卵巢上皮性癌组织中E钙黏素基因启动子区甲基化及其表达

卵巢上皮性癌(卵巢癌)是一种常见的、高病死率的女性生殖系统恶性肿瘤,大多数患者死于肿瘤盆腹腔种植转移引起的并发症,多种黏附分子参与上述过程.E钙黏素(E-eadherin,E-cad)是钙依赖性上皮细胞黏附分子,以同种亲和的方式与邻近上皮细胞相互作用,其基因的失活会导致细胞间黏附力下降,癌细胞易于从原发灶脱落,进而向周围、远处组织浸润转移.研究表明,在卵巢癌组织中E-cad表达降低;临床分期越高,表达降低越明显;且其表达与生存时间有关[1-2].     

卵巢上皮性癌细胞中E钙黏素基因的甲基化状态及去甲基化的意义

目的 研究卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞中E钙黏素(E-cad)基因启动子区5'二核苷酸胞嘧啶(5'CpG)岛的甲基化状态,观察DNA甲基转移酶抑制剂--5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)去甲基化后对卵巢癌细胞的生长、侵袭以及E-cad蛋白表达的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测卵巢癌细胞系ES-2、3AO及SKOV3细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛的甲基化状态.以不同浓度(分别为0.1、110、10.0μmoL/L)的5-Aza-CdR处理卵巢癌细胞后,电镜下观察细胞形态的变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,蛋白印迹法检测细胞中E-cad蛋白表达的变化,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 MSP技术检测显示,ES-2及SKOV3细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛呈高度甲基化状态和非甲基化状态,3AO细胞中E-cad基因启动子区5'CpG岛仪呈非甲基化状态.经不同浓度(分别为0.1、1.0、10.0 μmol/L)的5-Aza-CdR处理后,ES-2及SKOV3细胞的体积变小,皱缩,核/质比例缩小,核分裂象减少,随着药物浓度的增高,此种趋势逐渐明显;ES-2和SKOV3细胞中E-cad蛋白相对表达水平分别为0.274、0.320、0.398和0.415、0.507、0.638,均明显高于对照细胞(分别为0.131和0.342,P＜0.01);ES-2和SKOV3细胞穿膜细胞数分别为(88.8±2.5)、(60.7±2.4)、(36.1±3.0)个和(88.2±2.1)、(60.5±2.2)、(36.2±3.0)个,均明显低于对照细胞[分别为(121.9±2.3)、(97.6±2.7)个,P＜0.01].结论 启动子区5'CpG岛的高度甲基化是卵巢癌细胞中E-cad基因异常表达的重要机制之一,5-Aza-CdR能通过降低E-cad基因启动子区5'cpG岛的甲基化而恢复其在卵巢癌细胞中的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭.     

妇科肿瘤与E钙黏素启动子甲基化研究进展

E钙黏素是细胞间重要的黏附因子，介导同型细胞间的黏附，其基因启动子区域异常甲基化可影响基因的转录进而影响其蛋白的表达，在肿瘤的浸润和转移中起到了一定的作用。近年来在对妇科恶性肿瘤的多项研究中发现了E钙黏素启动子区域异常甲基化，并与宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌及滋养细胞肿瘤的发生发展有关，而改变DNA甲基化状态将极有可能成为将来肿瘤基因治疗的候选靶点。就E钙黏素基因启动子甲基化与妇科肿瘤相关性研究进展进行综述。     

妇科肿瘤与E钙黏素启动子甲基化研究进展

E钙黏素是细胞间重要的黏附因子,介导同型细胞间的黏附,其基因启动子区域异常甲基化可影响基因的转录进而影响其蛋白的表达,在肿瘤的浸润和转移中起到了一定的作用.近年来在对妇科恶性肿瘤的多项研究中发现了E钙黏素启动子区域异常甲基化,并与宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌及滋养细胞肿瘤的发生发展有关,而改变DNA甲基化状态将极有可能成为将来肿瘤基因治疗的候选靶点.就E钙黏素基因启动子甲基化与妇科肿瘤相关性研究进展进行综述.     

卵巢上皮性肿瘤EDNRB基因甲基化状态的研究

卵巢上皮性癌（卵巢癌）是一种严重威胁妇女生命的恶性肿瘤,绝大多数卵巢癌患者早期症状不明显,约有70%的患者诊断时已届晚期,病死率较高,研究卵巢癌的发病机制,阻断其发生过程中的关键环节,寻找新的治疗靶点至关重要.     

