3种分离流感病毒方法的比较分析

目的：为了比较流感病毒３种分离方法的敏感性及确定流感优势病毒株,１９９６年５月－９月,对江西南昌地区流感病毒进行了分离和鉴定研究。方法;采用细胞接种培养法,鸡胚羊膜腔接种培养法,鸡胚尿囊腔接种培养法。结果;细胞接种法分离的流感病毒侏１４株,鸡胚羊膜腔法得１２株,鸡胚尿囊腔法得２株,共２８株,其中甲,型１８株,甲３型４株,乙型６株。     

3种分离流感病毒方法的比较分析

目的：为了比较流感病毒3种分离方法的敏感性及确定流感优势病毒株,1996年5月～9月,对江西南昌地区流感病毒进行了分离和鉴定研究。方法：采用细胞接种培养法、鸡胚羊膜腔接种培养法、鸡胚尿囊腔接种培养法。结果：细胞接种法分离的流感病毒株14株、鸡胚羊膜腔法得12株、鸡胚尿囊腔法得2株,共28株,其中甲1型18株、甲3型4株、乙型6株。结论：流感病毒分离中,细胞接种法与鸡胚羊膜腔接种法同样敏感。鸡胚分离培养中,应高度重视羊膜腔接种法。1996年南昌地区的优势而行珠是甲1型。     

流感病毒MDCK细胞培养条件的优化

目的优化流感病毒MDCK细胞培养条件,提高流感病毒分离率和流感监测效果。方法使用MDCK细胞培养法,比较传统的与优化的实验条件对流感病毒分离率和对血凝试验滴度的影响。结果不同的优化实验条件可明显提高流感病毒的分离率和滴度。结论已筛选出流感病毒MDCK细胞培养法适宜的条件。     

3种流感病毒检测方法的比较

目的对病毒分离培养法、实时荧光PCR法和鸡胚培养法3种检测流感病毒的方法和结果进行比较研究,筛选快速准确的检测方法,为流感监测与防控工作提供及时可靠的病原学依据。方法同时采用病毒分离培养法、实时荧光PCR法和鸡胚培养法对2014年10月~2015年3月牡丹江市流感监测哨点医院采集的流感样病例咽拭子样本进行检测,比较检测结果。结果实时荧光PCR法的流感病毒核酸检测阳性率为15.52%,其中169份为季节性H3N2流感病毒,73份为B型Yamagata株;病毒分离培养法的阳性率为6.29%,分离出63株季节性H3N2流感病毒,35株B型Yamagata株;鸡胚分离培养法检出率为0.64%。3种方法中,实时荧光PCR法的阳性率最高,病毒分离培养法次之,鸡胚分离培养法阳性率最低。结论实时荧光PCR法比病毒分离培养法和鸡胚培养法灵敏快捷、特异性强、敏感度高,适用于流感病毒的快速检测。     

流感病毒两种鸡胚接种方法的比较

流感病毒属正黏病毒在鸡胚羊膜腔及尿囊腔中均生长良好,故常应用羊膜腔接种.鸡胚分离病毒是一种经典的病毒分离方法[1,2],但传统壳外接种鸡胚的方法成功率低,常常影响实验教学.2003年以来采用打开鸡胚气室卵壳接种流感病毒的方法,接种成功率高,满足了教学的需要,有利于学生观察操作,收到良好效果.     

银翘感冒颗粒体外抗甲型流感病毒作用的药效学实验

目的通过实验观察银翘感冒颗粒的体外抗甲型流感病毒作用。方法采用鸡胚接种和血凝试验测定病毒效价。结果药物的直接灭活作用(A组)和药物抑制病毒在鸡胚内的增殖作用(B组)的血凝滴度(GMT)分别为13.61和18.52(P<0.01)。结论银翘感冒颗粒在对甲型流感病毒的直接灭活作用和抑制病毒在鸡胚内的增殖作用方面均有效。     

儿茶提取物抗甲型流感病毒作用的实验研究

目的　研究从中药儿茶中提取的药物成分抗甲型流感病毒的作用。方法　用狗肾传代MDCK细胞培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用;用鸡胚培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒增生的作用;用红细胞凝集试验观察儿茶提取物体外直接抑制甲型流感病毒的作用。结果　1)儿茶提取物的细胞毒性较低,可有效抑制甲型流感病毒感染细胞(P<0.05);2)儿茶提取物在一定范围内可明显抑制甲型流感病毒在鸡胚内的增生,经红细胞凝集试验测定抑制病毒效价为8倍或8倍以上;3)儿茶提取物直接与甲型流感病毒作用后可抑制病毒血凝效价达16 倍以上。结论　儿茶提取物具有很好的抗甲型流感病毒的作用。     

