核素标记混合抗体瘤内注射治疗大肠癌的实验研究

目的:为临床应用混合抗体进行放射免疫治疗提供实验依据。方法:在裸鼠荷人大肠癌Lovo移植瘤生长至1cm时,瘤内分别或同时注射~(131)I标记的抗CL_3单克隆抗体(~(131)I-CL_3)和~(131)I标记抗FERR单克隆抗体T_9(~(131)I-T_9),治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并进行疗效观察。结果:我们发现两种抗体混合治疗组疗效明显好于单独治疗组,抗体在肿瘤内的浓聚也大于单独应用。结论:多种抗体混合应用瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤内的浓聚,并能提高放射免疫治疗的疗效。     

抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究

目的 探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAg Fab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据.方法 荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAg Fab、131I-chTNT、131I-抗HBsAg Fab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131HgG)及PBS.治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并澍量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率.结果 研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,呀显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%.联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组.结论 131I-抗HBsAg Fab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚.并能提高放射免疫治疗效果.     

瘤内注射核素标记混合抗体治疗肝癌的实验研究

目的 为临床应用混合抗体进行瘤内注射放射免疫治疗提供实验依据。方法 在裸鼠荷人肝癌２．２．１５移植瘤生长至１ｃｍ时,瘤内分别或同时注射＾１３１Ｉ标记的抗癌胚蛋白（ＡＦＰ）单克隆抗体（＾１３１Ｉ－ＡＦＰ－ＩＴ）和＾１３１Ｉ标记抗乙型肝炎表面抗原单克隆抗体Ｓ１０２（＾１３１Ｉ－Ｓ１０２－ＩＴ）,治疗后行ＳＰＥＴ显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并进行疗效观察。结果 发现两种标记抗体联合治疗组肿瘤抑制率为     

经皮氩氦冷冻/微波消融序贯131I-chTNT瘤内注射治疗Lewis肺癌的对照研究

目的探讨经皮氩氦冷冻/微波消融序贯131I-肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体(131I-chTNT)瘤内注射治疗Lewis肺癌的疗效。方法建立C57BL/6小鼠Lewis瘤模型,随机分成对照组、微波消融组、氩氦冷冻组(各25例)。分别在对照组的肿瘤中心、微波消融组的微波消融范围中心、氩氦冷冻组的氩氦冷冻范围中心注射131I-chTNT。测量给药后不同时间每克肿瘤组织的摄取率(%ID/g)、T/NT及观察荷瘤小鼠显像情况。结果微波消融组、氩氦冷冻组的%ID/g、T/NT高于对照组,氩氦冷冻组的%ID/g、T/NT高于微波消融组(P<0.05);荷瘤小鼠活体核素显像示微波消融组、氩氦冷冻组的药物浓聚高于对照组,且氩氦冷冻组的药物浓聚高于微波消融组。结论氩氦冷冻、微波消融均可以促进131I-chTNT在肿瘤内浓聚,氩氦冷冻与微波消融序贯131I-chTNT瘤内注射相比,更有利于131I-chTNT在小鼠肿瘤组织的浓聚。     

~(131)Ⅰ标记抗c-erbB-2单克隆抗体对卵巢癌动物模型的生长抑制作用

目的:用131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体,探讨其对荷人卵巢癌裸鼠的生长抑制作用。方法：将抗c-erbB-2单克隆抗体与131I偶联,制成免疫靶向药物,将已接种卵巢癌SKOV3细胞且肿瘤直径已达1.0 cm的裸鼠分为131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1 MBq高剂量组,以131I标记的mIgG（非治疗性抗体）为对照组,对三组荷人卵巢癌裸鼠模型分别进行肿瘤局部注射,于用药当日后6周内每周测量肿瘤体积、质量,计算抑瘤率,并与对照组进行比较。结果：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1MBq高剂量组与对照组比较肿瘤体积减小（P<0.05）、肿瘤质量减轻（P<0.05）、抑瘤率增高（P<0.05）,同时131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1MBq高剂量组肿瘤体积和肿瘤质量低于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）、抑瘤率高于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）。结论：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体对荷人卵巢癌裸鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,且以131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1 MBq剂量作用强于3.7 MBq剂量。     

抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体放射免疫显像的实验研究

目的 检验制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体经同位素标记后用于胆管癌放射免疫显像诊断的特异性。方法 将纯化的抗人胆管癌相关原单克隆抗体经^131I标记后,注射于荷人胆管癌移植瘤的裸鼠体内,研究标记抗体在荷瘤裸鼠体内组织分布,并于不同时相点在SPECT下观察裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果。结果 ①裸鼠移植瘤的放射免疫显像效果良好,在各时相点时,以96h时相点显像效果最佳;②注射放射性标记抗体96h后,肿瘤组织有标记抗体特异性浓聚,T/NT比值达到峰值。结论 制备出的抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体在人体胆管癌的放射免疫显像诊断中具有良好的应用前景,值得进一步研究。     

^131 I—Rituximab对B细胞淋巴瘤生物学效应的实验研究

目的：研究^131 I标记的Rituximab对B细胞淋巴瘤细胞的生物学效应以及对荷人Raji细胞移植瘤裸鼠的放射免疫治疗效果,为放射免疫导向治疗提供实验依据。方法：体外培养人B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞,裸鼠皮下接种Raji细胞成瘤,IODO-GEN法将^131 I标记于Rituximab,将细胞分为^131 I—Rituximab组、单纯抗体组、单纯核素组及空白对照组4组,流式细胞仪检测各组Raji细胞凋亡和细胞周期;取30只成瘤裸鼠随机分成高、中、低剂量治疗组及单纯抗体组、单纯核素组、空白对照组6组,进行裸鼠的放射免疫治疗研究。每周测量裸鼠荷瘤大小1次,4周后处死裸鼠,取瘤称重,常规病理分析。结果：^131 I．Rituximab组凋亡率高于其他各组;^131 I—Rituximab组细胞周期发生变化,大部分被阻滞在G2期。裸鼠各治疗组与对照组比较,肿瘤生长减慢,肿瘤生长抑制率具有剂量时间依赖性,组织病理学检测显示治疗有效。结论：^131 I—Rituximab能够诱导Raji细胞凋亡并调控细胞周期,而且可特异性地定位于肿瘤组织,发挥放射免疫导向治疗作用,具有潜在的临床应用价值。     

131 I-Rituximab对B细胞淋巴瘤生物学效应的实验研究

目的:研究131I标记的Rituximab对B细胞淋巴瘤细胞的生物学效应以及对荷人Raji细胞移植瘤裸鼠的放射免疫治疗效果,为放射免疫导向治疗提供实验依据。方法:体外培养人B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞,裸鼠皮下接种Raji细胞成瘤,IO-DO-GEN法将131I标记于Rituximab,将细胞分为131I-Rituximab组、单纯抗体组、单纯核素组及空白对照组4组,流式细胞仪检测各组Raji细胞凋亡和细胞周期;取30只成瘤裸鼠随机分成高、中、低剂量治疗组及单纯抗体组、单纯核素组、空白对照组6组,进行裸鼠的放射免疫治疗研究。每周测量裸鼠荷瘤大小1次,4周后处死裸鼠,取瘤称重,常规病理分析。结果:131I-Rituximab组凋亡率高于其他各组;131I-Rituximab组细胞周期发生变化,大部分被阻滞在G2期。裸鼠各治疗组与对照组比较,肿瘤生长减慢,肿瘤生长抑制率具有剂量时间依赖性,组织病理学检测显示治疗有效。结论:131I-Rituximab能够诱导Raji细胞凋亡并调控细胞周期,而且可特异性地定位于肿瘤组织,发挥放射免疫导向治疗作用,具有潜在的临床应用价值。     

