中医药通过调控自噬治疗胃癌及癌前病变的研究现状

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,胃癌前病变则是正常胃黏膜恶性发展成胃癌过程里的一个长期阶段,胃癌及癌前病变临床难以治愈,预后较差,且对患者的日常生活质量有着严重消极影响。近几年,对于细胞自噬的相关研究一直位于自然生命科学领域的前沿,通过调控细胞自噬以治疗胃癌前病变,预防胃癌已成为了时下研究热点。自噬是细胞在将部分多余或受损的胞质、蛋白及细胞器包裹,形成自噬体,并与溶酶体相结合,将内容物进行降解的过程。自噬对不同细胞及同一细胞的不同阶段具有双向作用,较低水平的自噬对癌细胞具有杀伤作用,而在乏氧、饥饿、感染等应激条件下,或自噬清除胞内受损蛋白质,细胞器功能异常时,自噬对癌细胞的生长和增殖会起到促进作用。中医药对胃癌及癌前病变的治疗具有较好的疗效,且毒性较低,患者易于接受。在现阶段,以细胞自噬为切入点,探讨中医药防治胃癌及癌前病变的研究已经深入开展,越来越多的实验研究结果证实,中医药可通过干预多种自噬相关基因、信号通路及细胞器,对胃癌细胞自噬过程进行调控,发挥抗肿瘤的作用。现对中医药调控细胞自噬以治疗胃癌及癌前病变的相关研究进行综述,旨为未来中医药在调节自噬相关研究中提供一定参考。     

Beclin1诱导自噬在胃癌发生发展过程的机制研究

自噬是一种高度保守的细胞行为,是体内多余的长寿命蛋白质、细胞器和部分细胞质依赖溶酶体降解的复杂的催化过程。在肿瘤发展过程中,自噬活性的改变犹如一把"双刃剑",既能够使肿瘤细胞耐受应激条件获得生存,又可以减轻各种应激条件下的细胞损伤而减少肿瘤发生。而Beclin1是自噬体形成过程中的一个必需分子,可以介导其他自噬蛋白定位于前自噬小体的关键因子调控自噬体形成与成熟。目前研究发现,自噬的激活和诱导与胃癌的发生发展均有着密切的联系。文章从胃癌细胞中自噬相关基因Beclin1的表达情况及其与胃癌关系的角度进行概述。     

基于细胞自噬理论探析胃癌的中医药防治机制

胃癌是指发生在胃上皮组织的恶性肿瘤,临床难以治愈,预后较差,发病率和致死率常年居高不下。近年来,通过调控细胞自噬防治胃癌成为研究的热点。自噬是指细胞利用溶酶体消化降解自噬体中多余或受损的胞质、蛋白及细胞器,以实现细胞成分再循环使用的过程。低水平自噬对癌细胞有杀伤作用,当处于应激状况下可促进癌细胞增殖,因此自噬被喻为一把"双刃剑",在癌症的发生、发展、转移等方面发挥着重要作用。越来越多研究表明,中医药宏观上可针对胃癌病机辨证论治,微观上可通过干预自噬相关基因、信号通路及蛋白活性,进而调控胃癌细胞的自噬过程,有效发挥抗癌作用。以细胞自噬为切入点,探析中医药通过调控自噬对胃癌细胞的影响和作用,以期对胃癌的临床防治提供参考。     

基于细胞自噬的胃癌中医药防治

自噬是细胞通过消化降解自身蛋白、细胞器和胞质,实现细胞成分的循环利用,是以维持细胞的正常代谢和生存的生物过程,在肿瘤的形成及进展中发挥抑制和促进的双重作用。自噬调控复杂且多样,肿瘤患者体内普遍存在自噬调控失衡,中医药能通过诱导自噬性死亡、抑制保护性自噬、协调自噬与凋亡关系等,有效调控自噬而发挥抗肿瘤作用,为肿瘤的防控提供了新方向。以细胞自噬为切入点,将中医药通过调控自噬在胃癌发生发展及治疗中所发挥的作用进行总结,以期为胃癌的临床防治提供参考。     

