PD-1信号通路在非小细胞肺癌中的研究进展

摘 要：近年来,对于程序性死亡因子-1（programmed death-1,PD-1）与肿瘤免疫逃逸关系的研究已越来越深入,尤其是对以PD-1信号通路为靶点的临床肿瘤治疗研究取得了令人瞩目的进步。全文对PD-1及其信号通路的理论基础、临床前证据及以PD-1通路为靶点在NSCLC中治疗研究进展进行综述,并对其应用前景进行展望。     

Smad4 mRNA在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:通过检测非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer ,NSCLC ）组织中以及癌旁肺组织中Smad4 mRNA 的表达,分析其与不同临床病理特征之间的关系,探讨Smad4 mRNA 在非小细胞肺癌发生、发展及转移中的作用。方法:本实验共收集 40例标本作为实验组,其中男性 22例,女性 18例;年龄为 41～68岁,平均（55.3 ± 7.1）岁。选取 18例距肿瘤边缘 2 cm以上的癌旁肺组织作为对照组,采用实时定量PCR（Real-time PCR）技术检测Smad4 mRNA 的表达。结果:Smad4 mRNA 在实验组中非小细胞肺癌的表达量（2.242 5 ± 0.605 7）低于癌旁肺组织（对照组）的表达量（4.485 0 ± 1.064 8,P<0.001）。 Smad4 mRNA 在不同年龄、性别、不同病理类型 NSCLC 的中,差异无统计学意义。Smad4 mRNA 在低分化非小细胞肺癌中的表达量为1.964 8 ± 0.517 0,在高、中分化的非小细胞肺癌中的表达量为2.549 5 ± 0.554 5,二组比较（P=0.001 4）。 Smad4 mRNA 在无淋巴结转移的非小细胞肺癌表达量为2.493 8 ±0.550 2,在有淋巴结转移的非小细胞肺癌中的表达量为1.865 6 ± 0.485 9,二组比较（P=0.000 7）。 Smad4 mRNA 在有胸膜侵犯的非小细胞肺癌中的表达量为1.968 3 ± 0.548 3,在无胸膜侵犯的非小细胞肺癌中的表达量为2.466 8 ± 0.565 7,二组比较（P=0.007 8）,Smad4 mRNA 在Ⅲ期和Ⅳ期非小细胞肺癌中的表达量为1.926 8 ± 0.605 8,在Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌中表达量为2.528 1 ± 0.451 6,二组比较（P=0.001 0）,本组患者随访时间为10～76个月,40例非小细胞肺癌患者术后生存3 年以上者25例,占62.50% 。提示非小细胞肺癌中Smad4 mRNA 表达与患者预后相关（χ2=16.962 0,P<0.000 1）。 结论:Smad4 mRNA 在非小细胞肺癌组织中低表达,Smad4 mRNA 在非小细胞肺癌的发生发展中可能具有重要作用,检测Smad4 mRNA 可能对判断非小细胞肺癌的预后有一定的价值。      

PTEN和Nocth信号通路与非小细胞肺癌的关系

肺癌是一种基因性疾病,癌基因激活或抑癌基因失活是导致细胞异常增殖和凋亡障碍从而导致肺癌发生的关键。PTEN 是第一个被发现的具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因,它与肿瘤发生关系密切。Notch 信号通路在决定细胞分化方向,细胞增殖和凋亡过程中起重要作用,其异常表达常参与肿瘤的发生、发展和血管生成等。因此,针对 PTEN 及 Notch 信号通路的研究有助于对非小细胞肺癌的预防和治疗。本文结合国内外最新报道,对 PTEN 及 Notch 信号通路与非小细胞肺癌相关性研究进展作一综述。     

