应用SELDI-TOF-MS技术分析不同中医证型肝癌血清标志物的研究

目的:应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测不同中医证型肝癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性相关血清生物学标志物。方法:应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测5种中医证型(气滞证、脾虚证、湿热证、血瘀证、阴虚证)肝癌患者血清,获得CM10蛋白质芯片蛋白表达图谱,用Marker Wizard软件分析差异蛋白并经数据库搜索初步鉴定。结果:应用弱阳离子交换芯片(CM10)在不同中医证型肝癌血清中检测到在不同质荷比(M/Z)差异蛋白质峰,气滞证组M/Z为4182Da、6589Da及湿热证组M/Z为5710Da的血清蛋白质峰下调,脾虚证组M/Z为5816Da、血瘀证组M/Z为4297Da、阴虚证组M/Z为6992Da的血清蛋白质峰上调,上述蛋白质含量差异均有统计学意义(P0.01)。结论:应用SEIDI-T0F-MS可以筛选不同中医证型肝癌患者血清特异性生物标志物,检测到的差异蛋白质可能是鉴别肝癌不同中医证型的血清生物学指标。     

蛋白指纹图谱在原发性肝癌中医辨证分型应用的初步研究

目的应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）检测肝细胞性肝癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性候选标志物。方法应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测56例肝郁气滞证和55例肝胆湿热证肝癌患者血清,获得弱阳子交换型蛋白质芯片（CM10）蛋白表达图谱,用Marker Wizard软件分析差异蛋白并经数据库搜索初步鉴定。结果应用CM10在肝郁气滞证和肝胆湿热证肝癌血清中检测到在不同质荷比（M/Z）有2个差异蛋白质峰8 576 Da、8 780 Da,其蛋白质含量有显著性差异（P〈0.05）。经蛋白质数据库搜索,与这2种差异蛋白质分子量最接近的蛋白质分别为细胞色素C6和细胞色素C氧化酶合成因子5。结论应用SEIDI-T0F-MS可以筛选不同中医证型肝癌患者血清特异性生物标志物,检测到的2个差异蛋白质可能是鉴别肝郁气滞型与肝胆湿热型的血清生物学指标。     

中西医结合治疗顽固性心力衰竭32例

目的：观察中西医结合治疗顽固性心力衰竭心肾阳虚、血瘀水停证的临床疗效。方法：将65例心肾阳虚、血瘀水停证顽固性心力衰竭患者随机分为两组。对照组33例予西药常规治疗，治疗组32例在西药常规治疗的基础上加服参附汤合真武汤治疗。结果：治疗组疗效优于对照组（P〈0．01）。结论：加服参附汤合真武汤治疗顽固性心力衰竭心肾阳虚、血瘀水停证有较好疗效。     

不同中医证型原发性肝癌患者介入治疗前后血清蛋白指纹图谱的观察

目的 应用表面加强激光解析电离化飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,SELDI TOF MS） 蛋白质芯片检测不同中医证型原发性肝癌患者介入治疗前后血清蛋白指纹图谱的变化。方法 将154例原发性肝癌患者分为肝郁证、脾虚证、湿热证、血瘀证及阴虚证5组,应用SELDI TOF MS分析其血清蛋白指纹图谱,观察肝癌介入治疗前后不同中医证型与血清蛋白指纹图谱之间的关系。结果 与健康对照组比较,符合叶氏诊断模型者,肝郁证中质荷比（M/Z）为4 182 Da及6 589 Da、湿热证中M/Z为5 710 Da、阴虚证中M/Z为6 992 Da的差异蛋白表达下调;脾虚证中M/Z为5 816 Da、血瘀证中M/Z为4 297 Da的差异蛋白表达上调;差异均有统计学意义（P<0.01）; 与介入前比较, 符合叶氏诊断模型者,肝郁证中 M/Z为4 182 Da及6 589 Da、湿热证中M/Z为5 710 Da、脾虚证中 M/Z为5 816 Da、血瘀证中M/Z为4 297 Da的差异蛋白表达下调;阴虚证中 M/Z为6 992 Da的差异蛋白表达上调;差异亦有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 不同中医证型原发性肝癌患者介入治疗前后的血清蛋白指纹图谱变化有统计学意义。     

