以IgH、bc1-2/IgH为分子标志检测B细胞淋巴瘤微小残留病研究进展

肿瘤的复发与停止治疗时患者体内仍存在用常规方法无法检测出的微小残留病(minimalresidualdisease,MRD)有关,关于MRD的研究已成为肿瘤研究领域的热点。B细胞所特有的基因重排等遗传学特征为我们提供了可用于检测B细胞淋巴瘤(B NHL)MRD的分子标志,本文就这一方面的研究进展进行综述。1　IgH、bc1- 2 /IgH检测B NHLMRD的理论基础B NHL与其他恶性肿瘤一样具有克隆性的特征,它的所有的子代瘤细胞都是从同一个恶变的细胞演化而来的,即这个恶变的B细胞及其所有的子代细胞是一个克降,它们具有相同的基因编码,当患者经治疗达CR(完全…     

荧光定量聚合酶链反应检测B细胞淋巴瘤IgH基因重排的进展

实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)是近年出现的一种新的核酸定量技术,为检测血液系统肿瘤微小残留病(MRD)提供了快速、简便、精确、敏感、可靠的定量检测方法.对判断疗效、预防复发,指导治疗有一定的临床意义.就目前国内外用RQ-PCR在B细胞淋巴瘤患者中检测IgH基因重排的应用研究进展进行综述.     

甲状腺原发MALT淋巴瘤12例临床病理、免疫表型及IgH基因重排研究

目的：观察甲状腺原发MALT淋巴瘤的临床病理表现、免疫组织表型和免疫球蛋白重链(IgH)基因重排情况。方法：对12例甲状腺原发MALT淋巴瘤进行回顾性研究，包括临床病理表现、免疫表型(CD20、CD45RO、CD5、CDl0、CyclinD1、bcl-2、κ、λ)分析及多聚酶链反应(PCR)检测IgH基因重排。结果：按2001新版WH0关于淋巴造血组织肿瘤分类．12例均被确诊为MALT淋巴瘤。其中男2例，女10例，男女之比为1：5，中位年龄为63岁。免疫表型检测：所有病例之瘤细胞均表达B细胞分化抗原CD20；4例(33．3％)检测出免疫球蛋白轻链限制性表达；bcl-2阳性1例；CD45RO、CD5、CD0和Cyclin D1均为阴性。8／12例(66．7％)检测出IgH基因克隆性重排。随访11例，失访1例，死亡3例(25％)，存活8例(66.7％)。结论：甲状腺原发MALT淋巴瘤属惰性淋巴瘤，需要结合其病理组织形态、免疫组织化学染色及必要的分子生物学技术才能作出正确的诊断。     

化疗对B-NHL患者外周血IgH基因重排的影响

目的：通过观察B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）患者化疗过程中IgH基因重排的阴转情况,了解IgH基因重排能否作为适时的肿瘤分子水平缓解指标。方法：对20例B-NHL的初治患者于化疗前及化疗达到部分缓解及完全缓解后应用多聚酶链反应（PCR）进行IgH基因重排检测;对10例非淋巴瘤的肿瘤患者在化疗前后行IgH基因重排检测;同期检测10例正常人。结果：20例初治B-NHL患者,化疗前18例检测到IgH基因单克隆型重排;化疗后7例达到完全缓解,6例达到部分缓解。18例阳性患者中,除1例化疗后达到完全缓解的患者IgH基因重排转阴外,余未变化。2例IgH基因单克隆型重排阴性的病例化疗后检测结果仍为阴性。对照组的肿瘤患者化疗前后外周血以及正常人外周血IgH基因单克隆重排均为阴性。结论：IgH基因单克隆型重排虽可以作为诊断B-NHL及检测微小残留病变的重要指标,但是肿瘤缓解后的短期内还不能作为适时的肿瘤分子水平缓解指标。     

