肿瘤坏死因子-α诱导肝细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用

目的 研究肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）诱导肝细胞凋亡细胞凋亡在暴发性肝衰竭中的作用机制。方法 分别注射脂多糖（ｌｉｐｏｐ ｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）和ＴＮＦ－α于Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ,ＧａｌＮ）致敏的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠造成暴发性肝衰竭模型,用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口原位末端标记（ｉｎ ｓｉｔｅ ｅｎｄ ｌａｂｅ     

内毒素／肿瘤坏死因子所致肝细胞损害机制的体外研究

为了解内毒素（ＬＰＳ）／肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）所致肝细胞损害的机制，以乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及噻唑蓝染色（ＭＴＴ）为细胞毒性指标，利用Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝细胞进行了ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ等的肝细胞损害机制研究。结果发现：ＬＰＳ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６等对肝细胞ＬＤＨ漏出及ＭＴＴ无显著影响（Ｐ＞０．０５），仅在ＬＰＳ、ＬＰＳ／ＴＮＦ－α加入肝细胞－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞混合培养组后有所变化；经ＧａｌＮ／ＬＰＳ体内作用后分离的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞与正常肝细胞混合培养，加入ＬＰＳ、ＴＮＦ及ＬＰＳ／ＴＮＦ－α均可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０ｌ），多粘菌素Ｂ及抗－ＴＮＦ能分别完全和部分阻断此效应；经ＬＰＳ或ＴＮＦ－α体内作用后抽取的大鼠血清，加入培养肝细胞可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０１）与ＭＴＴ显著降低（Ｐ＜０．０５），经５６℃灭活后此细胞毒性作用完全消失。上述结果提示，ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ无肝细胞直接毒性作用，而经其活化的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞可能引起一系列瀑布效应，导致肝细胞损害。     

细胞因子对树突状细胞抗肝癌作用的影响

目的研究人血树突状细胞（ＤＣ）和细胞因子ＴＮＦ,ＧＭＣＳＦ或ＩＦＮγ联合ＤＣ对淋巴因子和ＰＨＡ激活的杀伤细胞（ＬＰＡＫ细胞）体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ７４０２的影响．方法实验分为Ｌ组（ＬＰＡＫ）,Ｄ组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ）,Ｔ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５０００ｋＵ／Ｌ）,Ｔ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５００ｋＵ／Ｌ）,Ｇ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ５００ｋＵ／Ｌ）,Ｇ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ１００ｋＵ／Ｌ）,Ｉ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ５００ｋＵ／Ｌ）和Ｉ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ１００ｋＵ／Ｌ）．每组效靶细胞比分别采用５∶１和１０∶１两种．培养４８ｈ后用中性红比色法检测细胞毒活性．结果Ｌ,Ｄ,Ｔ２和Ｔ１组的细胞毒活性依次增强,各组间差异有显著性（Ｐ＜００１）．Ｇ１和Ｇ２组均高于Ｄ组（Ｐ＜００１）,但Ｇ１,Ｇ２组间差异无显著性．Ｉ１,Ｉ２组与Ｄ组相比,也无显著性差异．随效靶比增加,各组细胞毒活性均相应增强．结论ＤＣ能增强ＬＰＡＫ细胞对肝癌细胞ＢＥＬ７４０２的细胞毒活性;ＴＮＦ或ＧＭＣＳＦ与ＤＣ联用,两者有协同作用;但与ＩＦＮγ联用,则无进一步增强作用     

抗核心糖脂域MAb对脓毒症小鼠存活及其血中LPS,TNF—α和IL—6水平…

为进一步探讨抗核心糖脂域单克隆抗体（ＭＡｂ）的免疫保护效果及其可能的作用机制，以小鼠脓毒症为模型，用产色鲎试验法和细胞因子活性检测等方法，研究了抗核心糖脂域ＭＡｂ（ＥＬ１，ＥＬ３和３Ｈ４）对实验性脓毒症小鼠的存活及其血ＬＰＳ，ＴＮＦ－α和ＩＬ－６水平的影响，结果表明，这三株ＭＡｂ均能显著性提高受ＬＰＳ及Ｅ．ｃｏｌｉ攻击小鼠的存活率（Ｐ〈０．０５）；且有明显降低小鼠血中ＬＰＳ，ＴＮＦ－α和ＩＬ－６水     

