深圳市龙岗区副溶血性弧菌检出情况及血清型分析

目的了解深圳市龙岗区水产品、外环境水体及食物中毒样品中副溶血性弧菌的污染状况、血清型分布及携带耐热直接溶血素(tdh)毒力基因情况。方法于2009年6—10月间采集深圳市龙岗区水产品、外环境水体及期间发生的5起食物中毒病人粪便样品共548份,通过实时荧光PCR法对副溶血性弧菌初筛后进行常规分离培养,并对分离株进行血清学分型及携带tdh产毒基因情况进行分析。结果 548份样品分离到223株副溶血性弧菌,其中42份食物中毒样品中分离到35株且均携有tdh产毒基因,21株血清型为O3∶K6,其余14株为O4∶K8。506份水产品和外环境水体中分离到副溶血性弧菌188株,其血清群呈多样化,最主要的为O2(25.0%),其次为O3(10.1%)、O1(6.4%)、O10(6.4%)。结论在深圳市龙岗区引起食物中毒的主要病原体是带有tdh基因的O3∶K6或O4∶K8血清型的副溶血性弧菌。该区水产品和外环境水体中副溶血性弧菌的带菌率较高且血清型呈现多样性,并与食物中毒分离株血清型存在差异。     

山东省聊城市2020-2021年小肠结肠炎耶尔森菌食品分离株分子特征分析

目的了解 2020-2021年山东省聊城市小肠结肠炎耶尔森菌(Y.e)食品分离株分子特征。方法对聊城市市售生肉与肉制品中Y.e开展分离培养、药敏试验、毒力基因检测、PFGE和全基因组测序(WGS)。利用微生物基因组注释系统对全基因组数据进行拼接组装, 对组装基因组开展多位点序列分型(MLST)和核心基因组多位点序列分型(cgMLST), 并应用基于WGS的单核苷酸多态性(wg-SNPs)分型方法与美国生物技术信息中心上获取的14株国内外Y.e的基因组进行遗传进化分析。结果 165份样品中共检出21株Y.e, 检出率为12.73%, 20株Y.e测序成功。Y.e携带多种耐药基因和毒力基因, 出现多重耐药现象, 毒力基因PCR检测显示21株Y.e呈现2种毒力基因特征;PFGE、MLST和cgMLST聚类分析显示, 21株Y.e呈高度多样性;wg-SNPs遗传进化分析显示20株Y.e可分为2个进化主分支。结论聊城市生肉与肉制品中分离的Y.e携带多种耐药基因和毒力基因, 且分子分型呈现高度多样性, 应加强生肉与肉制品中Y.e分子生物学监测, 开展基因组测序及分子分型检测工作, 为预防由Y.e引...     

崇州市23株副溶血弧菌的病原特征分析

目的分析四川崇州地区2014-2017年6起23株副溶血弧菌食物中毒疫情分离株毒力基因携带,耐药及分子分型特征,为该地区副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法采用微量肉汤稀释法(MIC)检测13种抗生素的敏感性;实时荧光PCR法检测(tdh、trh)毒力基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和Bio Numerics软件对菌株进行分子分型分析。结果 23株副溶血性弧菌PFGE聚类分析共分为18个型别。2起暴发的病人之间分属同一PFGE型别,其余4起暴发病人、食品、环境之间相关性均低于60%;2起暴发病人分离株存在100%相似的带型。食品和环境分离株无毒力基因检出,病人分离株毒力基因检出率88.89%(16/18)。食品环境分离株对头孢唑啉100%(5/5)耐药,对其他12种药物均敏感;临床分离株对氨苄西林27.78%(5/18)耐药、头孢唑啉100%(18/18)耐药,对其他11种药物均敏感。结论该地区近年来由副溶血性弧菌引起的食物中毒事件存在由多种不同型别和相同型别(PFGE带型100%相似)弧菌引起情况。     