胃肠安诱导胃癌MKN45细胞自噬的机制

目的:观察健脾复方胃肠安对人胃癌MKN45细胞自噬的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:体外培养人胃癌MKN45细胞,采用细胞活力检测法(CCK-8)检测不同质量浓度胃肠安(250,500,1000,2000 mg·L^-1)作用体外培养的人胃癌细胞MKN45细胞,共孵育24,48,72 h,检测细胞增殖活力的改变;采用吖啶橙(AO)染色和单丹磺胺戊二胺(MDC)染色观察胃肠安对胃癌MKN45细胞自噬小体及自噬囊泡的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测微管相关蛋白1轻链3(LC3),酵母ATG6同源物(Beclin1),泛素结合蛋白-1(p62),自噬相关基因5(ATG5),自噬相关基因7(ATG7)mRNA和蛋白的表达。结果:CCK-8实验显示,与空白组比较,胃肠安(500,1000,2000 mg·L^-1)可明显抑制MKN45细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01);AO和MDC染色显示,与空白组比较,随着胃肠安浓度的增加,自噬小体和自噬囊泡含量逐渐增加;Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组比较,胃肠安(1000 mg·L^-1)组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ,Beclin1,ATG5,ATG7 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),p62表达下降(P<0.05,P<0.01)。结论:胃肠安可诱导人胃癌MKN45细胞自噬,其机制涉及上调自噬相关基因Beclin1,ATG5,ATG7 mRNA和蛋白表达,下调p62 mRNA和蛋白表达,促进自噬标志蛋白LC3-I向LC3-Ⅱ转化。     

竹节香附素A对胃癌SGC-7901细胞凋亡、自噬的影响

目的探讨竹节香附素A(RA)对胃癌SGC-7901细胞的影响及其分子机制。方法 MTT观察RA对胃癌细胞SGC-7901生长抑制;流式细胞术检测RA对细胞凋亡的影响;透射电镜观察RA诱导自噬;Western blot检测凋亡、自噬相关蛋白表达。结果 RA能显著抑制SGC-7901细胞生长;RA能诱导SGC-7901细胞凋亡和自噬;Western blot检测发现,随着给药剂量增加,LC3-I逐渐向LC3-II翻转,PARP及bcl-2表达递减,bax、p-p38表达递增。结论 RA能有效抑制SGC-7901细胞生长,其机制可能是诱导细胞凋亡和自噬,RA诱导凋亡及自噬可能是通过激活MAPK通路实现的。     

丹参酮ⅡA诱导体外胃癌细胞的自噬

目的探讨丹参酮ⅡA体外对人胃癌SGC7901细胞自噬的影响,初步探讨其抑制肿瘤的机制。方法 MTT法检测不同质量浓度(0.5、1、2和4μg/mL)丹参酮ⅡA作用体外培养的胃癌SGC7901细胞共孵24、48、72 h后,细胞增殖活力的改变;1、2和4μg/mL丹参酮ⅡA作用SGC7901细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞自噬小体的水平;实时定量RT-PCR和Western blot分别测定自噬相关蛋白Beclin 1、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、LC3-Ⅱ和LC3-I的mRNA和蛋白的表达水平。结果 0.5μg/mL丹参酮ⅡA对胃癌SGC7901细胞没有明显的生长抑制作用,1μg/mL以上各质量浓度丹参酮ⅡA对胃癌SGC7901细胞则有明显的生长抑制作用;流式细胞分析结果显示,与对照组相比,丹参酮ⅡA诱导细胞凋亡(P<0.05);细胞内酸性自噬小体含量增加(P<0.05);实时定量RTPCR和Western blot结果显示,与对照组相比,Beclin-1、PTEN和LC3-ⅡmRNA和蛋白表达水平逐渐升高,LC3-I表达下降(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA可诱导人胃癌SGC7901细胞自噬,其机制可能涉及上调自噬相关基因表达Beclin-1,促进自噬标志蛋白LC3-I向LC3-Ⅱ转化,促进自噬调控蛋白PTEN表达。     

抑郁症神经元自噬机制及中医药调节作用研究进展

抑郁症是以情绪持续低落为主要特征的精神疾病,严重威胁人们的健康。近几年来神经元自噬作为应激反应的一个重要方面也被视为抑郁症发病机制假说而提出。相关研究综合表明,自噬不足或过度均会引起神经元损伤,抑郁症动物模型表现出神经元自噬激活或受抑两种状态,因此,神经元自噬可能是参与抑郁症发病的一把双刃剑。中医认为本病的发生与肝郁脾虚密切相关,而中药对抑郁症神经元自噬的调节也呈现出多种多样的方式,其中调节神经元自噬的中药单体均具有保护神经或穿透血脑屏障的功能,而中药复方从其功效来看,多属于疏肝或健脾类方剂,与抑郁症的核心病机肝郁和脾虚相契合。从中医药对抑郁症模型神经元自噬的综合调节作用来看,其治疗抑郁症可能是多靶点、多通路和多系统共同作用的结果。该文基于神经元自噬参与抑郁症的病理学和治疗的新证据对当前研究的局限性进行了讨论,以期为后期同类研究及中医药抗抑郁研究提供思路和借鉴。     

