工业锑尘与石英联合作用的实验研究

本实验采用大白鼠气管注入法染尘,对锑化合物与石英粉尘的联合作用进行了实验观察。在本实验条件下所得结果表明:染生后1—6个月(或3—6月)时,实验组动物肺胶原蛋白及血兰蛋白的含量均低于对照组;实验组动物肺脏的病理改变为矽结节纤维化Ⅰ—Ⅱ级,而对照组病变已达Ⅰ—Ⅲ级;实验组动物的溶血率均较对照组高,且随粉尘剂量的增加有逐步升高的趋势。这些结果说明,锑化合物(Sb_2O_3)对矽结节纤维化的发展似有一定的延缓作用。     

大鼠现场自然吸入茶尘实验研究

本文采用大鼠现场自然吸入茶尘作动物实验性尘肺观察,发现染尘后肺干重、胶原蛋白、肺气肿程度和血清铜蓝蛋白含量等指标,随染尘时间及剂量的增加而上升,X线见肺纹理增粗、增多、模糊或呈斑片状浸润灶。实验结果证明了茶尘对肺组织的病理损害。     

锑锡铝金属氧化物尘对肺泡巨噬细胞作用的体外及体内试验

应用肺泡巨噬细胞(PAM)体外培养和气管内注入染尘试验.研究了Sb_2O_3Al_2O_3、SnO_2对PAM的作用。通过生化学测定,电镜、相差和偏光显微镜形态学观察,说明Sb_2O_3、Al_2O_3对PAMR具有明显的细胞毒性,使溶酶体酶释放入基质的量明显增加,但SnO_2无类似作用。讨论了该三种物质的尘肺病因学意义。     

四种石棉纤维对大鼠肺脏的作用

350只Wistar种大鼠随机分为5组:温石棉、青石棉、阳起石、透闪石和对照组。气管注入染尘,剂量为40mg。粉尘粒子直径及纤维长度小于5μm,均占90％以上。大鼠在染尘后2、4、6、12和18个月分批剖检,检测全肺湿、干重,全肺胶原蛋白含量和肺病理检查。剩余1/3大鼠观察自然死亡及肿瘤发生情况。实验结果表明,四个实验组大鼠的肺干、湿重和胶原蛋白含量均高于对照组。肺病理均有明显网状纤维和少量胶原纤维增生。四种石棉都引起肺恶性肿瘤,其中温石棉3例,青石棉2例,透闪石和阳起石各1例。实验结果可见这些石棉不仅能引起肺纤维化,而且可影响恶性肿瘤发生。     

阿斯匹林预防性治疗实验性矽肺疗效研究

目的　探讨阿斯匹林预防性给药对实验性矽肺的疗效。方法　观察组大鼠染尘 [5 0mg/ (ml·只 ) ]后每次 2 0mg/ml的阿斯匹林溶液 1ml灌胃 ,每周 3次 ,给药 4周后测BALF中细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞数、细胞内羟脯氨酸含量、血清铜蓝蛋白活性、全肺干重及胶原蛋白含量 ,取肺脏作组织切片 ,观察病理变化。结果　治疗组大鼠所有指标的测定值均显著低于染尘组。结论　阿斯匹林有抑制尘源性炎症和实验性矽肺的纤维化的作用。     

柞木尘和桦木尘致病作用的实验研究

本研究用柞木尘和桦木尘给大鼠气管内注入染尘,观察染尘后1、3、6、12个月和死鼠肺的病理组织学改变,并测定了肺体积、肺湿重、肺干重和全肺胶原蛋白量。实验结果表明,两种木尘所致病理改变相似。早期,木尘对肺泡有明显的刺激作用,导致肺泡上皮脱落,肺泡闭塞和细胞增生。后期,肺内有粉尘细胞灶形成,粉尘向淋巴结转移,粉尘细胞灶占据的肺胞腔出现逐渐通气的趋势。尽管如此,肺内病变并没有完全恢复,至染尘后一年,肺内仍留有大面积的损伤,伴轻度的网状纤维增生。认为,这种长期存在的病理性损害同样是木尘作用的结果。     

