趋化因子受体CXCR3 mRNA在寻常型银屑病患者皮损及外周血单个核细胞中的表达

目的 研究手常型银屑病患者皮损及外周血单一核细胞(PBMC)中趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达及其临床意义.方法 RT-PCR法测定20例银屑病患者皮损和10例健康正常人皮肤及其PBMC中CXCR3 mRNA的表达;直线相关性分析方法分析银屑病患者皮损及PBMC中CXCRB的表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系.结果 银屑病患者皮损及PBMC中CXCR3 mKNA表达相对含量分剐为(1.44±0.72)和(1.49±0.10),正常人皮肤及PBMC中CXCR3 mRNA相对含量为(0.51±0.10)和(0.45±0.09).经统计学分析,银屑病皮损及外周血PBMC中CXCR3的mRNA表达明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);银屑病患者CXCR.3 mRNA的表达水平与PASI呈正相关(P<0.05).结论 趋化性因子受体CXCR3可能参与了在银屑病的发病过程.     

IL-21及其受体在银屑病患者外周血和皮损组织中的表达及意义

目的探讨IL-21及其受体在斑块型银屑病患者外周血PBMC和皮损组织中的表达情况及临床意义。方法采用流式细胞仪检测斑块型银屑病58例患者及20例健康对照者外周血PBMC中IL-21、IL-21R的表达;采用实时定量RT-PCR（quantitative real-time, RT-PCR）法检测25例银屑病和15例正常人外周血PBMCs和皮肤组织中IL-21、IL-21R mRNA的表达情况;采用Western印迹法检测皮肤组织中IL-21和IL-21R的表达情况;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测PBMC培养上清液中IL-21的分泌水平。结果流式细胞仪检测发现银屑病患者PBMC中IL-21和IL-21R占CD4+T细胞的百分率明显增加（P<0.01）;Real-time PCR发现IL-21、IL-21R mRNA在银屑病患者的PBMC和皮肤组织中表达均较健康对照者增高（P<0.01,P<0.05）;Western印迹法显示IL-21和IL-21R蛋白在银屑病患者的皮损中表达增高（P<0.01）;ELISA检测发现培养上清中IL-21分泌水平增加（P<0.01）。结论斑块型银屑病患者PBMC和组织中IL-21和IL-21R的表达水平均较健康对照者升高,IL-21可能参与了银屑病的发病过程,并可能成为一个潜在的治疗靶点。     

程序性死亡因子5在Graves病和桥本甲状腺炎中表达的初步研究

目的探讨促凋亡基因PDCD5 mRNA在初诊Graves病（GD）和桥本甲状腺炎（HT）患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达。方法半定量RT-PCR法测定50例GD和30例HT患者PBMC中PDCD5 mRNA表达的阳性率和表达水平。结果GD和HT患者PBMC中PDCD5 mRNA表达的阳性率和表达水平均高于正常对照组,其中HT患者PDCD5 mRNA表达的阳性率显著高于正常对照组（P〈0.05）,GD、HT、正常对照三组间PDCD5 mRNA表达水平差异有统计学意义（P〈0.01）,HT组PDCD5 mRNA表达水平显著高于GD组（P〈0.01）。患者PDCD5 mRNA表达水平与甲状腺微粒体抗体（TM-Ab）、甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab）呈显著正相关（P〈0.01）,与血清T4水平及｜lgTSH｜呈显著负相关（P〈0.05）。结论PDCD5 mRNA在GD和HT患者PBMC中表达升高,可能与GD和HT淋巴细胞凋亡异常有关。     

外周血单个核细胞HBV的复制状态与干扰素-γ表达和分泌的关系

目的: 研究HBV侵犯外周血单个核细胞(PBMC)及对IFN-γ表达和分泌的影响.方法: 慢性HBV感染者60例,巢式PCR检测PBMC中HBV共价闭合环状DNA(cccDNA);ELISA法检测血清IFN-γ水平;实时定量RT-PCR方法检测PBMC中IFN-γmRNA的表达水平.结果: 48.3%(29/60)的患者PBMC中检测到cccDNA;血清IFN-γ水平低于对照组(P＜0.05);PBMC中IFN-γmRNA表达水平低于对照组(P＜0.01);PBMC中cccDNA阳性组IFN-γ表达和分泌水平低于cccDNA阴性组(P＜0.01).结论:HBV慢性感染者PBMC中IFN-γ表达和分泌水平降低.     

