肾上腺髓质增生大鼠模型酷氨酸羟化酶基因的表达

目的：研究肾上腺髓质增生(AMH)大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因表达水平。方法：Wistar大鼠随机分为2组：正常对照组(NC组)和肾上腺髓质增生组(AMH组)。用利血平皮下注射制备肾上腺髓质增生大鼠模型。6周后取出肾上腺组织，用免疫组织化学和原位杂交法分别测定该模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶蛋白质及mRNA表达，检测血清中的去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和24h尿3-甲氧4-羟基苦杏仁酸(VMA)的含量，同时测量肾上腺髓质百分数以反映肾上腺髓质增生的程度。结果：肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶蛋白质及mRNA表达均明显增强，血清中的NE，E和24h尿VMA的含量明显升高，肾上腺髓质百分数明显升高。结论：肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因表达增强。     

肾上腺交感神经离断术对利血平诱导大鼠肾上腺髓质增生的影响

目的:探讨大鼠肾上腺交感神经离断术在利血平诱导的大鼠肾上腺髓质增生中的作用及肾上腺交感神经与肾上腺髓质增生的关系。方法:雄性Wistar大鼠60只随机分为A、B、C、D 4组各15只,A组为单侧肾上腺交感神经离断组,B组为假手术组,C组为肾上腺髓质增生组,D组为正常对照组。C组用利血平诱导肾上腺髓质增生大鼠模型,A、B组手术7 d后同C组给予相同剂量利血平42 d。分别于停药后第14,28,56天时测大鼠24 h尿3-甲基-4-羟基苦仁酸(VMA)含量及血浆儿茶酚胺(CA)水平,处死大鼠,取肾上腺做病理切片,观察肾上腺髓质增生情况并测肾上腺髓质百分数。结果:在各观察阶段,A、B、C组大鼠24 h尿VMA和血浆CA含量明显高于正常对照组(P<0.05),A组手术侧肾上腺百分数明显低于未手术侧(P<0.05),而与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论:大鼠肾上腺交感神经离断术可抑制利血平诱导大鼠肾上腺髓质增生的作用,利血平通过肾上腺交感神经的介导作用于大鼠肾上腺髓质引起增生,肾上腺交感神经离断术可能对肾上腺髓质增生有治疗作用。     

大鼠肾上腺髓质增生模型的建立

目的 :建立大鼠肾上腺髓质增生 (AMH)模型。方法 :A、B、C组 (实验组 )分别皮下注射 0 .1%利血平 1.0ml (kg·d) ,2 5 %苯甲酸钠咖啡因 1.0ml (kg·d) ,0 .1%利血平和 2 5 %苯甲酸钠咖啡因各 [0 .5ml (kg·d) ],D组 (对照组 )皮下注射 0 .9%生理盐水 [1.0ml (kg·d) ],观察大鼠第 6周血压 ,2 4h尿中 3 甲氧 4 羟基苦杏仁酸 (VMA)的含量。肾上腺的病理变化。结果 :实验组与对照组比较 ,血压均无显著性差异 (P均 >0 .0 5 )。 2 4h尿中VMA含量有显著性差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。髓质百分数有显著性差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :用利血平、苯甲酸钠咖啡因或者二者联合给药均可成功建立肾上腺髓质增生模型     

Survivin及Ki-67在大鼠肾上腺增生髓质中的表达及其相关性研究

目的：研究Survivin及Ki-67在大鼠肾上腺增生髓质中的表达,以探讨Survivin及Ki-67在肾上腺髓质增生发生发展中的作用及二者相关性。方法：健康雄性Wistar大鼠40只随机分为2组：A组(肾上腺髓质增生组),B组(正常对照组),每组20只。A组用利血平0．4 mg／(kg·d)诱导建立肾上腺髓质增生的大鼠模型,B组用生理盐水0．4 mg／(kg·d),于第6周末用免疫组织化学SP技术检测两组大鼠肾上腺髓质组织中Survivin及Ki-67的表达。结果：在增生组和正常对照组中,Survivin的阳性表达率分别为15／18(83．33％),5／20(25．00％);Ki-67的阳性表达率分别为13／18(72．22％),4／20(20．00％)。肾上腺髓质增生组的阳性表达率明显高于正常对照组(F<0．01),并且Survivin和Ki-67之间有一定相关性(r=0．388)。结论：Survivin及Ki-67基因的过度表达与大鼠肾上腺髓质增生发生发展存在一定的关系,并且二者之间存在一定协同性,共同促进肾上腺髓质增生的发生。     