以血管生成为靶点的肿瘤核素显像及治疗的实验研究

目的以荷人膀胱癌、胆管癌小鼠为模型,研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR、整合素αvβ3受体在肿瘤的核素显像及治疗中的应用.方法①复制荷人膀胱癌小鼠模型,观察 131I-anti-VEGF的放射免疫显像;②将荷瘤小鼠分为实验组、非标记抗体对照组及空白对照组,探讨 131I-anti-KDR的放射免疫治疗;③建立荷人胆管癌小鼠模型,观察 125I-RGD-4CY的受体显像.结果①免疫组化结果示膀胱癌组织高表达VEGF及KDR蛋白,而正常组织极低水平表达;② 131I-anti-VEGF、 131I-anti-KDR及 125I-RGD-4CY在各组织中均具有较高的T/NT;③ 131I-anti-KDR的放射免疫治疗示实验组与非标记抗体对照组均能明显抑制膀胱癌的生长,但前者作用快且抑制率明显高于后者;④放射自显影示 125I-RGD-4CY在肿瘤组织中浓聚影最强,肺、颈部及其它软组织呈低水平分布.结论 131I- anti-VEGF、 131I-anti-KDR可较好地显示膀胱癌,并明显抑制其生长, 125I-RGD-4CY可望成为一有效的肿瘤αvβ3受体显像剂.     

消化道肿瘤裸鼠碘-131 标记短肽 Tyr-GX1 的显影特征

目的 分析碘-131（131I）标记短肽酪氨酸修饰的血管靶向肽（Tyr-GX1）在荷结肠癌与胃 癌裸鼠体内的显影特征。方法 采用Iodogen 碘标法标记Tyr-GX1,检测其标记率和稳定性。建立荷结肠 癌、胃癌裸鼠模型（分别设置为结肠癌组和胃癌组）,均注射131I 标记短肽Tyr-GX1,观察24 h 后显影特 征。结果 纸层析法结果表明,131I 标记短肽Tyr-GX1 的标记率较高,为（95.67±0.79）% ;放射化学纯度为 （96.68±1.68）%。24 h 稳定性测试显示,131I 标记短肽分别与人血清、乙二胺四乙酸、生理盐水、半胱氨酸混 合后标记率仍然维持在90% 以上。结肠癌组、胃癌组裸鼠尾静脉注射131I 标记的短肽Tyr-GX1 后8 h 开始裸 鼠右后肢背侧荷瘤部位放射性浓聚较心血池本底升高,并随着时间延长而升高;结肠癌组16 h 时达峰值随后 稍有降低,荷瘤部位和心血池本底放射性摄取比值（T/NT）均>1。结肠癌组与胃癌组T/NT 比值在不同时 间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）。随着时间延长,结肠癌组和荷胃癌组裸鼠心、肺、肝、肾、胃、 肌肉、肿瘤、血液和甲状腺组织中Tyr-GX1 摄取率逐渐降低（P <0.05）,其中肝、肾组织均具有较高的放射 性。结肠癌组和胃癌组1、6、12 和24 h 肿瘤组织的摄取率均高于心脏、甲状腺、胃和肌肉组织（P <0.05）。 结论 131I 标记短肽Tyr-GX1 对结肠癌和胃癌裸鼠肿瘤血管靶向性较好,与恶性肿瘤组织有较高的结合率, 而结肠癌与胃癌的放射性浓聚和达峰时间有所不同;131I 标记短肽Tyr-GX1 可能在消化道恶性肿瘤血管靶向 诊断和治疗方面具有潜在价值。     

^131I—CAE单抗在荷瘤裸鼠体内分布及治疗结肠癌肝转移？…

目的 探讨＾１３１Ｉ标记抗ＣＥＡ单抗在裸鼠人结肠癌肝转移模型的体内分布及其抑制肝转移的作用。方法 在建立裸鼠人结肠腺癌肝转移模型的基础上,用＾１３１Ｉ标记抗ＣＥＡ单抗ＣＬＯ＾－１,注射荷瘤裸鼠,观察＾１３１Ｉ标记抗ＣＥＡ单抗在荷瘤裸鼠体内分布及抑制肝转移的作用。结果 体外标记抗体特异性结合率为５９．９％。在注射＾１３１Ｉ标记ＣＬＯ－１后２４～９６ｈ肝转移灶内特异性放射性浓聚,９６ｈ瘤／肝比值为４．     