IgA肾病湿热证的血清蛋白质组学研究

目的：应用表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术,对IgA肾病（IgAN）湿热证患者进行血清蛋白质指纹图谱检测,分析探讨该人群中所表达的特异蛋白,试图从蛋白质组层面寻找与IgA肾病湿热证相关的血清标志物。方法：采集IgA肾病患者的血清样本共29例（湿热证14例,非湿热证15例）,同时选择非IgA肾病的湿热证肾病患者血清样本10例和健康人血清样本15例。采用表面增强激光解析离子化蛋白质芯片分析仪实现各组血清蛋白质表达谱的检测,后运用Biomarker WizardTM和Biomarker PatternsTM软件进行数据分析,最终识别IgA肾病湿热证特异表达的蛋白质,并建立证候决策树模型。结果：IgA肾病湿热证组与非湿热证组之间共检出有7个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与非IgA肾病湿热证组之间共检出有4个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;IgA肾病湿热证组与健康对照组之间共检出有5个蛋白峰具有显著差异（P〈0.05）;综合以上各组对比结果,并结合统计学分析证实,M/Z（质荷比）为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”可能是IgA肾病湿热证的特异血清蛋白标志物。经筛选以M/Z为1092.71等11个蛋白峰组成的证候决策模型能很好地将IgA肾病湿热证区分出来,该模型的敏感性为92.86%,特异性为87.50%。进一步对此决策模型进行盲法验证,结果其敏感性为90.00%,特异性为86.67%。结论：IgA肾病湿热证的发生发展,可能是以M/Z为4987.92所代表的“Beta-defensin 33蛋白”的差异表达为物质基础的,同时建立了分子生物学证候决策树模型。     

真武汤治疗慢性心衰属阳虚水泛机理浅析

心力衰竭是一个非常复杂的临床综合征,是各种病因的终末阶段,其发生率及病死率均较高。真武汤是伤寒论中一个很重要的方剂,其治疗证属阳虚水泛的各种疾病每获良效,本文就应用经方真武汤治疗慢性心衰证属阳虚水泛者的中医机理进行探析。     

真武汤治疗慢性心衰属阳虚水泛机理浅析

心力衰竭是一个非常复杂的临床综合征,是各种病因的终末阶段,其发生率及病死率均较高.真武汤是伤寒论中一个很重要的方剂,其治疗证属阳虚水泛的各种疾病每获良效,本文就应用经方真武汤治疗慢性心衰证属阳虚水泛者的中医机理进行探析.     

参芪真武汤治疗慢性充血性心力衰竭50例

目的 观察参芪真武汤治疗慢性充血性心力衰竭阳虚水泛证的临床疗效.方法 选取慢性充血性心力衰竭阳虚水泛证患者50例,随机分为两组,均予地高辛片、速尿片、安体舒通片、单硝酸异山梨酯缓释片、雷米普利片、阿司匹林肠溶片等基础治疗;治疗组加服参芪真武汤.疗程均为2周.结果 治疗组总有效率高于对照组.结论 参芪真武汤合用西药治疗阳虚水泛证慢性充血性心力衰竭疗效安全、疗效满意.     

甲状腺癌中医辨证唾液蛋白质组诊断模型研究

目的 探讨甲状腺癌不同证型患者的唾液蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型,为甲状腺癌的中医辨证分型提供客观依据.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测23例痰瘀互结型和26例肝郁气滞型甲状腺癌患者的唾液蛋白质指纹图谱,筛选出2组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法 建立诊断模型.结果 通过2组唾液蛋白质指纹图谱数据比较,共获得29个有明显差异的蛋白峰(P＜0.01),其中M/Z 3809.85、3 110.04、4 970.80被选择用于构建最佳决策树模型,该模型的测试组总准确率为85.7%(42/49),灵敏度为84.6%(22/26),特异性为86.9%(20/23).结论 初步建立了甲状腺癌的唾液蛋白质指纹图谱辨证模式,为中医证候实质研究提供了新的方法 和途径.     