乙肝患者外周血单个核细胞FOXP3 mRNA表达检测方法的建立及应用

目的:比较乙肝患者与健康人外周血单个核细胞(PBMC)中 FOXP3 mRNA表达水平差异. 方法:利用实时荧光定量RT-PCR的方法检测25例慢性乙肝患者以及11名健康人PBMC中FOXP3 mRNA的水平. 结果:乙肝患者PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01),且与血清中的病毒含量呈正相关(r=0.70,P＜0.01),而与谷丙转氨酶(ALT)水平无关(r=0.06,P＞0.05). 结论:慢性乙肝患者FOXP3表达水平可能是HBV感染持续的一个因素.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中PDCD5 mRNA的表达及意义

目的 通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡相关基因程序化细胞死亡因子5(PDCD5)mRNA 表达变化,从而探讨PDCD5基因与SLE发生与发展的关系.方法 应用逆转录PCR(RT-PCR)半定量检测67例SLE患者和50例健康者PBMC中PDCD5 mRNA的表达.结果 SLE活动期患者PDCD5 mRNA 阳性表达率明显高于健康者(P＝0.00);SLE活动期患者PDCD5 mRNA表达水平明显高于稳定期患者和健康者(P<0.01),稳定期患者PDCD5 mRNA比健康者也明显升高(P<0.01).SLE活动期患者PBMC中PDCD5的表达与反应SLE疾病活动的指标如SLEDAI、补体C3、抗ds-DNA抗体等呈显著相关(P<0.05).狼疮性肾炎患者和非狼疮性肾炎患者PDCD5表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 SLE患者PBMC中PDCD5表达上调,且与SLE疾病活动相关,提示PDCD5通过增加表达量而导致异常淋巴细胞凋亡,参与SLE的发生、发展.     

西达本胺对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及Notch1、Sirt1基因表达的影响研究

目的:通过研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺对Notch1、Sirt1基因表达的影响来探讨其对胃癌细胞株SGC-7901的体外抗增殖作用。方法:采用MTT法观察不同浓度西达本胺对SGC-7901细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Sirt1基因表达情况,蛋白质印迹法检测Notch1蛋白表达情况。结果:西达本胺在体外可抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,呈浓度、时间依赖性;其可促进细胞凋亡,减少Sirt1基因的表达,下调Notch1蛋白的表达。结论:西达本胺可通过抑制Sirt1基因表达、下调Notch1蛋白的表达来抑制细胞增殖、促进细胞凋亡而发挥体外抗胃癌作用。     

黄芩苷通过抑制miR-141激活Sirt1/Nrf2信号改善小鼠糖尿病肾病

目的:研究黄芩苷对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用及机制。方法:构建糖尿病肾病(DN)小鼠模型并用黄芩苷进行干预。ELISA法检测小鼠尿白蛋白。qRT-PCR和Western Blot检测miR-141、Sirt1/Nrf2,HO-1的表达。化学比色法检测细胞中SOD水平,流式细胞检验检测细胞凋亡水平。结果:黄芩苷下调DN小鼠肾组织中miR-141表达,上调Sirt1和Nrf2表达。过表达Sirt1慢病毒注射DN小鼠后,尿白蛋白排泄率明显减少,肾组织中HO-1的表达明显上调。肾小球系膜细胞系转染miR-141 inhibitor后,Sirt1/Nrf2信号激活,SOD水平上升,细胞凋亡减少;而si-Sitrt1能逆转miR-141 inhibitor的作用。此外,过表达miR-141能逆转黄芩苷对Sirt1和Nrf2表达、SOD水平和细胞凋亡的作用,而过表达Sirt1能进一步逆转过表达miR-141对细胞的作用。结论:黄芩苷通过抑制miR-141激活Sirt1/Nrf2信号改善小鼠糖尿病肾病。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞中S100B的表达水平及意义

目的探讨S100B在寻常型银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及意义。方法选取2016年3月—2017年10月来我院诊治的35例寻常型银屑病患者(银屑病组)及17例正常对照(正常对照组)为研究对象,采用实时定量PCR检测两组外周血单个核细胞中S100B以及STAT3的mRNA表达,同时采用流式细胞仪检测两组PBMC中S100B蛋白表达水平,并采用皮尔逊相关系数分析S100B和银屑病皮损面积和严重指数评分(PASI)的相关性。结果银屑病组PBMC中S100B mRNA的相对表达量为(0.057±0.004),正常对照组为(0.043±0.003),两组比较差异有统计学意义(t=14.322,P<0.001)。银屑病组PBMC中STAT3 mRNA的相对表达量为(0.758±0.067),正常对照组为(0.418±0.035),两组比较差异有统计学意义(t=23.954,P<0.05)。皮尔逊相关系数分析显示S100B和PASI具有明显相关性。银屑病组PBMC中S100B蛋白表达水平较正常对照组明显增高。结论寻常型银屑病外周血单个核细胞S100B和STAT3表达异常升高,S100B可能通过调控STAT3参与了寻常型银屑病的发生发展。     

2型糖尿病伴周围神经病变患者外周血单个核细胞中醛糖还原酶mRNA水平测定

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)中醛糖还原酶(AR)mRNA水平与2型糖尿病并发周围神经病变的关系.方法用RT-PCR法检测32例2型糖尿病患者及35名正常对照者PBMC中ARmRNA水平,用肌电图检测腓神经传导速度,根据神经传导速度有无减慢将糖尿病患者分为普通糖尿病组和糖尿病神经病变组.结果2型糖尿病患者PBMC中AR mRNA的表达量(0.59±0.56)高于正常对照组[(0.30±0.1l),P=0.003];糖尿病是否伴神经病变患者之间AR mRNA的表达量无差别.结论2型糖尿病患者PBMC中AR mRNA表达水平增高与是否伴神经病变无关.