MDCK、Vero和Hep-2细胞共培养分离甲型H1N1型流感病毒

目的用MDCK、Vero和Hep-2细胞共培养体系,分离甲型H1N1流感病毒,提高流感监测效率及缩短临床诊断周期。方法选取4株经国家流感中心复核鉴定、本实验室保存的甲型H1N1流感病毒,用病毒培养液1:2稀释后分别接种MDCK、Vero和Hep-2共培养细胞瓶和MDCK细胞瓶,每组设空白对照,用生理盐水代替接种。经35℃、5%CO2培养后记录甲型H1N1型流感病毒毒株在共培养细胞瓶和MDCK细胞瓶中的细胞病变效应(CPE)、血凝滴度和荧光定量PCR反应的CT值。结果培养后,2组接种流感病毒的细胞瓶均出现典型细胞病变,MDCK细胞瓶CPE略强于共培养细胞瓶,分离物-70℃冻融2次后检测血凝滴度,2组接种流感病毒的细胞瓶内分离物,血凝滴度均(1∶32;提取分离物核酸,荧光定量PCR检测,CT值均(20。结论用MD-CK、Vero和Hep-2细胞共培养体系可以分离流感病毒,同时还可分离鉴定其它呼吸道病毒。     

流感病毒RNA聚合酶的分离与纯化

目的：建立分离、纯化流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA 3P蛋白的有效方法,为进一步研究3P蛋白的结构和功能奠定基础。方法：用甘油、CsCll及CsTFA不同介质的密度梯度超速离心法进行分离,用SDS-PAGE电泳及Western blot法检测3P蛋白,用尿素变性PAGE检测vRNA。结果：用甘油密度梯度离心,可从病毒粒子中分离由NP、3P和RNA组成的RNP。将纯化的RNP用CsCl和甘油双组分不连续密度梯度离心,可形成NP和3P-RNA两部分,使NP与3P-RNA分离。进一步将3P-RNA在CsTFA-甘油双组分不连续密度梯度介质中进行超速离心,可有效地将3P与RNA分离,获得较纯的3P蛋白。3P位于离心管的上半部分,而RNA则位于离心管的近底端部可有效地将3P与PNA分离,获得较纯的3P蛋白。3P位于离心管的上半部分,而RNA则位于离心管的近底端部分。结论：用甘油、CsCl-甘油和CsTFA-甘油分步超离心法可有效地从流感病毒粒子中纯化出离纯度的流感病毒RNA聚合酶。     

抗病毒1号中药在鸡胚中对流感病毒的抑制作用

目的 开发安全有效的抗流感病毒新药。方法 采用鸡胚实验技术观察抗病毒１号中药对流感病毒的抑制作用。结果 抗病毒１号最大无毒剂量大于７２０ｍｇ／胚;３６０、２４０ｍｇ／胚剂量组对流感病毒Ａ３有显著的抑制作用（Ｐ〈０．０５）,半数有效量（ＥＤ５０）为１３０．６４ｍｇ／胚,９５％可信区间为１０２．１３～１６７．１１ｍｇ／胚,治疗指数（ＴＩ）大于５．５;３６０、２４０、１６０、１０６．６ｍｇ／胚剂量组对流     

细胞培养与PCR法检测生殖器疱疹病毒的对比研究

目的:比较不同方法检测生殖器疱疹病毒感染的效率。方法:采用病毒培养和PCR法检测疑为生殖器疱疹病毒感染者标本60例,并用PCR作病毒分型。结果:根据病史及临床表现确诊的生殖器疱疹患者标本60例中,病毒培养法阳性36例,阳性率60%(36/60);PCR检测单纯疱疹病毒(HSV)阳性45例,阳性率75%(45/60),和病毒培养相比,差异非常显著(χ2=26.76,P<0.01);PCR分型结果显示阳性标本均为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)。水疱和脓疱标本的病毒培养和PCR检测阳性率均较高(80.0%~93.3%),糜烂、结痂、斑丘疹标本检测中PCR阳性率(20.0%~66.7%)高于病毒培养(0~33.3%)。结论:对疑为生殖器疱疹患者作病原学诊断,采集水疱、脓疱标本进行病毒分离或PCR检测较佳。     

实时荧光PCR法和病毒分离培养法在手足口病病毒检测中的应用分析

目的 筛选快速准确的检测方法,为手足口病监测与防控工作提供及时可靠的病原学依据。方法 采用病毒分离培养法和实时荧光PCR检测法对2014年牡丹江市手足口病监测哨点医院采集的手足口样病例标本进行检测,比较检测结果。结果 2014年采集的206份标本中,实时荧光PCR法检测肠道病毒EV 71型42例、Cox A16型9例、肠道病毒通用型37例,阴性118例。病毒分离培养法检测肠道病毒EV 71型4例、Cox A16型4例、肠道病毒通用型6例。实时荧光PCR法、病毒分离培养法检测阳性率分别为42.72%和6.80%;与实时荧光PCR法相比,病毒分离培养法灵敏度、特异度分别为15.91%、100.00%。结论 实时荧光PCR法比病毒分离培养法更灵敏快捷、特异性强、敏感度高等,适用于手足口病病原体的检测。     

