MTBDR-Plus线性探针技术检测耐多药结核病效果评价

目的评估线性探针技术(MTBDR-Plus)快速筛查耐多药结核病的可靠性和应用价值。方法对230例涂片阳性肺结核患者痰液标本进行线性探针技术检测耐异烟肼、耐利福平菌株,同时进行酸性罗氏培养和比例法药物敏感性试验结果相比较。结果两种方法检测对RFP均敏感者213例,均耐药者12例,二者结果一致率97.8%(225/230);对INH均敏感者205例,均耐药18例,二者结果一致率97.0%(223/230)。MTBDRPlus技术检测耐利福平的灵敏度为80.0%(12/15),耐异烟肼的灵敏度为'78.3%(18/23),耐利福平特异度为99.0%(213/215)、耐异烟肼特异度为99.0%(213/215)。结论线性探针技术检测时间短,敏感度高,特异性强,是快速检测耐多药结核病的有效诊断方法。     

线性探针检测技术对痰标本中耐药结核分枝杆菌快速检测的应用评价

目的 评价线性探针检测技术(LPAs)直接从痰标本中检测结核分枝杆菌复合群及其对耐多药结核病的快速检测。方法 连续收取193例临床涂片抗酸染色阳性的痰标本,直接用LPAs法从痰标本中进行结核分枝杆菌复合群及其对利福平和异烟肼耐药性的检测,结果与MGIT 960系统药物敏感性试验以及利福平、异烟肼耐药相关基因rpoB、katG、inhA和ahpC的基因测序结果进行比较,评价线性探针检测技术从痰标本中检测耐药结核分枝杆菌的灵敏度、特异度和符合率。统计学分析采用kappa检验。结果 LPAs法对涂阳痰标本结核分枝杆菌复合群检测的灵敏度为100.0%,耐利福平、耐异烟肼和耐多药结核分枝杆菌复合群检测的灵敏度分别为96.0%(48/50)、92.8%(64/69)和90.0%(45/50),特异度分别为99.3%(142/143)、100.0%(124/124)和99.3%(142/143),符合率分别为98.4%(190/193)、97.4%(188/193)和96.9%(187/193)。结论 LPAs法能够直接从涂阳痰标本中检测耐多药结核分枝杆菌,对耐利福平和耐异烟肼菌株具有较高的灵敏度和特异度,与MGIT 960系统药物敏感性试验结果的一致性较好,能够明显缩短从样本接收到得到药物敏感性试验结果的报告周期,为临床准确、快速地诊断耐多药结核病提供可靠的实验室依据,有利于耐药结核病的早期诊断。     

全基因组测序技术在口岸耐多药肺结核诊断中的应用探索

目的 探索全基因组测序(whole generation sequencing,WGS)技术在口岸耐多药(multidrug resistant,MDR)肺结核(pulmonary tuberculosis,PTB)诊断中的应用价值.方法 自广州国际旅行卫生保健中心结核生物样品库中整理出单异烟肼耐药(isoniazid...     

鄂东南地区173例耐多药肺结核可疑患者耐药监测结果

目的了解鄂东南地区(黄冈市、鄂州市)耐多药肺结核可疑患者耐药情况。方法收集2015年鄂东南地区耐多药肺结核可疑者173例的痰培养均阳性且均经菌型鉴定为结核分枝杆菌(Mtb)痰标本,采用比例法进行常规药敏试验。结果173例可疑患者中,出现耐药者67例,总耐药率为38.73%,耐多药患者46例,耐多药率为26.59%。4种一线抗结核药物耐药率由高到低依次为RFP(34.68%)、INH(29.48%)、SM(9.25%)、EMB(4.05%)。初治患者耐药率(32.85%)显著低于复治患者(61.11%),差异有统计学意义(P0.05)。结论耐多药肺结核可疑者耐药及耐多药发病率均高于一般结核病人,复治患者是耐多药筛查和防治的重点人群。     