The role of radioimmunodetection in the management of testicular cancer

Five patients with testicular cancer received an intravenous injection of between 1 and 2.5 mCi of iodine 131-labeled antibody to human chorionic gonadotropin (HCG) or alpha-fetoprotein (AFP), followed by total-body photoscanning to visualize areas of abnormal radioactivity. Blood-pool and nontarget sites of radioactivity were reduced by subtracting the images derived by injection of technetium Tc 99m-labeled components from the iodine 131 scans. The HCG-immune scintiscans proved helpful in tumor localization and in the selection of appropriate therapy, while the AFP scan presented corroborative evidence of widespread tumor. Elevated serum levels of these two markers did not hinder successful tumor detection and localization by this method of radioimmunodetection. Cancer radioimmunodetection with antibodies to HCG and to AFP appears to be a useful procedure for the pretreatment and posttreatment evaluation of patients with testicular cancer and can reveal sites of tumor not detected by other methods.     

(131)~碘标记抗人AFP-R-LCA McAb对原发性肝癌的放射免疫显像

目的:探讨抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体单克隆抗体（AFP－R－LCAMcAb）对原发性肝癌细胞的特异性亲和力及放射免疫显像。方法：应用(131)Ⅰ标记的AFP－R－LCAMcAb对11例AFP阳性肝癌、6例AFP阴性肝癌及4例肝炎后肝硬化患者进行放免显像，观察不同时间肝癌显像情况。结果：11例AFP阳性肝癌患者中有9例肿瘤区显像，而6例AFP阴性肝癌及4例肝炎后肝硬化患者无1例出现肝肿瘤区及肝内局部显像。且小剂量(131)I－AFP－R－LCAMcAb对人体肝功能及凝血酶原时间无明显影响（P＜0．05）。结论：AFP－R－LCAMcAb对人AFP阳性肝癌细胞有较强的特异性亲和力，有希望成为肝癌放免检测及治疗的理想载体。     

(131)~碘标记抗人AFP-R-LCA McAb对原发性肝癌的放射免疫显像

用抗肿瘤相关抗原的抗体进行肿瘤放免显像及治疗是近年来肿瘤导向研究的热点。自80年代起，国内外众多学者利用多种抗肿瘤单克隆抗体进行肿瘤的放免诊治，并取得了较为满意的结果。我们曾利用抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体单克隆抗体（AFP－R－LCAMCAb）进行了荷人肝癌裸鼠的放免显像和治疗［’］，在此基础上，使用‘”I标记的AFP－R－LCAMCAb对17例原发性肝癌及4例肝炎后肝硬化患者进行了肝癌放免显像研究，现报告如下。l材料和方法l．1病例和分组（1）肝癌组：选择1995年3月1日至1995年9月1日收住本院的AFP阳性原发性…     

RADIOIMMUNODETECTION ()F CANCERS CONTAININGCARCINOEMBRYONIC ANTIGEN AND ALPHA-FETOPROTEIN

We used radiolabeled antibodies to carcinoembryonic antigen (CEA) and alpha-fetoprotein (AFP)to detect and localize CEA- or AFP-producing tumors.The monoclonal antibody to CEA and affinity puri-fied antibody to AFP were prepared and Iabeledwith 131I by iodogen method. The radioantibodieshad 95% of radiochemical purity, 2.16 12 mCi per mgof specific radioactivity, and 8W70-93To of specificimmunoreactivity. Images were made with a r-scintillation camera, at about 48 hours after intra-venous injection of a dose ranging from 0.82 t0 3.5mCi of the labeled antibodies (140-590 ug of protein),and a dual radion.uclide subtraction technique withcomputer-assisted processing was used to enhancethe tumor-related activity. In 10 patients with CEA-producing tumors, 7 0f 8 primary lesions were posi-tive for the CEA radioimmunodetection, and of 15secondary lesions, 11 were positive and 4 weaklypositive. In 10 patients with AFP-producing tumors(liver cancer), 9 0f 10 intrahepatic lesions were de-tected by AFP radioimmunodetection. It is interesting that the tumors were detected by thismethod even in 5 0f 6 patients with normal levelof plasm CEA or AFP, and one tumor site missedby CT scan was detected too. The main factors forsuccessful application of this method are described.The mechanism of localization of the radioantibodiesin tumor is also discussed through an immunopathological approach.     