褪黑素对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究

目的 探讨褪斑黑素消除自由基及抗氧化性。方法 用Ｄ－半乳糖诱导昆明种小鼠形成衰老模型,同时给予模型外源性褪黑素（ＭＴ）,检测小鼠肝组织ＳＯＤ活性、肝及脑组织ＧＳＨ－Ｐｘ活性和ＭＤＡ含量、心脏组织ＬＰＦ水平的变化。结果 模型小鼠肝组织ＳＯＤ活性下降（Ｐ〈０．０５）;肝及脑组织ＧＳＨ－Ｐｘ活力降低（分别为Ｐ〈０．０５;Ｐ〈０．０１）,心脏组织中ＬＰＦ水平增高（Ｐ〈０．０１）。给予外源性ＭＴ（５ｍｇ／ｋ     

抗核心糖脂域MAb对脓毒症小鼠存活及其血中LPS、TNF-a和IL-6水平的影响

为进一步探讨抗核心糖脂域单克隆抗体（ＭＡｂ）的免疫保护效果及其可能的作用机制，以小鼠脓毒症为模型，用产色鲎试验法和细胞因子活性检测等方法，研究了抗核心糖脂域ＭＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对实验性脓毒症小鼠的存活及其血中ＬＰＳ、ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平的影响。结果表明，这三株ＭＡｂ均能显著提高受ＬＰＳ及Ｅ．ｃｏｌｉ攻击小鼠的存活率（Ｐ＜０．０５）；且有明显降低小鼠血中ＬＰＳ、ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平的作用，提示抗核心糖脂域ＭＡｂ的保护作用与其中和ＬＰＳ的活性，从而达到降低ＬＰＳ诱导小鼠效应细胞释放炎性细胞因子的作用有关。     

休克／再灌注肝损伤中氧自由基的作用

采用电子自旋共振（ｅｌｅｃｔｒｏｎｓｐｉｎｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＥＳＲ）及自旋捕捉技术直接测定兔休克／再灌注不同时限肝组织内氧自由基（ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓ，ＯＦＲ）含量的变化，同时观察肝组织内脂质过氧化物（ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄｅ，ＬＰＯ）含量，超氧化物岐化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）及血清ＡＬＴ活性的变化。结果示，ＯＦＲ易被自由基捕捉剂ＰＢＮ（α－ｐｈｅｎｙｌ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌｎｉｔｒｏｅｎｅ）捕捉，并可通过ＥＳＲ而检测。ＯＦＲ在休克１．５小时后即有明显增高，再灌注１５和３０分钟后增高更为显著，ＬＰＯ、ＳＯＤ于再灌注后才分别有显著增高和降低，ＡＬＴ休克１．５小时后即有大幅度增高。ＬＰＯ、ＡＬＴ与ＯＦＲ有良好的线性正相关，ＳＯＤ与ＯＦＲ有良好的线性负相关，提示兔休克／再灌注肝损伤可能由ＯＦＲ介导。     

内毒素／肿瘤坏死因子在肝细胞损害中的作用

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠体外肝细胞进行了内毒素（ＬＰＳ）及其介质肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）等的肝细胞损害机理研究，主要发现是：ＬＰＳ，ＴＮＦα，白细胞介素－１（ＩＬ－１），ＩＬ－６等加入后肝细胞ＬＤＨ漏出及噻唑蓝染色（ＭＴＴ）均无显著变化，仅在肝细胞－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞混合培养组用于加ＬｐＳ，ＬＰＳ／ＴＮＦα后有所变化，经半乳糖胺（ＧａｌＮ）／ＬＰＳ体内作用后分离的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞与正常肝细胞进行混合培养     