某地区耐多药结核分枝杆菌监测分析

<正>耐药结核病的广泛流行,使结核病治疗、控制和预防面临新的挑战,它是造成正规治疗失败的原因之一,也是反映化疗水平与国家结核病控制规程效能的标志。结核分枝杆菌     

耐多药肺结核患者发现和纳入治疗情况分析

摘要：目的　通过分析中国全球基金结核病项目地区耐多药肺结核患者发现和纳入治疗情况,为制定中国
耐多药肺结核防治模式提供参考资料和科学依据。方法　收集整理中国全球结核病项目月度报表,分析不
同登记分类涂阳肺结核患者中涂阳培阳率,耐多药肺结核检出率以及确诊耐多药肺结核患者的纳入比例。
结果　截至２０１２ 年１２ 月底合计筛查涂阳肺结核患者６４５２６ 例, 培养阳性５０５５６ 例, 涂阳培阳率为
７８．８％;开展药敏试验４９３９９例,确诊耐多药肺结核患者７１３９例,耐多药肺结核检出率为１４．５％;其中
复治失败、初治失败、复发、初治３月末阳性和新患者中检出的耐多药肺结核患者数分别为１４４３例、６０５
例、２２８４例、１０５例和１４９６例,耐多药肺结核检出率分别为５５．８％、３７．９％、２６．０％、２４．３％和４．８％;
确诊耐多药肺结核患者纳入治疗的比例为６４．８％。结论　高危人群应该作为耐多药肺结核筛查的重点人
群,应通过加强患者健康教育、保证药物不间断供应等多方面措施提高确诊患者纳入规范化治疗的比例。
关键词：耐多药;结核／肺;培养;药物敏感试验;治疗
中图分类号：Ｒ１８３．３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０６ ０５４６ ０４     

耐多药肺结核的影响因素及风险预测

目的探索耐多药肺结核(MDR-TB)的发病危险因素,并构建风险预测模型。方法整群抽取2014年6月至2015年12月武汉市结核病防治所登记耐多药肺结核病例为病例组,未患有结核病的健康人群为对照组。自行设计调查表,面对面调查收集相关资料。用logistic回归法筛选危险因素,构建风险预测模型;采用H-L检验评价拟合优度,ROC曲线下面积来评估其预测效能。结果多因素logistic回归分析显示,性别为男性、婚姻状况(未在婚)、无固定职业、经常去公共场所为MDR-TB发生的独立危险因素(P<0.05)。H-L检验结果为:χ~2=6.508,P=0.482。ROC曲线下面积为0.810(95%CI:0.757~0.862)。结论性别为男性、婚姻状况(未在婚)、无固定职业、经常搭乘公共交通工具(去公共场所)与MDR-TB的发生相关。Logistic回归模型预测MDR-TB发生风险精度较高。     

耐多药肺结核门诊个体化治疗的研究

目的探讨耐多药肺结核（MDR-PTB）个体化治疗的疗效和安全性。方法对MDR-PTB患者，给以3HPKzLTh／3DZLTh／9DLTh为主体方案的个体化治疗，观察痰菌阴转、肺部X线病灶的吸收率以及药物的毒副反应。结果41例患者丢失6例，35例完成15个月疗程，痰菌阴转率82.86％（29／35），X线病灶好转率85．71％（30／35），随访12个月痰菌复阳率5．7％（2／35）。完成疗程35例中，有肝功能出现异常者6例，其中1例在疗程末期出现严重肝功能异常，有2例出现蛋白尿、8例血尿酸增高，但经对症治疗都能基本恢复正常而顺利完成15个月治疗。结论MDRPTB的治疗，采用3HPKX LTh／3DXL Th／9DLTh为主体的化疗方案治疗，其痰菌阴转率和x线病灶吸收率都比较满意。     

HAIN技术快速检测耐药结核病及耐多药结核病效果评价

目的评价线性探针(HAIN)技术快速检测耐药结核病及耐多药结核病(MDR-TB)的临床应用效果。方法应用HAIN技术和传统比例法药敏试验(简称"药敏法")检测300株结核分枝杆菌临床分离株的耐药性,以药敏法结果为金标准,分析HAIN技术对诊断耐药结核病及耐多药结核病的特异性、敏感性和符合率。结果 HAIN技术检测与药敏法检测临床毒株耐药率和耐多药率结果差异均无统计学意义(P值均>0.05)。HAIN技术检测菌株对利福平耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为96.30%、99.20%和99.33%;对异烟肼耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为97.47%、99.09%和99.33%;对MDR-TB耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为92.86%、99.27%和99.33%。HAIN技术检测时间一般为≤6h,药敏法为4~6w。结论 HAIN技术能够快速检测耐药、耐多药结核病,可在有条件的实验室进行推广。     