细胞凋亡调控基因bcl-2和bax在肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中的表达与意义

目的研究肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织细胞凋亡抑制基因bcl-2和促进基因bax在肾上腺髓质增生发病机制中的作用。方法用免疫组化SP法对肾上腺髓质增生大鼠和正常对照组大鼠的肾上腺组织细胞凋亡相关基因bcl-2和bax的表达进行检测。结果bcl-2的表达,肾上腺髓质增生大鼠组阳性细胞数为(89.3±10.86)个,正常对照组为(21.2±7.65)个(P<0.05)。bax的表达,肾上腺髓质增生大鼠组阳性细胞数为(16.1±4.62)个,正常对照组为(54.8±9.31)个(P<0.05)。结论细胞凋亡调控基因参与了肾上腺髓质增生的病理过程。在此调控网络中,bcl-2基因发挥了较为重要的作用,bax基因的表达减少。     

天麻对大鼠下丘脑及肾上腺酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶的影响

目的:实验观察灌胃天麻水提取物对大鼠下丘脑和肾上腺组织酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺-β-羟化酶(DBH)遗传因子的表达影响,探讨天麻的镇静作用机制。方法:分别取不同剂量组(10、20、40、80 mg/kg灌胃)和不同时间组(灌胃后2、4、6、8 h)大鼠的下丘脑和肾上腺组织,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与相应对照组(生理盐水灌胃)比较TH及DBH遗传因子的表达。结果:3个剂量组(20、40、80 mg/kg)大鼠下丘脑组织的TH及DBH遗传因子的表达与对照组相比均明显降低(为P<0.05,P<0.01,P<0.01)。肾上腺组织的TH表达在4个剂量组(10、20、40、80 mg/kg)与对照组相比都明显降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01);DBH表达在3个剂量组(20、40、80 mg/kg)与对照组相比都明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。天麻提取物灌胃(40 mg/kg)4小时及6小时后,下丘脑及肾上腺组织的TH和DBH遗传因子的表达与对照组相比均明显降低(均为P<0.01)。结论:天麻可降低下丘脑和肾上腺组织的酪氨酸羟化酶及多巴胺-β-羟化酶的活性。     

去肾动脉交感神经对自发性高血压大鼠交感肾上腺系统的影响*

目的 研究去肾动脉交感神经对自发性高血压大鼠肾上腺、下丘脑等神经内分泌器官交感神经活动的影响。方法 16只12周龄的雄性自发性高血压大鼠随机分为去肾神经组（RDNX组）和假手术组（Sham组）,8只12周龄的雄性Wistar大鼠作为正常对照组（WKY组）。RDNX组采用苯酚消蚀法进行双侧去肾动脉交感神经术,而Sham组和WKY组进行假手术。分别检测各组大鼠术前和术后2周的收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）、心率（HR）和血清去甲肾上腺素（NE）含量,以及术后肾、肾上腺和下丘脑NE含量,免疫组织化学法观察肾上腺髓质和下丘脑视旁核酪氨酸羟化酶（TH）染色情况。结果 RDNX组和Sham组术前SBP、DBP、MAP高于WKY组（P?<0.05）;RDNX组与Sham组术前SBP、DBP、MAP差异无统计学意义（P?>0.05）;3组大鼠SBP、DBP、MAP术前与术后差值比较,差异有统计学意义（P?< 0.05）;RDNX组SBP、DBP、MAP术前与术后差值大于Sham组和WKY组（P?<0.05）。3组大鼠术后肾脏、肾上腺和下丘脑NE含量比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,Sham组术后肾脏、肾上腺和下丘脑NE含量高于RDNX组和WKY组。免疫组织化学结果显示,3组大鼠术后下丘脑视旁核和肾上腺髓质TH蛋白表达量比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,Sham组术后下丘脑视旁核细胞TH蛋白表达量高于RDNX组和WKY组,Sham组肾上腺髓质细胞TH蛋白表达最高,WKY组其次,RDNX组最低。结论 去肾动脉交感神经可减少自发性高血压大鼠肾上腺、下丘脑等神经内分泌器官的交感神经活动,并显著降低动脉血压。     

