缺氧诱导因子-1α与微血管密度在人鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在鼻咽癌和慢性鼻咽炎组织中的表达,并用CD34标记测定微血管密度(MVD),探讨HIF-1α和MVD在鼻咽癌各种临床病理因素中的作用以及它们之间的相互联系.方法:采用免疫组织化学SABC及SP法检测58例鼻咽癌和20例慢性鼻咽炎组织中HIF-1α的表达情况,并用CD34行免疫组织化学染色,计数MVD,并结合临床病理特征进行分析.结果:鼻咽癌和慢性鼻咽炎组织HIF-1α的阳性表达率分别为79.31%和10.oo%,差异具有统计学意义(P＜0.01).鼻咽癌组织MVD为39.32±7.99,慢性鼻咽炎为18.73±2.39,差异有统计学意义(P＜0.01).鼻咽癌组织中,有淋巴结转移组HIF-1α阳性表达率(92.6%)明显高于无淋巴结转移组(67.7%),有淋巴结转移组MVD(44.41±5.63)高于无淋巴结转移组(34.89±7.09).不同临床病理分期的HIF-1α的表达和MVD均差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).HIF-1α的表达与MVD呈正相关(P＜0.01).结论:HIF-1α参与了鼻咽癌的发生、浸润和转移;血管生成在鼻咽癌的浸润和转移中起了重要作用;鼻咽癌中HIF-1α的表达与肿瘤血管生成密切相关,在鼻咽癌发展过程中起重要作用,可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点.     

EB病毒潜伏膜蛋白1和鼻咽癌上皮间质转化相关分子与颈淋巴结转移关系

目的:评价EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)和鼻咽癌上皮间质转化相关分子与颈淋巴结转移关系.方法:88例鼻咽癌活检标本依据病理检查或MRI检查分成病理转移组(18例)、MRI转移组(40例)和无转移组(30例).免疫组织化学检测鼻咽癌组织中潜伏膜蛋白1(LMP-1)、STAT3、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达情况.结果:88例鼻咽癌组织中,LMP-1阳性表达见于35例,阳性率为38.7%.病理转移组、MRI转移组和无转移组的LMP-1阳性率分别为38.9%(7/18)、47.5%(19/40)和30.0%(9/30),3组间差异无统计学意义.LMP-1表达分别与Twist和Vimentin表达呈正相关(r=0.276和0.282,均P<0.01),与STAT3和E-Cadherin表达无相关性.88例鼻咽癌组织中STAT3、Twist和Vimentin阳性率以及E-Cadherin异常表达率分别64.8%(57/88)、54.5%(48/88)、20.0%(22/88)和60.2%(53/88).STAT3、Twist和Vimentin阳性率以及E-Cadherin异常表达率在病理转移组、MRI转移组和无转移组间差异均分别有统计学意义(均P<0.05).STAT3表达分别与Twist和Vimentin表达均呈正相关性(r=0.712和0.316,均P<0.01).结论:EMT在鼻咽癌转移过程中起着重要作用.LMP-1可能仅作为上游影响因素之一间接影响EMT的发生,但与颈部淋巴结转移可能无直接相关性.     

缺氧诱导因子-1α和葡萄糖转运蛋白-1表达对鼻咽癌患者预后的影响

目的探讨鼻咽癌组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)表达活性与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取宁波市镇海龙赛医院耳鼻喉科收治的鼻咽癌患者63例(鼻咽癌组)和慢性鼻咽炎患者20例(对照组),分别取鼻咽病灶组织,免疫组织化学法检测HIF-1ɑ和GLUT-1表达活性,分析其表达水平与患者临床病理特征及生存期的关系。结果鼻咽癌组HIF-1α和GLUT-1阳性表达率分别为55.56%(35/63)、58.73%(37/63),显著高于对照组的10.00%(2/20)、15.00%(3/20),组间差异具有统计学意义(P<0.01)。HIF-1α、GLUT-1阳性表达率与鼻咽癌患者的临床分期、淋巴结转移具有显著相关性(P<0.05);HIF-1α阳性者3年生存率75.76%,显著低于阴性患者的85.19%(P<0.05);GLUT-1阳性者3年生存率75.00%,显著低于阴性患者的88.89%(P<0.05)。结论 HIF-1α和GLUT-1在鼻咽癌组织中高表达,且与患者的临床分期、淋巴结转移和预后相关。     