真武汤联合强心利尿贴治疗慢性心衰阳虚水泛证临床观察

目的 探讨真武汤联合强心利尿贴治疗慢性心衰阳虚水泛证临床疗效。方法 选取菏泽市中医医院2021年3月—2023年3月收治的80例慢性心衰阳虚水泛证患者,随机分为治疗组和对照组,各40例。对照组接受强心、利尿、扩张血管等常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用真武汤和强心利尿贴。比较治疗前后2组患者N末端脑钠肽前体(NT-pro-BNP)水平、左心室射血分数(LVEF)、6 min步行试验(6MWT)距离及临床疗效。结果 治疗后,2组患者NT-pro-BNP水平、LVEF、6MWT距离、中医证候积分均较前有明显改善,且治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组临床症状有效率较对照组明显升高(P<0.05)。结论 真武汤合强心利尿贴治疗慢性心衰阳虚水泛证患者,可改善患者症状,降低NT-pro-BNP水平、提升LVEF、6MWT距离,具有显著疗效。     

肺胀阳虚水泛证水通道蛋白关联性研究

目的寻找肺胀阳虚水泛证的关联性因素,探讨肺胀阳虚水泛证的病理机制。方法对符合诊断标准的临床收治肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者分别采用双抗体夹心酶联免疫法检测尿水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP2)、放射免疫法检测血浆精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)、酶联免疫吸附法检测血浆脑钠素(brain natriuretic peptide,BNP)、钠钾三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)水平,对阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证三证之间相同项目指标分别采用秩和检验法比较相互之间的差异性,用相关分析法比较证型内指标之间的相关性。结果肺胀阳虚水泛证与痰热郁肺证的BNP水平有差异性(P0.05),阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP之间无统计学差异(P0.05),三组钠钾ATP酶与BNP之间有正相关性(P0.05),阳虚水泛证组及肺肾气虚证组的钠钾ATP酶与AVP之间有显著正相关性(P0.01);BNP与AVP之间有显著正相关性(P0.01),阳虚水泛证AQP2与AVP之间有显著正相关性(P0.01)。结论 BNP可能是肺胀阳虚水泛证的关键因素之一,需住院的肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者均有阳虚因素的存在,尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP可能是肺胀阳虚水泛证的内在因素之一。     

心肾综合征患者临床特征及中医证候特点分析

目的 研究心肾综合征患者临床特征及中医证候特点.方法 收集203例慢性心衰患者临床资料,分为心肾综合征和非心肾综合征组,比较两组临床特征、证候要素、证候分型的差异.结果 心肾综合征患者年龄偏大、男性构成比增加、吸烟比率高,心衰病程长,NYHA心功能分级高,左室射血分数降低,氨基末端B型利钠肽前体升高,血红蛋白降低,血肌酐升高,与非心肾综合征患者比较差异有显著性或非常显著性(P<0.05或P<0.01).同时心肾综合征患者气虚、阴虚证候要素出现频率低,阳虚、水饮证候要素出现频率高,心肾阳虚、阳虚水泛型比例升高,心肺气虚、气虚血淤、气阴两虚、痰饮阻肺型比例降低,与非心肾综合征患者比较差异有显著性或非常显著性(P<0.05或P<0.01).结论 心肾综合征的发生与患者心功能损害有关,年龄、吸烟等是重要的危险因子.心肾综合征出现伴随中医证候从气(阴)不足向阳虚水饮证候演变和心病及肾、心肾同病过程,淤血始终是关键的病理因素.     

真武汤治验举隅

真武汤出自《伤寒论》,主治太阳病汗出伤阳证及少阴病阳虚水泛证,以心肾阳虚为主要病机。笔者采用真武汤辨证治疗心衰、。肾衰等危重症,每获良效,举例如下。     

中西医结合治疗慢性心力衰竭阳虚水泛证30例临床观察

目的:观察真武汤巴布剂外用联合西药治疗慢性心力衰竭阳虚水泛证的临床疗效。方法:将60例慢性心力衰竭阳虚水泛证患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组予以常规西医抗心衰治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用真武汤巴布剂行穴位贴敷治疗。观察2组患者临床疗效、水肿程度、N末端脑纳肽原(NT-proBNP)、6min步行距离(6MWD)、体质量。结果:2组综合疗效和水肿疗效的总有效率治疗组均为93.3%,对照组均为73.3%,2组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。NT-proBNP、6MWD、体质量下降,治疗前后组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:真武汤巴布剂能改善慢性心力衰竭水肿阳虚水泛证患者的心功能和临床症状,减轻患者体质量,提高运动耐量。     