实时定量PCR检测IgH重排在B淋巴细胞恶性肿瘤中的应用

用精确、敏感和可靠的RQ-PCR方法,以克隆性IgH重排为靶分子,可对B淋巴细胞恶性肿瘤的MILD定量检测,对于其疗效评价、预后判断和预防复发等具有重要意义。就RQ-PCR在B淋巴细胞肿瘤中检测IgH重排的技术原理及其应用研究进行综述。     

儿童淋巴系统恶性肿瘤免疫分型IgH,TCRγ基因重排关系的初步探讨

目的 了解儿童淋巴系统恶怀肿瘤分型与ＩｇＨ，ＴＣＲγ基因重排的关系。方法 应用ＰＣＲ方法检测８１例已做免疫分型的儿童恶性淋巴瘤和急性淋巴细胞性白血病患者的ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排。结果 Ｂ－ＮＨＬ中，ＩｇＨ基因重排的检出率为８２．４％，ＴＣＲγ基因重排的检测率是７６．５％，Ｔ－ＮＨＬ中ＩｇＨ基因重排率为２５％，ＴＣＲγ基因重排未检出，在Ｂ－ＡＬＬ中ＩｇＨ基因重排出率为７４％，ＴＣＲγ基因重排检出率     

急性髓系白血病细胞衍生的树突状细胞

微量残留病(MRD)是导致急性髓系白血病(AML)复发的根本原因，人们一直在不断找寻根除MRD的方法。大量研究表明细胞免疫治疗方法已经成熟，可根除MRD从而治愈AML。AML细胞在体内不能有效被T细胞识别，主要机制为70％的AML细胞表面缺乏共刺激分子CD(80)和CD(86)(分别为T细胞共刺激受体CD(28)和CTLA-4的配体)，不能提供T细胞活化必需的第二信号，从而导致肿瘤特异性T细胞克隆……     

多聚酶链反应检测急性淋巴细胞白血病微量残留病的进展

白血病复发的主要原因是体内残留白血病细胞克隆的再增殖,因此如何早期、微量、特异地检测微量残留病(MRD)显得十分重要。目前常用的形态学、免疫学、细胞遗传学及DNA印迹杂交等不能发现少于1%～5%的微量残留白血病细胞(MRLC);双色免疫荧光加流式细胞仪虽能检到10~(-1)水平,但操作复杂、假阴性高。多聚酶链反应(PCR)技术通过体外扩增肿瘤特异性靶DNA或mRNA已使MRD的检测水平达10~(-4)～10~(-7)。急性淋巴细胞白血病(ALL)是克隆性疾病,其肿瘤特异性基因重排和染色体异位等可作扩增靶用于MRD的检测。     

非B淋巴细胞来源的恶性肿瘤细胞中存在Ig重链片段的表达

免疫球蛋白Ig是由两条重链及两条轻链组成的糖蛋白,分别由定位于不同染色体上的3个不连锁的Igc,Igλ,IgH基因所编码.目前的免疫学理论认为,在正常的机体内,Ig基因只有在B细胞来源的细胞中进行选择性重排及表达,是B淋巴细胞的特有产物.然而,我们曾用免疫学方法检测表明癌细胞可能表达免疫球蛋白.近期设计了23条PCR引物,分别位于Ig重链前导,肽区,FRIJ链区,恒定区,并用RTPCB的方法对4个来源于人的恶性肿瘤细胞系HT-29(大肠癌),MCF-7(乳腺癌),HeLaMR(宫颈癌),PC3M(前列腺癌)及来源于健康人外周血的单个核细胞的阳性对照进行了检测.     

