PCR扩增法检测DMD患者的基因缺失

目的 探讨Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）患者基因缺失的突变特点并进行基因诊断。方法 用一对特异引物进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因ｅｘｏｎ４８附近的ＤＮＡ片段。结果 在２１例ＤＭＤ患者中，检出１６例患者的ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因在该处存在缺失突变。ｅｘｏｎ４８是ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因发生缺失突变“热点”区的观点。结论 该方法可用于ＤＭＤ的遗传咨询、基因诊断及产前基     

常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征6型PINK1基因的突变分析

目的探讨常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征6型(PARK6)。PINK1基因的突变及临床特征。方法应用聚合酶链反应(PCR)、DNA直接测序和限制性内切酶酶切等技术对11个常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征家系先证者进行PINKl基因的突变分析。结果在两个家系中检测出PINK1基因两个新的点突变：位于第4外显子938位的C→T,导致所编码的313位氨基酸由苏氨酸变为蛋氨酸(1313M);位于第7外显子1474位的C→T,导致第492位提前出现终止密码子,截短了后面90个氨基酸。在另一个家系中检测出一个同义突变(Y454Y)。具有PINK1基因突变的患者临床特征包括发病年龄早,病情进展慢,腱反射活跃,症状波动明显,睡眠后症状减轻,对小剂量多巴制剂反应良好,未见到由左旋多巴诱导的运动障碍。结论。PINK1基因突变是常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的常见病因;我国大陆存在PARK6家系;PARK6具有临床异质性。     

散发性早发帕金森病parkin基因1、2号外显子突变的研究

[目的]研究parkin基因1、2号外显子突变与散发性早发帕金林病发病的关系。[方法]应用聚合酶链反应（PCR）、琼脂糖凝胶电泳和单链构象多态性（SSCP）方法检测52例散发性早发帕金森病病人外周血白细胞DNA的parkin基因1、2号外显子突变情况,并对SSCP有异常泳动外显子进行DNA测序。[结果]发现1例病人（1.9％）存在parkin基因2号外显子缺失,2例病人（3.8％）分别存在parkin基因1、2号外显子PCR产物 SSCP发生泳动变位,测序发现1号外显子为杂合突变（T103C）,2号外显子 为纯合突变（G237C）。[结论]parkin基因1、2号外显子突变可能与部分散发性早发帕金森病发病有关。     

散发性早发帕金森病parkin基因1、2号外显子突变的研究

【目的】研究parkin基因1、2号外显子突变与散发性早发帕金森病发病的关系。【方法】应用聚合酶链反应（PCR）、琼脂糖凝胶电泳和单链构象多态性（SSCP）方法检测52例散发性早发帕金森病病人外周血白细胞DNA的parkin基因1、2号外显子突变情况,并对SSCP有异常泳动外显子进行DNA测序。【结果】发现1例病人（1.9%）存在parkin基因2号外显子缺失,2例病人（3.8%）分别存在parkin基因1、2号外显子PCR产物SSCP发生泳动变位,测序发现1号外显子为杂合突变（T103C）,2号外显子为纯合突变（G237C）。【结论】parkin基因1、2号外显子突变可能与部分散发性早发帕金森病发病有关。     

广西地区帕金森病患者Parkin基因外显子缺失的研究

目的:研究Parkin基因1～12号外显子缺失突变与广西地区帕金森病(Parkinson Disease,PD)发病的关系.方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增29例临床确诊为早发性帕金森病(EOPD)和34例临床确诊为晚发性帕金森病(LOPD)的患者的Parkin基因1～12号外显子;用琼脂糖凝胶电泳检测Parkin基因1～12号外显子缺失突变.结果:未检测到Parkin基因1～12号外显子缺失突变.结论:未发现Parkin基因外显子缺失突变与PD发病有明显相关关系.     

哈萨克族食管癌患者3号染色体短臂3p24等位基因杂合缺失的研究

应用聚合酶链反应技术，配合限制片段长短多太现象分析，对１６例新疆哈萨克族管癌病人３号染色体短臂３ｐ２４等位基因杂合缺失（进行了测定，并同汉族、维吾尔族食管癌病人３ｐ２４杂合缺失进行了比较。结果显示，哈萨克族３ｐ２４杂合缺失率为１００％（１１／１１），汉族为４２．８％（３／７），维吾尔族为３３．３％（１／３）。提示３ｐ２４杂合人率为１００（１１／１１），汉族为４２．８％（３／７），维吾尔族为３３。．     

聚合酶链反应-单链构象多态性分析Kallmann综合征的基因突变

目的 检测Kallmann综合征位于X染色体p22.3基因KAL-1外显子的突变.方法 KAL-1基因外显子突变应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析.结果 5例Kallmann综合征患者KAL-1基因外显子突变情况,发现2例KAL-1基因外显子5～10缺失.结论 Kallmann综合征可能存在KAL-1基因外显子的缺失.     

