的26.67%(4/15),差异有统计学意义(P<0.05).PTEN在胃癌组织中的阳性表达率为30.77%(20/65),明显低于正常胃黏膜组织的66.67%(10/15),差异有统计学意义(P<0.05).PTEN和LIVIN的阳性表达率与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,而与患者性别、年龄、肿瘤直径无关.LIVIN与PTEN的表达呈负相关(r=0.362,P=0.003).结论 LIVIN蛋白表达增高和PTEN蛋白表达下调是胃癌发生、发展、侵袭及转移重要的生物学标志,联合检测LIVIN、PTEN蛋白的表达可为胃癌患者治疗方案的制定和预后判断提供重要依据.     

叶酸缺乏对乳腺癌化疗疗效和毒性的影响

目的 :检测叶酸缺乏时化疗药物对人乳腺细胞株HBL 1 0 0和人乳腺癌细胞株MCF 7敏感性的影响。　方法 :将HBL 1 0 0和MCF 7在正常培养液和叶酸缺乏培养液中加入化疗药物 ,培养 3天 ,用四唑蓝 (MTT)法检测化疗药物对HBL 1 0 0和MCF 7的杀伤作用。　结果 :MCF 7对阿霉素 (ADM)、顺铂 (DDP)、氟尿嘧啶 (5 FU)、丝裂霉素(MMC)和甲氨蝶呤 (MTX)等化疗药物均不敏感。将 5 FU、MMC和MTX分别加入实验组和对照组培养液后 ,对照组中MCF 7细胞数减少 ,光密度值降低。ADM和DDP对MCF 7生长的抑制作用在两种培养液中无显著差异。ADM、DDP、5 FU、MMC和MTX等化疗药物 ,在两种培养液中 ,对HBL 1 0 0光密度值的影响无显著差异。　结论 :叶酸缺乏可以降低某些化疗药物如 5 FU、MMC和MTX对MCF 7的杀伤作用 ,但不改变ADM、DDP、5 FU、MMC和MTX等化疗药物对HBL 1 0 0的毒性作用     

HCPT联合L-OHP 5-Fu方案治疗进展期胃癌60例近期疗效观察

[目的]观察羟基喜树碱(HCTP)、奥沙利铂(L-OHP)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)联合治疗进展期胃癌的近期临床疗效. [方法]经手术或病理学证实为进展期胃癌患者60例,随机分成实验组用.HCPT联合L-OHP 5-Fu方案治疗进展期胃癌30例,对照组L-OHP联合5-Fu方案治疗进展期胃癌30例两组.化疗2周期以上,评价近期疗效及毒副反应情况. [结果]HCPT联合L-OHP 5-Fu的实验组有效率为46.7%,明显高于L-OHP联合5-Fu的对照组,有效率为26.7%,两组比较差异有统计学意义(X2=3.363,P=0.033 9).两组均有不同程度的胃肠道反应及骨髓抑制、口腔溃疡等不良反应(P＞0.05),差异无统计学意义. [结论]HCPT联合L-OHP 5-Fu方案治疗进展期胃癌疗效好,毒副反应轻,能耐受.     

羟喜树碱对胃癌细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的 探讨羟喜树碱(HCPT)对胃癌细胞的致凋亡作用及其相关作用机制.方法 MTT细胞毒性试验检测HCPT对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制活性,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,荧光定量PCR和Western blot检测多梳基因-1(Bmi-1) mRNA和蛋白的变化.结果 HCPT对人胃癌SGC-7901细胞的药物半数抑制浓度(IC50)值为(4.87±0.35)μmol/L.0、5、10、20μmol/L的HCPT作用于人胃癌SGC-7901细胞48 h后,人胃癌SGC-7901细胞的凋亡率分别为(1.62±0.37)％、(21.45±4.54)％、(36.67±5.38)％和(54.26±7.14)％,Bmi-1 mRNA的2-△Ct值分别为0.614±0.022、0.445±0.018、0.376±0.012和0.215±0.010,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).Western blot检测显示HCPT可以剂量依赖性地下调Bmi-1蛋白的表达.结论 HCPT对人胃癌SGC-7901细胞具有显著的致凋亡作用,下调Bmi-1蛋白的表达可能是其主要的作用机制.     