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用

目的 探讨肾上腺髓质素在脑缺血再灌注大鼠脑内的表达情况及其对再灌注损伤的保护作用.方法 采用拴线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,阻断血流2 h后进行再灌注.应用免疫组织化学染色法检测不同时间点大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况,并进行动态观察.结果 正常对照组大鼠脑内即有肾上腺髓质素表达,假手术组术后肾上腺髓质素表达略有增加,但与正常对照组相比差异无显著性意义(P＞0.05);大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多,与正常对照组及假手术组相比差异均有显著性意义(P＜0.05);大鼠脑缺血再灌注后缺血侧和缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性细胞均增多,但以缺血侧区域增多最为明显.动态观察发现,脑缺血再灌注2 h后,肾上腺髓质素免疫阳性细胞即增多,缺血再灌注6 h达高峰,至1周仍明显增多.结论 脑缺血再灌注后肾上腺髓质素表达增强,对脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

手术对肾上腺交感神经内分泌的影响

1.肾上腺交感神经内分泌增加是人体对创伤反应的基本规律。文中报导8例不同类型的手术病人,在手术前后作了血浆E、NE、17-OHCS及24小时尿中VMA、E、17-OHCS、17-KS的排出的一系列观察。 2.胸腔内大手术、低血压等情况对内分泌的影响显著。 3.重大手术时血浆中E水平有明显升高,其规律性较N E显著,切除双侧肾上腺髓质后,E的排出便下降至极低水平。 4.肝硬化伴有明显的肝功能损害时,对手术中皮质激素的代谢有明显影响。 5.文中简单讨论皮质激素、肾上腺素与创伤反应的关系问题。     

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用

目的探讨肾上腺髓质素与脑缺血再灌注损伤的关系。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，阻断血流2h后进行再灌注。应用免痘组织化学染色法拴测不同时间段大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况，并进行动态观察。结果正常大鼠脑内即有肾上腺髓质表达，假手术后肾上腺髓质素表达略有增加，但与正常对照组相比无明显差异，P〉0．05；大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多，与正常对照组及假手术组相比差异显著，均P＜0．05；大鼠脑缺血再灌注后缺血侧既缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性知胞均增多，但以缺血侧区域增多最为明显，P〈0．05。动态观察发现，脑缺血再灌注2h后，肾上腺髓质素免痘阳性细胞即增多，缺血再灌注6h迭高峰，至1周左右仍明显增多。结论脑缺血再灌注后肾上腺髓质表达增强。     

人参皂苷Rg1对多巴胺能神经元的保护作用及ICI182,780的阻断作用

目的研究人参皂苷Rg1对去卵巢（ovariectomized,OVX）帕金森病（Parkinson disease,PD）模型大鼠黑质（substantianigra,SN）酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）表达的影响以及ICI182,780的阻断作用。方法雌性Wistar大鼠随机分为正常组、OVX组、6-hydroxydopamine（6-OHDA）组、Rg1＋6-OHDA组及ICI＋Rg1＋6-OHDA组。大鼠OVX后应用6-OHDA单侧损毁内侧前脑束（medial forebrain bundle,MFB）制备PD模型,腹腔注射Rg1或侧脑室同时给予雌激素受体（estro-gen receptor,ER）拮抗剂ICI182,780,免疫组织化学技术检测TH阳性神经元,RT-PCR技术检测SN内TH基因的表达。结果OVX大鼠SN内TH基因的表达较正常大鼠明显降低（P〈0.05）。6-OHDA制备的PD模型组损毁侧SN内TH阳性神经元数量及TH基因表达较健侧明显降低（P〈0.01）。与模型组相比,Rg1可显著提高损毁侧大鼠SN内TH阳性神经元数量及TH基因的表达（P〈0.01）。此效应可以被ER拮抗剂ICI182,780完全阻断（P〈0.01）。结论ER拮抗剂ICI182,780可以阻断人参皂苷Rg1对OVX PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用。     

Study on molecular mechanism of liver yang ascending syndrome in hypertension

ＬｉｖｅｒＹａｎｇＡｓｃｅｎｄｉｎｇＳｙｎｄｒｏｍｅ（ＬＹＡＳ）ｉｓｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐａｌＳｙｎｄｒｏｍｅ ｔｙｐｅｏｆＬｉｖｅｒｄｉｓｏｒｄｅｒｉｎＴＣＭ,ｍｏｓｔｌｙｓｅｅｎｉｎｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ,（1）ａｎｄｉｔｓｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏ ｌｏｇｉｃａｌｂａｓｉｓｈａｓｂｅｅｎｄｅｅｐｌｙｓｔｕｄｉｅｄ,（2,3）　ｔｈｏｕｇｈｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｅｖｅｌｏｎｔｈｉｓＳｙｎｄｒｏｍｅｈａｓｎｏｔｂｅｅｎｓｅｅｎ．Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙ,ｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｐｒｅｖｉｏ…     

