替硝唑体外抗毛滴虫效果观察

本文观察了替硝唑(Tinidazole)对体外培养的两株阴道毛滴虫和一株人毛滴虫的作用.该药与阴道毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在2μm/ml浓度时,有一定程度的抑制作用;与甲硝唑对比,替硝唑的作用低一个稀释度。该药与人毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在4μg/ml浓度时,有一定程度的抑制作用,与甲硝唑对比,作用相同。     

铁离子对体外培养的阴道毛滴虫生长的影响

目的研究铁离子对体外培养的阴道毛滴虫生长的影响。方法在TYM(trypticase-yeast extract-maltose)培养基(pH6.0)中,分别加入100、200、300和400μmol/L铁离子,并设不加铁离子组为对照组,阴道毛滴虫初始浓度为1×105/ml,于37℃定量纯培养。采用台盼蓝染色法镜下观察并计数活滴虫数和死滴虫数,绘制生长曲线和存活率曲线,并计算对数生长期内世代时间。通过连续稀释的方法测定在加入200μmol/L铁离子培养基和对照组培养基中甲硝唑对阴道毛滴虫的最小致死浓度(minimal lethal concentration,MLC)。结果在加入100、200、300和400μmol/L铁离子的培养基中,阴道毛滴虫均于40h达最高密度,分别为2.9×106、3.2×106、3.1×106和2.8×106/ml,对照组阴道毛滴虫于54h达最高密度,为2.5×106/ml。400μmol/L铁离子组阴道毛滴虫的世代时间为(6.8±0.7)h,较100～300μmol/L铁离子组的世代时间[(4.8±0.3)、(4.8±0.2)和(5.0±0.4)h]延长(均P﹤0.05),而100～400μmol/L铁离子组的世代时间均短于对照组[(10.2±3.1)h](均P﹤0.05)。在加入200μmol/L铁离子的培养基中阴道毛滴虫的甲硝唑最小致死浓度为(23.44±11.56)μg/ml,显著低于对照组[(31.25±15.44)μg/ml](均P﹤0.05)。结论阴道毛滴虫在加入100～400μmol/L铁离子的TYM培养基中生长较快,且甲硝唑对阴道毛滴虫的最小致死浓度较小。     

阴道毛滴虫对甲硝唑的耐药性分析

目的研究阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalisvirus)对甲硝唑的耐药性,探索共生人型支原体对其耐药性的影响。方法由医院提供阴道毛滴虫样品,对其进行体外培养,达到纯培养后提取虫株核酸,进行扩增及测序;制备浓度梯度板,测定甲硝唑对阴道毛滴虫的最小致死浓度(minimum lethallon centration,MLC),并将人型支原体进行序列分析和清除后再测定DNA及MLC,并作前后比较。结果甲硝唑对34株阴道毛滴虫MLC范围为1~300μg/ml,其中敏感性较高的共有21株,9株敏感性略低,4株敏感性低;在人型支原体共生与甲硝唑MLC关系测定中,12株扩增出特异性产物(长度大小约为530bp),阳性率为35.3%。DNA检测阳性的12株阴道毛滴虫中,甲硝唑MLC在1~25μg/ml、50~70μg/ml和100~300μg/ml范围内的虫株共生率分别为14.3%、66.7%和75.0%。当MLC在300μg/ml时,有2个虫株呈现人型支原体共生现象,显示人型支原体共生状态与甲硝唑MLC之间存在一定的关联性;清除人型支原体后的甲硝唑MLC测定中,加入多西环素并对虫株进行传代培养。当传至3代后进行检测,12株阳性虫株中仅有7株未再检出人型支原体DNA,其中甲硝唑敏感株的4株MLC无变化,对甲硝唑耐药的3株MLC略有降低,但仍维持在较高水平。结论甲硝唑MLC不同的阴道毛滴虫虫株人型支原体的共生情况也不同。对甲硝唑耐药性越强的虫株人型支原体检出率越高,甲硝唑MLC为300μg/ml的虫株均查出人型支原体,表明阴道毛滴虫对甲硝唑的耐药性与人型支原体共生现象可能存在一定关系。     

治糜灵栓体外抗阴道毛滴虫的作用

目的 观察治糜灵栓体外杀灭阴道毛滴虫效果,为临床应用提供依据.方法 以实验药物治糜灵及对照药物甲硝唑配制大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,培养24 h,观察药物的抗滴虫作用.结果 随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降.治糜灵对阴道毛滴虫的最低有效浓度为15 mg/ml.结论 治糜灵对阴道毛滴虫有较强的抑制作用.     

