不育厨师精液质量参数及精子DNA完整性分析

目的探讨不育厨师精液常规质量参数和精子畸形率、精子DNA碎片率等指标。方法对生殖门诊52名不育厨师（观察组）和49名育前体检者（对照）行精液常规和DNA碎片率等检测。结果观察组精液液化异常率、精子畸形率、DNA碎片率都显著高于对照组;精子浓度、前向运动精子比率显著低于对照组。结论厨师职业暴露会影响精液质量,导致男性不育,应加强保护和防范。     

不育男性精子膜表面抗精子抗体水平与精液主要参数及精子功能的相关性

目的探讨男性不育症患者精子膜表面抗精子抗体与精液主要参数的相关性。方法收集男性不育症患者350例,均采用免疫珠法测定精子膜表面抗精子抗体(AsAb,IgA或IgG型),根据结果分为AsAb阳性组(43例)和阴性组(307例)。结果在这350例男性不育症患者中精子膜表面抗精子抗体检出率为14.00%。AsAb阳性组患者的精液主要参数(精液密度、活动率、活动力、精液量)均低于AsAb阴性组患者,两组间比较差异具有显著性(P<0.05)。结论精子膜表面抗精子抗体与精液主要参数及精子功能下降有明显相关性,是导致男性免疫性不育的重要因素之一。     

果糖定性及定量试验对无精子症患者的评价

目的　探讨无精子症患者不同病因类型的精浆果糖水平。方法　果糖定性试验采用间苯二酚法 ,定量试验应用吲哚法。结果　先天性双侧输精管缺如患者组 (n =2 7)的果糖含量阴性 ,唯支持细胞综合征患者组 (n =2 )和生精阻滞患者组 (n =6 )的果糖含量在正常值范围 ,获得性精道梗阻患者组 (n =5 )的果糖水平有较大差别 ,其中 2例的果糖偏低。结论　果糖测定有助于诊断输精管缺如引起的无精子症或其它病因所致没有精子 ,果糖定性试验简便实用 ,可应用于无精子症患者的病因鉴别     

小鼠胚胎毒性试验方法的建立及在评价中药早期胚胎毒性中的应用

目的 建立一种快速、早期的中药胚胎毒性的快速检测技术,用于中药的早期胚胎毒性筛选。方法 ①血清制备:SD大鼠随机分为阳性对照组4只,正常组4只,雄黄组、朱砂组各3只。阳性对照组给予环磷酰胺10 mg/kg,正常组用0.5%CMC-Na灌胃给药,雄黄组和朱砂组分别将雄黄和朱砂（用0.5%CMC-Na稀释）按1.0 ml/100 g灌胃给药。末次给药后1 h,无菌取血并取上清血清;②细胞采集:4~6周雌性C57小鼠,用妊娠孕马血清（PMSG）腹腔注射,48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）,合笼交配。第2天检查阴栓,用M2培养液将2细胞胚胎从输卵管中冲出,用M16培养液进行培养;③毒性试验:在胚胎2细胞阶段加入正常组、阳性对照组、雄黄组及朱砂组不同稀释比血清,观察囊胚成活率。结果 在1∶4、1∶16、1∶32的稀释比下,正常组的囊胚率为60.00%、73.33%、93.33%,高于阳性对照组的46.67%、60.00%、66.67%;朱砂组血清各个稀释比的囊胚率均未达到80%;除1∶512这个稀释比外,雄黄组血清各个稀释比2细胞胚胎的囊胚率均未达到80%。结论 ①朱砂和雄黄的大鼠含药血清在一定浓度时,对小鼠2细胞胚胎的生长发育有一定的影响,呈现中药的胚胎毒性;②小鼠胚胎2细胞用于中药的早期胚胎毒性筛选方法是可行的。     

内皮素-1对人系膜细胞表达MMP-3及TIMP-1的影响

目的研究内皮素-1(ET-1)对人系膜细胞(MC)基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及其组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法采用体外MC培养,应用细胞ELISA法测定MC内MMP-3、TIMP-1蛋白的表达。结果ET-1促进MC内MMP-3、TIMP-1蛋白表达,但MMP-3/TIMP-1比值呈剂量及时间依赖性下降。结论ET-1可能是人系膜细胞内MMP-3/TIMP-1比值下降的原因之一,这与肾小球细胞外基质降解受抑密切相关。     