欧洲和北非早期发病帕金森综合征中的PINK1基因突变分析

帕金森病是主要由黑质多巴胺能神经元缺失所导致的一种常见疾病。已在退行性早发性帕金森病的家族中发现,除parkin和DJ-1基因之外的PTEN诱导激酶(PINK1)基因突变。在177例发病年龄≤60岁的常染色体隐性遗传性帕金森病家族成员(主要来自欧洲)中筛查parkin和PINK1基因突变。在7个不相关的家族中,鉴定出10个致病性PINK1突变(5个错义突变、2个无义突变和3个移码缺失突变),其中的8个为新发现的突变,所有突变均呈纯合或复合杂合状态。有趣的是,在1个有2种不同突变的家族中观察到拟显性遗传。12例PINK1突变患者和114例parkin突变患者的临…     

中国人遗传性高铁血红蛋白血症患者中一个新的突变基因型的鉴定

目的：报道一例遗传性高铁血红蛋白血症患者还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-细胞色素b5还原酶（b5R）基因突变情况.方法：采用逆转录-聚合酶链反应产物直接测序法,分析遗传性高铁血红蛋白血症患者b5R基因的 cDNA 全部编码序列;PCR 结合限制性内切酶（PvuⅠ和AfaⅠ）酶切,分析患者和她的家庭成员b5R基因组DNA扩增片段.结果：两个b5R等位基因中,一个存在M176T（ATG→ACG）突变,另一个存在C203Y（TGC→TAC）突变,其中M176T（ATG→ACG）为新发现的b5R基因突变.结论：本研究鉴定的M176T/C203Y复合杂合子突变是该遗传性高铁血红蛋白血症患者的致病基础.     

乳腺癌患者3p24等位基因杂合缺失的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，配合限制片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，对２２例妇女乳腺癌患者３号染色体短臂３ｐ２４等位基因杂合缺失（ＬＯＨ）进行了测定。结果显示在３ｐ２４ＥＡβＭＤ位点和ＥＡβＨ位点的ＬＯＨ检出情况为６／１４，杂合缺失率为４２．８％。实验发现乳腺癌患者在３ｐ２４位点的ＬＯＨ较高，提示这一位点可能存在抑癌基因，此基因的缺失改变与乳腺癌的发生可能有密切关系。     

唐氏综合征动物模型肠神经系发育的动态观察

目的 通过研究唐氏综合征动物模型１６三体鼠肠神经系发育，揭示１６三体鼠是否伴有先天性巨结肠。方法 通过免疫组织化学方法测定１６三体胎鼠及同龄胎鼠蛋白基因产物９．５（ＰＧＰ９．５），并观察了肠神经系的形态学特征。结果 １６三体胎鼠肠神经系发育异常，肠肌间神经丛发育迟缓，肠粘膜下神经丛缺如，盲肠末端有５ｍｍ的无神经节区。但肠道外源性神经支配正常，肠系膜神经系发育良好。结论 唐氏综合征动物模型１６三体鼠     

15例汗孔角化症回顾分析

目的探讨汗孔角化症的病因、临床特点及治疗。方法总结分析既往15例资料齐全的汗孔角化症病例。结果汗孔角化症病因不明确。临床上除特征性的环状角化皮损外,各型有各自的皮损表现特点,但病理改变相同。治疗无特异性,即使消退仍可能复发,部分还可能转变为皮肤肿瘤。结论遗传、环境和免疫因素可能在汗孔角化症发病中起重要作用;临床表现各异,病理可作为诊断汗孔角化症的金标准;本病疗效欠佳。     