塞克硝唑苯甲酸酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的 研究塞克硝唑苯甲酸酯体外抗阴道毛滴虫的效果。 方法　 以肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫,将滴虫混悬液接种于96孔培养板中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组、不加药物的对照组及空白组,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果。另将滴虫混悬液接种于试管中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组和不加药物的对照组,通过计数法观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果。 结果　 培养24 h后,塞克硝唑苯甲酸酯浓度为0.15、0.31、0.63、1.25、2.50、5.00、10.0及20.0 μg/ml时呈浓度依赖性地抑制滴虫增殖（t=9.02, P<0.01）,MTT法相对抑制率分别为14.6%、28.7%、31.3%、60.4%、89.0%、89.2%、95.6%和100%;计数法相对抑制率分别为18.2%、31.1%、39.7%、68.8%、84.6%、90.1%、94.6%和100%。培养6～24 h,呈时间依赖性地抑制滴虫增殖。体外抗阴道毛滴虫的最低杀灭浓度为20 μg/ml,最低抑制浓度为0.15 μg/ml。 结论　 塞克硝唑苯甲酸酯具有较强的体外抗滴虫效果。     

葡萄糖酸-δ-内酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的通过对葡萄糖酸-δ-内酯体外抗阴道毛滴虫作用的实验观察,为该药的临床应用提供依据.方法以实验药物葡萄糖酸-δ-内酯及对照药物甲硝唑制成大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,进行24 h培养,观察药物的抗滴虫作用.结果随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降.该药对阴道毛滴虫的最低有效浓度为16 mg/ml.结论葡萄糖酸-δ-内酯对阴道毛滴虫有较强的抑制作用.     

葡萄糖酸—δ—内酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的 通过对葡萄糖酸－δ－内酯体外抗阴道毛滴虫作用的实验观察,为该药的临床应用提供依据。方法 以实验药物葡萄糖酸－δ－内酯及对照药物甲硝唑制成大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,进行24h培养,观察药物的抗滴虫作用。结果 随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降。该药对阴道毛滴虫的最低有效浓度为16mg/ml。结论 葡萄糖酸－δ－内酯对阴道毛滴虫有较强的抑制作用。     

人型支原体共生与阴道毛滴虫甲硝唑耐药性的关系

目的研究人型支原体(Mycoplasma hominis)的共生与阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)甲硝唑耐药性的关系。方法2010年11月至2011年7月,自四川省妇幼保健院妇科门诊患者生殖道分泌物中分离出160株阴道毛滴虫,用梯度浓度1 024、512、256……4、2和1μg/ml甲硝唑分别处理该批虫株,以死亡率≥90%的最低浓度作为甲硝唑最小致死浓度(MLC)。以160个阴道毛滴虫分离株中提取的DNA为模板,用PCR技术特异性扩增人型支原体16S rRNA基因,检测滴虫细胞内是否有人型支原体共生。对检出人型支原体DNA的分离株用32μg/ml多西环素清除支原体,比较清除前后甲硝唑MLC的变化。结果 160个阴道毛滴虫分离株中甲硝唑MLC为1～8μg/ml的占61.3%(98/160),16～32μg/ml的占26.3%(42/160),64～256μg/ml的占12.5%(20/160)。PCR检测结果显示,有61株(38.1%)检出人型支原体DNA,其中MLC为1～8μg/ml的分离株检出率为13.3%(13/98),16～32μg/ml的分离株检出率为73.8%(31/42),64～256μg/ml的分离株检出率为85.0%(17/20),不同MLC范围的分离株人型支原体检出率差异有统计学意义(P<0.01)。用多西环素处理后,61株中仅有8株支原体被清除,清除前后甲硝唑MLC无明显变化。结论四川地区的阴道毛滴虫分离株对甲硝唑表现出一定程度的耐药性,人型支原体的共生可能与之有关,但尚未发现直接证据。     

几种药物体外抗阴道毛滴虫效果观察

甲硝唑是临床常用的抗阴道毛滴虫药物,但副反应多,开辟和发现新的抗阴道毛滴虫药物很有必要。本实验选择了4种药物5种制剂进行了体外抗阴道毛滴虫效果观察一、材料与方法 (一)虫种取自滴虫性阴道炎患者阴道分泌物。 (二)药物甲硝唑片系武汉制药厂生产;乙酰螺旋霉素系沈阳克达制药厂生产,吡喹酮系南京制药厂生产;甲硝唑注射剂系黑龙江省庆安制药厂生产;5氟尿嘧啶系齐齐哈尔市第二制药厂生产。 (三)实验方法用捷克斯洛伐克产阴道毛滴虫培养基培养阴道毛滴虫,37℃48h传代一次。待生产旺盛     

