革兰阴性杆菌AmpC酶和AmpC耐药基因检测

目的检测革兰阴性杆菌临床分离株的AmpC酶和AmpC耐药基因,探讨产AmpC酶菌株的耐药情况。方法用超声破碎法提取102株细菌的β-内酰胺酶粗提物,进行三维试验,提取细菌总DNA,PCR扩增ampC结构基因和ACT-1、CMY-G1、CMY-G2、DHA、FOX耐药基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 102株革兰阴性杆菌中三维试验和PCR检测AmpC基因同时阳性的有11株,确认产AmpC酶菌株11株,并全部为鲍曼不动杆菌。三维试验和PCR基因检测AmpC酶的检出率比较,差别无统计学意义（χ~2=1.125,P〉0.05）。ACT-1、CMY-G2、FOX、DHA、CMY-G1的检出率分别为14.7%、12.7%、4.9%、1.0%和0。对产AmpC酶菌株敏感度最高的是丁胺卡那霉素（90.1%）,其次是亚胺培南（54.6%）。结论三维试验和PCR基因检测对AmpC酶的检出率无明显差别,但仍存在假阳性与假阴性。产AmpC酶菌株耐药情况严重,提示临床慎重用药。     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药相关性

目的了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性，指导临床合理用药。方法K—B法检测184株革兰阴性杆菌对11种抗生素的耐药性；采用头孢西丁（FOX）药敏纸片进行AmpC酶的初筛，通过酶提取物三维试验方法确证产AmpC酶细菌；采用NCCLS推荐的纸片扩散确证试验检测184株革兰阴性杆菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况。结果184株革兰阴性杆菌中，AmpC酶阳性率为23．3％主要产生菌为鲍曼不动杆菌57．7％，铜绿假单胞菌37．5％，AmpC酶阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、复方新诺明（SXT）、左旋氧氟沙星（LEV）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AK）、头孢吡肟（FEP）、美洛培南（MEM）的耐药率分男11为94．7％、86．8％、84．2％、81．6％、71．0％、68．4％、68．4％、55．3％、50．O％、5．3％；38株大肠埃希菌和26株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为42．1％、23．1％，ESBLs阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、复方新诺明（SXT）、头孢他啶（CAZ）的耐药率较高。对头孢吡肟（FEP）、阿米卡星（AK）、头孢西丁（FOX）、美洛培南（MEM）的耐药率较低，对左旋氧氟沙星（LEV）的耐药率大肠埃希菌则远高于肺炎克雷伯菌。结论在革兰阴性杆菌中，AmpC酶和ESBLs产生情况已相当严重，应重视对其的检测；产酶菌与非产酶菌对抗生素的耐药性有明显区别；临床用药以碳青霉烯类如美洛培南（MEM）为首选。     

产AmpC酶革兰氏阴性杆菌的院内分布与耐药性研究

目的探讨革兰阴性杆菌产诱导性AmpC酶耐药的诱因并监测耐药菌株院内分布情况。方法选择2006年10月~2007年10月我院临床分离的871株革兰阴性菌,采用纸片扩散法进行初筛试验,即以头孢西丁药敏纸片检测受试菌,根据世界药敏协会CLSI(原NCCLS)标准抑菌环直径≤17mm提示对头孢西丁中介或耐药,疑为产AmpC酶菌株,然后利用头孢西丁三维确证试验,对耐药突变菌株进行选择,使用最新版本的WHONET5.4统计软件分析结果。结果头孢他啶和头孢噻肟对持续高产突变株的选择能力最强,头孢比肟选择性较弱,亚安培南无选择性。三代头孢菌素频繁使用的科室,高产AmpC酶菌株所占比例大。结论革兰阴性杆菌处于第三代头孢菌素的选择之下,能筛选出高产AmpC酶突变株,严格控制三代头孢菌素在革兰阴性杆菌所致感染中的使用,可避免治疗过程中发生继发性耐药,止高产AmpC菌株在医院的迅速蔓延。     

革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

1242株革兰阴性杆菌抗生素耐药分析

目的 了解我院近4年革兰阴性杆菌的分布及耐药情况.方法 对各类标本中培养分离出的1 242株革兰阴性杆菌,采用全自动微生物分析仪进行分析.结果 1 242株革兰阴性杆菌中,以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属多见,革兰阴性杆菌对β-内酰胺类及喹诺酮类耐药率普遍增高.结论 革兰阴性杆菌耐药严重,应定期进行细菌耐药监测.     

136析革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题。已发现越来越多的革兰阴性杆菌对B-内酰胺类抗生素产生耐药性。细菌产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一。其中AmpC酶对β-内酰胺酶抑制剂不敏感,使高产AmpC酶的菌株引起的感染更加难治。此外,出现AmpC酶由原来局限于染色体编码向质粒转移的趋势,大大提高了AmpC酶的横向传播能力[1]。为调查革兰阴性杆菌的产酶情况,我们对136株革兰阴性杆菌进行ESBLs和AmpC酶检测,并对检测结果进行分析。     

136株革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题.已发现越来越多的革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性.细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一.     

