20(S)-原人参二醇的药理作用研究进展

目的:对20(S)-原人参二醇的药理作用方面的研究进行文献整理和分析。方法:查阅中国知网,万方数据,维普,Springer,Pubmed,Ovid等数据库中近15年来国内外有关中药活性化合物20(S)-原人参二醇的近30篇文献资料,对其药理活性按研究的热门程度进行统计概括。结果:20(S)-原人参二醇具有抗癌、抗抑郁、激活氯离子通道和抑制钠离子通道去极化的作用、抑制人胚肾HEK-293细胞和幽门螺旋杆菌生长等诸多药理活性。结论:首次对20(S)-原人参二醇的药理活性进行较为全面的整理,为医药学科研人员今后开展有关20(S)-原人参二醇的药理研究提供参考和借鉴,今后应加强其药理作用机制及毒性的研究,为开发新药打下基础。     

20(S)⁃原人参二醇止血作用及其机制

目的通过体内和体外实验研究20(S)?原人参二醇对小鼠凝血系统的作用和对人/鼠血小板的活化作用,探讨原人参二醇的止血作用及相关的作用机制。方法小鼠断尾和肝划痕法观察小鼠出血时间;自动血液分析仪检测大鼠血常规;自动凝血分析仪检测大鼠凝血四项指标;酶联免疫吸附法检测血小板中环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平;Cytation 5多功能酶标仪检测洗涤人血小板内钙离子的浓度([Ca²⁺]i);比色法观察血小板的聚集率;流式细胞术检测洗涤人血小板中CD62P和PAC?1相关表达。结果原人参二醇能缩短小鼠的出血时间;增加红细胞参数中的红细胞数量(RBC)和红细胞压积(HCT),提高血小板参数中血小板数量(PLT)和血小板压积(PCT);缩短大鼠活化部分凝血活酶时间(APTT),中剂量和高剂量组可增加纤维蛋白原的表达。同时,原人参二醇能提高大鼠洗涤血小板cAMP水平、血小板内[Ca²⁺]i和血小板聚集度;增加洗涤人血小板CD62P释放和PAC?1表达。结论原人参二醇具有一定的止血作用,一方面通过激活大鼠的内源性凝血系统,影响体内血小板和红细胞参数,促进血浆中纤维蛋白原生成;另一方面通过影响钙离子和cAMP信号通路,增加血小板Ca²⁺内流、CD62P释放和促进PAC?1的表达,最终诱导血小板聚集,形成血栓,发挥止血作用。     

20(S)-原人参二醇药质体的制备及体外评价

目的:研制20(S)-原人参二醇(Ppd)药质体和Brij78修饰的Ppd药质体并对其进行体外评价。方法:采用薄膜超声法制备Ppd药质体和Brij78修饰的Ppd药质体,用超速离心法测包封率,用动态光散射(DLS)考察粒径分布,以粒径和包封率为指标,分别考察温度、乙醇、酸碱和人工胃肠液等对药质体的影响。结果:薄膜超声法制备的Ppd药质体的包封率为(80.84±0.53)%,粒径100.1 nm;Brij78修饰的Ppd药质体的包封率为(72.76±0.63)%,粒径为117.3 nm。结论:该药质体制备工艺简单可行,制剂学性质较稳定。     

20(S)-原人参二醇的荧光示踪及体内活性探析

目的 旨在明确二醇型人参皂苷在肠道菌群作用下的代谢产物20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]是否具有基本的生物活性,为后续研究提供基础数据。方法 选择萘酰亚胺作为初级荧光基团,设计荧光探针N-丁基-4-溴-1,8-萘酰亚胺的合成路线,将该荧光探针接入到20(S)-PPD中,制备得到N-丁基-4-溴-1,8-萘酰亚胺标记的20(S)-PPD;然后将其与大肠杆菌混匀作为食物喂给模式生物秀丽隐杆线虫,借助荧光显微技术察线虫的游泳能力及虫体内的荧光强度,检测其在线虫体内的分布及药物活性。结果 与空白组相比,PPD给药组线虫体内的荧光强度和分布差异有统计学意义(P=0.036),并随剂量的增加而增强;且给药后的线虫1min内身体摆动次数明显增多,存在显著统计学意义(P<0.01)与显著差异(P<0.05)。结论 该20(S)-PPD荧光探针在线虫体内跨细胞膜转运且增强线虫的运动能力,为20(S)-原人参二醇在体内的活性研究与检测提供技术支持。     

RP-HPLC法测定20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率

目的:建立20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率的测定方法.方法:采用RP-HPLC法.色谱条件:COSMO-SIL 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(95:5);流速1.0 mL·min(- 1);检测波长203 nm;柱温25℃;进样量50μL;采用低温超速离心法分离PPD药质体中的游离药物.结果:在上述色谱条件下豆磷脂和试剂对药物的测定无干扰,20(S)-原人参二醇在0.1～0.5 g·L(- 1) 与峰面积的线性关系良好(r=0.999 9),回收率在101.44%～103.11%,日内及日间RSD均小于2%(n=3).结论:RP-HPLC法可用于20(S)-原人参二醇药质体含量及包封率的测定.     