南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究

目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物对HepG2细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;采用分光光度计检测凋亡细胞胞浆caspase-3的活性变化。结果不同浓度的南蛇藤提取物能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量效应和时间效应关系;药物作用24h时,其IC50为111.8μg/ml,作用48h时,其IC50为99.7μg/ml,作用72h时,其IC50为43.0μg/ml;药物干预24h时,HepG2细胞停滞在G0-G1期,并产生细胞凋亡亚二倍峰。在药物为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时,细胞凋亡率分别为44.91%、31.95%和21.94%,与对照组比较,均有显著性差异（F=5.449,P〈0.05）;在药物浓度为30μg/ml、60μg/ml和120μg/ml并分别作用24h和48h时,Caspase-3活性逐渐增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物抑制HepG2细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用可能与其增强Caspase-3活性有关。     

护龈灵体外抑杀口腔毛滴虫的研究

以40%～80%5个浓度的乙醇作为溶剂提取护龈灵有效成份,获取40%、50%、60%、70%和80%护龈灵醇提浸膏。实验设40%～80%护龈灵醇提浸膏组、甲硝唑对照组和空白对照组。护龈灵醇提浸膏各组分别再设5个亚浓度组,分别于125μl对数生长期口腔毛滴虫悬液(2×105个/ml)中加入终浓度为6.25、12.5、25、50和100mg/ml的各浓度护龈灵醇提浸膏;甲硝唑组的终浓度为10μg/ml,每组4孔。作用12、24和48h后,采用显微镜计数法检测护龈灵体外杀灭口腔毛滴虫的效果。并采用噻唑蓝(MTT)法检测药物作用24h后各浓度护龈灵醇提浸膏组对口腔毛滴虫的杀灭效果。结果显示,各浓度护龈灵醇提浸膏随着药物浓度的增大或药物作用时间的延长,对口腔毛滴虫的杀灭作用增强。药物浓度为6.25和12.5mg/ml的60%护龈灵醇提浸膏的相对杀虫率,与相同浓度的40%、50%、70%和80%护龈灵醇提浸膏之间的差异有统计学意义(P0.01),提示护龈灵醇提浸膏在体外具有较强的杀灭口腔毛滴虫作用,其中以60%护龈灵醇提浸膏的作用最强。     

Comparative in vitro sensitivity to metronidazole of Trichomonas vaginalis with isolates and clones

Isolates of Trichomonas vaginalis from a group of Thai women in Khon Kaen, Thailand were studies for their in vitro sensitivity to metronidazole. Forty-five isolates of T. vaginalis and further 226 laboratory clones of these isolates were examined for drug sensitivity under anaerobic conditions using the CPLM (Cysteine-Peptone-Liver infusion Maltose) medium. The in vitro sensitivity of T. vaginalis to metronidazole, recorded as MLC values revealed highly variable sensitivity profiles Greater than 90% of the trichomonads studies were susceptible to relatively low concentrations of metronidazole in the range of 1-10 micrograms/ml. The remaining fraction of trichomonads, appeared to be less sensitive and required higher concentration of drug to attain the MLCs. The highest recorded MLC was 60 micrograms/ml. The geometric mean MLC of the 45 isolates was 7.99 micrograms/ml while that of The influence of the individual clones of subpopulations of T. vaginalis on the observed sensitivity of the isolate was also examined. A positive linear relationship was observed between the MLC of the isolated and the MLC of the least sensitive clone of the same isolate (p less than 0.05). This suggests that the most resistant clone present within an isolate of T. vaginalis plays an important role in determining the overall drug sensitivity of the isolate.     

人参皂甙单体Rh2对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的观察人参皂甙单体Rh2（GS-Rh2）对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法用GS-Rh2处理人脑胶质瘤U251细胞,采用MTT法检测U251细胞增殖抑制率,流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双染法观察U251细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测U251细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测U251细胞人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达。结果 5、10、20、40、80μg/ml GS-Rh2组U251细胞增殖抑制率分别为20.42%、32.19%、45.09%、57.37%、73.82%。根据细胞增殖抑制曲线计算出IC30、IC50、IC70值分别为9.7、25.2、68.4μg/ml。FITC和PI荧光双参数点图显示实验组细胞分布区域与对照组相比出现明显改变,随着药物浓度的增加,早期凋亡、晚期凋亡或坏死的区域细胞数量逐渐增多。9.7、25.2、68.4μg/ml GS-Rh2处理12、24、48、72 h后U251细胞端粒酶活性随GS-Rh2浓度增加和作用时间的延长而降低。浓度为25.2μg/ml GS-Rh2作用24、48、72 h的U251细胞hTERTmRNA与β-actin灰度值比为0.964 9±0.004 2、0.401 8±0.001 4、0.297 8±0.001 8,对照组为0.976 4±0.005 1。作用48、72 h U251细胞hTERT mRNA与β-actin灰度值比与对照组相比P均〈0.05;作用48、72 h者相比P〈0.05。结论 GS-Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞凋亡,抑制U25l细胞增殖。其机制与其抑制hTERT基因表达,降低端粒酶活性有关。     

Use of intravaginal microbicides to prevent acquisition of Trichomonas vaginalis infection in Lactobacillus-pretreated, estrogenized young mice.