Smac基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

Smac基因是近年发现的一种凋亡促进基因,在细胞凋亡中有重要作用.当细胞受到凋亡刺激时,线粒体释放细胞色素C和Smac蛋白到细胞质中,两者与凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins,IAP）结合,使其丧失抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）活性的作用,从而促进细胞凋亡.细胞凋亡的减少与肿瘤的发生关系密切.本研究旨在探讨Smac基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义.     

斯钙素1在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其意义

卵巢上皮性癌(卵巢癌)是常见的妇科恶件肿瘤,具有不易早期发现、易转移、预后差的特点,病死率居妇科恶性肿瘤的首位,其病因至今仍不是很清楚,且缺乏早期诊断方法.     

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因在卵巢上皮性癌中的甲基化状态及临床意义

目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidicand rich in cysteine,SPARC)基因在卵巢上皮性癌组织中的甲基化状态及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测2008-2010年由兰州大学第一医院病理科提供的40例原发性卵巢上皮性癌、30例卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢石蜡包埋组织中SPARC基因启动子区域甲基化的状态。结果 SPARC基因启动子区甲基化在原发性卵巢上皮性癌组织、卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的发生率分别为65.0%(26/40)、26.7%(8/30)及20%(2/10),癌组织中SPARC甲基化率显著高于良性肿瘤组织及正常卵巢组织(P<0.05),而良性肿瘤组织与正常组织相比差异无统计学意义(P>0.05),浆液性癌与黏液性癌之间SPARC甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。低分化癌组中SPARC基因启动子区甲基化发生率高于高分化癌组(P<0.05),临床Ⅲ期和Ⅳ期SPARC基因启动子区甲基化发生率高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),有腹水组与无腹水组相比差异有统计学意义(P<0.05),而有无淋巴结转移组间相比差异...     

卵巢上皮性肿瘤cyclinE表达的临床意义

目的 :检测卵巢上皮性肿瘤中cyclinE的表达 ,分析其临床意义。方法 :应用免疫组化S -P法检测cyclinE在 2 0例良性、10例交界性、55例恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达情况 ,并分析它们与临床病理指标的关系。结果 :cyclinE在良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中表达总阳性率分别为 30 %、50 %、78.18% ,强阳性率分别为 10 %、2 0 %、4 3.6 % ,差异均有显著性。在恶性卵巢上皮性肿瘤中cyclinE阳性表达与低组织分化 ,淋巴结转移及腹水显著有关 (P <0 .0 5) ,cyclinE阳性的肿瘤细胞多发生转移 ,预后差。结论 :cyclinE在卵巢上皮性肿瘤中的表达 ,可作为估计卵巢肿瘤恶性程度和预后的重要指标之一     

子宫内膜异位症患者卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子甲基化状态的研究

目的:探讨子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)患者卵巢颗粒细胞中类固醇生成因子-1(steroidogenic factor-1,SF-1)表达下降的可能机制。方法:应用重亚硫酸盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测EMS患者和正常女性卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5'Cp G位点甲基化水平,将测得的序列与原始序列比对,统计甲基化位点、数量并分析EMS组和正常组甲基化程度。结果:BSP片段涵盖SF-1基因转录起始位点附近的13个Cp G位点(从Cp G-84到Cp G+168),EMS组SF-1基因启动子区域的整体甲基化水平显著高于对照组(P0.05),逐个位点的分析显示EMS组Cp G+7、+18、+21、+42、+54、+60、+132以及+146位点相较于对照组呈现高甲基化水平(P0.05);而EMS组Cp G+77、+121和+141位点的高甲基化水平尤为显著(P0.001)。结论:EMS患者卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5'Cp G位点甲基化水平显著高于对照组,可能是EMS患者卵巢颗粒细胞SF-1 m RNA表达降低的机制。     