实时荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒

目的探讨实时荧光定量PCR（FQ—PCR）技术检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的相关性。方法用FQ—PCR检测115份疑似HCV感染的病人血清HCV—RNA，ELISA法检测抗-HCV，全自动生化分析仪测定ALT。结果以80拷贝／ml血清为标准，115份标本中HCV—RNA阳性率为54．8％（63／115）；抗-HCV阳性率为53．9％（62／115）；ALT异常率为40．9％（47/115）。HCV—RNA载量与抗-HCV（＋）例数呈正相关（r=0．986，P〈0．01）。HCV—RNA载量与ALT异常例数（r=0．94，P〈0．01）、含量（r=0．624，P〈0．01）呈正相关。结论HCV—RNA载量升高，抗-HCV阳性率相应增加，ALT高于正常值（40U／L）的异常率和浓度也增高，均呈正相关。FQ—PCR法可作为临床检测丙型肝炎的确诊方法之一。     

EB病毒感染与自然流产的关系探讨

目的 探讨EB病毒（EBV）感染在自然流产中的作用及预防流产的临床意义.方法 选取2012年11月至2013年4月湖南省妇幼保健院不明原因流产妇女40例（观察组）及正常孕妇50例（对照组）,用ELISA法检测两组对象血清中EBV的核心抗原（NA）IgG,早期抗原（EA）IgM,衣壳抗原（VCA）IgM、IgG,分析EBV感染与自然流产的相关性.结果 观察组和对照组EBV-IgG阳性率分别为97.5%（39/40）、96.0%（48/50）（P＞0.05）;两组EA-IgM阳性率分别为50.0%和12.0%,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组VCA-IgM阳性率分别为47.5%和10.0%,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 EBV激活感染与不明原因早中孕期妊娠丢失有密切关系,应作为孕早期常规检测项目.     

病毒感染与氧化应激的关系

 病毒感染和氧化损伤密切相关。病毒感染可引起机体广泛的氧化应激反应,并进一步加重疾病。本文针对RNA、DNA及逆转录病毒,尤其侧重于流感病毒、乙肝病毒和人免疫缺陷病毒,从病毒感染诱导产生活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的能力、病毒与ROS的相互影响、病毒在机体氧化/抗氧化平衡中发挥的作用、抗氧化剂在病毒感染中的治疗作用等方面对病毒感染和氧化应激的关系作一综述。     

消化道肿瘤与EB病毒关系的研究

目的探讨EB病毒与消化道肿瘤发生的关系。方法 用双温聚合酶链反应(PCR)扩增出EB病毒Bam W区的121bp DNA片段,对233份消化道肿瘤和83份消化道良性疾病的内镜活捡标本进行了EB病毒DNA检测。结果消化道肿瘤内镜活检组织中EB病毒阳性率为6.44％(15/233),30例癌旁、远离癌灶5cm以上组织和非肿瘤病交均阴性。结论 消化道肿瘤内镜活检组织中EB病毒感染率低,两者关系的进一步研究,有助于EB病毒致瘤机制的阐明。     

人乳头瘤病毒与宫颈癌的关系

目的 宫颈癌是全世界妇女中除乳腺癌外最常见的妇科恶性肿瘤,是多种因素共同作用的结果.高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌的主要危险因素.90%以上的宫颈癌伴有高危型HPV感染.HPV感染能否引起宫颈癌的发生,受性激素水平、HPV感染逆转情况、宿主免疫状态、病毒DNA的存在形式等多种因素影响,本文就HPV感染引起宫颈癌的影响因素作一综述.     

EB病毒感染与胃癌的关系

Epstein-Barr病毒(Epstein-Barrvirus，EBV)最初是由Epstein和Barr从非洲Burkitt淋巴瘤培养中发现的，属人疱疹病毒4型，是一种癌基因DNA病毒。EBV在人群中感染非常普遍，世界上大多数人在幼儿期就可感染EBV，并终身携带。血清学、流行病学及分子生物学的研究表明，EBV与人类多种疾病密切相关，包括传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤(BL)、鼻咽癌(NPC)、霍奇金病(HD)等，     

Line-Gene荧光定量PCR检测系统工作原理及常见故障维修

本文介绍Line-Gene荧光定量PCR检测系统的检测原理、工作原理及仪器的常见故障维修,并提供了相应部分的结构示意图.     

Glypican3与肝癌关系的研究进展

肝癌是当今世界常见肿瘤之一,近年来,国内外肝癌的发病率呈上升趋势。传统的肝癌诊断及治疗都无法满足临床工作的需要,新近发现的磷脂酰肌醇蛋白3-Glypican3（Gpc3）与肝癌的发生密切相关,现就近几年对两者关系的研究作一综述。