蔺草染土尘致大鼠肺部病变的实验研究

目的　研究蔺草染土粉尘的致尘肺作用。方法　SD雄性大鼠以非暴露式气管内染尘(5 0mg/只 ) ,于染尘后 3、6、12个月 ,取大鼠肺和肺淋巴结作病理和电镜观察 ,测定肺组织胶原蛋白和血清铜蓝蛋白 (CP)含量。结果　染尘后 12个月 ,蔺草染土尘组大鼠肺湿重 (2 .6 9± 0 .2 2 )g ,高于对照组 [(1.87± 0 .2 5 )g]和TiO2 组 [(2 .2 5± 0 .2 6 )g],但低于SiO2 组 [(11.4 1± 1.6 3)g];蔺草染土尘组大鼠肺干重 (0 .4 7± 0 .0 3)g ,高于对照组 [(0 .32± 0 .0 3)g]和TiO2 组 [(0 .4 1± 0 .0 8)g],但低于SiO2 组 [(2 .0 6± 0 .2 8)g];蔺草染土尘组大鼠肺胶原蛋白含量 [(10 3.0 8± 14 .79)mg]高于对照组 [(75 .96± 13.91)mg]和TiO2 组 [(85 .84± 17.6 2 )mg],但低于SiO2 组 [(497.5 0± 10 0 .80 )mg];蔺草染土尘组大鼠血清CP含量为 (18.0 3± 1.87)U/L ,高于对照组 [(15 .0 5± 2 .2 4 )U/L]和TiO2 组 [(16 .92± 1.6 7)U/L],但低于SiO2组 [(2 5 .37± 3.5 8)U/L]。以上各指标各组间的差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。蔺草染土尘组大鼠病理观察可见肺巨噬细胞肺泡炎、Ⅱ型肺泡上皮细胞增多及肺泡间隔增宽 ,有 1～ 2级矽结节和少量胶原纤维性变。电镜下可见 ,蔺草染土尘组大鼠肺有初级和次级溶酶体及     

用HOPE-MED8050动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型

[目的]采用动式染尘控制系统建立大鼠矽肺模型.[方法]40只SD大鼠随机分为1d、3d、7d、2周、4周、8周、12周及对照组,每组5只;大鼠暴露的染尘浓度为170～ 190 mg/m3,每天染尘2h,至各组相应的染尘时间段处死动物(对照组于12周末处死),称量体重与肺脏重量,计算肺脏器系数,检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量并对肺组织进行病理组织学观察.[结果]染尘室浓度稳定持久.肺脏器系数随染尘时间延长而逐渐增加;1d组肺组织轻度充血、水肿;7d组血管周围可见较多炎细胞围绕,以单核细胞和淋巴细胞为主;2周组可见肺泡内有红染物及泡沫细胞;4周组巨噬细胞呈结节状,肺泡上皮细胞部分脱落,少量纤维组织增生;8周组纤维性增生更甚,同时可见肺泡Ⅱ型上皮细胞腺营样增生;12周组出现纤维性结节,而对照组的大鼠肺部无明显异常.肺组织内Hyp含量随染尘时间延长而增加.[结论]采用动式染尘控制系统可建立大鼠矽肺模型.     

染矽尘大鼠早期肺组织病理变化观察

目的探讨大鼠染矽尘早期肺组织病理改变。方法 Wistar大鼠随机分为对照组和15、30、60mg/ml染矽尘实验组,每组42只。一次性气管内注入染尘建立大鼠矽肺模型,每组分6个时间点(1、3、7、14、21、28d)分别取7只大鼠处死,取肺脏称重,福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,普通光镜下观察肺组织病理变化。结果各剂量染尘大鼠各时间点肺组织脏器系数均高于对照组(P<0.05),且随时间延长和染尘剂量增加其增高幅度增大(P<0.05);肺组织肉眼观察可见,随着染尘时间的延长,肺表面逐渐出现颜色变深、体积增大、不规则斑块增多、弹性减弱等症状;HE染色显示,大鼠染尘后28d内,肺组织以炎症反应为主伴发肺间质的弥漫性纤维化。实验大鼠炎症反应程度随染尘剂量的增加加重,在染尘后7～14d肺组织的炎症反应比较明显。肺间质纤维化程度随实验时间的延长及染尘剂量的增加有逐渐加重的趋势。结论矽肺早期炎症反应明显,主要表现为细胞浸润聚集,肺泡间隔增厚,纤维组织增生,肺泡正常组织发生改变。     