循环肿瘤DNA监测早期肺癌术后微小残留病灶的研究进展

循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)已经应用于监测转移性非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的治疗。近来研究者开始关注ctDNA预测早期NSCLC患者根治术后微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)的价值。全文总结目前常用的ctDNA检测方法，并介绍了其在早期肺癌术后评估MRD和复发预警方面的应用进展。     

cHLIgH和TCRβ基因重排检测的研究

目的探索检测cHLIgH和TCRβ基因重排的意义.方法对32例cHL病例石蜡存档切片进行了TCRβ及IgH基因FRⅢ区的重排检测.结果31.3%(10/32)出现IgH基因克隆重排单带,9.1%(3/32)出现TCRβ基因克隆重排单带,其中一例呈双克隆基因重排.结论本研究证实部分cHL可能来源于B细胞,但仍不能除外T细胞来源.     

急性B淋巴细胞白血病微小残留病的监测

  微小残留病（MRD）是白血病复发的根源,动态监测MRD是目前国内外的研究热点,也是难点。B淋巴细胞白血病MRD的监测有其自身的特点：正常增生骨髓中会出现数量较多的B系前体细胞,较容易误认为白血病细胞残留;也没有可以简便快捷检测的特异基因改变。现对流式细胞术的抗体组合及监测时机选择、聚合酶链反应检测的基因进行了归纳总结,作为B淋巴细胞白血病MRD监测的参考。     

小细胞肺癌患者骨髓微小转移病灶的检测与临床应用

小细胞肺癌(SCLC)是一种高侵袭性肿瘤,治疗结果不佳,进一步了解其生物学行为,特别是与临床治疗及预后相关的因素以指导l临床治疗是非常重要的.肿瘤微小转移病灶(MRD)的研究是近年来研究的热点,在小细胞肺癌中具有更加重要的意义.本文对小细胞肺癌骨髓微小转移病灶的检测方法及其在临床中的应用和意义进行了综述.     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血bcl-2/IgH基因的研究

目的 检测非霍奇金淋巴瘤患者t(14；18)异位bcl-2／IgH基因突变3种类型，探讨外周血bcl．2／IgH基因突变在非霍奇金淋巴瘤诊断和治疗过程中的变化。方法 采集非霍奇金淋巴瘤患者和正常人外周血，PCR方法检测bcl-2／IgH基因3种不同重排方式的发生率。结果 正常人bcl-2／IgH3种基因异位的概率分别为mbr3．8％，mcr1．9％，mdr1．9％。同时发生3种异位的概率为0，发生2种异位的概率为0。非霍奇金淋巴瘤患者化疗前mbr、mcr和mdl的发生率分别为71．2％、50．0％和25．0％，化疗后的发生率分别为6713％、44．2％和17．3％。化疗前后同时有发生两种异位的概率分别为7．7％和11．5％，同时发生3种异位的发生率为分别为5．8％和3．8％。结论 同时检测3种bcl-2／IgH基因重排在非霍奇金淋巴瘤患者化疗前后发生率和重排率有差异，对临床诊断和个体化化疗方案的选择以及疾病预后的监测有重要意义。     

以bcl-2/IgH为分子标志检测B细胞淋巴瘤微小残留病的研究进展

 bcl-2／IgH基因重排是B细胞淋巴瘤最为常见的染色体易位,以bcl-2／IgH基因重排为克隆标志开展微小残留病变检测,对疾病的分期,疗效评价,化疗方案的确定,预后判断,复发监测和移植物净化都有着重要的意义。随着分子生物学的不断发展,有效、敏感、准确、快速的检测手段不断出现,并且从定性逐步发展到定量,为临床工作进入量化阶段奠定基础。     