乳腺癌耐受蛋白的表达与5-氟尿嘧啶耐受的相关性研究

目的 筛选乳腺癌耐受蛋白(BCRP)介导的耐受药物,探讨BCRP的表达与耐受药物的相关性.方法 采用已成功建立的BCRP表达细胞模型,经细胞存活实验(MTr法)筛选出BCRP介导的耐受药物,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内残留耐受药物的相对含量;运用荧光定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法(IHC)检测140例临床乳腺癌组织标本中BCRP的表达,同时利用MrIT法研究临床组织标本对耐受药物的化学敏感性;采用单项方差统计学检验方法分析临床乳腺癌组织中BCRP的表达与药物耐受的相关性.结果 MTT实验结果显示,细胞对5.氟尿嘧啶(5-Fu)的耐药指数随着BCRP表达的升高而增加,达到10.58倍(P＜0.05,n=3).HPLC实验证实BCRP的表达与细胞内残留的5-Fu呈显著的负相关性(r=-0.897,P＜0.05).140例临床乳腺癌组织标本中,BCRP阳性表达率为33%(47/140).BCRP阳性表达的乳腺癌组织对5-Fu的耐药指数是正常癌旁组织的7-12倍,BCRP的表达与5-Fu的耐受具有正相关性(R2=0.8124,P＜0.01).结论 BCRP的表达与5-Fu的药物耐受具有显著的相关性,研究结果有助于BCRP阳性;表达的乳腺癌病人化疗方案的制订和优化.     

ATP—TCA法对乳腺癌常用化疗药物体外作用的评价

目的建识以三磷酸腺苷生物发光法肿瘤化疗药物敏感试验（ATP—TCA）法对乳腺癌常用化疗药物的体外作用评价方法。方法采用ATP—TCA法,对4组不同乳腺癌常用化疗药物选择相同规格、不同厂家共8种品规药品,同时检测对5株乳腺癌细胞株的杀伤效果,以比较同种乳腺癌细胞对同一品种、规格不同抗肿瘤药品的敏感性。结果4种药物对乳腺癌细胞株的敏感性顺序为紫杉醇（PTX）〉长存瑞滨（NVB）〉阿霉素（ADM）〉丝裂霉素（MMC）;同一种肿瘤细胞株对于不同厂家生产的同一种化疗药物的敏感性基本上具有一致性,但是也有个别具有差异性。结论ATP—TCA法可以作为评价不同厂家抗肿瘤药品体外作用的方法。     

PI3K/Akt信号通路对胃癌细胞SGC7901细胞化疗效果的影响

目的运用磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3-K)LY294002[2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮]作用于胃癌细胞系SGC7901,探讨抑制PI3K/Akt信号转导通路对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法采用MTT比色法,流式细胞术检测5-FU、DDP及ADM单独或联合PI3K抑制剂LY294002对人胃癌细胞SGC7901的抑制率、凋亡率。并分析单独及联合应用LY294002对SGC7901细胞周期的影响。Western-blot检测单独及联合化疗药后P-Akt蛋白在SGC7901细胞中的表达水平。结果单独使用化疗药5-FU、DDP及ADM均可抑制SGC7901细胞增殖、诱导其凋亡。当化疗药与抑制剂联合应用,对细胞的抑制作用明显增强,促凋亡作用增强,与对照组比较(P0.05)。细胞周期同步分析显示,单独用药均可将SGC7901细胞阻滞于G0/G1期。联合使用抑制剂使处于G0/G1期细胞增加。Western blot显示化疗药上调P-Akt蛋白的表达,联合使用抑制剂后SGC7901细胞P-Akt蛋白的表达与未使用抑制剂比较减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论阻断PI3K/Akt信号通路可提高化疗药5-FU、DDP及ADM对胃癌细胞株SGC7901的抑制率,凋亡率并使阻滞于G0/G1期细胞增多;LY294002通过阻断PI3K/Akt信号通路,抑制P-Akt蛋白表达,增强化疗药的敏感性;LY294002阻断PI3K/Akt信号通路对5-FU、DDP、ADM治疗胃癌有一定的协同或增强作用。     

Tip30基因过表达对人胃癌细胞生长的影响及分子机制

目的探讨Tip30基因过表达对人胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响及相关分子机制。方法人胃癌AGS细胞中Tip30基因过表达采用腺病毒转染法,使用实时定量PCR和Western blotting验证Tip30过表达的效果,分别采用MTT法、划痕试验检测细胞增殖、迁移情况,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blotting分析p53、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果过表达组AGS细胞Tip30基因m RNA和蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,Tip30过表达后,细胞增殖、体外迁移能力均显著减弱(P<0.05);Tip30过表达后AGS细胞凋亡率相比对照组显著增大,Tip30过表达促进AGS细胞凋亡与上调p53、Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达水平相关。结论 Tip30基因过表达可抑制人胃癌AGS细胞增殖活性、体外迁移能力,且促进胃癌细胞凋亡。