细胞色素氧化酶P450 3A4基因联合环磷酰胺的体外抗肿瘤效应

 目的 克隆细胞色素氧化酶P450 3A4（CYP3A4）基因,构建真核表达质粒并导入K562细胞进行表达,研究CYP3A4联合环磷酰胺（CPA）的体外抗肿瘤效应。方法 利用RT-PCR从人肝细胞中克隆CYP3A4基因,构建重组真核表达载体。脂质体法导入K562细胞,RT-PCR和Western blot检测CYP3A4基因在K562细胞中的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。MTT法检测CYP3A4联合CPA对肿瘤细胞的抑制作用。结果 成功克隆CYP3A4基因并构建了真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His A(+)-CYP3A4。RT-PCR和Western blot分别显示转基因组的CYP3A4 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于转空载体组和对照组。MTT示转基因组IC₅₀值为1.090 16 mmol/L,明显低于转空载体组和对照组。酶诱导剂和抑制剂分别能够减低和增高转基因组IC₅₀。结论 CYP3A4体外具有联合CPA的抗肿瘤作用,这种作用能够被CYP3A4相应的诱导剂和抑制剂增强或减低。     

抗人AFP－R－LCA McAb在裸鼠人肝癌模型中放免显像及治疗

放射性核素~（１３１）Ｉ标记的抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体（ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡ）ＭｃＡｂ，注入荷瘤裸鼠腹腔后，能在裸鼠人肝癌模型肿瘤区积聚，其放射性核素浓度是裸鼠肝脏的５．２倍；而~（１３１）Ｉ标记的正常小鼠ＩｇＧ（ｍＩｇＧ）及游离~（１３１）Ｉ却无肿瘤区积聚，且在荷瘤裸鼠体内呈均匀分布。~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ组γ照像均显示出裸鼠人肝癌的阳性定位。用~（１３１）Ｉ－ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ治疗裸鼠人肝癌，肿瘤生长受到明显抑制（８５．０％），优于~（１３１）Ｉ－ｍＩｇＧ及游离~（１３１）Ｉ（４６．０％、２０；１％，Ｐ＜０．０５）．结果表明：ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ对人肝癌细胞有较强的亲和力和特异性，有希望成为肝癌导向研究的理想载体。     

人肝细胞癌转铁蛋白受体显像及靶向治疗研究

目的 探讨^131I-D2C5用于肿瘤受体成像和放射免疫治疗的价值。方法 人肝细胞癌SMMC-7721采用隧道包埋法植入Balb／c（-／-）裸鼠肝左叶,建立原位种植肿瘤模型。①12只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组6只,分别经尾静脉注射^131I-D2C5、^131I-mIgG,放射剂量均为14．8MBq／只;SPECT采集^131I-D2C5和^131I-mIgG注射后6h、24h放射白显影图像;γ计数器检测体内放射性分布。②18只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组9只,每周分别经腹腔注射^131I-D2C5 ,^131I-mIgG,连续6周;另外9只荷瘤裸鼠每周腹腔注射生理盐水200肛l作为对照组。8周后比较各组肿瘤体积,计算其生长抑制率,评估肿瘤坏死程度。结果 注射^131I-D2C5后6h时,裸鼠肝肿瘤部位显影,24h时肿瘤显影最清晰。注射^131I-mIgG后,肿瘤部位未见明显放射性浓聚。24h时^131I-D2C5组裸鼠体内肿瘤／血为6．6,肿瘤／肝为2．2,肿瘤／肌肉为20．8。静脉注射^131I-D2C5导向治疗较^131I-mIgG更显著抑制人肝细胞癌裸鼠模型中肿瘤的生长,促进肿瘤坏死。结论 ^131I-D2C5能与人肝细胞癌SMMC-7721高特异性、高亲和力地结合。在肝癌显像及生物靶向治疗中具有广泛的应用前景。