20(S)-原人参二醇片含量测定及体外评价方法的研究

目的:制备20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]片,建立其含量测定及溶出度考察方法。方法:采用高效液相色谱法,C18色谱柱,乙腈-水(88∶12)为流动相,检测波长203 nm,流速1.0 mL.min-1,对样品中的20(S)-原人参二醇含量进行测定;并参照《中国药典》2010年版二部溶出度测定法第二法,以0.5%十二烷基硫酸钠水溶液为溶出介质,转速为100 r.min-1,对其进行体外溶出度考察,采用SAS软件非线性回归NLIN程序包中的Levenberg-Marquardt法进行迭代计算药物溶出度Weibull分布参数和特征溶出参数。结果:20(S)-原人参二醇的含量测定线性范围为20.4～1 020.0 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为97.0%,RSD为1.99%;溶出度方法学考察,含量测定线性范围为10.0～80.0 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为99.9%,RSD为2.13%,20 min即溶出完全;Weibull分布参数α位置参数为0.5 266,m形状参数为0.602 1,β尺度参数为2.387 2;特征参数Td为4.766 8 min,T50为2.834 7 min。结论:所建立的20(S)-原人参二醇片剂的含量测定和体外溶出度测定方法简便、准确、可靠,采用SAS系统可以简单快速的求解药物溶出度Weibull分布参数和特征参数。     

20(S)-原人参二醇干混悬剂的处方及初步质量研究

目的制备20(S)-原人参二醇干混悬剂,建立该制剂定量测定方法。方法以20(S)-原人参二醇为主药,泊洛沙姆(Poloxamer)188,Avicel CL 611,尼泊金甲酯,尼泊金丁酯和甜菊素为辅料制备20(S)-原人参二醇干混悬剂,并制定产品的检测方法。结果以Avicel CL 611作为助悬剂制备的20(S)-原人参二醇干混悬剂稳定性良好,且形成的混悬液符合干混悬剂的各项质量指标。高效液相色谱法测定干混悬剂中20(S)-原人参二醇的量,标准曲线回归方程为A=11.412 6C+174.39(r=0.999 8)。结论处方合理,制备工艺可靠。采用高效液相色谱法测定时,专属性强、准确度好、灵敏度高、辅料无干扰。     

20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇对抗肝癌药物的增敏作用研究

目的探讨20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇(人参皂苷IH901)与医学上常用抗肝癌药物环磷酰胺(CTX)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(cDDP)单独用药及联合用药体外抗肝癌细胞Bel-7402、SMMC-7721的活性。方法应用MTT法检测人参皂苷IH901、CTX、5-FU、cDDP分别在不同质量浓度下单独及联合用药对肝癌细胞的增殖抑制率,并根据金氏公式计算其协同指数(Q值),进而评价两药联用的增敏效果。结果 IH901与CTX联合用药后对Bel-7402、SMMC-7721抑制作用明显增强,且二者合用具有协同作用;而IH901与5-FU联合用药后对2种细胞仅相加效果;IH901与cDDP联合用药,对Bel-7402仍然是相加的效果,对SMMC-7721则是具有轻微的协同效果。结论人参皂苷IH901可增强CTX对肝癌细胞增殖的抑制作用,具有化疗协同效果,且具有一定的广谱性,可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

20(S)-原人参二醇组皂苷的制备及其转化制取人参皂苷Rh2

目的：制取２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷并将其转化制备抗癌活性单体２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２。方法：以国产西洋参茎叶总皂苷为原料，通过萃取法制备２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷；将２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷碱催化水解后，经柱层析分离纯化制备２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２。结果：２０（Ｓ）原人参二醇组皂苷收率为４１．５％，其转化成２０（Ｓ）人参皂苷Ｒｈ２的转化率为９．６４％。结论：制取方法简便，收率较高。     

肝星状细胞(HSC)凋亡机制研究进展

肝星状细胞是一种肝脏非实质性细胞,它的活化、增殖与凋亡在肝纤维化过程中起着核心作用。HSC的凋亡是减少活化的HSC的主要途径,其凋亡机制非常复杂,主要与一些细胞因子、相关基因和蛋白、粘附分子等有关。     

20(S)-原人参二醇对肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的研究20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞凋亡及周期的影响,并在裸小鼠人肺癌模型上观察20(S)-原人参二醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果20(S)-原人参二醇对A549细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系,并且流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,24小时凋亡率分别为32.47%、32.75%、33.51%。荷瘤裸小鼠动物实验表明,20(S)-原人参二醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为18.78%、34.37%、50.02%。结论20(S)-原人参二醇对A549细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用。     

