苍术素对人结肠癌LS174T细胞增殖的影响

目的: 探讨苍术素(atractylodin)对人结肠腺癌LS174T细胞增殖的影响。方法: 将人结肠癌LS174T细胞分为空白对照组、无水乙醇对照组、苍术素处理组(10,20,40,80 mg/L)。将梯次浓度苍术素作用于LS174T细胞后,分别培养24、48、72、96 h;采用倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法检测细胞生长状况;流式细胞仪检测细胞周期变化;液相芯片法检测细胞因子分泌的改变。结果： 作用24 h后,20,40,80 mg/L组苍术素抑制LS174T细胞增殖,且抑制作用呈时间和浓度依赖性;流式细胞术结果可见经苍术素处理后,G0/G1期细胞比例增加;液相芯片检测结果显示苍术素可抑制LS174T细胞分泌IL-6和IL-7。结论： 苍术素抑制LS174T细胞增殖,其机制可能是影响细胞因子分泌和阻断细胞周期。     

醋酸甲羟孕酮对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:检测醋酸甲羟孕酮(MPA)对人结肠癌细胞LS174T增殖和凋亡的影响并初步分析其机制.方法:人结肠癌细胞LS174T体外培养,以不同浓度的MPA(12.5、25、50和100 μmol/L)进行干预120 h,MTT法测定其对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡率和细胞表面Fas表达.结果:不同浓度MPA对结肠癌细胞具有显著的抑制作用. MPA处理后阻止G1期细胞向S期的进程,S期和G2/M期细胞相对减少.LS174T细胞的自然凋亡率为4.8%,12.5 μmol/L组细胞凋亡率为15.1%,25 μmol/L组细胞凋亡率为25.6%; MPA作用后结肠癌细胞表面Fas表达显著增强.结论:MPA对结肠癌细胞具有显著的抑制作用和诱导凋亡的作用,其机制可能与MPA使结肠癌细胞停滞于G1期及细胞表面Fas表达上调有关.     

藤龙补中汤促结肠癌LS-174-T细胞衰老及其机制

目的：细胞衰老是重要的细胞内在抗癌机制,与肿瘤治疗效应机制密切相关。本研究观察中药复方藤龙补中汤对人结肠癌LS-174-T细胞衰老及相关信号转导的影响。方法：藤龙补中汤处理结肠癌细胞LS-174-T,显微镜观察细胞形态,衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal）染色检测SA-β-gal活性,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测p21WAF1/CIP1、p53、p16基因的表达以及RB磷酸化水平。结果：藤龙补中汤作用后,LS-174-T细胞呈现典型大而扁平的衰老形态,SA-β-Gal染色阳性,细胞周期阻滞于G0/G1期。Western blot显示藤龙补中汤可促进LS-174-T细胞p21WAF1/CIP1、p16等基因的表达,对p53、RB等基因的表达无明显影响,可抑制RB磷酸化。结论：藤龙补中汤可促进LS-174-T细胞衰老,并可能与促进p21WAF1/CIP1、p16等基因的表达,以及抑制RB磷酸化相关。     

大麻提取物对人结肠癌细胞LS174T体内外抑制及诱导凋亡作用

目的：研究大麻提取物在体内外对人结肠癌细胞LS174T的生长抑制及诱导凋亡作用。方法：体外培养结肠癌细胞,加以不同浓度（500,250,125,62.5,31.25μg/mL）的大麻提取物培养72 h,用MTT法检测大麻提取物对结肠癌细胞抗增殖的作用;用DNA末端原位标记染（TUNEL）法检测大麻提取物对结肠癌细胞的诱导凋亡作用;建立结肠癌小鼠模型,将实验动物随机分为五组：空白对照组、阳性药物组、低剂量组（25 mg/kg）、中剂量组（50 mg/kg）、高剂量组（100 mg/kg）,每组5只小鼠,2周后处死动物测定肿瘤的重量和体积。结果：不同浓度的大麻提取物处理细胞72 h后,结肠癌细胞的抑制率分别为（93.12±2.66）%（、74.56±4.62）%（、62.37±3.77）%（、36.84±6.24）%（、19.16±4.24）%,各组间抑制率相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;用TUNEL法可检测到典型的结肠癌细胞凋亡形态;在结肠癌小鼠模型上给药组肿瘤生长被抑制,其肿瘤体积、重量均较对照组减小,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：大麻提取物在体内外具有抑制结肠癌细胞LS174T增殖及诱导凋亡的作用,且呈剂量依赖性。     