2018-2019年茂名市水产品中创伤弧菌的分子特征和耐药性分析

目的 对茂名地区2018-2019年水产品中分离的创伤弧菌进行毒力相关基因、耐药性分析和分子基因分型,初步建立该菌区域病原学特征数据库和耐药谱,为创伤弧菌的溯源和临床用药提供依据。方法 采用PCR技术进行毒力相关基因和生物型、血清分型的鉴定;脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）和微量肉汤稀释法进行基因分子分型和药物敏感性（AMS）分析。结果 175份水产品分离出51株创伤弧菌,阳性率为29.14%。41株创伤弧菌毒力相关基因vcg C/E和16S rRNA A/B分型结果显示共有3种型别,分别为CB型、EA型、CAB型;生物分型全为BT1型。药敏结果显示该菌对头孢类抗生素出现较多耐药株。PFGE指纹图谱结果显示41株创伤弧菌有41种分子型别。结论 茂名市水产品中创伤弧菌污染较为严重。毒力基因型别以CB型为主;PFGE型别多,菌株存在遗传多样性。因此,需对茂名水产品中创伤弧菌的食品安全进行风险评估和耐药监测,预防食源性疾病的暴发。     

副溶血性弧菌海产品及临床分离株毒力基因及多位点序列分型分析

目的了解宁波地区海产品和临床分离的副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)血清型、毒力基因和多位点序列分型分布情况。方法选取2016年从海产品中和临床腹泻患者粪便标本中分离的副溶血性弧菌各30株,进行血清分型,利用PCR技术检测毒力基因tdh、trh,对所有60株菌株进行多位点序列分型(MLST)分析。结果 30株海产品来源的VP血清型较多样,共分得15种血清型,4株未分型成功,O3血清群最多有12株。临床来源的VP共分得8种血清型,O3∶K6最多,有19株,1株未分型成功。30株海产品来源的VP毒力基因tdh和trh全部阴性,临床来源的VP毒力基因29株tdh阳性,tdh携带率为96.7%,1株trh阳性。对60株副溶血性弧菌进行MLST检测,海产品来源的VP共分得11种ST型,分布较分散,5株未分型成功。临床来源的VP共分得6种ST型,其中ST3有20株,占66.7%。结论宁波地区海产品及临床来源副溶血性弧菌血清型分型具有多样性,MLST优势型别分布较散,具有遗传多样性。     

上海市2014年腹泻患者弯曲菌分离、毒力基因检测及分子分型结果

[目的]了解上海市2014年腹泻患者中弯曲菌感染现状,并分析弯曲菌的毒力基因及分子分型特征。[方法]采用膜过滤法对2014年上海市2 235例腹泻患者肛拭标本进行弯曲菌检测,并用常规生化试验和PCR方法鉴定分离菌株。采用PCR检测弯曲菌分离株的6种毒力相关基因,包括鞭毛蛋白基因fla A,细胞溶涨毒素cdt基因簇cdt A、cdt B、cdt C,p Vir质粒vir B同源性基因vir B11,外膜蛋白基因cad F。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对弯曲菌分离株进行分子分型。[结果]2 235例腹泻患者的肛拭标本中共检出弯曲菌43株,阳性率为1.9%。其中空肠弯曲菌占95.3%(41/43),结肠弯曲菌占4.7%(2/43)。毒力相关基因检测显示,100.0%(43/43)的弯曲菌菌株fla A基因和cad F基因阳性,93.0%(40/43)的弯曲菌菌株cdt A基因和cdt B基因阳性,88.4%(38/43)的弯曲菌菌株cdt C基因阳性,只有7.0%(3/43)的弯曲菌菌株vir B11基因阳性。43株弯曲菌经PFGE分型,共分为6个聚类。[结论]上海市腹泻患者中分离的弯曲菌普遍存在fla A和cad F基因,cdt A、cdt B、cdt C基因携带率高,vir B11携带率略低。弯曲菌分子分型呈多样化和复杂化特征,其引起的腹泻以散发为主。     