革兰氏阴性杆菌的AmpC酶检测与其药物敏感率分析

目的:探讨湘雅医院革兰氏阴性杆菌AmpC酶产生与其耐药性的关系,为临床提供选药参考.方法:应用Microscan微生物自动鉴定系统进行细菌鉴定与药敏试验,并应用纸片扩散法进行AmpC酶检测.结果:204株革兰氏阴性杆菌中AmpC酶阳性菌株40株,阳性率为19.61%;AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示,前者大多对头孢曲松、哌拉西林、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢呋肟、头孢他啶/棒酸、头孢噻肟/棒酸耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者比较,差异有统计学意义(均P<0.05).而两者大多对头孢吡肟、亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、左氟沙星及阿米卡星敏感.结论:AmpC酶检测有助于耐药菌株的检出,AmpC酶阳性菌株大多对第三代头孢菌素及酶抑制剂及氨曲南耐药,对亚胺培南、美洛培南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、左氟沙星及阿米卡星敏感,可为临床经验治疗提供参考.     

非发酵革兰阴性杆菌产AmpC酶的耐药性及ampC基因分布状况的研究

目的探讨83株非发酵革兰阴性杆菌对11种常用抗生素的耐药性、产AmpC酶的耐药情况及ampC结构基因在非发酵革兰阴性杆菌中的分布状况.方法对临床分离的83株非发酵革兰阴性杆菌(假单胞菌属57株和不动杆菌属26株)用microscan walkaway-4.0鉴定到种并鉴定其耐药性,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶,行PCR扩增了解AmpC耐药结构基因在83株非发酵革兰阴性杆菌中的分布情况.结果53株细菌ampC基因阳性(占63.9%),12株细菌产AmpC酶(占14.5%).83株菌对IPM、CIP、AK、TOB、FEP、CN、CAZ、SXT、PIP、CRO、ATM的药物敏感率从高到低依次为78.3%、74.7%、63.9%、62.7%、60.2%、51.8%、38.6%、32.5%、32.5%、24.1%、22.9%.结论非发酵革兰阴性杆菌的耐药状况严重,明确高产AmpC酶的菌株有助于临床抗菌药物的选用.     

855株革兰阴性分离杆菌分布及耐药性分析

目的:了解临床分离的常见G-杆菌的分布及耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:将2007~2009年各类临床标本按照全国临床检验操作规程进行分离培养,采用Micro Scan-40S型半自动微生物鉴定仪和药敏系统进行鉴定和药敏试验,部分菌株用K-B法,结果按照临床实验室信息系统(Clinical Laboratory Information Systems,CLIS)标准判断。结果:分离出G-杆菌855株,其中大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌居前3位;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产β内酰胺酶检出率为58.6%和29.7%;非发酵菌以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌为主。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对亚胺培南的敏感率均>90.0%;铜绿假单胞菌对亚胺培南和阿米卡星的敏感率为62.4%,对头孢吡肟的敏感率为43.5%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南、阿米卡星和罗米沙星的敏感率分别为92.7%、63.4%和60.2%;嗜麦芽寡养单胞菌对复方磺胺甲口恶唑的敏感率为100.0%。结论:临床应及时与微生物实验室联系,关注多重耐药细菌的出现,并根据药物敏感性试验结果个体化、合理应用抗生素,以提高感染治疗成功率,有效减少耐药菌株。     

痰标本中铜绿假单胞菌AmpC酶的检测及其耐药性研究

目的　调查痰标本中铜绿假单胞菌AmpC酶的表达情况 ,比较产酶菌和非产酶菌的耐药性。 方法　收集来源痰标本中的铜绿假单胞菌 114株 ,首先采用K -B法检测铜绿假单胞菌的AmpC酶以及 3种不同表型的AmpC酶产生情况 ,然后使用微量肉汤稀释法分析产酶菌株与不产酶菌株耐药性。结果　在 114株铜绿假单胞菌中检出产AmpC酶菌 79株 ( 69.5 % )。产AmpC酶的菌株表现为 3种表型 ,高产高表达型 61株 ( 5 3 .5 % )、低产高表达型 3 3株( 2 7.5 % )、低产低表达型 43株 ( 3 7.7% )。高产高表达AmpC酶菌株明显多于低产高表达型和低产低表达型。 3种不同AmpC酶表型的菌株 ,低产低表达型对哌拉西林 /他唑巴坦 (P/T)、哌拉西林 (PI)、氨曲南 (ATM )、头孢他啶 (CAZ)、头孢吡肟 (FEP)、亚胺培南 (IMP)的敏感率均明显高于低产高表达型和高产高表达型。结论　痰标本中铜绿假单胞菌AmpC酶产生率高 ,可能是对 β -内酰胺类抗生素耐药的主要机制。     

