丙型肝炎病人系列血清中5‘—NCR和C区基因变异研究

目的研究丙型肝炎病人的系列血清中HCV5′-NCR及核心区基因变化。方法4例因献血感染HCV病人的系列血标本,用特异性引物扩增5′-NCR和核心区基因并进行测序。结果所有HCV分离株基因序列均为1b和2a型，5′-NCR序列差异只与型别有关，与病人和不同时点采集的标本无关。核心区基因序列差异因病人和基因型别而异，未发现同一病人的同一基因型序列随时间而变化。结论5′-NCR序列保守性大于核心区。型别是导致基因变化的主要原因。未发现该2区段基因的核苷酸改变与时间有关。     

丙型肝炎病人系列血清中5′-NCR和C区基因变异研究

目的研究丙型肝炎病人的系列血清中HCV 5′-NCR及核心区基因变化。方法 4例因献血感染HCV病人的系列血标本, 用特异性引物扩增5′-NCR和核心区基因并进行测序。结果所有HCV分离株基因序列均为1b和2a型,5′-NCR序列差异只与型别有关,与病人和不同时点采集的标本无关。核心区基因序列差异因病人和基因型别而异,未发现同一病人的同一基因型序列随时间而变化。结论 5′-NCR序列保守性大于核心区。型别是导致基因变化的主要原因。未发现该2区段基因的核苷酸改变与时间有关。     

不同引物检测庚型肝炎病毒及其与丙型肝炎病毒混合感染的研究

目的评价不同引物检测庚型肝炎病毒（HGV）的效果和了解其与丙型肝炎病毒（HCV）混台感染率及相互关系．方法5’-NCR,NSS引物和PCRELISA检测HGV,定量RT－PCR检测HCV及部分标本中的HCV分型,部分扩增产物测定核苷酸序列。结果211例HCV阳性血清标本中HGV5－NCRRNA和HGVNSSRNA检出率分别为47．9％和31．8％,总阳性率高达49．8％。结论HGV和HCV有较高的混合感染率。PCRELISA是一种极为敏感的HGV检测方法,HGV5’－NCR引物的检测效果优于HGVNS5。核苷酸序列分析证实PCR—ELISA检测结果可靠。标本中HCV浓度与HGV感染呈负相关,可能存在相互抑制的机制。     

38例早期胃癌的胃镜诊断与临床分析

１９８４年５月至１９９６年１２月，我院胃镜室共做胃镜检查２２６８０例，发现早期胃癌３８例，全部为手术切除标本病理证实，诊断符合我国胃癌病理标准，报告分析如下。１．临床资料：年龄与性别：３８例早期胃癌中，男２５例，女１３例，男女之比１．９：１。平均年龄为４９．５岁，其中４０岁以上３０例，占７８．９５％。病程：１个月内３例（７．８９％），～６个月２６例（６８．４２％），～１２个月６例（１５．７９％），～３年２例（５．２６％），３年以上１例（２．６３％）。预后：全部病例手术治疗并行随访，术后５年生存率…     

广州地区部分人群庚型肝炎病毒感染的流行病学调查

目的 为了解广州地区庚型肝炎病毒（HGV）感染的现状和流行特点，我们对348例住院和门诊的肝病患者进行了HGV RNA、HGV抗体（HGV－Ab)检测，现将结果报道如下。材料和方法，从广东省人民医院门诊和住院肝病患者收集血清标本348份，其中丙型肝炎93份，乙型肝炎120份，肝硬化75份，肝细胞癌60份。采用逆转录套式PCR检测HGV RNA。引物序列为：HGV1（F外）5′-CGCTCAAGCCAGCGAAGTAAGCA－3′，HGV2(R外）5′－CAATACCTCTCACCGACGGG－3′，HGV3（F内）5′－GGACTTCCGGATAGCTGAAAGCT－3′，HGV4（R内）5′－GCGTCCACACAGATGGCGA－3′。两次PCR循环条件相同，均为：94℃ 1min、55℃ 1min、72℃ 1min，35个循环。产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HGV－Ab。诊断试剂为北京大学医学院产品。结果 348份标本中，HGV RNA阳性检出率为8．62％（30／348）。其中丙肝标本检出率为6．45％（6／93），乙肝标本检出率为7．50％（9／120），肝硬化标本检出率为8．00％（6／75），肝细胞癌标本检出率为15．00％（9／60）。HGV－Ab阳性检出率为12．93％（45／348）。其中丙肝标本检出率为12．90％（12／93），乙肝标本检出率为10．00％（12／120），肝硬化标本检出率为8．00％（6／75），肝细胞癌标本检出率为25．00％（15／60）。30份HGV RNA阳性标本中HGV－Ab均为阳性。结论 HGV在广州地区多种肝病人群中的感染状况较普遍，与其它肝病重叠感染的情况较严重。应得到足够重视。℃℃℃     