Therapeutic effect of human amniotic epithelial cell transplantation into the lateral ventricle of hemiparkinsonian rats

Background Human amniotic epithelial cells （HAECs） are able to secrete biologically active neurotrophins such as brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin-3, both of which exhibit trophic activities on dopamine neurons. Previous study showed that when human amniotic epithelial cells were transplanted into the striatum of 6-hydroxydopamine （6-OHDA）-induced Parkinson disease rats, the cells could survive and exert functional effects. The purpose of this study was to investigate the survival and the differentiation of human amniotic epithelial cells after being transplanted into the lateral ventricle of Parkinson＇s disease （PD） rats, and to investigate the effects of grafts on healing PD in models. Methods The Parkinson＇s model was made with stereotactic microinjection of 6-hydroxydopamine （6-OHDA） into the striatum of a rat. The PD models were divided into two groups： the HAECs group and the normal saline （NS） group. Some untreated rats were taken as the control. The rotational asymmetry induced by apomorphine of the HAECs group and the NS group were measured post cell transplantation. The expression of nestin and vimentin in grafts were determined by immunohistology. Ten weeks after transplantation the density of tyrosine hydroxylase positive cells in the substantia nigra of the HAECs group, NS group and the untreated group was determined. The differentiation of grafts was determined by TH immunohistology. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to determine monoamine neurotransmitter levels in the striatum. Results The rotational asymmetry induced by apomorphine of the HAECs group was ameliorated significantly compared to the NS group two weeks after transplantation （P 〈0.01）. The grafts expressed nestin and vimentin five weeks after transplantation. TH immunohistochemistry indicated that the TH positive cells in the substantia nigra of the HAECs group increased significantly compared to the NS group （P 〈0.01）. Tyrosine hydroxylase （TH） positive cells in the substantia nigra of the HAEC group and the NS group were decreased compared to the untreated group （P 〈0.01）. Dopamine and DOPAC levels in the striatum of the HAECs group increased significantly compared to the NS group （P 〈0.05）. Homovanillic acid （HVA） levels in the striatum of the HAECs group increased significantly compared to the NS group （P 〈0.01）. In addition dopamine, DOPAC, and HVA levels in the striatum and dopamine levels in the cerebrospinal fluid of the HAECs group and the NS group were decreased compared to the untreated group （P 〈0.05）. Conclusions Human amniotic epithelial cells could be used to ameliorate the rotational asymmetry induced by apomorphine of the PD models. This could have been due to the increased content of dopamine and its metabolic products, DOPAC and HVA, in the striatum in the PD models.     

建立类似于绝经期妇女帕金森病大鼠模型的实验研究

目的探讨利用6-羟基多巴(6-OHDA)制备模拟绝经期妇女帕金森病的大鼠模型。方法应用6-OHDA制备OVX PD模型大鼠,应用免疫组织化学染色、高效液相色谱法等技术对大鼠黑质(SN)的酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目、纹状体多巴胺(DA)及其代谢物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量进行考察并评价。结果阿朴吗啡可诱导出明显的PD大鼠旋转行为;大鼠损伤侧黑质TH阳性神经元数量较健侧显著减少(P<0.01),纹状体DA及其代谢物DOPAC和HVA含量也较健侧明显减少(P<0.01)。结论本模型具有绝经期妇女帕金森病的基本的病理特点。     

绝望行为模型大鼠脑去甲肾上腺素能和5-羟色胺能神经元中fos蛋白的表达

目的 了解绝望行为模型大鼠脑去甲肾上腺素(NE)能和5-羟色胺(5-HT)能神经元中fos蛋白(Fos)的表达情况.方法 采用不同强度强迫游泳应激造成绝望行为(BD组)模型和单纯强迫游泳模型(对照组)大鼠各10只,在其蓝斑(LC)切片上做抗Fos和抗酪胺酸羟化酶(TH)免疫组化双重染色,在中缝背核(RD)切片上做抗Fos和抗色氨酸羟化酶(TPH)免疫组化双重染色,40倍光镜F观察和计数每组LC中的TH阳性细胞数和TH/Fos 阳性细胞数、RD中的TPH阳性细胞数和5-HT/Fos阳性细胞数,并进行2组之间的比较.结果 与对照组相比,BD组LC的TH阳性细胞胞体大、染色深,TH/Fos阳性细胞数[BD组(8.9±0.7)个,对照组(3.9±0.9)个,P<0.01]明显增加,RD中出现TPH/Fos 阳性细胞[BD组(5.0±0.8)个,对照组0个,P<0.01].结论 中枢NE能神经元代谢增强导致该神经元变性件改变,可能与抑郁症的发病有关.RD巾的5-HT能神经元在正常情况下可能不参与或很少参与生理活动,只有在较强烈的应急状态下才开始被启动.     