自噬在脑出血中的作用及针刺调节机制研究探析

自噬是一种溶酶体参与的细胞代谢途径,涉及错误蛋白降解和清除、有缺陷的细胞器周转和细胞重构。研究表明脑出血后脑组织存在明显自噬现象。因此如何积极控制自噬体数量、调节自噬过程,可能对治疗脑出血、保护受损神经元具有十分关键的意义。本研究主要从自噬的分子调控机制、脑出血中影响自噬发生的主要因素、自噬在脑出血中的双向调节作用及针刺对脑出血中自噬作用的影响进行研究,并对针刺治疗脑出血的前景进行展望,为临床脑出血防治措施的突破性进展奠定基础。     

自噬在中医药治疗肿瘤中的作用研究进展

肿瘤的根治是世界难题,患者的生活质量和生存率不高。因此寻找一个药物靶点抑制肿瘤的发生发展变得就非常有意义。近年来医学研究的热点——自噬为自体的自我吞噬,是细胞清除受损或多余细胞器,并能适应外界环境压力来获得生存,影响肿瘤细胞生存、代谢、分化、衰老和死亡等多个生物行为过程,对细胞重塑及维持细胞生存动态平衡扮演了重要角色,特别是与肿瘤发生发展变化关系密切。自噬也是把双刃剑,对于单个肿瘤细胞和整个肿瘤的效应也可能不尽相同。当肿瘤细胞自噬出现异常时,或者细胞在低氧和营养缺乏条件下,不能及时清除自身细胞内受损的物质,此时自噬有利于肿瘤细胞增殖与存活。反之,适度的自噬作为肿瘤的抑制因子,具有抗肿瘤作用。中医药防治肿瘤历史悠久,具有低毒性和多目标的优点。通过整体和局部治疗效果,在癌症中具有综合治疗效果。随着肿瘤自噬的研究日益深入,不仅西药对肿瘤自噬的研究较多,而且单味中药和中药复方在国内外研究肿瘤自噬也与日俱增,其对自噬分子机制的最新见解导致了潜在药物靶点的发现。同时中医药研究肿瘤自噬取得了一定进展。笔者就中医对自噬的认识以及中医药调节肿瘤自噬的研究进展进行综述,希望为中医药在肿瘤自噬治疗研究中提供有益的借鉴。     

中药活性成分诱导肿瘤细胞自噬的实验研究进展

查阅中药活性成分相关的文献,分析其在肿瘤细胞自噬方面的研究概况。结果表明中药活性成分对肿瘤细胞有明显的自噬诱导作用,但目前仍有问题亟待解决:自噬对肿瘤具有双重作用,且机制尚不明确;自噬与凋亡关系复杂,如何协同发挥抗肿瘤作用;中药活性成分通过自噬途径治疗肿瘤,还需更多的临床研究。进一步提出,中药对自噬的调节作用为肿瘤治疗提供新的策略和思路。     

自噬在阿尔茨海默病中的作用及中药的干预作用

对近年来阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)与自噬相关性的研究及中药对自噬的调控作用进行介绍,对自噬的过程和相关分子机制、信号途径,自噬参与AD病理学表现的形成、神经元的缺失及与其他AD病理学表现,中药对自噬的影响,自噬在AD中的治疗意义进行总结.研究表明,自噬功能缺陷与多种神经退行性疾病密切相关,包括AD.集中介绍自噬在AD发生发展过程中的作用以及调控自噬在阻止或延缓AD发生,改善临床症状等方面的潜在治疗价值.在调节自噬,治疗AD等神经退行性疾病方面,关于中药的研究几乎处于空白状态.研究中药对神经细胞自噬的影响,通过调节自噬探讨中药治疗AD的潜在可能,并以此为基础,进行复方药物的选择,具有重要意义和极大的研究潜力.     