D2A21, a novel peptide antibiotic has in vitro activity against a wide spectrum of sexually transmitted diseases (STD). In this study we tested the hypothesis that intravaginal D2A21 would interfere with acquisition of Trichomonas vaginalis infection in a modified mouse model. T. vaginalis infections of estrogenized young mice pretreated with Lactobacillus vaginalis or Lactobacillus rhamnosus were more frequent and persistent than those in mice pre-treated with Lactobacillus gasseri or Lactobacillus acidophilus. One hundred percent T. vaginalis infection was achieved for 2-4 days post-challenge when intravaginal L. rhamnosus pre-treatments were given to estrogenized mice 48 hr prior to a single T. vaginalis challenge. Estrogenized mice pre-treated with L. rhamnosus were pre-medicated with intravaginal placebo gel, 0.5% or 2% D2A21 gel, or 500 microg/mL metronidazole gel prior to T. vaginalis challenge. Both 2% D2A21 and metronidazole gels were significantly more efficacious (10% or none infected) than placebo gel (53% infected) in preventing vaginal T. vaginalis infections in mice.     

Prevalence, incidence, natural history, and response to treatment of Trichomonas vaginalis infection among adolescent women

BACKGROUND: Trichomonas vaginalis infection is a sexually transmitted infection (STI) linked with reproductive health complications. However, few data exist concerning the epidemiologic profile of this pathogen in adolescent women, a group at high risk for other STIs. METHODS: Our objective was to describe the prevalence, incidence, natural history, and response to treatment of T. vaginalis infection in adolescent women. Women 14-17 years old were followed for up to 27 months. Vaginal swab samples were obtained during quarterly clinic visits and were self-obtained weekly during 12-week diary collection periods. The weekly samples were tested quarterly. Infections were identified by polymerase chain reaction and were treated with 2.0 g of oral metronidazole. Analysis was performed on the subset of participants who returned for at least 1 quarterly clinic visit. RESULTS: T. vaginalis infection was identified in 6.0% (16/268) of the participants at enrollment. Overall, 23.2% (57/245) of the participants with at least 3 months of follow-up had at least 1 infection episode; 31.6% (18/57) experienced multiple episodes. Seventy-two incident infection episodes were diagnosed. When treatment was not documented, weekly samples from participants were positive for up to 12 consecutive weeks. After treatment, T. vaginalis DNA was undetectable within 2 weeks in all but 3 participants. CONCLUSIONS: The incidence of T. vaginalis infection is high among adolescent women; untreated infections may last undetected for 3 months or longer. Reinfection is common. Treatment with oral metronidazole is effective, and T. vaginalis DNA disappears rapidly after treatment.     

人参皂甙-Rh2对Ara—c诱导HL60细胞增殖抑制和凋亡作用的影响

目的探讨人参皂甙单体Rid（GS—Rh2）对阿糖胞苷（Ara—c）抗白血病作用的影响。方法体外培养人髓性白血病细胞株（HL60）并随机分为三组,其中Ara．C组加入终质量浓度分别为5．0-40．0μg／ml的Ara-c,GSRh2组加入终质量浓度为4．0～32．0μg／ml的GS-Rh2,联合组加入终质量浓度为4．0μg／ml的GS—Rh2及上述质量浓度Ara—C。48h后采用MTT法测定三组HL60细胞的增殖抑制率（IR）,并计算半数抑制浓度（IC50）、合用指数（CI）、增效倍数及合并效应与期望合并效应的比值（q）;倒置显微镜及常规瑞-吉染色法观察细胞凋亡形态。结果Ara-c组、GSRh2组的IC如分别为32．0、13．0,联合组Ara-c的IC50为14．5μg／L,显著低于Ara-c组（P〈0．001）;联合组CI为0．76,4．0μg／ml GSRh2对Ara—c的增效倍数为2．21,Ara-c质量浓度为5．0、10．0、20．0、40．0μs／ml时的q分别为1．42、1．39、1．36、1．21;联合组细胞凋亡形态较其他两组明显。结论GSRh2可提高HL60细胞对Am-c的敏感性,减少Ara—C的临床用药剂量和毒副作用,加强Ara-c的疗效;此为临床治疗白血病提供了新的思路。