卵巢上皮性肿瘤中survivin bcl-X基因蛋白的表达及其相关性

目的　研究卵巢上皮性肿瘤中survivin、bcl X基因蛋白的表达及其相关性。方法　 2 0 0 0年 9月至2 0 0 2年 9月应用免疫组织化学技术 ,检测正常卵巢组织及良、恶性卵巢上皮性肿瘤中survivin、bcl X基因蛋白表达。结果　survivin及bcl X在恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的表达阳性率分别为 6 3 3%和 4 6 9% ,显著高于良性卵巢上皮性肿瘤组织 ( 2 6 9%和 15 4 % )和正常卵巢组织 (阴性 ) (P <0 0 1)。Ⅲ～Ⅳ期恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的survivin蛋白表达水平高于Ⅰ～Ⅱ期恶性卵巢上皮性肿瘤组织 (P <0 0 5 )。survivin阳性表达与bcl X的过表达密切相关。结论　survivin基因的异常表达而引起的凋亡抑制在恶性卵巢上皮性肿瘤的发生中起一定作用 ,其过表达或 (和 )bcl X基因蛋白表达阳性 ,提示恶性卵巢上皮性肿瘤预后不良     

卵巢上皮性肿瘤中细胞周期素D1蛋白与p16蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨细胞周期素D1蛋白 (cyclinD1)与 p16蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义。 方法　 1998年 1月至 2 0 0 0年 1月采用免疫组化SP法 ,检测恶性、交界性、良性卵巢上皮性肿瘤、正常卵巢组织中的cyclinD1蛋白和p16蛋白的表达。结果　cyclinD1蛋白、p16蛋白表达的阳性率分别为恶性 5 0 %和 4 0 %、交界性30 %和 5 0 %、良性卵巢上皮性肿瘤 0和 80 %、正常卵巢组织中 0和 90 %。恶性卵巢上皮性肿瘤与良性卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织之间比较 ,cyclinD1蛋白的表达差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,p16蛋白的表达差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。在恶性程度较高 ,组织分化差 ,晚期的恶性卵巢上皮性肿瘤中cyclinD1蛋白表达率高 ,p16蛋白的表达率低。相关性分析显示 ,cyclinD1蛋白与 p16蛋白的表达呈负相关。 结论　cyclinD1蛋白的过度表达与 p16蛋白表达的缺失在恶性卵巢上皮性肿瘤的发生、发展中起一定作用 ,二者可能存在相互抑制机制。     

卵巢上皮性癌中肌切蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨肌切蛋白(Scinderin)在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义.方法:运用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法分别检测34例卵巢上皮性癌、21例卵巢良性肿瘤和20例正常卵巢组织中肌切蛋白mRNA和蛋白的表达情况,并进行临床资料统计,分析肌切蛋白与卵巢上皮性癌临床病理参数间的关系.结果:卵巢上皮性癌组中肌切蛋白mRNA及蛋白表达量均显著高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组(P＜0.01),而在正常卵巢组与良性卵巢肿瘤组中,肌切蛋白mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P＞0.05).肌切蛋白mRNA和蛋白表达与卵巢上皮性癌病理分级、淋巴结转移有关(P ＜0.01;P＜0.05),而与患者年龄、肿瘤临床分期无相关性(P＞0.05).结论:肌切蛋白在卵巢上皮性癌中表达上调,且在低分化卵巢上皮性癌中表达高于中-高分化卵巢上皮性癌,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,提示肌切蛋白与卵巢上皮性癌患者的不良预后相关,可作为判断卵巢上皮性癌预后的生物学标志物.     

子宫颈癌组织中p16基因启动子甲基化的临床意义

宫颈癌是严重威胁妇女健康的主要疾病之一,全世界每年大约有50万宫颈癌新发病例,死亡20万;我国每年新发病例13.15万,约占全世界宫颈癌新发病例的28.8%,居我国妇女生殖道恶性肿瘤的第1位[1].     

卵巢上皮性肿瘤P53抑癌基因蛋白表达及其临床意义

卵巢上皮性肿瘤ｐ５３抑癌基因蛋白表达及其临床意义姜彦多，王永信，戴晓淳，何安光，张乃连我们应用免疫组化方法，观察卵巢上皮性肿瘤ｐ５３蛋白的表达情况，探讨其临床意义。现报道如下。一、材料和方法所用组织均手术切除标本。取材后用１０％中性福马林固定，石蜡包...     

