新型有机硒化合物双硒唑烷-1的动物体内免疫调节作用

目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Ethaselen-1, Eb1)的动物体内免疫调节作用.方法:建立Lewis肺癌(Lewis lung cancer, LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg 和12.5 mg/kg两个剂量的Eb1作为实验药物,以左旋咪唑(levamisole,LMS) 2.0 mg/kg作为阳性对照,以溶剂5 g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射7 d药物,探讨Eb1对正常及肿瘤鼠的相对脾重、脾淋巴细胞转化活性、自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性、淋巴因子-激活杀伤(lymphokine-activated killer,LAK)细胞活性及淋巴细胞CD4+,CD8+亚群阳性细胞百分数的影响.结果:高剂量Eb1能够使正常鼠和肿瘤鼠的相对脾重增加150.59%和122.55%,脾淋巴细胞转化活性增加162.25%和561.98%,NK细胞活性增加78.60%和219.42%,脾淋巴细胞CD4-CD8+亚群阳性细胞百分含量增加104.72%和105.87%,高剂量Eb1亦能使肿瘤鼠的LAK细胞活性增加195.11%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:新型有机硒化合物Eb1在C57/BL小鼠体内具有明显的免疫调节作用.     

单一剂量美法仑治愈荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的建立

[目的]建立单一剂量化疗药物治愈荷瘤小鼠的动物模型,为研究在体内化疗药物治愈肿瘤与机体免疫力和肿瘤细胞耐药之间的关系奠定基础.[方法]用MTT法在体外检测小鼠淋巴瘤EL4细胞对化疗药物美法仑的敏感性.野生型C57BL/6小鼠皮下接种小鼠淋巴瘤EL4细胞建立荷瘤小鼠模型,不同剂量的美法仑单次腹腔内注射,观察不同剂量的美法仑体内治疗的效果及其毒、副作用,找出美法仑可发挥最大抑瘤作用、并能使荷瘤小鼠的肿瘤消退、不再复发的最小治疗剂量.[结果]体外美法仑对EL4细胞的直接杀伤作用与所用美法仑的剂量呈正相关.接种1×105EL4细胞可使C57BL/6小鼠肿瘤进行性生长,接种后12 d平均肿瘤直径为6 mm,动物致死时间平均为(17.7±1.0)d.接种后12 d的荷瘤小鼠腹腔单次注射不同剂量的美法仑,观察发现:应用0.75 mg/kg～30 mg/kg的美法仑,肿瘤结节缩小的速率与所用美法仑的治疗剂量呈正相关;在肿瘤结节完全消退后,肿瘤的复发率与所用美法仑的治疗剂量呈负相关.7.5 mg/kg美法仑单次腹腔内注射后不但使野生型C57BL/6荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,治疗后2个月内无肿瘤复发,并且再次接种等量肿瘤细胞无肿瘤生长.[结论]单一剂量(7.5 mg/kg)的美法仑腹腔内注射是可以治愈野生型C57BL/6荷瘤小鼠的最低有效剂量.该动物模型的建立为研究化疗药物治愈恶性肿瘤的机制奠定了基础.     

负载辐射凋亡MB49肿瘤细胞抗原的树突状细胞(DC)疫苗对小鼠膀胱癌的抑制作用

 目的 研究辐射凋亡MB49肿瘤细胞诱导的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗的制备及对C57BL/6小鼠体内膀胱肿瘤的免疫学效应。方法 采用辐射法获取MB49细胞抗原并用其致敏骨髓来源的DC来制备DC疫苗。用MB49小鼠膀胱癌细胞建立荷瘤动物模型,随机分为实验组和对照组,于肿瘤细胞接种后第7、14天给予相应DC疫苗治疗或者PBS,每组分为2个亚组,分别用于测量瘤质量、体积及用于观察荷瘤小鼠存活情况。结果 负载辐射凋亡肿瘤细胞DC疫苗的实验组荷瘤小鼠,其肿瘤的平均体积和平均质量均显著低于对照组(P<0.01),生存期长于对照组。DC疫苗实验组中有2只小鼠30天内无肿瘤生长,再次皮下接种MB49细胞观察30天仍无肿瘤发生。结论 负载辐射凋亡肿瘤细胞的DC疫苗对膀胱肿瘤荷瘤小鼠具有抑瘤效应和延长生存期的作用。     