保肝宁对肝星状细胞的促凋亡作用

目的:采用血清药理学方法观察保肝宁对肝星状细胞(HSC)凋亡的影响。方法:给正常Wistar大鼠灌胃保肝宁煎剂7 d,制备含药血清,以HSC为研究对象,采用荧光染色、琼脂糖凝胶电泳法、WesternBlot法观察其对HSC凋亡的影响。结果:保肝宁能显著促进体外培养的HSC的凋亡,随着作用时间的延长,HSC的凋亡明显增多;保肝宁可显著抑制NF-kB、IkB的表达。结论:凋亡是活化的肝星状细胞减少的主要途经,保肝宁对HSC的促凋亡作用是抗肝纤维的主要机制之一。     

总状毛霉对20(S)-原人参二醇的微生物转化及条件优化

目的: 利用微生物转化的方法构建20(S)-原人参二醇过氧衍生物的新合成途径,并对转化条件进行优化,提高过氧衍生物的产率。方法: 选取总状毛霉Mucor racemosus AS 3.205为转化菌株,从接菌量,底物浓度,转化时间,加样时间,温度,转速等方面对转化条件进行优化。结果: 获得2个20(S)-原人参二醇过氧衍生物,20(S)-原人参二醇为25,26-烯-24(R)过氧羟基-20(S)-原人参二醇和23,24-烯-25过氧羟基-20(S)-原人参二醇;获得了优化的转化工艺,即接种量为10%,底物浓度为0.25 mmol·L^-1,加样时间为转种后48 h,培养温度为28 ℃,转化时间为5 d,摇床转速为150 r·min^-1。结论: 该方法能简便的获得20(S)-原人参二醇过氧衍生物,采用优化后的转化条件25,26-烯-24(R)过氧羟基-20(S)-原人参二醇和23,24-烯-25过氧羟基-20(S)-原人参二醇的产率均明显增大。     

20(S)-原人参二醇聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的制备

目的:制备20(S)-原人参二醇聚乳酸-羟基乙酸微球。方法:以聚乙烯醇为乳化剂,乙酸乙酯和二氯甲烷混合液为油相,采用乳化溶剂挥发法制备20(S)-原人参二醇聚乳酸-羟基乙酸微球,在单因素试验基础上,以微球收率、包封率、载药量的综合评分为指标,通过正交试验设计优选处方工艺,并进行体外释放特性研究。结果:优选的处方工艺为O/W体积比1∶50,PVA质量分数0.5%,投药量20 mg。制备的微球外观圆整,平均粒径约1.16μm,收率35.58%,包封率41.76%,载药量19.61%。微球在前0.5 h内的释放量18.24%,至192 h时,累积释放量高达98.99%。结论:该优选处方和制备工艺稳定可行,制备的微球具有明显的缓释效果。     

20(R)-原人参二醇酸水解条件的工艺研究

目的:优化三七茎叶总皂苷的盐酸水解工艺,提高水解产物20(R)-原人参二醇[20(R)-protopanaxadiol,20(R)-PPD]的产率。方法:采用正交试验设计,考察料液比、盐酸浓度、水解时间、水解温度对三七茎叶总皂苷水解过程的影响。结果:影响水解的主次因素依次是盐酸浓度>料液比>水解温度>水解时间,优选的最佳工艺为料液比1∶1;盐酸浓度17.1mol·L-1,水解时间90min,水解温度50℃。结论:采用优化后的水解条件能够提高PPD的转化率,适合工业化生产。     

HPLC-ELSD法测定人参属药材不同部位中的20(R)-25-羟基-原人参三醇

目的在人参属资源中研究20(R)-25-羟基-原人参三醇[20(R)-25-OH-PPT],为人参皂苷降血糖作用的创新和研发提供科学依据。方法色谱柱Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(70∶30);柱温35℃;体积流量1.0 m L/min;ELSD气化室温度87.0℃,载气流速2.20 L/min;进样体积10μL。采用HPLC-ELSD法测定人参属植物不同部位提取物(以丙酮为溶剂,采用超声法提取)中20(R)-25-OH-PPT。结果 20(R)-25-OH-PPT在0.001~0.050 mg/m L线性关系良好,在人参茎叶、人参根、人参果、人参花、西洋参茎叶、西洋参根和三七芦头总皂苷中的量分别为3.74%、2.59%、2.37%、0.40%、0.68%、0.22%和0.39%,回收率为98.54%、97.54%、100.35%、101.46%、97.46%、99.14%和99.38%。结论20(R)-25-OH-PPT存在于人参属植物多个部位中,可作为人参皂苷降血糖作用开发利用的重要依据。     

原人参萜二醇皂苷的肠细菌代谢物诱导Lewis肺癌细胞凋亡

探讨了原人参萜二醇皂苷生成的肠细菌代谢物M1诱导Lewis肺癌(LLC)细胞凋亡的作用及其机制。 方法:①抗肿瘤活性:在C57BL/6无菌雌性小鼠植入肿瘤后第1d经口给予M1,连续14d。第17d通过检测肺内植入肿瘤的体积和转移到纵隔淋巴结的肿瘤重量来评估抗肿瘤效应。②体外生长抑制实验:将Lewis肺癌细胞接种于96孔培养板,孵育24h后,加入不同浓度的M1继续培