泰安市51例耐多药结核病患者情况分析

目的分析探讨耐多药结核病(MDR-TB)患者的耐药情况和形成耐药原因。方法对2010年1月至2011年12月泰安市结核病防治院就诊的51例MDR-TB患者,分析耐药情况和耐药形成原因。结果 51例MDR-TB患者中,男性为70.59%(36/51),64.71%(33/51)的患者为农民,住院两次及以上的占29.41%(15/51),有过结核病密切接触史的患者为17.65%(9/51),胸片显示有空洞的患者为41.78%(21/51),合并肺部其他疾病、糖尿病的患者分别占50.98%(26/51)和19.61%(10/51)。MDR-TB耐药率为13.11%(51/389),17.65%的新患者曾用抗结核药。初治痰培养阳性肺结核患者中耐多药率为8.30%(24/289),复治痰培养阳性肺结核患者中耐多药率为27.00%(27/100),差异有统计学意义(P0.05)。MDR-TB患者的耐药谱中,对INH+RFP、RFP+INH+SM、RFP+INH+SM+EMB、RFP+INH+EMB+PAS这4种组合常见。结论 51例MDR-TB患者以中年男性为主,耐药谱比较复杂,复治患者和曾用过抗结核药的初治患者易导致MDT-TB的发生,应加强肺结核患者的宣教管理,规范化治疗。     

MTBDR plus线性探针技术快速检测结核分枝杆菌耐药性的临床应用评价

目的评价线性探针杂交技术(简称HAIN技术)对耐药结核分枝杆菌的检测效果,评估其应用价值。方法利用传统罗氏培养及药敏试验和HAIN技术同时对开封市2010年4～10月份登记的453例涂阳肺结核患者进行耐多药检测,以传统罗氏培养及药敏试验为金标准对HAIN技术的检测效果进行评价。结果具有完整耐药检测结果的430例患者纳入分析。HAIN技术对新涂阳患者(P=0.589)和复治涂阳患者(P=1.000)耐药的检测效果与金标准差异无统计学意义。检测初治涂阳患者耐多药灵敏度为66.67%,Kappa值为0.56,阳性预测值为50.00%;检测复治涂阳患者耐多药的灵敏度为69.23%,Kappa值为0.61,阳性预测值为69.23%;所有检测结果的特异度均>91.00%,阴性预测值均>91.00%。结论 HAIN技术同传统方法检测涂阳肺结核患者耐药情况相比差异无统计学意义,但HAIN技术对初治涂阳患者耐多药的阳性预测值偏低,检测效果有一定局限性,可能会在实际应用中造成过度诊断。     

MODS法在结核分枝杆菌检测和药物敏感性实验中的临床应用评价

目的:评价MODS(显微观察药敏分析)技术在痰中结核分枝杆菌检测以及药物敏感性实验中的临床应用价值。方法:分别应用MODS法、L-J培养基培养和比例法(MOP)对涂阳肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌进行检测和药敏实验,并对实验结果进行比较分析。结果:128份涂阳痰标本培养,MODS法与L-J培养的结核分枝杆菌阳性检出率分别为92.8%和84.13%(χ2=4.62,P<0.05);不同药物浓度(INH0.4μg/ml,INH0.1μg/ml;RIF1μg/ml,RIF0.5μg/ml)MODS法药敏实验结果与比例法(INH0.2μg/ml,RIF40μg/ml)的一致率分别为96.8%、95.2%、98.4%、96.8%,一致性程度Kappa值分别为0.91、0.87、0.94、0.90,两法在不同药物浓度下差异均无统计学意义(McNemar’sχ2分别为2、0.33、1和0,P值均大于0.1)。MODS法中分枝杆菌检测和药敏实验结果平均所需时间最短(9 d和9.5 d)。结论:MODS是一项符合发展中国家的廉价、快速、简便、高效的结核病培养诊断和药敏检测新技术。     