低硒与Coxsackie B_(3m)病毒感染对BALB/c小鼠肝脏脂质过氧化物代谢的影响

用国产低硒食用酵母合成低硒饲料（硒０．０１３ｍｇ／ｋｇ，ＶＥ含量为２０ｍｇ／１００ｇ）喂养断奶后ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠，５周后腹腔接种嗜鼠心肌病毒ＣＶＢ３ｍ１０３ＴＣＤ５００．１ｍｌ，７天后处死建立低硒状态下病毒性心肌炎模型，测定肝脏组织中脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量及全血中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果表明低硒感染ＣＶＢ３ｍ小鼠肝组织中ＬＰＯ含量明显高于常硒病毒感染组及常硒对照组（Ｐ＜０．０１）；低硒感染ＣＶＢ３ｍ病毒组小鼠全血ＧＳＨ－Ｐｘ活力也最低。结果提示：低硒因素加重病毒感染引起ＧＳＨ－Ｐｘ活力降低，ＬＰＯ堆积，降低机体的抗氧化能力     

培养胎肝细胞上清对暴发性肝衰竭小鼠存活率的影响

目的探讨胎肝细胞悬液治疗严重肝病的机理以及使用培养胎肝细胞分泌上清（ＦＨＣＳ）替代的可能性．方法采用Ｄ＿氨基半乳糖（Ｄ＿ｇａｌｎ）／内毒素（ＬＰＳ）诱发小鼠暴发性肝衰竭（ＦＨＦ），观察ＦＨＣＳ的保护作用．结果ＦＨＣＳ能显著提高ＦＨＦ小鼠的存活率（Ｐ＜００１），降低血清转氨酶（Ｐ＜００５），减轻肝细胞坏死程度，并促进肝细胞再生．结论ＦＨＣＳ对ＦＨＦ有较好的保护与治疗作用，可望为已被迫放弃的胎肝细胞悬液输注疗法开辟新的途径     

慢性血吸虫病合并肝癌超声图象分析

对确诊慢性血吸虫病合并肝癌34例(其中9例手术证实)进行超声图象分析:血吸虫病肝病变左叶较明显,合并肝癌时肝肿块右叶及左、右叶同时发生多见,肿块数目两个以上占55.9％;肿块周围有低回声声晕和呈光带包绕的光轮征。下列情况提示合并肝癌:1 肝内出现肿块图象呈低回声或强回声,该区网络状光带消失或为杂乱回声所替代;2 肿块周围有声晕或光轮征;3 门静脉内出现异常光团;4 肿块内有动脉频谱。     

两种肝纤维化标志鉴别晚期血吸虫病的应用价值

测定了39例晚期血吸虫病患者血清单胺氧化酶(MAO)及72例晚血患者血清的腺苷脱氨酶(ADA)。结果表明在排除肝炎后,这两种肝纤维化标志的检测在晚期血吸虫病中都有应用价值,且ADA较MAO检测更敏感、特异及简便。     

复杂性肝包虫病手术治疗分析

目的　探讨复杂肝包虫病的较好手术方法。　方法　采用回顾性调查方法总结分析 84例复杂肝包虫病的手术方法。肝切除术 2 5例 ;内囊摘除后外囊内翻缝合 10例 ;外囊部分切除、大网膜填塞 15例 ;残腔内置T管引流 3 4例。结果　行肝切除者 8d拆线 ,痊愈出院 ,随访 2～ 7年 ,无复发 ;行内囊摘除后外囊内翻缝合者并发囊内感染 2例 ,膈下感染 1例 ,3年后复发 1例 ;大网膜填塞者并发囊内感染 2例 ,2年后复发 1例 ;残腔内T管引流者 ,拔管时间最短 18d ,最长 190d ,平均 5 6d ,随访 1～ 7年 ,无复发。　结论　肝切除术是治疗复杂肝包虫病的最佳选择 ,清除内囊后残腔T管引流亦是较好的手术方法 ,但引流时间往往较长。     