缺氧诱导因子和血管生成素在喉癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-IX(HIF-1α)及血管生成素-2(Ang-2)在喉癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法:采用免疫组织化学法检测52例喉癌组织和10例正常喉组织中HIF-1α、Ang-2蛋白的表达.结果:HIF-1α和Ang-2蛋白在喉癌组织和正常喉组织中的表达差异有统计学意义(均P<0.05);HIF-1α蛋白在喉癌组织中的表达与临床分期和淋巴结转移有关(均P<0.05),而与患者的性别、年龄、分化程度无关(均P>0.05);Ang-2蛋白在喉癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.01或P<0.05),而患者的性别、年龄对其表达无明显影响(均P>0.05);HIF-1α和Ang-2蛋白在喉癌组织中的表达呈正相关(r=0.607,P<0.01).结论;HIF-1α和Ang-2蛋白在喉癌组织中的高表达,可能与肿瘤的生长、浸润及转移有密切关系.     

α-烯醇化酶在鼻咽癌中的表达

目的:观察α-烯醇化酶(ENO1)在鼻咽癌中的表达状态,探讨其与鼻咽癌的发生发展及转移的关系.方法:采用SP免疫组织化学方法检测120 例鼻咽癌初治患者癌组织中ENO1表达.结果:鼻咽癌组织中ENO1蛋白高表达率为60.0%(72/120),鼻咽黏膜炎性组织为27.5%(11/40),两组差异有统计学意义(P<0.05).T1 、T2、T3期患者ENO1蛋白表达阳性率均高于T4患者,其差异有统计学意义(χ2=11.424,P<0.05).但ENO1蛋白表达与颈淋巴结转移及放疗后复发和转移无关(P>0.05).结论:ENO1蛋白的高表达可能涉及鼻咽癌的发生和发展过程.     

水通道蛋白5与低氧反应通路因子在鼻息肉组织中的表达及其相关性研究

目的:检测水通道蛋白5(AQP5)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在鼻息肉组织中的表达情况,并探讨3种因子之间表达的相关性及其在鼻息肉发病机制中的作用。方法:取18例患者鼻息肉组织(鼻息肉组)及10例单纯行鼻中隔偏曲矫正术中切除的下鼻甲组织(对照组),分别运用RT-PCR和Western blot检测AQP5、HIF-1α、VEGF mRNA以及蛋白的表达情况;采用t检验和直线相关分析进行统计学分析。结果:①RT-PCR结果显示,AQP5 mRNA在鼻息肉组中的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),HIF-1α、VEGF mRNA在鼻息肉组和对照组中表达差异无统计学意义(P>0.05);②Western blot结果显示AQP5蛋白表达鼻息肉组与对照组无明显差异(P>0.05),HIF-1、VEGF蛋白表达水平在鼻息肉组中的表达显著高于对照组(P<0.05);③Western blot结果显示鼻息肉组中AQP5与HIF-1α之间蛋白的表达呈明显正相关(r=0.633,P<0.01),AQP5与VEGF蛋白质表达亦呈明显正相关(r=0.611,P<0.01)。结论...     

缺氧诱导因子1α和环氧化酶2在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨喉鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和环氧化酶2(cyclooxygenage-2,COX-2)的表达情况及其与患者临床病理资料的关系和对预后的影响.方法 免疫组化Envision二步法检测60例喉鳞癌标本中HIF-1α和COX-2蛋白的表达,15例不典型增生、10例声带白斑、10例声带息肉标本作对照.结合喉鳞癌患者临床和病理资料进行分析.结果 60例喉鳞癌组织中HIF-1α呈高表达为35.0%(21/60),COX-2高表达为38.3%(23/60).两者阳性表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉组相比差异均具有统计学意义(Fisher确切概率法,P值均<0.01).喉鳞癌组织中HIF-1α和COX-2的表达结果 呈正相关(r=0.526,P<0.01).喉癌HIF-1α高、低表达组在临床分期(X2=4.331,P<0.05)及淋巴转移方面(Fisher确切概率法,P<0.05)组间差异具统计学意义;COX-2高、低表达组在T分期及临床分期方面组间差异具统计学意义(X2值分别为6.792和8.539,P值均<0.01).单因素分析HIF-1α高、低表达组间生存率及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为6.003和5.010,P值均<0.05),COX-2高、低表达组生存率差异及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为9.489和6.102,P值均<0.05).多因素分析提示复发及COX-2表达是影响喉癌患者预后的重要危险因素(相对危险度分别为7.104和5.714,P值均<0.01).结论 HIF-1α和COX-2在喉鳞癌发生、发展中起重要作用,两者可能有协同关系.COX-2表达及肿瘤复发情况可能作为评估喉鳞癌预后的重要危险因素.     