线性探针技术诊断耐药肺结核准确性的Meta分析

目的 采用Meta分析方法评价线性探针技术对耐药肺结核诊断的准确性。方法 通过检索中文数据库（中国知网、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献服务系统、维普期刊中文期刊服务平台）和英文数据库（PubMed、Embase、Cochrane Library）获得2000年1月1日至2017年9月1日发表的线性探针技术对中国耐药肺结核患者诊断准确性的研究。使用诊断准确性研究质量评价标准-2（QUADAS-2）进行质量评价。通过Meta分析（双变量或单变量模型）合并各研究（金标准为传统药敏试验或耐药相关基因测序）的灵敏度和特异度,然后对亚组（GenoType MTBDRplus、GenoType MTBDRsl和反向斑点杂交技术）进行分析,并进行敏感性分析。结果 最终纳入24篇文献,共包括82项研究。线性探针技术诊断耐利福平肺结核的灵敏度为0.91（0.88～0.94）,特异度为0.98（0.97～0.99）;诊断耐异烟肼肺结核的灵敏度为0.80（0.77～0.83）,特异度为0.98（0.96～0.99）;诊断耐多药肺结核的灵敏度为0.81（0.76～0.85）,特异度为0.99（0.99～1.00）;诊断耐喹诺酮肺结核的灵敏度为0.92（0.88～0.95）,特异度为0.94（0.91～0.97）;诊断耐二线注射类（包括卡那霉素、卷曲霉素、丁胺卡那霉素）肺结核的灵敏度为0.79（0.58～0.91）,特异度为0.98（0.90～1.00）;诊断广泛耐多药肺结核的灵敏度为0.46（0.19～0.75）,特异度为1.00（0.98～1.00）。亚组分析显示GenoType MTBDRplus和GenoType MTBDRsl诊断准确性整体上高于反向斑点杂交技术。敏感性分析显示本研究结果较为稳定。结论 线性探针技术对耐药肺结核的诊断准确性较高。     

应用探针熔解分析法检测结核分枝杆菌rpoB基因突变

目的 研究结核分枝杆菌利福平耐药突变实时PCR检测试剂盒(探针熔解分析)的临床应用价值.方法 用37株非结核分枝杆菌考察该方法的特异性,用菌株H37Rv考察其检测限,并检测962份结核分枝杆菌培养标本的rpoB基因利福平耐药决定区突变,检测结果经测序验证.结果 37株非结核分枝杆菌中仅有3株出现耐药突变峰,检测限考察结果表明该方法每反应可重复检出30个菌.用该试剂盒检测962份标本,检出突变株186份,野生株751份,扩增失败标本25份.选取2009年11月以后的标本中试剂盒检出为突变的标本112份,并数字表法随机选取200份试剂盒检出为阴性的标本,进行测序验证,除5份测序失败其余107份标本的DNA序列分析结果与试剂盒检测结果一致.结论 该试剂盒准确快速,方便易行,是检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的有力工具.

Abstract：

Objective To evaluate the clinical performance of a probe melting analysis ( PMA)-based real-time PCR detection kit in rapid detection of rifampin-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis (MTB). Methods The specificity of the assay was evaluated by detecting 37 non-tuberculous mycobacteria (NTM) ,and the detection limit of the method was evaluated by genomic DNA of a standard strain H37Rv. Finally, 962 clinical isolates were analyzed with the PMA assay by detecting mutations in rifampin resistance-determining region (RRDR) of rpoB gene, and results were verified with DNA sequencing. Results Among 37 NTM strains,three strains showed drug resistant mutation signals. The PMA method could detect down to 30 bacteria per reaction. Sample analysis showed that 186 of 962 isolates were mutants,751 isolates were wild type and 25 isolates failed to give amplification signals. Among the mutant samples detected, 112 samples from November 2009 to April 2010 were further analyzed by sequencing, as well as 200 wild-type samples. The results showed a complete agreement with the PMA assay except for 5 samples failed in sequence analysis. Conclusion The PMA assay is rapid, accurate and easy-to-use, and thus can be used for detection of rifampin-resistant in clinical isolate samples.     