夏枯草提取物体内外对小鼠T淋巴瘤EL-4细胞生长的影响

目的:观察夏枯草提取物体内外对小鼠T淋巴瘤EL-4细胞生长的影响.探讨夏枯草提取物的抗肿瘤作用机制.方法:用MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳、TUNEL等方法检测夏枯草提取物体外对小鼠T淋巴瘤EL-4细胞生长的影响.建立C57BL/6小鼠EL-4细胞移植瘤模型,分别给予500、300、100 mg,/(kg·d)夏枯草提取物,10 d后.计算抑瘤率,对肿瘤组织进行形态学观察,并测定其中bcl-2和Bax蛋白的表达情况.结果:夏枯草提取物体外能抑制EL-4细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为(23.67±3.05)mg/L;夏枯草提取物能诱导EL-4细胞凋亡.夏枯草提取物能抑制EL-4细胞在C57BL/6小鼠体内的生长,500、300、100 mg/(kg·d)剂量组的抑瘤率分别为(39.54±1.83)%、(65.26±1.31)%、(22.30±3.7)%,平均生存时间分别为(25.50±1.87)、(28.50±2.62)、(24.86±2.19)d,均大于空白对照组(P<0.05),移植瘤bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加.结论:夏枯草提取物在体内外均能抑制EL-4细胞的生长,诱导凋亡可能是其抗肿瘤的主要机制之一.     

OK-432和IL-2联合用药对C57BL/6 小鼠Lewis肺癌的抑制作用及Bcl-2表达的影响

目的研究A组溶血性链球菌冻干生物制剂OK-432联合白细胞介素2（IL-2）对小鼠C57BL/6Lewis肺癌（LLC）生长的抑制作用及对Bcl-2表达的影响。方法将40只C57BL/6荷瘤LLC小鼠分4组,分别用生理盐水、OK-432、IL-2和OK-432联合IL-2处理,观察用药后肿瘤生长的状况,用抗鼠bcl-2单克隆抗体进行SABC免疫组化技术半定量测定Bcl-2在Lewis肺癌原发灶中的表达。结果OK-432/IL-2抑制肿瘤作用强,抑瘤率为60%,（P<0.05）。对照组中的Bcl-2的表达明显高于联合用药组（P<0.05）。结论OK-432与IL-2有明显的协同抗肿瘤活性,其杀瘤过程主要为对瘤细胞的直接或间接攻击,并促进体内多种反应细胞相互作用,其机制可能与抑制Bcl-2基因的表达、诱导瘤细胞的凋亡有关。     

OK-432和IL-2联合用药对C57BL/6 小鼠Lewis肺癌的抑制作用及Bcl-2表达的影响

目的 研究A组溶血性链球菌冻干生物制剂OK-432联合白细胞介素2（IL-2）对小鼠C57BL/6Lewis 肺癌（LLC）生长的抑制作用及对Bcl-2表达的影响。方法 将40只C57BL/6荷瘤LLC小鼠分4组,分别用生理盐水、OK-432、IL-2和OK-432联合IL-2处理,观察用药后肿瘤生长的状况, 用抗鼠bcl-2单克隆抗体进行SABC免疫组化技术半定量测定Bcl-2在Lewis肺癌原发灶中的表达。结果 OK-432/IL-2抑制肿瘤作用强,抑瘤率为60%,（P<0.05）。对照组中的Bcl-2的表达明显高于联合用药组（P<0.05）。结论 OK-432与IL-2有明显的协同抗肿瘤活性,其杀瘤过程主要为对瘤细胞的直接或间接攻击,并促进体内多种反应细胞相互作用,其机制可能与抑制Bcl-2基因的表达、诱导瘤细胞的凋亡有关。     

益气养阴解毒方抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤生长及诱导移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的 研究益气养阴解毒方对Lewis肺癌(LLC)小鼠移植瘤生长及细胞凋亡的影响.方法 复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,将接种Lewis肺癌的C57BL/6小鼠随机分为6组:对照组(A组)、益气养阴解毒方低剂量组(B组)、中剂量组(C组)、高剂量组(D组)、顺铂(DDP)组(E组)、益气养阴解毒方联合DDP组...     