类鼻疽16例误诊探讨

类鼻疽是类鼻疽假单胞菌引起人畜共患的感染性疾病。近年来，我国陆续报道了一些病例，但因对该病缺少认识，加之临床表现多样化，误诊率极高。一般资料　１９９５年６月～１９９８年６月三年期间，我院共确诊类鼻疽１６例。男：女为１２∶４，年龄３３岁～７０岁，其中３３岁～５０岁１４例（８７．５％）。１４例为农民。死亡８例（５０．０％）。１６例病人入院误诊率为１００％，误诊病种见附表。附表　１６例类鼻疽病病人临床资料确诊疾病（例数）入院诊断（例数）培养阳性标本来源治疗治愈死亡肺类鼻疽病（５）　类鼻疽败血症（５）　…     

丙型肝炎病毒肝外组织感染与肝外肿瘤的关系

目的：研究丙型肝炎病毒（HCV）在肝外组织感染及复制状况，探讨HCV与肝外肿瘤的关系。方法：采用免疫组化技术对70例慢性丙型肝炎（CHC）患者合并外科疾患的手术切除标本进行HCV抗原标记；RT-PCR检测组织中HCV正、负链RNA。结果：70例CHC合并恶性肿瘤的组织标本37份，HCV抗原阳性率为67.6％（25／37）；非恶性肿瘤的组织标本33份，HCV抗原阳性率为24．2％（8／33），两者比较差异有显著性意义（Х^2=13．14，P〈0．05）。33份HCV抗原阳性的组织中21份（63.6％）检出HCV正链RNA，10份（30.3％）检出HCV负链RNA，且组织中正链和负链HCV RNA的检出与细胞内HCV抗原表达信号呈较好的一致性。结论：HCV可以感染肝外组织，其中部分肝外组织是HCV的复制场所；在CHC患者HCV除诱发原发性肝癌外，还可能诱发其他的恶性肿瘤。     

肝癌患者腹水K-ras和p53基因测序的研究

我们对３２例临床确诊肝癌并腹水的标本进行Ｋ－ｒａｓ基因外显子１、２和ｐ５３基因外显于５、６、７、８测序分析。 １．资料与方法：（１）标本：３２例腹水患者均经确诊为肝癌,男１９例,年龄３１～６８岁,女１３例,年龄３３～５９岁。非癌性腹水２７例,男１６例,年龄２３～６７岁,女１１例,年龄２７～６５岁。两组患者均无癌家族史及长期汹酒史、（２）材料：３１０型测序仪、２４００型ＰＣＲ仪由美国ＰＥ公司产,引物由上海生工生物工程公司合成,测序试剂盒、序列胶等由美国ＰＥ公司产。（３）方法：引物序列： ５’ＧＴＡＣ…     

抗HCV阳性病人血清、肝及外周血单核细胞中正负链RNA与肝损害的关系

为弄清丙肝病毒复制状态与肝损害的关系,我们以5′-非翻译区为引物的 PCR 方法对45例未经治疗的丙型肝炎病毒感染者的血清、外周血单核细胞和肝穿标本进行了研究。其中包括38例慢性肝炎,3例轻微肝损害和4例正常人。正链 HCV RNA 在血清、     

乙型肝炎患者重叠HCV感染的血清学检测及其临床意义

为了解乙型肝炎患者重叠HCV感染状况及对近期预后的影响，我们检测了403例乙型肝炎患者血清抗HCV和HCV－RNA。现报道如下。对象与方法对象:我科1992年12月至1995年12月间住院的各类乙型肝炎患者403例。所有患者甲、丁、戊型肝炎病毒标志物均阴性。男性312例，女性gi例，平均年龄38．5±23．4岁。其中慢性肝炎（CVH）236例，活动性肝硬化（ALC）111例，慢性重症肝炎（CSH）47例，原发性肝癌（HCC）9例。临床诊断标准符合文献［中华传染病杂志，1995，13（4）241）。方法：（1）血清抗HCV检测试剂购自上海科华公司（EI。ISA法）…     