熊果酸诱导人胃癌细胞株MGC-803发生凋亡和自噬

目的:观察熊果酸(UA)对胃癌细胞株MGC-803凋亡与自噬的影响。方法:体外培养人胃癌细胞株MGC-803,以CCK8法测定UA对MGC-803细胞活力的影响并筛选出UA最佳作用浓度和时间;采用倒置相差显微镜观察UA干预后MGC-803细胞的形态学改变;采用MDC染色法观察UA对MGC-803细胞自噬的影响;采用实时定量PCR法检测凋亡相关基因BAX、BCL2和自噬相关基因Beclin1、LC3Ⅱ的表达水平;采用WB法对上述凋亡及自噬相关基因进行蛋白水平的验证。结果:CCK8法显示UA能显著抑制MGC-803细胞增殖,并具有浓度和时间依赖性;倒置相差显微镜观察到UA干预后视野下MGC-803细胞数量显著减少,部分细胞的形态发生变化,呈现碎片化;MDC染色法显示UA干预后视野下MGC-803细胞的荧光信号显著增强;实时定量PCR法显示UA显著上调凋亡相关基因BAX水平以及自噬相关基因Beclin1、LC3Ⅱ水平(P0.05),显著下调凋亡相关基因BCL2水平(P0.05);WB法显示UA显著上调凋亡相关蛋白BAX水平以及自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ水平(P0.05),显著下调凋亡相关蛋白BCL2水平(P0.05)。结论:熊果酸对人胃癌细胞株生长具有显著的抑制作用且呈剂量和时间依赖性,同时熊果酸诱导人胃癌细胞死亡过程中凋亡和自噬均被激活。     

抗癌中药单体对肿瘤细胞自噬的调控

自噬是细胞内能量代谢和自我更新的机制,参与细胞诸多生理病理过程,维持机体内稳态。近年来研究发现,自噬与肿瘤的发生发展密切相关,参与调控肿瘤的形成、增殖、转移以及能量代谢等诸多方面。自噬对肿瘤的调控是一个复杂的动态过程,自噬能抑制早期肿瘤的生成,促进晚期肿瘤的发展。目前自噬已成为肿瘤研究领域的新热点,越来越多的研究表明,中草药及其有效成分具有调控肿瘤细胞自噬水平的作用。相对应于自噬在肿瘤发生发展中的复杂角色,抗癌中药有效成分的作用亦具有多面性,或诱导肿瘤细胞发生自噬引起细胞死亡、抑制肿瘤转移;或抑制自噬,增强肿瘤对药物的敏感性;甚至可能在不同肿瘤类型中表现出截然相反的自噬性死亡或保护性自噬作用。目前调控肿瘤自噬水平的中药有效成分研究主要集中在具有抗肿瘤作用的皂苷、生物碱、多酚、黄酮和内酯类化合物,既可以通过诱导细胞自噬达到抗肿瘤的效果,也可以通过抑制细胞自噬发挥抑瘤作用。因此,本文对抗癌中药单体在调节肿瘤细胞自噬方面的研究进展做一综述,有助于研制以自噬为靶点的抗肿瘤药物,为抗肿瘤药物研发提供新方向。     

电针水沟穴对脑缺血再灌注大鼠自噬相关蛋白p62表达的影响

目的:探讨电针水沟穴对大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)损伤的保护作用及与自噬相关蛋白p62的关系。方法:线栓法复制大鼠局造性脑缺血再灌注模型。采用Bederson神经功能缺损体征评分法对MCAO/R大鼠进行神经功能评分;Western blot检测MCAO/R大鼠自噬相关蛋白p62的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠有明显神经功能缺损体征,自噬相关蛋白p62的表达明显下调;与模型组相比针刺治疗组大鼠神经功能缺损体征明显减轻,自噬相关蛋白p62的表达明显上调。结论:电针水沟穴可能是通过拮抗自噬相关蛋白p62表达的下调减轻脑缺血再灌注损伤。     

自噬在阿尔茨海默病中的作用及药物干预研究进展

  自噬是一种特定的广泛存在于真核细胞中的生命现象,是长命蛋白和胞浆细胞器降解的主要细胞代谢通路。阿尔茨海默病,又称老年性痴呆,是一种中枢神经系统变性病。在阿尔茨海默病人或转基因鼠的神经细胞中存在大量的自噬囊泡,提示自噬可能参与了阿尔茨海默病发展不同阶段中异常蛋白的清理和沉积、神经元生存与损伤等过程。认识自噬在阿尔茨海默病发生发展中的作用,对深入理解阿尔茨海默病的发病机制,以及通过药物干预调节自噬延缓阿尔茨海默病的进展具有重要意义。笔者查阅近年国内外文献,综述自噬在阿尔茨海默病中的最新研究进展,对自噬在阿尔茨海默病中的作用及药物干预研究进行分析、归纳和总结,为深入研究阿尔茨海默病的治疗策略提供理论依据。     