5-氮-2''-脱氧胞苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖凋亡及hMLH1和hMSH2表达的影响

目的 探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、凋亡及错配修复基因HMLH1和HMSH2表达的影响.方法 用0.5、5和50μmol/L特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理SKOV3细胞3 d,继续常规培养7 d后,采用四唑盐(MTT)比色法检测生长活性,流式细胞术分析细胞的凋亡,半定量RT-PCR检测细胞HMLH1和HMSH2 mRNA的表达水平.结果 人卵巢癌细胞系SKOV3经0.5、5和50 μmol/L5-Aza-CdR处理后,均能明显抑制肿瘤细胞生长.各组细胞的凋亡率分别为10.59%±1.57%、17.52%±1.72%、34.10%±1.45%,显著高于对照组的5.35%±0.86%(P＜0.01);且凋亡率与5-Aza-CdR剂量成正相关(F=227.6,P＜0.01).在SKOV3中HMLH1和HMSH2呈弱表达,经5-Aza-CdR处理后mRNA表达量有不同程度的增加,且与药物存在剂量依赖性.结论 5-Aza-CdR可逆转卵巢癌细胞系中存在的HMLH1和HMSH2甲基化,DNA错配修复基因甲基化与卵巢癌的发生、发展有关.     

低温冷冻对精子膜功能的影响

目的评价低温冷冻对精子膜功能的影响,为冻精的临床利用提供理论指导。方法用精子尾部低渗肿胀试验(hypoosmotic swelling test,HOST),比较冷冻前后及不同冷冻方法间精子尾部的低渗肿胀率,以评估低温冷冻对精子膜功能的影响。结果精尾低渗肿胀率在冷冻前为63．9±10．4％,经速冻法冷冻后为17．3±8．3％,经缓冻法冷冻后为 27．7±11．4％,任意二者间比较结果均有显著差异(P<0．01)。结论低温冷冻破坏了精子膜的功能完整性;降温速度越快,精子膜的功能完整性下降越显著。在冷冻前后进行精子尾部低渗肿胀试验,具有重要的临床意义。     

过氧化氢对生育男性精子凋亡及核DNA完整性的影响

目的研究体外过氧化氢对生育男性精子凋亡及精子DNA完整性的影响。方法58例正常生育男性均来自吉林大学第二临床医院泌尿男科,精子Percoll优选后制作精子悬液,用伊红Y染色分析精子活率,用瑞-姬染色分析精子凋亡率,用精子核吖啶橙荧光染色检测精子DNA完整性。结果外加过氧化氢浓度为0.02mmol/l时,精子活率显著低于对照组（P〈0.05）。当浓度为0.20mmol/l时,精子活率显著低于对照组（P〈0.05）,精子凋亡率显著高于对照组（P〈0.05）。外加过氧化氢浓度为0.02mmol/l、0.2mmol/l时,精子DNA完整性均显著低于对照组（P〈0.05）,且精子DNA完整性随实验浓度增加而下降。结论体外过氧化氢对精子活率、凋亡率与DNA完整性有影响,高浓度的过氧化氢可促使精子凋亡,损伤精子DNA完整性,导致男性不育。     

冷冻保存对人类精子膜完整性的影响

本文建立“低渗肿胀－伊红”（ＨＯＳ－ＥＹ）结合试验探讨冷冻保存人类精子头部和毛部膜完整性的影响，ＨＯＳ－ＥＹ试验按照精子尾部肿胀与否和头部着色与否区分为４种膜类型。冷冻保存后，头膜－尾膜均完整的Ⅳ型精了率和头膜－尾膜的均损伤的Ｉ型精子率分别显著减少和增多（ｎ＝５０，Ｐ〈０．００１），表明冷冻－解冻过程对精子膜完整性有严重影响，头膜损伤－尾膜完整的Ⅲ型精子率在冷冻组显著增多，提示精子头部或尾部的冷东     

人精子膜功能完整性与精液参数的关系

目的探讨精子膜功能完整性与精液参数的关系。方法收集503例精液样本,其中对照组149例,不育组354例。根据WHO标准分析精子密度、活率、活力、精液白细胞浓度、精子形态和精子尾部低渗膨胀(HOS)率。结果不育组精子尾部低渗膨胀率显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,HOS正常不育组和HOS异常不育组形态正常精子率、密度、活力、活率均显著降低(P<0.05),头部异常精子率、精液白细胞浓度显著增高(P<0.05);此外,HOS正常不育组的尾部异常精子率显著高于对照组,其精子活力、活率均显著高于HOS异常不育组(P<0.05)。精子HOS与精子密度、活力、活率呈显著正相关,与精液白细胞浓度呈显著负相关(P<0.05)。结论精子膜功能可能与精液参数密切相关,精子膜功能是评价男性生育力的重要指标。     