PD-1信号通路在非小细胞肺癌中的研究进展

免疫治疗是目前除手术、化疗、放疗及靶向治疗外,另一种能够有效改善肺癌预后的治疗方法。在各种免疫治疗方法中,免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICI)在近年来发展迅速,已成为肿瘤治疗领域的新兴疗法及研究热点。其中,程序性死亡受体1(programmed death receptor 1,PD 1)及其配体程序性死亡配体 1(programmed death receptor ligand1,PD L1)的抑制剂在多种恶性肿瘤的治疗中均取得了显著疗效,部分药物已被美国FDA批准应用于临床。该文对PD 1／PD L1抑制剂在晚期非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)患者治疗中的临床研究现状进行综述,探讨其在晚期NSCLC治疗中的临床应用价值、前景及面临的问题与挑战。     

核糖体S6蛋白激酶家族在信号通路中的作用

目的:总结国内外关于RSKs在肿瘤MAPK信号通路中的调控作用,及其调节细胞分裂、存活和分化作用的研究进展.方法:应用Medline及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"RSKs,MAPK"为关键词,检索1990-01-2008-10的相关文献,共检索到英文文献44篇和中文文献3篇.纳入标准:1)RSKS的来源和分子结构特征;2)RSKS与MAPK通路的关系;3)RSKs与细胞生长和增殖的关系;4)RSKs与疾病的关系.根据纳入标准:精选31篇文献,最后纳入25篇文献.结果:P90核糖体S6蛋白激酶(RSK)家族是胞外信号调节激酶(ERK)的底物,是Raf-MEK-ERK级联信号通路下游重要的一级效应分子,通过磷酸化大量的细胞内蛋白来调节细胞分裂、存活和分化等.结论:RSKs可能是抗肿瘤研究的潜在靶点.     

mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系

目的:研究mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系。方法:采用不同剂量的雷帕霉素抑制非小细胞肺癌细胞系A549中的mTOR信号通路;Western blot检测雷帕霉素作用后下游信号分子的表达;将A549细胞分为空白对照组及雷帕霉素作用的实验组,将对照组和实验组经不同剂量射线作用;用MTT实验（噻唑蓝）及克隆形成能力检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:雷帕霉素药物作用抑制了mTOR信号通路及下游分子的表达,经不同剂量射线照射后细胞的增殖能力和克隆形成能力显著低于对照组,凋亡显著高于对照组。结论:抑制mTOR信号通路可以增加非小细胞肺癌对放疗的敏感性。     

Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌中作用的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和细胞增殖、分化等生理过程中扮演着重要角色,同时它在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的肿瘤干细胞(cancerstemcell, CSCs)的维持、血管生成和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymaltransition, EMT)中起着至关重要的作用。有多项研究证实Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC中被显著激活,随着对Wnt/β-catenin信号通路的研究,靶向Wnt/β-catenin信号通路疗法在NSCLC的治疗中取得了显著成效。本文对Wnt/β-catenin信号通路在NSCLC发生和发展中的作用以及治疗研究进行概述。     

整合素α5β1和细胞外信号调节激酶信号传导通路在非小细胞肺癌中的作用及其相关性研究

研究整合素α5β1 及磷酸化ERK1/2 （p-ERK1/2） 在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及整合素α5β1 和ERK1/2 信号通路在人肺癌A549 细胞生长和迁移中的作用。方法：采用免疫组织化学法和免疫印迹（Western blot）法检测41 例NSCLC 组织和15例正常肺组织中整合素α5β1 及p-ERK1/2 的表达并分析两者的相关性,体外培养肺癌A549 细胞,以Anti-α5β1 或ERK 激酶抑制剂PD98059 作为工具药物,采用四甲基偶氮唑盐比色 （MTT） 法和 Annexin-V FITC PI 双染色法检测A549 增殖和凋亡,采用Western blot 检测A549 中MMP-9 蛋白水平。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot 检测Anti-α5β1 处理后A549 中ERK1/ 2 蛋白和mRNA 表达水平的变化。结果：人NSCLC 组织中整合素α5β1 及p-ERK1/2 阳性表达率（分别为58.53%,65.52%）明显高于正常肺组织（分别为26.67%, 20.00%）（P<0.01）。整合素α5β1与p-ERK1/2 表达均与病理分级（分别为P<0.001,P=0.030）、淋巴结转移（分别为P=0.014,P<0.001）、临床分期（分别为P=0.027,P=0.038）相关。整合素α5β1 与p-ERK1/2表达具有相关性（r=0.375, P<0.05）。经Anti-α5β1 或PD98059 处理后,A549 细胞增殖效应和早期凋亡细胞百分率增加,MMP-9 的表达均明显减弱。经Anti-α5β1 处理后A549 细胞中ERK 的mRNA 和蛋白表达受到抑制,ERK1/2 的磷酸化水平显著减少。结论： 整合素α5β1 及p-ERK1/2 在人NSCLC 组织中高表达,Anti-α5β1 在下调了细胞内ERK 的mRNA 和蛋白磷酸化的同时,可以明显抑制A549 细胞的增殖和MMP-9 蛋白表达,表明整合素α5β1 可能介导ERK1/2 信号转导通路参与了非小细胞肺癌中的异常增殖和迁移的调控。