骨桥蛋白在Lewis肺癌生长转移过程中的表达

目的建立能够模拟肿瘤生长、侵袭转移动态全过程的动物模型,利用该模型探讨骨桥蛋白在肿瘤生长转移过程中的作用。方法Lewis肺癌（LLC）在C57BL/6小鼠体内连续传代,观察第2代（早期组）、第8代（中期组）和第15代（晚期组）荷瘤小鼠肿瘤生长和肺转移的情况,采用免疫组化法检测各组荷瘤鼠肿瘤组织中骨桥蛋白（OPN）和微血管密度（MVD）的表达。结果①随传代次数的增加肿瘤生长速度加快、侵袭力增强,肺转移率升高。②OPN和MVD在早、中、晚三组小鼠瘤组织中的表达均呈升高趋势（P〈0．05）,且二者的表达呈正相关。结论OPN可能通过促进肿瘤血管生成的途径加速肿瘤的生长转移。     

巨噬细胞炎症蛋白1α修饰的小鼠肺癌疫苗的制备及体内抗肿瘤活性研究

目的以小鼠趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)的重组腺病毒载体(AdmMIP-1α)体外感染小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC),观察其体内抗肿瘤活性,探讨其成为肺癌疫苗的可能性。方法AdmMIP-1α体外感染LLC细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达检测感染率。连续14 d隔天进行细胞计数,观察细胞的体外生长曲线。取3×106修饰后的LLC细胞接种于C57BL／6小鼠,4周后在MIP-1α瘤苗组未荷瘤小鼠原接种部位的对侧再接种1×106野生型LLC或小鼠淋巴瘤细胞株(EL4)细胞。观察肿瘤体积。结果AdmMIP-1α能有效感染靶细胞LLC细胞,感染后LLC细胞的体外生长无明显改变。修饰后LLC细胞的体内成瘤性下降;4周后再接种LLC细胞,肿瘤生长速度明显减慢;而再接种的EL4细胞呈渐进性生长,与对照组无明显差异。结论表达MIP-1α基因的LLC细胞的体内成瘤性下降,并且能激发特异性免疫保护反应,有可能成为有效的肺癌疫苗。     

IRM-2小鼠移植性肿瘤模型的生物学特性

目的 观察IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌生物学特性的对比研究.方法 取肿瘤组织研磨,用生理盐水稀释成2×106/mL,取细胞悬液接种于IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠腋下,0.2 mL/只.观察两品系肿瘤生长、荷瘤鼠生存时间,外周血细胞及病理指标变化.结果 两品系小鼠成瘤率均是100%,荷瘤鼠存活时间无明显差异,IRM-2小鼠荷瘤鼠体重净增长明显高于C57BL/6荷瘤小鼠(P＜0.05).白细胞分类及病理指标变化无明显差别.结论 IRM-2小鼠与C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型生物学特性基本一致,IRM-2小鼠可以建立稳定的Lewis肺癌肿瘤模型应用于实验研究.     

拓扑替康对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的：探讨拓扑替康对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及抗血管生成作用。 方法：将Lewis肺癌模型小鼠随机分为对照组10只及拓扑替康小、中、大（0.312、0.624 和1.248 mg•kg^-1）剂量组各15只,第21天处死小鼠,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度（MVD）及检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。 结果：拓扑替康各剂量组较对照组小鼠的肿瘤生长缓慢,原发瘤抑瘤率与对照组相比差异有显著性（P<0.05）;拓扑替康大、中剂量组MVD与对照组比较差异有显著性（P<0.05）;各剂量组VEGF阳性率均较对照组低。 结论：拓扑替康明显地抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长,并可抑制肿瘤的微血管生成。     

Rh-Endostatin作用肺癌血管正常化时相与CA9表达的关系初探

目的初步探索重组人血管内皮抑素（rh-Endostatin,rh-ES）作用于肺癌的血管正常化时相与CA9的关系,以及CA9在肺癌中的表达水平。方法收集对数生长期的Lewis细胞,制成1×106 mL-1的单细胞悬液,注射入40只C57/BL6小鼠（0.2 mL/只）,建立Lewis肺癌皮下移植瘤（LLC）模型,然后随机分成对照组和rh-ES组,各20只。rh-ES组小鼠腹腔注射rh-ES 5 mg/（kg·d）,9 d,1次/d。对照组小鼠同时点腹腔注射生理盐水（NS） 0.2 mL/次。于治疗第2、4、6、9天,每组各处死5只小鼠。免疫组化检测肿瘤组织和癌旁组织中CA9表达,Real-time PCR及ELISA技术分别检测两组不同时间点肿瘤组织中CA9表达。结果C57/BL6小鼠成瘤率为100%。同时,对照组不同时间点CA9在肿瘤组织中表达均高于癌旁组织（P<0.05）。Real-time PCR及ELISA发现在LLC移植瘤模型中CA9基因和蛋白表达在rh-ES组给药后第4天和第6天（血管正常化时相）降低,与同组第2天、第9天比较,差异有统计学意义（P<0.05）,与对照组第4天和第6天比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论CA9在肿瘤组织中高表达。rh-ES 可于血管正常化时间段内降低CA9表达,逆转Lewis肺癌乏氧。     