驱虫斑鸠菊对大鼠实验性矽肺纤维化干预作用

目的观察雾化吸入新疆维吾尔药驱虫斑鸠菊(VAW)对矽肺纤维化大鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白表达的影响。方法无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组、二氧化硅(Si O2)模型组和VAW干预组,每组20只。采用一次性非暴露式气管滴注法,Si O2模型组和VAW干预组大鼠均予质量浓度为50.0 g/L Si O2混悬液1.0 m L染尘,对照组大鼠予生理氯化钠溶液1.0 m L。染尘后1 d,VAW干预组予雾化吸入质量分数为20%的VAW注射液,Si O2模型组和对照组均予雾化吸入生理氯化钠溶液,1.0 m L/次,2次/d,直至处死。各组大鼠均分别在雾化吸入干预后1、3、7和14 d各处死5只,观察肺组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附法检测血清中SP-D表达水平,采用免疫组织化学法检测肺组织中Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达。结果肺组织病理学观察显示:对照组大鼠肺组织结构正常;Si O2模型组大鼠出现肺泡炎和肺纤维化;VAW干预组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度明显轻于Si O2模型组。Si O2模型组大鼠SP-D表达水平高于对照组[(40.48±3.58)vs(38.20±2.21)μg/L,P<0.05];VAW干预组大鼠SP-D表达水平分别与对照组和Si O2模型组比较,差异均无统计学意义[(39.38±2.25)vs(38.20±2.21)μg/L,(39.38±2.25)vs(40.48±3.58)μg/L,P>0.05];SP-D表达水平在处理方案与处理时间的交互效应上无统计学意义(P>0.05)。Si O2模型组和VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达均高于对照组(P<0.01),VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达低于Si O2模型组(P<0.017)。结论 VAW能改善Si O2所致肺泡炎及肺纤维化程度,其机制可能与抑制SP-D、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的表达有关。     

应用基因芯片筛选矽肺纤维化相关差异基因表达谱的研究

目的研究染矽尘大鼠肺组织纤维化有关基因的表达。方法将大鼠随机分为染尘组及对照组,每组8只,采用气管灌注法1次染矽尘。应用基因芯片技术,研究染尘后第28天大鼠肺组织中差异表达基因。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)实验进行验证。结果本次实验筛选出的有效基因22 107个,差异基因2 096个,其中fold值>5差异基因,主要有SPP1、LCN2、RETNLA、RASA1、CD68、PI4K2A。经过GO数据库分类注释的功能簇包括生物过程723个、细胞组分153个、分子功能161个。real-time PCR实验结果显示,染矽尘大鼠肺组织中GM-CSF基因相对表达量与对照组比较,4组上调,1组下调。结论染矽尘大鼠通过多种基因、多种信号共同参与生物学调控过程,最后诱导形成肺纤维化。GM-CSF是导致矽肺纤维化发生、发展的一个重要基因。     

氧化锑对大鼠肺泡巨噬细胞膜性结构作用的实验研究

本实验用Wistar雄性大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)与Sb_2O_2共同体外培养。透射电镜下可见PAM变圆,伪足消失,溶酶体数量早期增多、后期减少并呈大颗粒状,线粒体肿胀,常染色质减少,异染色质增多,核固缩,最后细胞崩解。培养基中酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)含量早期明显增高,分别与空白组有显著差异(均P<0.01),并呈持续上升趋势。提示Sb_2O_2对PAM有较肯定的细胞毒作用,可速成膜性结构明显损伤。     