101例慢性布鲁氏菌病患者的肝功及菌苗治疗的影响

本文报告了101例慢性布病患者的肝功测定结果,肝功异常者占48.5％。肝功异常与皮内变态反应强度有关,即随着皮试红肿面积的增大,其肝功异常者增多。19例肝功异常病人经菌苗治疗后有7例(36.8%)恢复正常。     

IDENTIFICATION AND CHARACTERIZATION OF THE HUMAN HEPATIC ANDROGEN RECEPTOR

Human liver contains components in both cytosol and nucleosol which bind the synthetic testosterone derivative, mibolerone, with a high affinity, moderate capacity and a high specificity for androgens. Gel filtration chromatography shows two binding components, a high molecular weight component (mol wt. 250 000) present in cytosol alone and a low molecular weight component (mol wt. 75 000) present in cytosol and nucleosol. Human liver contains the classical androgen receptor.     

EXCRETION OF BROMSULPHALEIN AND DEPLETION OF HEPATIC GLUTATHIONE IN THE RATE

In previous studies, bromsulphalein (BSP) was shown to be excreted in the bile mainly as a conjugate with the tripeptide, glutathione. In the present studies, BSP given by single intravenous injection in a dose of 0·2 μMole per gramme of body weight has been found to produce a highly significant transient fall in the concentration of glutathione in the liver of the non-fasting rat—from 7·8 to 5·5 μMole per gramme 60 minutes after injection (P<0·001). Minimum concentrations were observed at 45, 60 or 75 minutes, when most of the BSP had been excreted. The concentration in the liver of one of the amino acid constituents of glutathione, glutamic acid, concurrently rose significantly from 3·3 to 4·1 μMole per gramme of liver (P=0·01). In further studies, the constant intravenous infusion of BSP at 0·48 μMole per minute for an average time of three hours in fasting rats was also found to deplete the liver of glutathione; mean values fell significantly from 6·2 to 3·6 μMole per gramme (P=0·01). Prior treatment with cysteine, an essential amino acid constituent of glutathione, increased liver glutathione content, and prevented depletion on administration of BSP. Chemical studies of the major BSP conjugate, synthesized in vitro or isolated from rat bile, revealed conjugation of BSP and glutathione in a one-to-one relationship. Autoradiography of paper chromatograms of bile obtained after the administration of ³⁵S-labelled glutathione and then BSP by intravenous injection ro minutes later showed a diversion of radioactivity from the usual metabolites of glutathione to the BSP conjugates. It was concluded that depletion of hepatic glutathione is caused by removal of glutathione from the liver cells by conjugation molecule for molecule with BSP and excretion into the bile, and not by decreased synthesis or increased catabolism other than by conjugation. On the contrary, the rate of synthesis of hepatic glutathione may be increased during the action of BSP and for some time thereafter, and catabolism by the usual pathways appears to be decreased.     

大鼠肝干细胞的分离培养

目的 分离大鼠胎肝细胞,观察人肝细胞生长肽(HGP)和小鼠白血病抑制因子(mLIF)对其生长和肝干细胞集落形成的影响。方法 从大鼠胚胎(12日龄)肝中分离肝细胞,采用MTT比色法、~3H-TdR掺入法和碱性磷酸酶(AKP)检测法。结果 人HGP能剂量依赖性地促进胎肝细胞的DNA合成和增殖,500～2000u/ml的mLIF能明显促进肝干细胞集落的生长和维持未分化状态。肝干细胞培养基的组成为:5％FBS(国产或进口),10％国产NCS,0.14mM的β-ME,40ng/ml伴白蛋白,10ng/ml的人bFGF,0.5μg～1.0μg/ml的HGP,1000u/ml mLIF,1％非必需氨基酸的高糖DMEM培养基。AKP染色阳性细胞在上述培养基中传至6代仍生长良好和保持未分化状态。结论 从胎鼠肝中能分离到肝干细胞,人HGP能促进鼠胎肝细胞的生长,而mLIF对促进肝干细胞生长和维持未分化是必要的。