中药猫眼草对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的影响

目的探讨中药猫眼草对C57BL／6小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的影响。方法将Lewis肺癌C57BL／6小鼠分为模型组、猫眼草7．5、15．0、30．0、60．0g／kg组和顺铂组，应用流式细胞仪和TUNEL法检测猫眼草对Lewis肺癌细胞凋亡的影响。结果猫眼草30．0、60．0g／kg组瘤质量与模型组相比有显著性差异（F=7．90，q=4．16、6．21，P〈0．05）；猫眼草后3组及顺铂组凋亡率与模型组相比有显著性差异；猫眼草60．0g／kg组及顺铂组凋亡指数（AI）与模型组相比有显著性差异（t=2．63、1．93，P〈0．05）。结论中药猫眼草能诱导肺癌细胞凋亡，且该作用随剂量的增加而增强。     

醋酸甲羟孕酮对卵巢癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用

OBJECTIVE: To investigate the effects of medroxyprogesterone acetate (MPA) on angiogenesis and growth of transplanted human ovarian cancer cells in nude mice. METHODS: Ovarian cancer cell line COCI derived from human ovarian serous adenocarcinoma was transplanted into 30 nude mice, which were then randomized equally into 3 groups consisting of two treatment groups (in which MPA was administered at 60 and 120 mg/kg, respectively, twice a week for 4 weeks) and a control group. Six weeks later, the body mass of the nude mice was recorded and the morphology of tumor cells observed by electron microscope. The microvascular density (MVD) was examined by immunohistochemical staining with anti-human factor VIII antibody. RESULTS: Compared with the control group, the growth inhibitory rate in the two treatment groups were 23.76% and 43.80%, respectively, corresponding to the doses of 60 and 120 mg/kg. MVD of 60 mg/kg MPA group (3.64+/-0.02) and 120 mg/kg MPA group (2.11+/-0.12) was lower than that of the control group (5.14+/-0.74) (P<0.05 and P<0.01, respectively), and there was also significant difference between the two treatment groups (P<0.01). The morphological changes including compaction and margination of the nuclear chromatin, apoptotic bodies, and cell necrosis were significantly increased in the two treatment groups. CONCLUSIONS: MPA can inhibit the angiogenesis and growth of transplanted human ovarian cancer cells in nude mice in a dose-dependent manner, and its anticancer effect may involve induction of cell apoptosis as the result of its effect against angiogenesis.     

亚硒酸钠对移植性Lewis肺癌的抑制作用

用组化、免疫组化,扫描及透射电镜观察亚硒酸钠对C57BL/6小鼠免疫功能及肿瘤细胞超微结构的影响,以研究亚硒酸钠对移植性Lewis肺癌的抑制作用。ip亚硒酸钠0.75mg/kg对生长肿瘤的抑瘤率为34.1％。给药组小鼠淋巴结中边缘窦及髓窦内充满巨噬细胞,成淋巴细胞应答反应增加。给药组瘤细胞表面平滑,细胞内有自噬泡,变性的内质网较多,染色质颗粒较细较少。结果提示亚硒酸钠抗癌机理主要是加强机体对肿瘤免疫监视作用及其细胞毒作用。     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

蝎毒多肽提取物对小鼠Lewis肺癌生长转移的抑制作用

目的 观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)生长及转移的影响并探讨其作用机制.方法 采用30只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组、5-FU治疗组、PESV治疗组,连续灌胃给PESV18d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率.另取20只C57BL/6J小鼠,尾静脉注射Lewis肺癌细胞悬液,建立Lewis肺癌实验转移模型,随机分为荷瘤对照组和PESV组,连续灌胃给PESV28d,观察肺部转移灶数目并计算转移抑制率;采用免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清中骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 PESV抑瘤率为46.02%,肺转移抑制率76.19%;与荷瘤对照组相比,瘤组织和血清中OPN和MMP-9的表达明显降低(P<0.05).结论 PESV能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制OPN和MMP-9的表达有关.