卵巢上皮性癌中p53基因缺失与HER-2基因扩增及其临床意义

目的:检测卵巢上皮性癌中17号染色体上野生型p53基因缺失与HER-2基因的扩增情况并探讨其临床意义。方法:分别以不同颜色荧光标记的p53、HER-2基因和17号染色体着丝粒为双色探针组,应用间期双色荧光原位杂交(FISH)技术检测54例卵巢上皮性癌间期细胞核中p53基因、HER-2基因和17号染色体的拷贝数及其相对比例,以确定其缺失或扩增,并统计分析其临床意义。结果:54例卵巢上皮性癌中p53基因缺失38例(70.4%);HER-2基因扩增14例(25.9%);17号染色体多倍体有35例(64.8%)。p53基因缺失与17号染色体多倍体呈正相关(χ2=12.116,P<0.001),与HER-2基因的扩增无关(χ2=0.00,P=1.00)。p53基因缺失与卵巢上皮性癌患者肿瘤分期及体积大小无关(P>0.05),而与血CA125水平及淋巴结转移有关(P<0.05);术后2年存活率p53基因缺失患者显著低于无缺失患者(81.3%,χ2=4.186,P=0.047)。结论:p53基因高频缺失和HER-2基因扩增,可能与部分卵巢上皮性癌的发生发展有关。     

卵巢上皮性肿瘤常见病理诊断问题及临床意义

<正>2014第4版女性生殖器官肿瘤WHO分类出版,在总结了10余年来妇科肿瘤病因学、病理学、流行病学和分子遗传学方面研究进展的基础上,对妇科肿瘤分类进行了新的诠释。本文结合新分类,对卵巢上皮性肿瘤常见病理诊断问题做一简单介绍,以提高大家对病理诊断问题的认识。1 2014 WHO分类卵巢上皮性肿瘤的命名[1,2]卵巢上皮性肿瘤诊断名称有所更改,如以前称呼     

血清DNA定量及基因甲基化状态检测在卵巢上皮性癌诊断中的应用

卵巢恶性肿瘤是病死率最高的女性生殖系统肿瘤,其中90%为卵巢上皮性癌(卵巢癌),而70%的患者诊断时已达Ⅲ期或Ⅳ期,5年生存率仅为15%～20%[1].因此发现新的既敏感又特异的肿瘤标志物,对卵巢癌的早期诊断、提高生存率具有重要意义.近年的研究发现,作为表观遗传的主要方式之一,DNA异常甲基化是肿瘤发生的早期事件,可早于基因及其表达产物的改变[2].而且,肿瘤患者血清DNA含量明显升高,虽然其来源尚未十分明确,但其具有与肿瘤DNA类似的遗传学和表观遗传学改变[3].因此,血清DNA的异常甲基化用于肿瘤的早期诊断具有明显的优势和极大的潜力.本研究通过定量检测卵巢癌患者血清DNA含量,以及基因EGFLAM、CDKN2A和LSM2的启动子区胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤二核苷酸岛(CpG island,CGI)甲基化状态,探索新的可用于辅助卵巢癌早期诊断的血清DNA甲基化标志物.     

上皮性卵巢肿瘤患者血清中YKL-40、HE4的表达及临床意义

目的:探讨血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)、人附睾蛋白4(HE4)在上皮性卵巢肿瘤的表达及临床意义。方法:用酶联免疫吸附试验,检测健康妇女、上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌患者血清中YKL-40、HE4的水平。结果:(1)健康妇女、上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌患者术前血清中,YKL-40表达中位数分别为35.56、41.42、44.34和130.25μg/L;HE4的表达中位数分别为41.10、43.98、65.21和260.90pmol/L;在术前卵巢癌组YKL-40、HE4的表达水平均高于前3组,差异有统计学意义(P<0.05),前3组之间差异无统计学意义;卵巢癌患者术后血清中YKL-40、HE4中位数分别为58.57μg/L、124.32pmol/L,术前血清水平明显高于术后(P<0.05);(2)卵巢癌患者术前血清YKL-40浓度与FIGO分期、血清CA125浓度呈正相关(P<0.05);术前血清HE4浓度与病理类型、血清CA125浓度、年龄相关。结论:血清YKL-40、HE4有望成为卵巢癌标志物,用于早期诊断和预后分析。     

育龄妇女的卵巢上皮性肿瘤

为评价年龄是否是影响卵巢癌预后的一个独立因素和研究年轻妇女卵巢癌的临床病理学特征,生存率等,对<40岁卵巢癌患者进行回顾性分析。 收集1969～1994年在Florence大学妇产科治疗的74例交界性和浸润性卵巢癌资料。平均随访时间72个月(11～288月),为了按年龄分析临床病理学特征和生存率,将患者分为“极年轻组”(≤30岁)34例,“年轻组”(31～40岁)40例,按FIGO分期标准Ⅰ～Ⅳ期分别占39.2％、6.7％、41.9％和12.2％。组织学类型最常见的为浆液性的44.6％,