大肠埃希菌质粒型AmpC酶基因的检测分析

目的 调查大肠埃希菌质粒型Ampc酶基因的存在状况。方法 采用MH药敏平板对40株临床分离的大肠埃希菌进行抗菌药物敏感试验和ESBLs纸片法确诊,PcR方法检测DHA和ACT-1型Ampc酶基因。结果 40株大肠埃希菌呈多重耐药,20株ESBLs阳性菌AmpCM基因阳性率90％,20株ESBLs性菌Ampc酶基因阳性率45％,40株大肠埃希菌ACT-1和DHA基因阳性率分别为57．5％,40．0％,有12株大肠埃希菌同时携带ACT-1和DHA基因。结论 临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重,质粒型AmpC酶基因携带率高。     

992株临床分离病原菌分布及耐药性分析

目的 了解该院近3年临床分离病原菌的分布及耐药情况.方法 回顾性分析该院2011年11月至2014年12月临床分离的992株病原菌及药敏结果.结果 该院992株病原菌中革兰阴性杆菌487株(49.1％),大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为47.5％、16.7％,两者对亚胺培南和美洛培南的敏感率分别为100％ 、98.5％;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物高度敏感;嗜麦芽窄食假单胞菌对多种抗菌药物均有不同程度的耐药,但对复方黄胺甲噁唑100％敏感.革兰阳性球菌245株(24.7％),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为45.5％、91.6％,未检出耐万古霉素葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌.真菌260株(26.2％),白假丝酵母菌对抗真菌药高度敏感,热带假丝酵母菌的耐药率较高.结论 定期回顾分析临床分离病原菌的分布及其耐药性,有利于及时掌握其耐药性的变迁,从而指导临床合理应用抗菌药物.     

铜绿假单胞菌ampC基因分布和产酶状况对药物敏感性的影响

目的:了解147株铜绿假单胞菌ampC基因分布和产酶状况对药敏的影响。方法:通过聚合酶链反应(PCR)法检测ampC基因分布情况,PCR产物克隆测序;通过酶提取物三维试验检测AmpC酶;纸片扩散法检测铜绿假单胞菌的药敏情况。结果:107株铜绿假单胞菌ampC基因阳性(占72.8%),PCR产物测序结果与Gene-Bank序列(AE 004827)同源性为100%。ampC基因阴性菌株依次对亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦敏感,敏感率均≥90.0%;ampC基因阳性菌株对头孢他啶、头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦敏感率明显降低(P<0.05);147株铜绿假单胞菌中88株产AmpC酶(占60.0%),不产AmpC酶菌株依次对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟敏感,产AmpC酶菌株仅对亚胺培南、头孢吡肟保持较高敏感率,而对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、头孢呋辛敏感率明显降低(P<0.05)。结论:铜绿假单胞菌广泛存在着ampC耐药基因,明确ampC基因分布和产酶状况有助于临床抗菌药物的选用。     

某院肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶基因型及耐药性研究

目的调查该院临床分离肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶表型和基因型携带情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法采用Vitek2-compact全自动细菌鉴定药敏系统对临床分离菌株进行鉴定及药物敏感试验,采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶表型,采用多重PCR方法检测AmpC基因并经DNA测序确定其基因型别。结果 2010年7月至2011年6月共分离到116株肺炎克雷伯菌,产AmpC酶肺炎克雷伯菌占18.1%(21/116)。产AmpC酶肺炎克雷伯菌多重耐药情况严重,对氨基糖甙类、喹诺酮类及大多数头孢菌素类抗菌药物的耐药率在57.1%～100%,对加酶抑制剂复合药氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦及哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为90.5%、85.7%、42.9%、38.1%,所有菌株对碳青霉烯类抗生素亚安培南和美罗培南仍全部敏感。产AmpC酶菌株对头孢西丁、第3代头孢菌素及氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸等抗生素的耐药率明显高于不产酶株(P<0.05)。21株产酶菌株均携带DHA-1型AmpC酶基因。结论该院肺炎克雷伯菌产AmpC酶株检出率较高,产酶菌株多重耐药情况严重。临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生。     

安徽省某医院多重耐药革兰阴性菌流行情况及耐药分析

目的:了解2011²013年我院临床分离多重耐药革兰阴性菌流行情况、耐药及变迁。方法:采用Vitek-32全自动微生物分析仪及纸片扩散法对分离菌进行鉴定及药敏实验。结果:3年期间临床分离多重耐药菌共1 905株,占分离病原菌的18.9%,其中革兰阴性菌占74.6%。分离出的多重耐药革兰阴性菌数依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、醋酸钙鲍曼复合不动杆菌、铜绿假单胞菌。多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类3年内均保持极低的耐药率,对头孢哌酮/舒巴坦虽保持高的敏感性,但耐药率呈增高趋势。多重耐药铜绿假单胞菌、鲍曼复合不动杆菌耐药率高,对常用抗生素耐药率多在50%以上,部分为泛耐药株。结论:多重耐药菌对常用抗菌药物耐药状况严重,需加强抗感染管理制度执行和多重耐药菌的监测,并根据药敏试验结果合理应用抗菌药物。