缬沙坦对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预研究

目的观察AT1受体拮抗剂缬沙坦对博莱霉素A5（BLMA5）所致大鼠肺纤维化模型形成过程的影响。方法54只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）、模型对照组（B组）和缬沙坦治疗组（T组）3组，18只／组。T组于大鼠气管内滴注0．5％BLMA5生理盐水溶液（5mg／kg）以复制肺纤维化动物模型，并于造模当天每日给予缬沙坦（20mg／kg）灌胃；B组以生理盐水代替缬沙坦灌胃；C组则均用生理盐水代替BLMA5和缬沙坦。各组动物均于制模开始后的第7、第14、第28天分别随机处死6只动物，分取肺组织行病理切片HE染色和Masson染色于光镜下观察大鼠早期肺泡炎程度以及晚期肺纤维化程度、碱水解法检测肺组织羟脯氨酸（Hyp）浓度、免疫组化技术检测肺组织平滑肌肌动蛋白（α—SMA）和转化生长因子TGF—β1水平。结果（1）肺组织Hyp含量：制模第7天3组动物间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；第14天和第28天，B组肺组织Hyp含量较C组明显升高（P〈0．01），T组较B组Hyp含量明显下降（P〈0．01）。（2）早期肺泡炎程度：HE染色可见B组在第7天时急性肺损伤、肺泡炎程度最为明显，可见肺泡间隔和肺泡腔内有大量炎性细胞浸润，肺泡隔增宽，其后炎症渐有减轻，但第14天和第28天时炎症仍较C组明显（P〈0．01）；T组在第7、第14天和第28天肺泡炎程度均较B组明显减轻（P〈0．05）。（3）晚期肺纤维化程度：Masson染色在第7天3组动物间肺纤维化程度差异无统计学意义，第14、第28天时B组可见胸膜下、大气道及血管壁周围的基质胶原明显及纤维组织增多，较C组差异有统计学意义（P〈0．01），T组较B组肺纤维化程度明显减轻（P〈0.05）。（4）肺组织TGF—β1蛋白表达水平：B组第7天时肺组织内TGF-β1表达水平最强，以后逐渐减低，但与C组比较仍显著升高（P〈0．01）；T组TGF—     

白细胞提取物对博来霉素诱生实验性肺炎及肺纤维化的影响

目的 探讨白细胞提取物抗肺炎、肺纤维化的效果及其作用机制。方法 用博来霉素（BLM－A6）6mg/kg气管内注入,诱生小鼠肺炎和肺纤维化;预防治疗组肌内注射白细胞提取物,每日500μg/kg;阳性对照组肌内注射丹参提取物（IH764－3）,每日20mg/kg,对照组肌内注射等体积的生理盐水。30d后处死动物,用电镜观察其病理改变。结果 预防治疗组和阳性对照组经处理后,分别有60％和70％的动物肺组织炎症和纤维化得到改善。电镜观察显示,两组大多数动物肺胶原形成细胞数量、炎性细胞渗出、胶原纤维和弹力纤维都较阴性对照组明显减少,肺泡毛细血管形态较正常,肺泡隔内胶原纤维明显减少,保留了肺的蜂窝状结构。结论 白细胞提取物对博来霉素诱致的肺炎、肺纤维化具有一定的防治效果,其作用机制可能是通过调节机体的非特异性免疫功能而起作用。     

丹芍化纤胶囊对肺纤维化干预作用及机制

目的 探讨calpain-2与caspase-3在肺纤维化中的变化及丹芍化纤胶囊对肺纤维化的干预作用机制.方法 选取SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和丹芍组,每组各10只,模型组和丹芍组气管内一次性灌注博来霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,丹芍组于造模第2d给予丹芍化纤胶囊混悬液灌胃(0.8 g/kg),于实验第28 d处死大鼠;采用免疫组织化学方法检测肺组织中calpain-2与caspase-3蛋白的表达情况;运用荧光实时定量PCR( real-time PCR)检测肺组织中calpain-2及caspase-3 mRNA的表达变化.结果 模型组大鼠肺组织中calpain-2,caspase-3的蛋白及mRNA表达分别为(0.35±0.06)、(0.41±0.12)、(210±86)、(614±106),明显高于对照组(P＜0.01);经丹芍化纤胶囊干预后,肺组织中calpain-2蛋白(0.18 +0.03)、mRNA(97±71)及caspase-3蛋白(0.22±0.04)、mRNA(315±92)的表达较模型组明显减少(P＜0.05或P＜0.01).结论 calpain-2及caspase-3在肺纤维化的发生发展中作用明显,丹芍化纤胶囊干预肺纤维化的机制可能与减少肺组织中calpain-2与caspase-3的表达有关.     