     

EML4-ALK在非小细胞肺癌中的研究进展

<正>肺癌是目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,每年有超过100万患者死于肺癌。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者5年生存率仅为13%,化疗仍为主要的治疗手段。针对酪氨酸激酶的靶向治疗越来越受到重视,2009年     

GATA4基因甲基化及GATA4对非小细胞肺癌生长的影响及其作用机制

目的 探讨GATA4在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的甲基化状态和GATA4对NSCLC细胞生长的作用及其可能机制。方法 收集2017年7月—2018年6月于新疆医科大学第一附属医院接受肺癌根治术的78例NSCLC患者癌组织及其癌旁组织标本,以及人肺癌细胞株A549、HCC827、NCI-H1299和人正常肺上皮细胞BEAS-2B,用MSP和qMSP检测GATA4基因甲基化状态,RT-PCR和Western blot检测GATA4表达。将sh-GATA4-1（sh-GATA4组）、sh-NC、GATA4过表达载体（pLV-GATA4组）及其空载体对照慢病毒液（pLV-NC组）分别转染至肺癌A549细胞中,同时设置空白对照组（Blank组）,用Western blot检测GATA4、p-ERK、ERK、p-p38和p38蛋白表达,CCK-8试剂盒检测细胞活力,细胞克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 NSCLC组织中GATA4基因甲基化率以及p-ERK、p-p38和Bcl-2蛋白表达水平均高于癌旁组织（P＜0.001）,GATA4 mRNA表达、GATA4和Bax蛋白表达均低于癌旁组织（P＜0.001）。GATA4基因甲基化程度与p-ERK、p-p38和Bcl-2蛋白表达水平呈正相关（P＜0.05）;与GATA4 mRNA表达水平,GATA4、Bax蛋白表达水平呈负相关（P＜0.05）。NSCLC细胞中GATA4呈甲基化状态,人正常肺上皮细胞BEAS-2B表现为去甲基化状态,GATA4 mRNA和蛋白表达低于BEAS-2B细胞（P＜0.01）。与pLV-NC组比较,pLV-GATA4组细胞中GATA4 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率升高（P＜0.001）,细胞活力、细胞克隆数、p-ERK/ERK和p-p38/p38蛋白表达水平降低（P＜0.05）;sh-GATA4组细胞中GATA4 mRNA、蛋白表达和细胞凋亡率低于sh-NC组（P＜0.001）,细胞活力、细胞克隆数、p-ERK/ERK和p-p38/p38蛋白表达高于sh-NC组（P＜0.05）。结论 GATA4基因在非小细胞肺癌中呈高甲基化状态并诱导GATA4基因表达降低,GATA4过表达可抑制肺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,可能通过调控MAPK通路实现。     