针刺调控自噬保护脊髓损伤探析

自噬是机体内一种自我防御机制,是细胞维持生存、分化所必需的过程,但是过度自噬会启动细胞自噬性死亡,研究显示针刺不仅可以直接调控自噬体的数量,调控自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3、B淋巴细胞瘤基因2同源结构域蛋白和自噬底物蛋白p62的表达,还可以通过调控磷脂肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素(mTOR)及同源性磷酸酯酶张力蛋白(PTEN)-蛋白激酶B-mTOR相关通路来激活或抑制自噬,最终改善脊髓损伤(SCI)。通过总结近年来针刺调控自噬防治SCI的研究,探求针刺对SCI进程中细胞自噬的影响,归纳其可能的作用机制及途径,为临床推广运用针刺治疗SCI提供实验依据。     

艾灸对小鼠活性巨噬细胞自噬作用的影响研究

研究表明,艾灸对于机体免疫系统具有双向良性调整作用,既能发挥抗感染作用也能防止炎症过当［1-2］。观察艾灸时主要淋巴细胞的信号转导有助于揭示艾灸作用机制。巨噬细胞对抗感染抗炎免疫类型和强度具有重要意义,其极化状态和吞噬能力是可变的,自噬可能是影响巨噬细胞功能状态的因素之一。自噬是真核细胞内一种广泛的蛋白和细胞器的自我清除过程。研究表明,温和、持续的高温刺激可能激活细胞自噬反应［3］。本研究通过对艾灸后自噬标志物［4］和相关信号通路［5-6］的检测,分析艾灸与自噬之间的关系,揭示艾灸调节细胞免疫的分子基础和途径,为艾灸用于感染与炎症的治疗提供理论依据。     

姜黄素对人胃癌AGS细胞自噬流的作用

目的探讨姜黄素对人胃癌AGS细胞自噬流的作用。方法 5、10、20μmol/L浓度的姜黄素处理AGS细胞24 h,采用MTT法观察姜黄素对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用,Western blot检测姜黄素对微管相关蛋白LC3和泛素相关蛋白SQSTM1/p62蛋白表达的影响。Western blot检测自噬抑制剂氯喹与姜黄素联合使用对LC3和SQSTM1/p62蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,姜黄素可以明显抑制AGS胃癌细胞的增殖,并且呈剂量依赖性(P0.05,P0.01)。Western blot结果显示,随着姜黄素浓度的增加,LC3-Ⅱ和SQSTM1/p62蛋白的表达均呈剂量依赖地上调(P0.05,P0.01),提示姜黄素可以引起自噬体的堆积。自噬抑制剂氯喹与姜黄素联合使用可以增强LC3-Ⅱ和SQSTM1/p62蛋白表达的上调,进一步验证了姜黄素对自噬流的抑制作用。结论姜黄素可能通过阻滞人AGS胃癌细胞自噬体降解,抑制AGS胃癌细胞的自噬流,促进AGS胃癌细胞的死亡。     

中药治疗糖尿病肾病足细胞自噬机制及作用研究进展

糖尿病肾病(DKD)主要特征为持续蛋白尿及肾小球滤过率下降。足细胞是肾小球滤过屏障的最终防线,其损害和蛋白尿关系密切。自噬是通过降解错误折叠的蛋白质和受损的细胞器来维持细胞内稳态,高糖可导致足细胞自噬异常,使肾小球滤过屏障结构发生变化,从而产生蛋白尿。中药能通过调节足细胞自噬来减轻糖尿病肾损伤。研究显示,中药对DKD足细胞自噬的调节呈现出多种方式,中药单体可直接靶向足细胞或动物实验模型自噬靶点和信号通路调节自噬发挥保护肾脏作用;中药复方多属于益气活血祛瘀、补益脾肾类方剂,其调节DKD足细胞自噬的作用与"气虚浊瘀、脾肾亏虚"存在DKD自噬紊乱的假说相吻合。从中药对DKD模型足细胞自噬的综合调节作用来看,其治疗DKD可能是多靶点、多通路和多系统共同作用的结果。