胎儿染色体异常与不同先天性心脏病的关系研究

目的 通过分析产前诊断中确诊的染色体异常并伴有先天性心脏病畸形患儿相关资料,总结心脏畸形不同分类和染色体异常的关系及比率,为探讨先天性心脏病病因、提高先天性心脏病产前诊断率提供理论依据.方法 回顾性分析2006年1月至2009年12月间北京大学人民医院产前诊断中心确诊的染色体异常并伴有先天性心脏畸形病例资料,综合分析先天性心脏病畸形分类和染色体异常的关系及比率.结果 49例染色体异常伴先天性心脏畸形患儿中,21-三体11例,18-三体6例,13-三体6例,14-三体1例,16-三体3例,8-三体1例,22-三体1例,46,XY/XX,5p- 2例,易位型部分三体8例,性染色体异常8例,三倍体2例.相同的染色体异常可伴有不同的心脏畸形及心外畸形,同样的心脏畸形可存在不同的染色体异常.结论 染色体异常可伴有众多基因的增加或减少,可同时伴有多种心脏或心外畸形,不同染色体异常伴发心脏畸形的类型及比率也各不同.超声提示胎儿心脏畸形者,应进一步行产前细胞遗传学诊断以排除染色体异常,避免染色体异常综合征患儿出生.     

白塞病合并8号染色体三体22例分析及文献复习

目的 探讨分析8号染色体三体异常白塞病(Behcet's disease,BD)患者的临床特点.方法 分析2012年10月至2020年7月复旦大学附属华东医院收治的22例8号染色体三体BD的住院患者,并检索中英文文献库中BD合并8号染色体三体的患者共46例,对临床特点进行比较分析.结果 22例8号染色体三体的BD患者中...     

STR-PCR分析诊断常见染色体三体及其亲源性、染色体不分离时期

[目的]通过采用短串联重复序列结合聚合酶链反应(STR-PCR)技术对胎儿进行产前诊断以及对已知染色体21三体的病例进行检测,探讨STR-PCR技术诊断常见三体综合征,同时判断额外染色体的双亲来源以及染色体不分离发生时期.[方法]收集了51个家系的174例样本,其中产前诊断组35个家系,包括18例单胎妊娠和17例多胎妊娠家系;已知为染色体21三体患者16个家系.采用STR-PCR技术,扩增21号染色体4个位点;18、13号染色体各3个位点,诊断这些染色体三体综合征,与染色体核型对照;并判断额外染色体双亲来源和染色体不分离发生时期.[结果]检出18例完全型染色体三体综合征,包括21三体16例;18三体和13三体各1例,其中4例为产前诊断的胎儿.1例罗氏易位型和1例嵌合型21三体未能检出.14例21三体及1例18三体、1例13三体可确定额外染色体的亲代来源和不分离时期.[结论]STR-PCR技术在诊断多种完全型染色体三体的同时,可判断额外染色体的亲源性及分析染色体不分离时期.但对嵌合型和易位型染色体异常的诊断有待改进.     

染色体拷贝数变异测序联合STR分型在流产物遗传学分析中的应用

目的对150例流产物进行遗传学检测,并对结果进行分析,为探究自然流产的遗传学病因积累临床资料。方法选择2020年2-7月在安徽省妇幼保健院妇产科就诊的150例自然流产病人,运用拷贝数变异测序（copy number variation sequencing,CNV-Seq）联合短串联重复序列（Short tandem repeats,STR）分型对流产物进行遗传学检测。结果150例流产物均成功检测,染色体正常71例（47.33%）,染色体异常79例（52.67%）,其中染色体数目异常56例,占染色体异常总数的70.89%,染色体微重复/微缺失4例（2.67%）,嵌合体14例（9.33%）,染色体数目合并结构异常3例（2.00%）,单亲二倍体2例（1.33%）。导致自然流产最主要的染色体异常为染色体数目异常（37.33%）,包括染色体非整倍体（32.67%）、三倍体（4.67%）;其次为嵌合体（9.33%）。与自然流产密切相关的染色体异常依次为:45,X、16-三体;69,XNN、21-三体;18-三体;16-三体嵌合体。结论CNV-Seq联合STR技术适用于流产物染色体异常的检测,可覆盖更多范围的染色体异常,能实现更加准确、全面的诊断,对明确自然流产的遗传因素,指导孕妇再次备孕,实现优生优育具有重要的意义。     