ＫＩＦ４Ａ在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的相关性

目的　研究ＫＩＦ４Ａ蛋白在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中的表达及其与预后的相关性。方法　选取术后经病理证实的１１５例ＮＳＣＬＣ和１９例肺良性病变（５例肺结核、４例支气管扩张、６例肺大疱、４例炎性假瘤）的标本,运用免疫组化ＥｎＶｉｓｉｏｎ法检测ＫＩＦ４Ａ蛋白的表达,采用χ２检验分析ＫＩＦ４Ａ蛋白在ＮＳＣＬＣ组织和良性组织中的表达差异及ＮＳＣＬＣ中ＫＩＦ４Ａ蛋白表达与临床病理特征的相关性。采用Ｋａｐｌａｎ-Ｍｅｉｅｒ生存分析和Ｃｏｘ回归法分析ＫＩＦ４Ａ蛋白在ＮＳＣＬＣ组织中表达和预后的关系。结果　ＫＩＦ４Ａ在ＮＳＣＬＣ组织中阳性表达率为６０％,显著高于对照组的３１.６％,与Ｔ分期、淋巴结转移明显相关。生存分析提示,ＫＩＦ４Ａ阳性表达的ＮＳＣＬＣ患者预后较差（Ｐ＝０.００３）;Ｃｏｘ回归分析结果表明,ＫＩＦ４Ａ蛋白也是影响ＮＳＣＬＣ预后的独立危险因素（相对危险度１.９４４,Ｐ＝０.０３２）。结论　ＫＩＦ４Ａ蛋白在ＮＳＣＬＣ组织中的阳性表达率高于肺良性病变组织;ＫＩＦ４Ａ蛋白的高表达与ＮＳＣＬＣ患者预后相关,可以作为判断预后的参考指标。     

非小细胞肺癌组织中ABCG4表达与耐药的相关性研究

目的 检测ABCG4 mRNA和蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,分析其表达与病理类型及NSCLC细胞耐药的相关性,为研究其耐药机制提供理论基础。方法 采用免疫组化染色、RT-PCR及Western blotting检测ABCG4在NSCLC组织中的表达;MTT法检测NSCLC对化疗药物的敏感性,分析药物敏感性与ABCG4 mRNA和蛋白表达的相关性。结果 ABCG4蛋白阳性主要定位于细胞膜和胞质,其在NSCLC组织中的阳性表达率为73.9%（68/92）,而在30例癌旁正常肺组织中几乎不表达。ABCG4蛋白在肺鳞癌和肺腺癌中的阳性表达率分别为67.3%和81.4％,差异无统计学意义（P＞0.05）。环磷酰胺、吉西他滨、多柔比星、紫杉醇和顺铂在NSCLC组织中的药物敏感程度与其相应组织中ABCG4蛋白阳性表达有关（rs均＞0.3,P均＜0.05）;除紫杉醇外,环磷酰胺、吉西他滨、多柔比星和顺铂在NSCLC组织中的药物敏感程度与其相应组织中ABCG4 mRNA表达量有关（P均＜0.05）。结论 ABCG4在肺鳞癌、肺腺癌中高表达,其表达程度与NSCLC部分化疗药物耐药有关,为进一步研究ABCG4在NSCLC中的表达及可能耐药机制提供实验依据。     

Role of pemetrexed in non-small cell lung cancer

Pemetrexed was approved for the treatment of relapsed or chemotherapy refractory non-small cell lung cancer patients, as it produced similar response and survival outcomes and less toxicity as compared to taxotere. Pemetrexed in combination with platinum analogs or with gemcitabine or vinorelbine, produce equivalent responses and overall survival results compared to combinations of platinum analogs with other drugs. The role of bevacizumab and the inhibitors of epithelial growth factor receptor also should be evaluated in selected patients with NSCLC treated with pemetrexed combinations. Further increases in drug dose may be possible using transfer of drug resistance genes in hematopoietic stem cells.     

非小细胞肺癌细胞分泌蛋白谱的鉴定

目的筛选非小细胞肺癌潜在的早期诊断标志物，对非小细胞肺癌细胞系A549的分泌蛋白进行鉴定。方法收集A549细胞培养上清中的蛋白进行蛋白双向电泳，应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）及生物信息学鉴定A549凝胶上特有的蛋白质点。结果鉴定出人属的蛋白质点17个，包括α肌动蛋白，γ肌动蛋白，α烯醇酶（ENO1），锰-超氧化物歧化酶（MnSOD），谷胱甘肽S转移酶P（GSTP1—1），Dihydrodiol dehydrogenase 2（DDH），磷酸甘油酸变位酶1（PGAM1），葡萄糖依赖性胰岛素释放肽受体（GIPR），肽基脯氨基顺反异构酶（PPIA），磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP），蛋白基因产物9．5（PGP9．5），Peroxiredoxin1（PDX1），Galectin-1及专利蛋白WO0222660等。结论该研究为非小细胞肺癌早期诊断标志物的筛选提供了新的方法和候选分子。     