B细胞淋巴瘤患者骨髓IgH基因克隆性重排检测的临床意义

目的 探讨半巢式聚合酶链反应(PCR)检测B细胞淋巴瘤患者骨髓中IgH基因克隆性重排的可行性,并初步评价其临床价值.方法 选用FR2、FR3A引物,采用半巢式PCR方法检测105例B细胞淋巴瘤患者骨髓中IgH基因的单克隆性重排,与骨髓穿刺细胞形态学检测结果进行比较,并评价PCR检测结果与临床病理特征的关系.结果 105例B细胞淋巴瘤患者中,IgH基因克隆性重排PCR检测48例(45.7%)阳性,而骨髓细胞形态学只检测出22例(21.0%),两者差异有统计学意义(P<0.05),符合率为71.4%(75/105).弥漫大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)及小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)初治患者PCR检测阳性率分别为30.8%、25.0%和100.0%.PCR检测结果与Ann Arbor分期有关,早期B细胞淋巴瘤患者lgH基因克隆性重排PCR检出阳性率低于晚期患者(P=0.02).PCR检测阳性和阴性患者的近期疗效差异无统计学意义(P>0.05),但CR率(23.3%和46.3%)差异有统计学意义(P=0.019).结论 IgH基因克隆性重排PCR检测可能是判断B细胞淋巴瘤患者骨髓异常的有效方法,较骨髓细胞形态学敏感;Ann Arbor分期晚的患者PCR检测阳性率高于分期早的患者;PCR检测阳性者治疗后获得CR的机会低于阴性者.     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Bcl-2基因重排与蛋白表达的关系探讨

目的 探讨Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)不同类型中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学S-P法检测60例弥漫性大B细胞淋巴瘤标本中Bcl-2蛋白的表达水平;同时行RT-PCR检测外周血Bcl-2/IgH的表达水平。结果 60例DLBCL中,Bcl-2阳性率分别为61.67%(37/60);Bcl-2/IgH的阳性表达12例(12/60)。结论 Bcl-2有望成为DLBCL亚分类的指标。     

PCR检测骨髓移植后慢粒白血病微小残留病的研究现状

对微小残留病(Minimal Residual Disease，MRD)的检测是当前白血病研究中的一个重要课题。bcr／abl基因重组是慢性粒细胞自血病(Chronic Myelold Leukemia CML)重要分子生物学特征，可作为CML特征性克隆标志用于MRD的研究。随着高度敏感特异的PCR(Polymerase Choin Reaction，聚合酶链反应) 技术在MRD检测中的应用，使CMLMRD的检测方法有了突破性的进步，检测敏感度得到了极大的提高。用PCR检测CMLMRD正在迅速地普及推广，它的临床意义及优越性也将得到越来越充分的认识。     

多发性骨髓瘤微小残留病检测的研究进展

近年来随着新药物的临床应用，多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者的预后有了根本性的改善，但目前仍不能达到临床治愈。主要障碍为微小残留病(minimal residual diseases，MRD)的存在，其对于患者无进展生存期(progression-free survival，PFS)和总生存期(overall survival，OS)具有重要影响。考虑到患者的克隆异质性、基因不稳定性和无效免疫监视，准确定义和精准检测MRD对制定临床治疗决策十分重要，同时MRD阴性也是患者维持治疗的理论终点和新药临床试验的重要研究终点之一。迄今为止，在检测精度、标准化和普遍适用性方面尚缺乏完美的MRD检测手段。本文综述包括流式细胞术和各种分子生物学检测方法在内的检测MM患者MRD的主要技术，对其各自的优缺点和未来发展方向予以阐述。      

急性淋巴细胞性白血病可用bcr/abl基因做微小残留病的标志

目的 :检测急性淋巴细胞白血病 (AL L)完全缓解后微小残留病 (MRD) ,探讨其临床意义。方法 :应用反转录 -巢式聚合酶链反应 (nest- PCR)检测 AL L 完全缓解后 bcr/abl m RNA。结果 :2 3例 AL L 患者中阳性 5例 ,5例阳性者 2月～ 13月内复发 ;而 MRD阴性的 18例中 2例于缓解后 2月、4月复发 ,余 16例无复发。结论 :AL L治疗完全缓解 (CR)后仍存在 MRD者有较高的复发危险 ,应进行巩固治疗和定期监测 ;MRD阴性可以做为临床疗效观察的客观指标。该方法检测 MRD敏感度高 ,适用于临床。