食物中毒中副溶血性弧菌的毒力基因及同源性分析

目的探讨无锡一起食物中毒事件中副溶血性弧菌分离株的毒力基因、耐药性及分子分型情况。方法对5份食品样品、8份环境涂抹样品、7份患者肛拭子、1份厨师肛拭子分别进行致病菌的分离鉴定、毒力基因检测、血清学分型、药敏试验以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱分析。结果分离自患者肛拭子的6株副溶血性弧菌血清型为O3∶K6型,毒力基因检测跨膜转录激活蛋白基因(tox R)阳性,耐热直接溶血素基因(tdh)阳性,耐热相关溶血素基因(trh)阴性,PFGE分型图谱一致;分离自食品和环境的2株副溶血性弧菌血清型为O4∶K42型,毒力基因检测tox R阳性,tdh阴性,trh阴性,PFGE分型图谱一致;两者之间的同源性50%。8株副溶血性弧菌对临床常用的8种抗生素均敏感。结论该起食物中毒由O3∶K6型副溶血性弧菌感染引起,排除了所采集食品和环境样品被污染作为传染源的可能。     

一起副溶血性弧菌食物中毒的病原学特征分析

目的 分析2018年中山市某公司发生的1起副溶血性弧菌食物中毒分离株的血清型别、耐药表型和分子特征。方法 对该起食物中毒事件中分离的29株副溶血性弧菌进行病原学检测,采用玻片凝集法进行血清学分型,采用荧光PCR法检测tdh、tlh、trh毒力基因,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型。结果 29株副溶血性弧菌分离株血清型均为O3∶K6型;毒力基因检测结果显示,所有菌株均携带tdh、tlh基因;药敏试验结果显示,分离株对头孢唑林、氨苄西林的耐药率分别为100.00%、57.17%。28株病例分离株和1株食物分离株经NotⅠ酶切后PFGE指纹图谱高度相似,仅1株病例分离株与其他28株分离株存在2个条带的差异。结论 该起食物中毒事件的病原体为O3∶K6型副溶血性弧菌, 携带tdh、tlh毒力基因, 具有共同的耐药表型和遗传特征。     

2006年-2013年四川省副溶血性弧菌毒力基因及耐药分析

目的研究四川省副溶血性弧菌毒力基因携带及抗生素的耐药情况,为副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法运用多重荧光定量PCR对2006年-2013年共计290株副溶血性弧菌,进行耐热直接溶血素基因(tdh)和相关溶血素基因(trh)检测,用肉汤稀释法测定8种抗生素的耐药性。结果 290株菌中有22.4%的菌株仅携带tdh基因,0.7%的菌株仅携带trh基因,0.3%的菌株同时携带tdh和trh毒力基因。59株临床分离株中57株均仅携带tdh基因,检出率为96.6%。290株副溶血性弧菌仅有11株(3.8%的菌株)出现耐药。结论四川省副溶血性弧菌临床分离株多携带tdh毒力基因,食品分离株毒力基因携带率低,副溶血性弧菌分离株对抗生素敏感性较高,大多数现行临床使用的抗生素药物都是有效的,菌株的毒力基因携带与否和耐药无必然联系。     

2014－2016年厦门市思明区海产品中副溶血性弧菌动态监测

目的 掌握厦门市思明区2014－2016年5－10月份市售海产品中副溶血性弧菌的污染状况以及分离菌株的血清型、耐药性与毒力基因携带状况,为食品安全监管、食源性疾病防控提供参考。 方法 2014－2016年5－10月份自思明区农贸市场与超市采集海产品样品分离副溶血弧菌,对分离菌株进行血清学分群、药物敏感试验以及毒力基因tdh和trh检测。 结果 180份样品共检出副溶血性弧菌菌株146株,检出率为81.11%,各类海产品检出率差异无统计学意义;7－9月份检出率均较5月份高。分离菌株血清群分布广泛,呈多样化状况,且以O2(27.27%)、O1(22.60%)、O4(15.75%)、O3(10.96%)为主。所有分离株均对氨苄西林耐药,对头孢曲松等16种抗生素敏感。仅检出一株菌株携带tdh毒力基因,毒力基因检出率为0.68%。 结论 2014－2016年厦门市思明区5－10月份海产品存在严重的副溶血性弧菌污染;分离株血清型以O2、O1、O4、O3为主,呈多样性;毒力基因携带率不高;分离株均对大部分抗菌药物敏感。     