可溶性肿瘤坏死因子受体I在病毒性肝炎中的意义

１．资料与方法：（１）研究对象为我院１９９７年－１９９８年病毒性肝炎住院患者６４例，平均年龄２９．４岁（７－５９岁）。急性肝炎２５例，慢性肝炎３０例，重型肝炎９例。其中甲型肝炎１４例，乙型肝炎３５例（３例合并丁型肝炎），丙型肝炎６例，戊型肝炎５例，庚型肝炎４例。所有病例于入院次日（起病期）及肝功能正常时（恢复期）分别采集２次血清标本，－７０Ｃ冷藏各检。２０例肝炎病毒标志物阴性的健康献血员作为正常对照。（２）方法：血清可溶性肿瘤坏死因子受体一Ｉ（ｓＴＮＦＲ—Ｉ）检测采用ＥＬＩＳＡ法。 ２．结果：（…     

慢性丙型肝炎患者病毒因素及宿主细胞免疫对干扰素治疗应答的影响

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）因素及机体细胞免疫因素对干扰素疗效的影响。方法：对40例慢性丙型肝炎患者进行干扰素治疗，分析HCV基因型，准种多样性，血清HCV RNA水平及肝组织HCV特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性与干扰素应答的关系。结果：经过6个月的干扰素治疗，21例获得治疗终点应答，其中10例呈持续应答，19例无应答，HCV1型患者应答率（43．3％）明显低于非1型患者（80％，P＜0．05），应答患者中治疗前血清HCV准种数目及HCVRNA水平明显低于无应答患者（P＜0．05，P＜0．01），而其肝组织HCV特异性CTL活性阳性率则显著高于无应答者（P＜0．05），结论：病毒因素和宿主因素均是影响慢性丙型肝炎干扰素治疗效果的重要因素，非1型感染，低准种数目，低病毒血症水平及肝组织HCV特异性CTL活性阳性者预示对干扰素应答良好。     

肝细胞癌患者手术前后血清可溶性IL－6受体检测及意义

１．标本来源：３４例经手术病理确诊的肝细胞癌（ＨＣＣ）患者,男２７例,女７例,年龄３３～７２岁,平均４４．６岁。其中肿瘤孤立的早期肝癌患者１４例,中晚期肝癌患者２０例。ＡＦＰ阳性者２１例,阴性者１３例。手术前１天、手术后７～１４天（平均９．８天）,分别抽取静脉血１ｍｌ,离心获取血清－３０℃保存。对照组：２０例健康体检者,男１５例,女５例,３５～６３岁,平均４６．８岁。２．方法：血清标本一次溶解后采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测,根据标准曲线推算出待测样品中血清可溶性白细胞介素－６受体（ｓＩＬ－６Ｒ…     

乌鲁木齐地区丙型肝炎患者的病毒基因分型研究

为了探讨乌鲁木齐地区HCV感染的基因型，作者用引物特异性PCR法对采自该地区的83例HCVRNA阳性的丙肝患者血清进行检测。结果：59例（71％）为Ⅱ型（1b），16例（19％）为Ⅲ型（2a），8例（10％）为Ⅱ／Ⅲ型HCV混合感染，表明HCVⅢ型是本地区的HCV优势株。     

多引物嵌套式聚保酶链反应在艾滋病病毒感染诊断中的应用

目的：评价多引物嵌套式聚合酶链反应（Nested-PCR)在艾滋病病毒（HIV）感染诊断中的应用。方法：采用柱离心式小量组织／细胞基因组脱氧核糖核酸（DNA）抽提试剂盒提取DNA。用3套分别来自于长末湍重复序列（LTR)-gag,pol,env不同区域的序列引物进行嵌套式PCR扩增。结果：用多物嵌套式PCR对28例不同来源标本进行检测，其中13例为HIV感染者，4例为HIV可疑感染者，4例为人嗜T淋巴细胞病毒（HTLV）感染者且HIV抗体检测为阴性，7例为正常者。经过检测每一套引物均漏检了1份标本，即每一套引物敏感性均为92．3％，HTLV标本经检测均为HIV阴性，根据判断标准，该检测方法敏感性和特异性均达到100％，最低检测线达到10^3外周血单核细胞（PBMC）。结论：多引物嵌套式PCR具有高敏感性及特异性，在鉴定HIV感染方面有重要的意义，可作为蛋白印迹试验的补充和辅助诊断。     