非小细胞肺癌患者血浆OLFM4水平及其临床意义分析

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆OLFM4水平及其临床意义。方法 收集本院确诊的272例NSCLC患者的外周血样本（NSCLC组）,采用酶联免疫吸附法检测其血浆OLFM4水平,分析血浆OLFM4水平与临床病理参数（性别、年龄、肿瘤大小、分化类型、临床分期、T分期、吸烟史和淋巴结转移）的关系;选取同期300例健康体检者的外周血样本作对照。检测156例NSCLC组织样本中OLFM4水平,采用Person相关分析法分析组织与血浆中OLFM4水平的相关性。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价血浆OLFM4水平在NSCLC早期诊断的效能。结果 NSCLC组血浆中OLFM4水平为（77.39±15.13）μg/ml,高于对照组的（14.56±6.94）μg/ml,差异有统计学意义（P<0.05）;血浆OLFM4水平与NSCLC的肿瘤大小、TNM分期、T分期及淋巴结转移有关,其中肿瘤大小>3 cm、TNM Ⅲ+Ⅳ期、T3+T4期及有淋巴结转移者的血浆OLFM4水平均高于对应项（P<0.05）。NSCLC患者血浆中OLFM4水平与组织中OLFM4表达呈正相关（r=0.641,P<0.05）。血浆OLFM4水平诊断NSCLC的曲线下面积（Az）为0.862（95%CI：0.752～0.937）,最佳截断值为2711 μg/ml,该截断值的灵敏度和特异度分别为81.3%和77.4%。结论 OLFM4在NSCLC患者血浆中高表达,与肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移有关,可能在NSCLC发生发展中有一定作用;且在NSCLC早期诊断有较好价值。     

Dickkopf家族蛋白在非小细胞肺癌中的作用机制和治疗应用的研究进展

非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌的80%~85%,是全世界发病率和致死率极高的恶性肿瘤。最初NSCLC对现有治疗的反应良好,但最终还是产生了耐药性。因此,有必要探索有效且新颖的治疗方法。随着对NSCLC研究的深入,发现Dickkopf家族蛋白(DKKs)的信号传导在NSCLC发展中扮演重要角色,DKKs是Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子,并与NSCLC细胞增殖、转移和侵袭密切相关。本文主要介绍了DKKs家族成员在NSCLC中的作用机制,讨论了DKKs在NSCLC治疗中的潜力,为进一步防治NSCLC提供了新思路。     

Current treatment landscape for oligometastatic non-small cell lung cancer

The management of patients with advanced non-small cell lung carcinoma (NSCLC) has undergone major changes in recent years. On the one hand, improved sensitivity of diagnostic tests, both radiological and endoscopic, has altered the way patients are staged. On the other hand, the arrival of new drugs with antitumoral activity, such as targeted therapies or immunotherapy, has changed the prognosis of patients, improving disease control and prolonging survival. Finally, the development of radiotherapy and surgical and interventional radiology techniques means that radical ablative treatments can be performed on metastases in any location in the body. All of these advances have impacted the treatment of patients with advanced lung cancer, especially in a subgroup of these patients in which all of these treatment modalities converge. This poses a challenge for physicians who must decide upon the best treatment strategy for each patient, without solid evidence for one optimal mode of treatment in this patient population. The aim of this article is to review, from a practical and multidisciplinary perspective, published evidence on the management of oligometastatic NSCLC patients. We evaluate the different alternatives for radical ablative treatments, the role of primary tumor resection or radiation, the impact of systemic treatments, and the therapeutic sequence. In short, the present document aims to provide clinicians with a practical guide for the treatment of oligometastatic patients in routine clinical practice.