肇庆市副溶血性弧菌血清型、毒力基因和脉冲场凝胶电泳分子分型研究

目的 通过副溶血性弧菌血清型、毒力基因和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型研究,建立肇庆市副溶血性弧菌DNA指纹图谱基因库。方法 对肇庆市食物中毒分离出的28株副溶血性弧菌和食品安全风险监测的各类水产品分离的17株副溶血性弧菌进行血清分型,耐热直接溶血素相关基因(trh)和耐热直接溶血素基因(tdh)PCR检测,对45株副溶血性弧菌进行PFGE分子分型。结果 食物中毒分离的28株副溶血性弧菌,血清型以O₄:K₈(32.14%)和O₃:K₆(25.00%)为主,17株水产品分离的副溶血性弧菌,血清型以O₁:K_UT(42.11%)为主;21株(46.67%)为tdh⁺trh^-菌株,23株(51.11%)为tdh^-trh^-菌株,1株(2.22%)为tdh^-trh⁺。45株副溶血性弧菌的PFGE相似值为3.9%~100.0%,被分为36种不同的PFGE型别,带型100%相同的菌株几乎都出现在同一年代相近的时间点,但也出现了跨年代菌株。结论 肇庆市食物中毒的副溶血性弧菌以O₄:K₈和O₃:K₆血清型为主,多数菌株携带tdh基因。PFGE结果提示肇庆市流行的副溶血性弧菌存在多克隆来源。     

2009－2015年深圳市不同来源样本中金黄色葡萄球菌毒力耐药特征及分子分型研究

目的 研究2009－2015年深圳市不同来源样本中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带毒力、耐药基因、耐药表型情况和分子型别研究。 方法 2009－2015年期间,86株SA分离自医院病人、医院环境涂抹样、食物中毒等样品。PCR方法检测毒力基因、耐药基因以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的SCCmec基因型,进行蛋白A基因多态性(single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein A gene,Spa)以及多位点序列分型(multilocus sequencing typing,MLST)研究。按照美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)方法,对抗菌药物进行药敏试验。 结果 检出21种毒力基因,55株(64.0%)携带mecA基因。SCCmec分型结果,Ⅲ型为优势型别(60.0%,33/55)。86株SA分为24种Spa型,MRSA菌株Spa优势型别为t030与t437,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌菌株(methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)的优势型别为t091与t127。86株SA分为23种 MLST型,形成3个克隆复合体CC239(27.9%)、CCnew3(27.9%)与CC188(11.6%)。 结论 优势型别为ST239(Spa-t030)、STnew3(Spa-t437)具有多药耐药的特征,且携带多种毒力基因。MRSA流行株、非流行株与MSSA在携带毒力与耐药基因之间均存在差异。需要加强监测SA中的优势型别及MRSA菌株.关注其耐药的动态变化。     

2012-2014年深圳市宝安区成人和儿童感染性腹泻病原学分析

目的 了解深圳市宝安区成人(>14岁)和儿童(0~14岁)感染性腹泻的病原学差异。 方法 采集宝安区2012年1月-2014年12月成人和儿童感染性腹泻患者的粪便标本,进行病原学分离、鉴定,并对检测结果统计分析。 结果 检测成人标本4 512份,总检出率17.00%,主要病原为副溶血性弧菌,检出率为7.49%,腹泻的主要症状为腹痛和水样便,发生率分别为65.81%、53.57%。检测儿童标本2 608份,总检出率28.80%,主要病原为轮状病毒和诺如病毒,检出率分别为10.35%、8.44%,腹泻的主要症状为发热和水样便,发生率分别为32.28%和46.78%,成人和儿童腹泻均多发于夏秋两季。 结论 2012-2014年副溶血性弧菌是深圳市宝安区成人感染性腹泻的主要病原,轮状病毒和诺如病毒是儿童感染性腹泻的主要病原菌,加强不同人群的监测,根据各种病原在不同季节检出率的差异开展相应的防控措施。     