大气污染物对大鼠肺细胞毒性及病理学研究

目的探讨大气污染物对大鼠肺细胞毒性及病理学改变.方法 80只Wistar大鼠(体重180～220g)随机分为4组,即对照组和实验组(低、中、高剂量组),分别进行总悬浮颗粒物(TSP)和SO2、NO2染毒.TSP染尘采用气管注入法,实验组分别注入TSP(7.5,15,30mg)生理盐水混悬液1ml,对照组注入1ml生理盐水.染尘后第2d,实验组静式吸入含SO2和NO2的空气混合气,SO2的浓度分别为8,16,32mg/m^3;NO2浓度分别为5,10,20mg/m^3,对照组吸入一般空气.连续染毒7d后,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中WBC总数、嗜酸细胞(Eos)数及细胞分类,电镜下观察肺组织超微结构变化.结果高剂量组WBC总数显著高于对照组(P＜0.05);随着剂量的增加,肺泡壁增厚明显,高剂量组出现肺间质结缔组织增生、泡壁不光滑及肺泡融合.结论大气污染物可导致肺组织发生急性炎症,呼吸面积极度变小,并有早期硬化改变.     

NAC对染尘大鼠模型血清及肺组织中丙二醛的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对二氧化硅所致大鼠肺纤维化血清及肺组织中丙二醛(MDA)的影响。方法取健康、雄性Wistar大鼠90只,随机分为3组:染尘组:采用经非暴露气管注入法,气管内注入无菌SiO2粉尘悬液(50 mg/ml)1 ml建立矽肺模型;4周后再次予以染尘1次。NAC预防治疗组:模型制备同染尘组,于染尘前1周及此后每日予以NAC[500 mg/(kg.d)]灌胃;对照组:同样条件下向气管内注入等量生理盐水。3组动物于实验第8周处死,取肺组织标本行病理学观察、测定肺组织及血清中MDA水平。结果染尘组及预防治疗组MDA含量明显高于对照组;预防治疗组MDA的含量明显低于染尘组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 NAC可降低SiO2所致肺纤维化大鼠MDA的产生,抑制肺纤维化的发展,减轻对肺组织的损伤。     

两种矽肺造模方法比较

目的 比较两种矽肺造模方法的优劣,并探讨一次性气管滴注法造模的最佳时间。方法 口鼻暴露染尘小鼠20只,气管滴注染尘小鼠20只,分别于染尘后第7、14、21、28天处死;对照组小鼠5只,正常饲养28d处死。检测各时间节点小鼠肺湿重、脏器系数、肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,并观察肺组织病理改变。结果 口鼻暴露法染尘21、28d小鼠肺湿重及脏器系数,7、14、21、28d小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘28d小鼠肺组织形成矽结节;气管滴注染尘后第14、21、28天小鼠肺湿重、脏器系数,第28天小鼠HYP含量,第7、14、21、28天小鼠肺纤维化评分,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染尘后第21天形成多个矽结节,第28天矽结节融合成大片状。结论 暴露法染尘28d小鼠开始形成矽结节,滴注法染尘后第21天小鼠即可完成矽肺造模。     

N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF—β的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对博莱霉素所致大鼠肺纤维化转化生长因子β（TGF—β）影响。方法取健康、雌性Wistar大鼠75只，随机分为3组：（1）博莱霉素模型组（B组）；（2）NAC治疗组（N组）：模型制备同B组，于博莱霉素处理前一周及此后每日经强饲法口服NAC（3mmol／kg）；（3）正常对照组（C组）：同样条件下向气管内注入等量生理盐水。3组动物分别于气管灌注后的第1、3、7、14及28天随机处死5只。取肺组织标本行血清及肺组织匀浆中TGF—β含量检测。结果（1）B组血清TGF—β含量呈持续增长趋势，在各时间点均高于C组及N组。B组与N组相比较，第7、14、28天差异有统计学意义（P〈0.05）。B组与C组相比较，亦是第7、14、28天差异有统计学意义（P〈0．05）。N组各时间点亦高于C组，但2组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）肺组织匀浆中TGF—β的含量变化与血清中TGF—β的含量变化有同一规律。结论NAC可降低博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清及肺组织匀浆中TGF—β水平，抑制肺纤维化的发展，对肺纤维化具有保护作用。