Experimental Study on Heterograft of Glomus Cells of Carotid Body for Hemiparkinsonian Rats

Parkinson disease(PD) is a neuro- degenerativedisorder commonly found in middle- aged or olderpeople,which ischaracterized by the loss ofmelanin-containing neurons in the substantia nigra pars com-pacta(SNpc) and a reduction in dopamine in stria-tum.After several years of treatment by dopamineprecursor,L- dihydroxyphenylalanine (L - DOPA ) ,and due to the reduced effectof L- DOPA and dyski-nesia,some PD patients need to be switched to othertherapeutic approaches such as neural transplant…     

Experimental Study on Heterograft of Glomus Ccl ls of Carotid Body for Hemioarkinsonian Rats

Summary: To observe the effects of heterograft of glomus cells of carotid body on hemiparkinsonian rat models, rats with unilateral 6-hydroxydopamine (6-OHDA)-induced lesions of the right dopamin ergic neurons of substantia nigra received intrastriatal glomus cells heterograft. Apomorphine-induced rotation was monitored for 30 rmin at various time points after grafting. The striata were cut and ex-amined for dopamine content by HPLC and for immunohistochemical staining of tyrosine hydroxylase positive neurons (TH ) at the end of the experiments. The results showed that apomorphine-induced rotational behavior was significantly reduced for 12 weeks and the dopamine contents were signifi cantly elevated after grafting (P＜0.01), and TH cells survived better. The present study demon strates that intrastriatal heterograft of glomus cells within carotid body in rats with 6-OHDA-elicited lesions could reduce apomorphine-induced rotational behavior and elevate the dopamine contents and numbers of TH cell surviving within striatum, and can serve as a new and effective alternative for Parkinson disease.     

丹参酮ⅡA对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用及其机制

目的：探讨丹参酮ⅡA对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱发的帕金森病（PD）模型小鼠中脑黑质区多巴胺能神经元损伤的影响,阐明其对多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。 方法：将60只C57BL/6N小鼠随机分为对照组、PD模型组和丹参酮ⅡA组,每组20只。PD模型组和丹参酮ⅡA小鼠采用MPTP制备PD小鼠模型,丹参酮ⅡA组制备PD模型后腹腔注射丹参酮ⅡA,观察各组小鼠行为学表现,采用免疫组织化学、免疫蛋白印迹和免疫荧光双标法检测各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶（TH）、整合素超家族成员Ⅰ型跨膜蛋白（cd11b）、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）氧化酶、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性细胞数和蛋白表达水平。 结果：与对照组比较,PD模型组小鼠出现典型的PD样症状;PD模型组小鼠中脑黑质区TH阳性神经元数和蛋白表达水平较对照组减少约45%和50%,cd11b、p47-phox和iNOS阳性细胞数和蛋白表达水平增加（P<0.01）。与PD模型组比较,丹参酮ⅡA组小鼠PD样症状减轻,黑质区TH阳性神经元数量和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,cd11b、p47-phox和iNOS阳性细胞数明显减少（P<0.01）,蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。 结论：丹参酮ⅡA可在一定程度上阻抑MPTP诱导的PD模型小鼠中脑黑质区多巴胺能神经元的丢失,其神经保护作用机制可能与抑制小胶质细胞激活、NADPH氧化酶和iNOS表达有关。     

慢性吗啡给药诱导大鼠地点偏好和被盖腹侧区酪氨酸羟化酶同步变化

目的：探讨药物依赖行为和酪氨酸羟化酶在成瘾过程中的相互关系．方法：建立大鼠条件性地点偏好模型，使用免疫印迹法在整个成瘾过程中对腹侧被盖区和伏隔核内的酪氨酸羟化酶免疫反应性进行监测．结果：大鼠地点偏好和腹侧被盖区酪氨酸羟化酶水平均在实验第3日发生剧烈变化，之后表现出相似的变化趋势．结论：动物成瘾行为与酪氨酸羟化酶的变化密切相关，酪氨酸羟化酶的调节可能是吗啡成瘾的分子基础．