丰台区2013年水产品及腹泻患者中副溶血性弧菌脉冲场凝胶电泳分型

目的 分析丰台区2013年水产品和腹泻患者分离的副溶血性弧菌分子生物学特征及其两者之间的遗传相关性,建立丰台区副溶血性弧菌分子分型数据库。 方法 对水产品及腹泻患者中分离到的72株副溶血弧菌进行PFGE分子分型,利用BioNumerics 5.10分析软件对图谱进行聚类分析。 结果 50株水产品来源的菌株分成48个PFGE型、22株腹泻患者来源的菌株分成13个PFGE型、对菌株间的相似性进行比较发现8个100%同源的PFGE型,其他菌株的分子特征的同源性均大于50%,水产品和腹泻患者来源的菌株分子特征同源性小于80%。 结论 丰台区2013年腹泻患者分离株与水产品分离株间PFGE带型具有相似性,但是两者间的关联需要进一步流行病学证据支持。水产品来源菌株基因型呈多态分布,腹泻患者菌株整体没有发现明显优势菌群。     

粪肠球菌分子分型特点及其与泰利霉素敏感性的关系

目的 了解临床分离的粪肠球菌分子分型特征及其与泰利霉素药物敏感性之间的关系。方法 收集深圳市南山医院2010-2016年不同临床标本分离的粪肠球菌320株,采用多位点序列分型技术进行分型,用微量肉汤稀释法测定菌株对泰利霉素的最低抑菌浓度,采用PCR检测耐药基因ermB的分布。结果 320株粪肠球菌分为48个ST型和56株新的ST分型,以ST16、ST179型为主。ST16型85株（26.6%）,其中72株（84.7%）ermB阳性,29株（34.1%）对泰利霉素敏感,10株（11.8%）中介,46株（54.1%）耐药;ST179型80株（25.0%）,其中71株（88.8%）ermB阳性,15株（18.8%）对泰利霉素敏感,4株（5.0%）中介,61株（76.3%）耐药。结论 该院粪肠球菌以ST16、ST179为优势菌株,该两型菌群高比例携带ermB基因,对泰利霉素耐药率较高。     

粪肠球菌临床株对泰利唑胺体外抗菌活性的研究

目的 评价泰利唑胺体外抗粪肠球菌的活性，探讨泰利唑胺不敏感粪肠球菌的耐药机制及其多位点序列分型分布情况。方法 收集2011年1月1日—2016年6月30日深圳市南山区人民医院临床分离的粪肠球菌菌株，使用自动化仪器法及微量肉汤稀释法对分离菌株的耐药性进行检测。应用聚合酶链式反应（PCR）方法检测恶唑烷酮类抗生素耐药基因的携带情况，并采用多位点序列分型（MLST）对分离菌株进行分型。结果 共获得289株粪肠球菌，来源科室主要为外科（57.4%），标本来源主要为中段尿（126株，43.6%）。289株粪肠球菌对泰利唑胺敏感率为94.1%，对氨苄西林、呋喃西林和万古霉素有较高的敏感性（敏感率为97.9%~99.7%）。MLST结果显示，共分为47个ST型，优势ST分型为ST16和ST179，分别占29.1%（84株）和24.9%（72株），在泰利唑胺不敏感粪肠球菌中，ST16的比例高于ST179（P<0.05）。共检出泰利唑胺不敏感粪肠球菌17株，其携带optrA基因比例高于敏感株。结论 泰利唑胺对粪肠球菌的抗菌活性整体优于利奈唑胺，但对携带optrA基因的粪肠球菌则未显示出良好的抗菌活性。     

深圳市坪山新区白纹伊蚊对氯菊酯的抗性及羧酸酯酶活性研究

目的 了解深圳市坪山新区白纹伊蚊野外种群对氯菊酯抗性及羧酸酯酶活性水平,为科学合理使用杀虫剂提供数据支持。 方法 采用幼虫浸渍法对白纹伊蚊进行氯菊酯抗药性测定,同时采用酶联免疫分析法对野外及敏感品系白纹伊蚊进行羧酸酯酶活性测试,分析比较野外品系和敏感品系羧酸酯酶活性的差异。 结果 坪山新区白纹伊蚊对氯菊酯的抗药性为4.17,属低抗性;野外品系与敏感品系白纹伊蚊羧酸酯酶活性浓度分别为(1 019.768±150.189)U/ml、(768.587±84.876)U/ml ,野外品系酶活性明显高于敏感品系,差异有统计学意义(t=3.256, P=0.012)。 结论 深圳市坪山新区白纹伊蚊对氯菊酯的低抗性可能与羧酸酯酶酶活性水平高有关。     