基于CCU重症病例及现代病理生理机制的真武汤方证条文内涵解读及其治疗心力衰竭、心肾综合征、利尿剂抵抗等急危重症体会

真武汤出自汉代医家张仲景的《伤寒论》,具有温阳、化气、利水功效，主治阳虚水泛证。基于急危重症病例及病理生理机制研究发现，真武汤条文描述的是心力衰竭急性期的症状和治疗方案，其方证成因，很可能与临床误诊、误治有关，尤其因心源性呼吸困难与肺源性呼吸困难鉴别困难而误用大剂量麻黄发汗误治，而致形成心力衰竭急性加重，合并水电解质紊乱，伴肺部感染的病理生理状态有关。真武汤方证可能反映出当时医家处理心力衰竭的临证经验不足。“振振欲擗地”本质是心衰的临床表现，是苓桂术甘汤“身为振振摇者”的升级版。真武汤的指征：(1)疾病方面，适用于急慢性心力衰竭、心肾综合征、利尿剂抵抗的治疗，真武汤可用于上述各种类型心力衰竭的治疗，尤其适用于全心衰竭、急性心力衰竭、射血分数降低性心力衰竭、《中国心力衰竭诊断和治疗指南2018》中的“湿冷”型心力衰竭；还可用于Ⅱ型和Ⅳ型心肾综合征的治疗；(2)症状指征方面，方证包括胸闷喘憋，心悸，下肢浮肿，小便不利，小便清长，肢冷怕凉，舌淡，苔薄白，脉沉迟无力；(3)药理机制上，真武汤与现代医学治疗心力衰竭的利尿、扩血管、强心治疗原则保持高度一致。附子为真武汤方中君药，以30～60 g为...     

Ⅱ型心肾综合征中医病机演变规律初探

目前对Ⅱ型心肾综合征(cardiorenal syndrome,CRS)病机认识尚不统一,主要有心肾不交、心肾阳虚和血不利为水3种,这些观点从不同层面反映了疾病发展阶段的病理特征。Ⅱ型CRS是心病及肾、心肾同病的状态,其发展多呈慢性经过,每一阶段有其不同的病理特点,分析其动态变化,探讨其病机演变规律,对开展疾病早期防治具有重要意义。本文基于文献研究和临床观察,提出Ⅱ型CRS病机演变规律主要经历4个阶段,即早期为心气不足、初期为阴虚火旺、中期为血瘀水停、后期为阳虚水泛,以期更有效指导临床辨证施治,减少疾病发生,延缓病情进展。     

真武汤辨治阳虚水泛型高血压病探讨

目前,高血压病中医辨证分型尚未论及阳虚水泛型,但临床中阳虚水泛型高血压病常见。高血压病其中一病机为阳虚水泛,指阳气亏虚则温煦推动无力,水液输布失常,水气上泛清窍,蒙蔽神明,临床表现头痛、眩晕,可予真武汤辨治。真武汤温脾肾助阳气、蒸化水气、促进人体气血津液各走其道,能有效治疗阳虚水泛型高血压病,临床应用取得良好效果。特此总结并附验案1则。     

应用SELDI技术建立甲状腺癌辨证分型的血清蛋白质组学诊断模型

目的:探讨甲状腺癌不同证型间的血清蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测19例肝郁气滞型和21痰瘀互结型甲状腺癌的血清蛋白质指纹图谱,筛选出两组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法建立诊断模型。结果:在2000~20000Da范围内共检测到86个蛋白质峰,其中22个蛋白质峰在两组之间表达有显著性差异(P0.01),17个蛋白质峰在肝郁气滞组中高表达,5个蛋白质峰在痰瘀互结组中高表达,BPS判别分析选出M/Z为4099.85、9418.17的2个蛋白质峰构建两组间血清差异蛋白决策树分类诊断模型。结论:初步建立了甲状腺癌的中医辨证模式——血清蛋白质指纹图谱,也为中医证候实质的研究探讨新的方法和途径。     

真武汤临床应用三则

真武汤仲景用以治疗少阴阳虚水邪为患,而又不强调利水药的名方。主要通过恢复脾肾功能,达到治疗目的。充分体现了治病求本的精神,但又不限于脾肾疾病,对于肺心脾肾各脏病变,只要符合阳虚水泛的机理,即可随证加减应用。且效如桴鼓,现举三例如下:     

参芪附子汤治疗阳虚血瘀证心肾综合征47例临床观察

<正>本研究观察了参芪附子汤治疗阳虚血瘀证心肾综合征(CRS)的疗效及对患者心、肾功能的影响,以为临床治疗提供科学依据。1资料与方法1.1一般资料:选择2018年4月～2019年3月在我院住院治疗的CRS患者94例,按照随机数字表法分成观察组和对照组,每组各47例。其中观察组男28例,女19