20例21-三体胎儿产前超声表现分析

 目的   探讨21-三体胎儿产前超声异常表现。方法  回顾性分析本院2010年1月至2012年12月期间通过羊水穿刺进行染色体核型分析(共1 362例)确诊为21-三体的20例胎儿的产前超声图像特征。结果   染色体核型分析21-三体胎儿20例,占所有(60例)染色体异常胎儿的33.3%;孕妇年龄在21~41岁,小于35岁者14例(70%)。其中8例(40%)胎儿产前超声未见异常;其余12例有1种或多种早孕晚期或中孕期超声表现异常,主要表现为鼻骨缺失或短小(3例)、全身皮肤水肿合并胸腹腔积液(3例)、中孕早期羊膜绒毛膜未融合(2例)、颈项透明层增厚(2例)及颈项软组织增厚(2例)、心室强光点(2例)、双泡征(1例)、双侧侧脑室增宽(1例),股骨及肱骨偏短(1例),心脏畸形(心内膜垫部分缺失,1例),羊水偏多(1例),小型脐膨出(1例),心脏三尖瓣反流(1例)。结论  具有染色体21-三体核型异常胎儿的孕妇大部分年龄小于35周岁;相当一部分21-三体胎儿的产前超声无异常表现;21-三体胎儿产前超声异常表现相对分散,无特异性表现。     

Porokeratosis: a report of three clinical variants.

Three patients presenting with distinct clinical variants of porokeratosis are reported. This article discusses the etiology, classification and response to different modalities of treatment.     

Aneuploidy in Early Miscarriage and its Related Factors

Background:

Genetic factors are the main cause of early miscarriage. This study aimed to investigate aneuploidy in spontaneous abortion by fluorescence in situ hybridization (FISH) using probes for 13, 16, 18, 21, 22, X and Y chromosomes.

Methods:

A total of 840 chorionic samples from spontaneous abortion were collected and examined by FISH. We analyzed the incidence and type of abnormal cases and sex ratio in the samples. We also analyzed the relationship between the rate of aneuploidy and parental age, the rate of aneuploidy between recurrent abortion and sporadic abortion, the difference in incidence of aneuploidy between samples from previous artificial abortion and those from no previous induced abortion.

Results:

A total of 832 samples were finally analyzed. 368 (44.23%) were abnormal, in which 84.24% (310/368) were aneuploidies and 15.76% (58/368) were polyploidies. The first was trisomy16 (121/310), followed by trisomy 22, and X monosomy. There was no significant difference in the rate of aneuploidy in the advanced maternal age group (≥35 years old) and young maternal age group (<35 years old). However, the rate of trisomy 22 and the total rate of trisomies 21, 13, and 18 (the number of trisomy 21 plus trisomy 13 and trisomy 18 together) showed significantly different in two groups. We found no skewed sex ratio. There was no significant difference in the rate of aneuploidy between recurrent miscarriage and sporadic abortion or between the samples from previous artificial abortion and those from no previous artificial abortion.

Conclusions:

Aneuploidy is a principal factor of miscarriage and total parental age is a risk factor. There is no skewed sex ratio in spontaneous abortion. There is also no difference in the rate of aneuploidy between recurrent abortion and sporadic abortion or between previous artificial abortion and no previous induced abortion.     

Altered action potential of myocardial cells from mouse fetuses with trisomy 16: a model of Down syndrome

BACKGROUND: Trisomy 21 in humans and trisomy 16 in mice (a model of Down syndrome) are associated with increases in rates of depolarization and repolarization and decreases in duration of action potential of neurons, due to overexpressing protein subunits of Na(+) and K(+) channels in a gene dose-dependent manner. These chromosomes also have genes for voltage-gated Na(+) and K(+) channels expressed by myocardial cells. Thus, it would be expected that heart cells would have alterations in their action potentials similar to those found in neurons in both aneuploidies. METHODS: Myocardial cells from normal and trisomy 16 mouse fetuses were compared in relation to their electrical membrane properties using intracellular microelectrodes. RESULTS: At 13 and 17 days of gestation, trisomic cells, as compared with control cells, had higher amplitude and rates of depolarization and repolarization, with lower duration of plateau of action potential at 25, 50, and 75% of repolarization. This suggests that Ca(2)+ influx is reduced in trisomic cells, which could impair Ca(2)+-dependent fetal myocardial functions (i.e., contractility or matrix secretion). CONCLUSIONS: Myocardial cells of Ts-16 mice showed electrophysiologic alterations qualitatively similar to those observed in trisomic neurons, in agreement with the gene dose-dependent hypothesis (see Introduction).