2009年深圳市南山区性病疫情分析

目的了解深圳市南山区2009年性病流行特征,为性病防治提供参考。方法用描述流行病学方法分析取自国家疾病监测信息系统的2009年南山区性病疫情数据。结果 2009年南山区共报告5种性病3 406例,较2008年(3 526例)下降3.40%,年报告发病率为344.42/10万。男女病例数之比为1∶0.64;淋病、梅毒和尖锐湿疣报告年发病率下降,生殖道沙眼衣原体感染报告年发病率上升。病例构成中,生殖道沙眼衣原体感染比例最高,其次为淋病,尖锐湿疣居第3。梅毒新发病例减少,隐性梅毒构成比增加;男性性病最常见淋病,女性性病最多见生殖道沙眼衣原体感染;20~39岁年龄段病例占总报告病例的78.16%;性病职业分布以劳务工最高。结论综合原因导致性病流行病谱逐渐变化,因此,要相应调整控制措施和优化资源配置,加强对梅毒和生殖道沙眼衣原体感染的防治工作。重点应关注男性劳务工群体、妇女和老年群体。     

深圳市龙岗区沙门菌质粒图谱和耐药性分析

目的了解深圳市龙岗区沙门菌的质粒图谱分布和耐药性。方法利用快速小量质粒提取技术及电泳图谱方法,对深圳市龙岗区2003—2007年食物中毒及伤寒、副伤寒疫情中分离的67株沙门菌进行质粒图谱分析并做药敏试验,药敏试验采用改良K—B法。结果质粒阳性率为67．2％（45／67）。质粒携带株每株1—8个不等数量的质粒,相对分子质量大小为1．1。54．2kb,质粒条带数以1～3条居多,未发现耐药谱与质粒特征有关。沙门菌对氟哌酸、氯霉素、氨基糖苷类及第3代头孢类抗生素完全敏感,对青霉素、苯唑西林完全耐药,对头孢氨苄的耐药率高达41．8％,对氨苄西林、羧苄西林、哌拉西林、四环素和复方新诺明的耐药率分别为37．3％、37．3％、25．4％、25．4％和3．0％;沙门菌多重耐药率为13．0％。结论深圳市龙岗区人群携带的沙门菌耐药情况比较普遍;检测沙门菌质粒阳性率不高,质粒特征与耐药谱无关。     

多位点序列分型技术在深圳副溶血弧菌同源性分析中的应用研究

目的 了解副溶血弧菌临床分离株的毒力基因、血清型及基因分型特征,探讨多位点序列分型(MLST)分型技术对其同源性分析的应用价值。方法 收集深圳地区2007-2014年食物中毒及医院散发病例来源的68株副溶血弧菌菌株,对其进行血清型、毒力基因分析。选择副溶血弧菌MLST数据库提供的7个管家基因,PCR扩增测序后采用BioEdit、eBURST等软件,对本次研究的68株副溶血弧菌进行MLST同源性分析。结果 68株副溶血弧菌共得到7种不同的血清型,优势血清型为O3∶K6(47/68),其余血清型分别为O4∶K8、O5∶K68、O4∶K13等。副溶血弧菌临床分离株94%为tdh+trh-。MIST分型将68株副溶血弧菌分为5个序列型(ST型),ST3为优势序列型(55/68),其余4种ST型中的ST189与ST345构成一个同源复合体CC345,且ST189为ST345的单位点变异型。结论 深圳地区副溶血弧菌所致的腹泻病暴发疫情,其流行菌株ST型别多样化,疾病控制中需警惕非主流ST型别引起暴发可能。