乳酸菌发酵液对结肠癌细胞LS174T体外增殖与凋亡效果的研究

目的研究乳酸菌发酵液对人结肠癌细胞株LS174T增殖及凋亡作用的影响,为结肠癌的防治提供依据。方法培养嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌并制备发酵液,采用四氮唑蓝（MTT）比色法检测其对结肠癌细胞株LS174T增殖活性的影响,设PBS对照;运用AnnexinV-FITC/PI双染法、流式细胞术检测LS174T细胞凋亡率。结果两种发酵液与LS174T细胞株共培养后,与对照组相比,同时点细胞的增殖活性均有降低,其中,保加利亚乳杆菌组与对照组比较差异有统计学意义;流式细胞术显示两组细胞的凋亡率增高,保加利亚乳杆菌组与对照组比较差异有统计学意义。结论保加利亚乳杆菌发酵液对结肠癌细胞体外增殖有一定抑制与促进凋亡的作用,有望应用于结肠癌的防治。     

阿司匹林对人结肠腺癌细胞LS174-T凋亡及caspase-3活性的影响

研究发现,长期服用阿司匹林可明显降低结肠肿瘤的发病率及预防致癌剂诱发结肠癌的发生[1]。本实验观察阿司匹林对人结肠腺癌细胞LS174-T凋亡及caspase-3活性的影响,以进一步探讨其作用机制。     

三氧化二砷对人结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人结肠腺癌LS－174T细胞增殖及凋亡的影响。方法：应用MTT法，细胞集落形成试验，流式细胞仪技术和TUNEL法观察不同浓度的As2O3（1．0、2．0、4．0、8．0、16．0μmol/L）对LS－174T细胞增殖和凋亡的影响，免疫组化技术观察As2O3对bcl-2基因表达的影响。结果：As2O3处理后，LS－174T细胞生长抑制率上升，集落形成率下降，细胞周期中G1期细胞比例上升，S期和G2／M期细胞比例下降，TUNEL法显示凋亡数增加，免疫组化结果显示bcl-2的表达明显减弱，结论：As2O3能抑制LS－174T细胞增殖并诱导该细胞株凋亡，其机理可能与下凋bcl-2的表达有关。     

IL-13对人结肠癌LS174T细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨细胞因子IL-13对人结肠癌LS174T细胞增殖和侵袭能力的影响?方法:在正常培养的人结肠癌LS174T细胞培养液中加入终浓度为20 ng/ml的重组人IL-13,分别应用MTT法?Transwell小室实验检测肿瘤细胞增殖?侵袭能力的变化?结果:MTT实验显示,IL-13处理组细胞72?96 h的OD值明显高于对照组(P < 0.05)?Transwell小室实验中,IL-13处理组细胞穿过Matrigel胶的细胞数量明显多于对照组(P < 0.05)?结论:一定浓度的重组人IL-13可以诱导人结肠癌LS174T细胞的增殖和侵袭能力增加?     

花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用研究

目的 研究花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用及其可能机制.方法 花椒挥发油按不同时间(24、48、72、96h)及不同浓度(0.125～16me/mL)分别处理Hda细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期.结果 4mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72h可显著抑制Heh细胞增殖,1 mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少.结论 花椒挥发油可抑制Hela细胞增殖并激发细胞凋亡.     

蟾蜍灵对结肠癌SW620细胞凋亡的影响

目的:研究蟾蜍灵诱导结肠癌细胞的凋亡作用.方法:采用不同浓度的蟾蜍灵处理结肠癌SW620细胞,采用四唑蓝比色法检测细胞生长,分别通过检测caspase-3活性和琼脂糖凝胶电泳了解细胞凋亡情况,以Fura-2荧光复合技术测结肠癌细胞内游离Ca2 浓度.结果:蟾蜍灵对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用.蟾蜍灵能够诱导结肠癌细胞凋亡.在结肠癌细胞凋亡过程中,胞内游离Ca2 浓度明显升高,以凋亡早期更为明显.1 h时为(288.56±8.46)nmol/L,明显高于对照组(125.56±3.18)nmol/L(P＜0.01).结论:蟾蜍灵对结肠癌细胞生长具有很强的抑制作用,与诱导细胞凋亡有关.Ca2 在蟾蜍灵诱导结肠癌细胞凋亡过程中有一定的作用.     

miR-200a在结直肠癌细胞系中的表达及其对高转移细胞系Lovo的影响

目的检测结肠癌细胞系中miR-200a对高转移细胞系Lovo的影响。方法采用荧光定量PCR法检测6种结肠癌细胞系
HCT116、HT29, LS174T、SW480、SW620和Lovo中miR-200a的表达水平,在高转移细胞系Lovo中瞬时转染miR-200a mimics
使其高表达miR-200a,检测高表达miR-200a后Lovo细胞增殖、迁移、细胞同质黏附能力和凋亡等情况的变化。结果miR-200a
在6种细胞系中存在差异性表达,其中具有高转移潜能的Lovo中表达最低,成瘤但不转移的细胞系HCT116表达最高。在Lovo
细胞高表达miR-200a后,Lovo细胞的增殖和迁移能力明显减弱、细胞同质黏附能力增强且凋亡增加。结论miR-200a在结肠
癌细胞系中表达失常,其作用可能与结肠癌细胞的侵袭和转移有关,高表达miR-200a 能抑制Lovo细胞增殖和迁移、增强细胞
间黏附能力、促进凋亡,其分子机制有待进一步研究。
     