BACTEC MGIT 960培养结合INNO-LIPA~(TM) RIF.TBDNA探针新技术快速诊断结核病

目的通过MGIT960培养系统结合国外最新的INNO -LIPATM RIF.TB(LIPA)DNA探针技术的应用 ,探讨其快速诊断结核病的可行性。方法应用BACTECMGIT960系统进行临床疑似结核病例标本的培养 ,筛选了70例结核分枝杆菌 ,35例非结核分枝杆菌 ,用LIPA探针技术诊断是否为结核分枝杆菌。结果用LIPADNA方法在70例结核分枝杆菌中获得阳性69例 ,占98.6 % ;35例非结核分枝杆菌均为阴性。与单纯消化纯化后涂片的82.9 % (58/70)的阳性率相比增加了15.7个百分点 ,两者在统计学上差异有显著性(P<0.05)。BactecMGIT960培养结合LIPADNA探针与传统诊断方法4～8周相比 ,整个过程只需6～37天 ,平均15天 (2周 )。结论LIPADNA探针是一种具有高度敏感性和特异性、能够简便、快速、准确地诊断结核病的新技术。同时还能鉴定rpoβ 基因位点的突变 ,诊断耐利福平 (RMP)性结核 ,有望适用于结核分枝杆菌耐RMP性结核的快速检测 ,进一步为结核病快速准确的治疗提供理论依据。     

2672例住院肺结核病人的耐药情况分析

目的了解住院肺结核病人的耐药情况。方法对安徽省胸科医院2011年11月-2013年5月痰结核菌培养阳性住院肺结核患者,采用改良罗氏培养基对结核杆菌进行培养和药敏实验,按《结核病诊断细菌学检验规程》要求,进行标本收集、处理及分离培养、菌种鉴定,并对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素进行药敏实验。结果收治的2 672例肺结核病例,耐药率为25.5%,其中初治组为12.6%,复治组为58.8%;耐多药率初治组为4.1%,复治组为34.7%,以上差异均有统计学意义(P值均0.01)。耐1种、2种、3种、4种抗结核药物耐药率复治组均高于初治组(P值均0.01)。初治组中耐药率最高的为链霉素(8.6%),复治组中最高的为利福平(50.5%),不同抗结核药物两组耐药率差异均有统计学意义(P值均0.01)。复治耐药肺结核病人中,发生不规则用药、治疗中断的占79.5%。结论肺结核病人耐药情况严重,不规则用药和治疗中断是导致耐多药的主要原因。应加强督导和管理,防止耐药菌株的产生和传播。     

TaqMan-MGB荧光定量PCR快速检测痰结核分枝杆菌异烟肼耐药效果的评价

目的评价通过检测结核分枝杆菌katG基因突变以诊断异烟肼耐药并检测结核分枝杆菌的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。方法收集临床诊断为肺结核病的患者痰样本,用已建立的荧光PCR方法进行检测,与常规痰涂片抗酸染色、分枝杆菌培养和传统比例法药敏试验比较,评价检测结核分枝杆菌敏感性和特异性及异烟肼耐药的特异性和敏感性。统计学分析采用χ2检验,P值<0.05为差异有统计学意义。结果荧光定量PCR共检测186份痰液样本,敏感性为84.47%,特异性为100.00%。在确诊病人的痰液中阳性检出率84.47%,明显高于痰涂片40.99%(χ2=46.44,P<0.01),痰培养40.37%(χ2=47.89,P<0.01),且差异有统计学意义。其中荧光PCR在菌阳痰液中检出率94.44%,涂阴培阴的痰液中检出率75.28%。与常规药敏试验结果比较,培养阳性的61份痰样本的药敏符合率96.72%(59/61),敏感性33.33%(1/3),特异性100.00%(58/58)。结论 TaqMan-MGB荧光定量PCR的方法能特异、灵敏、快速诊断痰液中的结核分枝杆菌及其异烟肼耐药性。     

实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达

目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,利用实时定量PCR的方法,检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后,whiB7基因的表达水平变化不明显外,其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐药株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因,推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。