280例不育症男性精奖浆抗精子抗体IgA与精子参数的研究

目的通过对男性患者精子质量分析,精浆抗精子抗体（antisperm antibodyAsAb）检测,分析精浆中抗精子抗体IgA与精子质量各项参数的相关性的。方法采用禁欲3-7天不育症患者的精液标本检测精子质量,进行精浆抗精子抗体检测.后对检测抗精子抗体阳性抗精子抗体阴性患者分组进行精子质量参数的统计学分析。结果280例不育男性抗精子抗体阳性率为15.35%,其精子的密度/活率活动度/均低于阴性组,两组间存在显著差异（P〈0.01）。结论精浆抗精子抗体IgA与精子密度、活率、精子活力关系密切是男性不育的主要原因之一。     

应用改良巴氏染色法对前列腺炎合并不育症患者精液标本的分析

目的探讨改良巴氏染色法在前列腺炎合并不育症患者精液标本的应用. 方法前列腺炎合并不育症患者精液(n=40, A组)和男性不育症门诊初诊者精液(n=40,B组)作改良巴氏染色法分析,并比较2组的精子和非精子细胞染色效果.结果 A组的畸形精子率和白细胞数显著高于B组(P<0.01).A组高粘稠度精液标本染色后,背景易因涂片较厚而出现杂色,精子头、颈和尾部的染色效果与B组的没有差别.而且非精子细胞类型的着色效果也未见与B组的有差别.结论前列腺炎合并不育症患者精液的畸形精子率和白细胞数有较高的发生率.改良巴氏染色法可应用于前列腺炎高粘稠度精液标本的染色分析,实际操作应避免涂片较厚而染上背景色.     

精子膜的完整性与男性不育的相关性研究

目的探讨精子膜完整性与精子功能的相关性。方法收集140例精液标本，其中生育组50例，不育组90例，采用伊红-Y水试验，低渗肿胀试验，检测精子形态和精子膜低渗肿胀率。结果生育组和不育组比较，精子头部未着色率、低渗肿胀率有显著性差异（P〈0．01）；同时，精子膜低渗肿胀率与精子活率密切相关，精子低渗肿胀率越高，其活率也越高（P〈0．01）。结论精子膜功能可能与精液参数密切相关，精子膜功能是评价男性生育力的重要指标之一。     

生育与不育男性精子顶体反应释放的顶体酶活性比较

目的比较生育与不育男性精子顶体反应释放的顶体酶活性,以此来评价精子顶体反应。方法30例不育男性和10例健康生育男性精液,用Percoll密度梯度分离法优选精子,FITC-PSA荧光染色法分析AR;用分光光度比色法测定顶体酶活性。结果少精子症组、弱精子症组和畸形精子症组精子顶体反应率和顶体反应释放的顶体酶活性均明显低于生育组(P<0.05),前3组中顶体反应率和顶体反应释放的顶体酶活性以畸形精子症组最低,但不育各组间比较均没有明显差异。将顶体反应释放的顶体酶活性与其相应的顶体反应率进行相关分析,两者存在明显正相关关系(P<0.001)。结论用顶体反应释放的顶体酶活性可以评价精子顶体反应功能。     

Modified method for evaluation of plasma membrane integrity in eukaryotic cell

We propose a method for evaluation of the number of viable cells by the content of bromcresol purple dye absorbed by dead cells from the incubation medium. Myramistin was used as a pore-forming agent. The number of live cells in yeast suspension inversely correlated with the percentage of dye absorbed by cells. The method is simple and requires no special equipment. The effect of myramistin on Candida albicans and Malassezia sympodialis cells and on epitheliocytes was evaluated. Two-hour treatment with myramistin in a concentration commonly used in clinical practice (100 mug/ml) decreased the number of viable cells by 2 and 1 order of magnitude, respectively. Epitheliocytes under the same conditions absorbed approximately the same mount of the dye as Candida cells.