三七总皂苷对K562细胞增殖、凋亡及周期的影响及机制

目的研究三七总皂苷（PNS）对K562 细胞增殖、凋亡、周期的影响及其相关分子机制。方法采用MTT法检测PNS对
K562细胞增殖的影响;AO/EB双荧光染色法及Annexin V-FITC/PI双染色法观察细胞凋亡及死亡状况;流式细胞术检测K562
细胞的周期变化;RT-PCR检测mTOR信号通路主要分子mRNA的表达变化;Western blot 检测cleaved caspase-3 蛋白、cyclin
D1蛋白及mTOR信号通路主要蛋白及磷酸化蛋白的表达量变化。结果100~800 μg/mL的PNS 作用于K562细胞后能够抑制
细胞增殖。PNS能够上调cleaved caspase-3蛋白表达,促使K562细胞发生凋亡。并且下调cyclin D1蛋白表达,促使K562细胞
阻滞在G0/G1期。同时,PNS 能够抑制K562 细胞mTOR mRNA 表达,降低mTOR 蛋白和磷酸化蛋白p-mTOR（Ser2448）、
p-p70S6K（Thr229/389）及p-4E-BP1（Thr37/46）的表达,从而抑制mTOR信号通路活性。结论PNS 对体外培养K562细胞有抑
制增殖,促进凋亡,使其发生周期阻滞的作用。其机制可能与PNS抑制mTOR信号通路活性、上调cleaved caspase-3蛋白表达
及抑制cyclin D1蛋白表达有关。
     

人结肠癌LS174T/5-Fu多药耐药细胞系的建立

目的建立人结肠癌多药耐药细胞系,并研究其生物学特性。方法以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为诱导药物,LS174T细胞株为研究对象,利用浓度递增诱导法,建立LS174T/5-Fu多药耐药细胞系。MTT法测定药物敏感性,光镜、细胞计数法、流式细胞仪及RT-PCR等方法观察其生物学特征及多药耐药相关基因(MRP)mRNA表达。结果历时6个月成功建立人结肠癌多药耐药细胞系LS174T/5-Fu,对5-Fu耐药指数为40.24,且与羟基喜树碱、顺铂、依托泊苷和脱氧氟尿苷等多种化疗药物有不同程度的交叉耐药性;细胞形态发生改变;倍增时间较亲代细胞延长;细胞周期发现其G1和S期细胞增加,G2期细胞减少;MRP mRNA表达增高。结论LS174T/5-Fu细胞是一种可靠的人结肠癌多药耐药细胞系,该细胞系的建立为深入研究5-Fu诱导人结肠癌多药耐药的发生机制奠定了基础。     

Survivin反义寡核苷酸对人结肠癌细胞的促凋亡作用

目的:探讨Survivin反义寡核苷酸对大肠癌细胞的促凋亡作用。方法:用脂质体介导Survivin反义寡核苷酸转染LS174T细胞,利用RT-PCR检测Survivin mRNA的表达;利用Western blot检测Survivin蛋白的表达;检验寡核苷酸作用前后caspase 3活性的变化及细胞凋亡情况。结果:Survivin-ASODN可使大肠癌细胞中survivin mRNA和蛋白的表达下降;caspase-3活性明显增加(P<0.05);细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:Survivin反义寡核苷酸可以增强caspase-3的活性,有效诱导大肠癌细胞凋亡,反义核酸技术有可能成为临床大肠癌基因治疗的一种新途径。     

RNA干扰PDK-1对5-FU诱导结肠癌细胞凋亡的促进作用

目的探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用。方法针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性。MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 Real-time PCR和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中最大敲减效率超过70%。MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P<0.05);流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P<0.05)。结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡。     

不同转移潜能结肠癌细胞比较性实验研究

目的:评估影响结肠癌进展的主要因素,为临床有效防治提供实验依据。方法:对两种具有不同转移潜能的人结肠癌细胞株LS174T及HCT8,作生长能力、侵袭力、癌细胞表面HLA及共刺激分子表达、诱导血管内皮细胞迁移能力、血管内皮生长因子表达等指标的检测。结果:两种癌细胞株主要在诱导血管内皮迁移能力上存在不同,LS174T及HCT8诱导的内皮细胞迁移数目分别为154.6±37.9个及113.0±72.7个,差异有统计学意义(t=2.137,P<0.05)。结论:高转移的结肠癌细胞在促使肿瘤血管生成能力上存在优势。