肝癌微卫星不稳定性及其相关基因突变

我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）为基础的技术对４８例原发性肝癌（ＰＨＣ）微卫星不稳定（ＭＳＩ）位点及相关基因的移码突变进行分析，藉以阐明ＭＳＩ及相关基因异常在ＰＨＣ发生发展过程中所起作用。一、资料与方法１．组织标本：４８份肝癌及其癌旁肝组织均为我院１９９２年至１９９７年手术切除标本，其中男３９例，女９例，年龄１７－６９岁，平均４３．１岁。手术切下肿瘤后立即收集癌及切缘处正常组织，剔除出血、坏死组织后，取少量组织用甲醛溶液固定，其余立即放置－８０℃冰箱保存备用。２．ＤＮＡ提取：将正常及肝癌组织连续冰…     

肝癌患者血清可溶性Fas水平检测及意义

通过对肝癌患者血清可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）水平及免疫指标的检测，探讨肝癌患者血清ｓＦａｓ水平与免疫功能的关系及其临床意义。１．临床资料：１８６例肝癌初治患者，系本院１９９７年１月～１９９９年６月收治的患者，诊断依据肝穿刺活体组织检查、ＣＴ及ＭＲＩ、ＡＦＰ等确诊，其中男１１８例，女６８例，年龄３５～７２岁，平均５０．２岁。４０例肝硬化患者，经肝穿刺活体组织检查证实，男３０例，女１０例，年龄３０～６８岁，平均４９８岁；。所有患者不包括严重感染、自身免疫性疾病、造血系统疾病及肾衰等合并症。健康献血员为…     

山东省丙型肝炎病毒分离株NS5区核苷酸序列分析

目的：了解山东省丙型肝炎病毒（HCV）分离株的基因型及其基因的变异情况，方法：应用德国UBI HCV EIA 4．0诊断试剂盒筛选山东省部分地区64例临床检验为抗－HCV阳性的血清标本，有54例阳性，随意抽取其中28例，应用逆转录套式－聚合酶链反应（RT－nested-PCR)扩增319bp的HCV NS5区基因片段，结果12例出现特异性条带，随后将这12个NS5区片段直接进行T载体克隆，并用Sanger法对克隆成功的10个NS5区基因片段进行序列测定，将所得到的10个序列与GenBank中所有的HCV分离株进行同源性比较。结果：10例山东省部分地区HCV分离株的基因型均属于HCV－1b型，对获得的10个NS5区片段进行是性分析发现，所有的核苷酸变化都是由于替代作用引起的，没有碱基的插入和缺失；大部分的突变属于同义突变，占突变总数的74％。RNA－依赖性RNA聚合酶的G－D－D基序和所有的半胱氨酸都完全保守，结论：本研究证明了HCV－1b型是山东省部分地区主要的基因型。     

芬必得治疗原发性痛经42例临床分析

芬必得治疗原发性痛经４２例临床分析山东财政学院卫生所（２５００１４）杨秀芬１９９５年３月至１９９６年１２月，我们对４２例痛经患者采用芬必得治疗，取得较好疗效。资料与方法：本组已婚２例，未婚４０例；年龄１３～３０岁，其中≤１５岁６例。疗程６个月至１６年...     

肝细胞癌中p53基因突变的检测及新DNA片段的发现

目的：检测原代肝癌组织以及肝癌细胞系中ｐ５３的突变位点和频率,了解ｐ５３突变与肝癌发病和治疗的关系。方法：设计了３对引物,采用ＰＣＲ技术扩增ｐ５３的５－８外显子,然后进行ＤＮＡ测序鉴定,共测定了两个肝癌细胞系（ＢＥＬ－７４０２和２．２．１５）以及两例原代肝癌组织,其中５和６外显子用一对引物串联扩增出来,上游引物序列为５′－ＧＧＡＡＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＧＣＡＧ－３′,下游为：５′－ＧＧＡＡＴＴＣＡ