Cripto-1在鼻咽癌中的表达及意义

目的　探究Cripto-1蛋白在鼻咽癌组织及癌细胞中的表达。方法　运用免疫组化检测鼻咽癌患者和鼻咽炎患者中Cripto-1蛋白的表达,通过Western blot检测Cripto-1在不同鼻咽癌细胞株中的表达。结果　Cripto-1蛋白在鼻咽癌组织中表达阳性率为80%明显高于鼻咽炎组织阳性率为36.7%;在伴有淋巴结转移的鼻咽癌组织中的阳性率为90.5%,不伴有淋巴结转移的鼻咽癌组织中的阳性率为68.4%。在不同病理类型、性别及年龄的鼻咽癌患者中表达无明显差异。Cripto-1阳性鼻咽癌组5年生存率57.8%低于阴性组81.3%。Cripto-1在鼻咽癌细胞中均表达,在CNE1-LMP1中明显高于CNE1细胞,差异具有统计学意义。结论　Cripto-1蛋白在鼻咽癌的发生、发展以及鼻咽癌淋巴结转移、预后中具有重要意义,可作为辅助鼻咽癌诊断和预判转移潜能的分子标志物之一。     

乙酰肝素酶、蛋白激酶CK2β与缺氧诱导因子-1α仪在鼻咽癌组织中的表达及其相关性研究

目的：检测乙酰肝素酶（HPA）、蛋白激酶CK2β（CK2β）、缺氧诱导因子-α（HIF-1α）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系;并分析三者在NPC组织中表达的相关性。方法：采用免疫组织化学染色技术Super-Vision法检测49例NPC组织标本及15例慢性鼻咽炎（CNT）组织标本中HPA、CK2β及HIF-1α的表达水平。结果：HPA、CK2β与HIF-1α在NPC组织中的表达水平均高于CNT组织中的表达,差异均有统计学意义（P〈O．05）;HPA、CK2β与HIF-β的表达与NPC临床分期、治疗后有无复发或转移相关（P〈0．05）,与患者的性别无关（P〉0．05）;HIF-1α的表达水平与NPC患者的年龄密切相关（P％0．01）,而HPA、CK2β的表达水平则与NPC患者的年龄无关（P〉0．05）;HPA、CK2β与HIF-1α任意两者间在NPC组织中的表达均呈正相关性（P〈O．05）。结论：HPA、CK2β和HIF-1α参与了NPC的发生和发展、浸润及转移;在NPC的发生发展过程中,HPA、CK2β和HIF-1α之间可能存在协同作用。     

RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖与侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响

目的探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep 2细胞株增殖、侵袭力及E 钙黏蛋白甲基化的影响。方法培养人喉鳞状细胞癌Hep 2细胞株，分别转染siRNA Twist（siRNA Twist组）、阳性对照siRNA GAPDH（阳性对照组）和阴性对照错义链（阴性对照组），利用实时荧光定量PCR技术检测各转染组细胞中Twist和E cad基因表达，Western blot法检测各转染组细胞中Twist和E cad蛋白表达，MTT比色法检测各转染组细胞增殖情况，Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，甲基化特异性聚合酶链式反应（MSP）检测不同转染组细胞中E cad甲基化表达。结果siRNA Twist组细胞中Twist mRNA和Twist蛋白表达量均低于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；siRNA Twist组细胞中E cad mRNA和E cad蛋白表达量均高于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；与阳性对照组和阴性对照组相比，siRNA Twist组细胞转染48 h～96 h时细胞增殖能力明显减弱，差异均具有统计学意义（P<0.05）；siRNA Twist组细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均低于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；MSP 检测结果显示，siRNA Twist组细胞中E cad甲基化扩增条带呈弱阳性，表达强度显著低于阳性对照组和阴性对照组，而非甲基化扩增条带呈阳性。结论特异性抑制Twist基因表达可能通过影响E cad甲基化而上调E cad表达，从而抑制细胞增殖及侵袭能力，有望为喉鳞状细胞癌基因治疗提供新的靶点。     

NF-КBp65在鼻咽癌组织的表达及临床病理意义

目的 探讨NF-КBp65蛋白和mRNA在鼻咽癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 运用免疫组化和RT-PCR的方法检测NF-КBp65蛋白和mRNA在60例鼻咽癌和30例鼻咽炎组织中的表达,分析鼻咽癌组织NF-ΚBp65表达活性差异与鼻咽癌患者临床病理指标的相关性.结果 鼻咽癌组织中NF-КBp65蛋白和mRNA的表...     

鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白的表达及其临床意义

目的了解抑癌基因nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中的表达,探讨其与鼻咽癌发生发展及转移的关系。方法采用免疫组化法检测43例鼻咽癌患者鼻咽部组织中nm23-H1蛋白的表达,分析鼻咽癌患者不同临床分期及鼻咽癌是否伴有淋巴转移组织中nm23-H1蛋白表达的差异;同期选取17例慢性鼻咽炎患者鼻咽部组织作为对照。结果鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白阳性表达率为53.4%,慢性鼻咽炎组织中nm-23H1阳性率为88.2%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）;鼻咽癌Ⅰ-Ⅱ期组织中阳性率为88.2%,Ⅲ-Ⅳ期组织中阳性率为30.8%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）;鼻咽癌伴有淋巴结转移组和不伴有淋巴转移组阳性率分别为38.5%、76.5%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）。结论抑癌基因nm23-H1蛋白表达下调,可能与鼻咽癌发生发展、侵袭转移有关。     

nm23-H1蛋白表达与鼻咽癌颅内转移发生及预后的关系

目的探讨nm23-H1基因蛋白表达与鼻咽癌颅内转移的关系.方法用nm23-H1单克隆抗体对68例鼻咽癌患者的102份标本进行免疫组织化学染色(SP)法,检测nm23-H1蛋白的表达.结果在鼻咽癌中,nm23-H1蛋白表达与颅内转移的发生及预后均有明显相关性(P＜0.05).结论原发肿瘤中nm23-H1表达下降对脑转移癌的发生及预后具有重要意义,检测鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白表达水平可能是预测鼻咽癌颅内转移及预后的重要指标.     

金属硫蛋白2及白细胞介素1α和6在中耳胆脂瘤组织中的表达及意义

目的 观察金属硫蛋白2( metallothionein 2,MT-2)及白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素6(IL-6)在中耳胆脂瘤组织中的表达及相关性,探讨其在中耳胆脂瘤发生发展过程中的作用.方法 采用免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测25例中耳胆脂瘤组织和7例正常外耳道皮肤组织中MT-2及IL-1α、IL-6蛋白和MT-2 mRNA的表达情况并分析其相关性.进一步以胆脂瘤鳞屑刺激人角质细胞系HaCaT,观察细胞MT-2 mRNA和蛋白质的表达变化.结果 MT-2、IL-1α及IL-6在中耳胆脂瘤中的表达明显高于正常外耳道皮肤,差异具有统计学意义(P值均＜0.05);MT-2mRNA在中耳胆脂瘤和正常外耳道皮肤中的表达差异具有统计学意义(t=15.38,P＜0.05).中耳胆脂瘤组织中MT-2与IL-1α的表达呈正相关关系(r=0.856,P＜0.05),与IL-6的表达亦呈正相关关系(r=0.714,P＜0.05).在胆脂瘤鳞屑刺激下,HaCaT细胞MT-2的mRNA和蛋白质表达均有明显增强,其表达变化与鳞屑组织呈浓度依赖关系.结论 MT-2和IL-1α、IL-6的异常表达可能在中耳胆脂瘤的发生、发展过程中起一定的作用.胆脂瘤鳞屑组织可能通过促进MT-2的过量表达而参与了胆脂瘤上皮的过度增殖.     

组织缺氧诱导因子-1α及相关靶基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的 检测喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织缺氧诱导因子-10α( hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter protein-1,GLUT-1)、血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达情况,并通过体外实验进一步验证低氧对喉鳞癌细胞HIF-1α及其下游靶基因GLUT-1、VEGF的表达上调方面的重要促进作用.方法 采用SP免疫组织化学和免疫细胞化学方法检测喉鳞癌组织和Hep-2细胞中HIF-1α、GLUT-1、VEGF蛋白的表达,分析HIF-1α与GLUT-1、VEGF表达的相关性.结果 35例喉癌患者组织切片中16例HIF-1α表达阳性(45.7％),16例GLUT-1表达阳性(阳性率45.7％),19例VEGF表达阳性(阳性率54.3％).HIF-1α和VEGF的表达水平与喉癌病理分级和淋巴转移有关(P值均＜0.05);GLUT-1表达水平与淋巴转移有关(P＜0.05).体外实验结果显示,Hep-2细胞在低氧条件下HIF-1α、GLUT-1、VEGF的蛋白表达明显增加(P值均＜0.05).结论 HIF-1α可作为转录调控因子参与调控GLUT-1、VEGF的表达,进而在喉癌的发生、侵袭、转移过程中发挥重要作用.     

HIF-1α在脑出血灶周的表达及其与脑水肿的关系

目的观察血肿周边神经组织中HIF-1α蛋白表达,并探讨脑水肿程度与HIF-1α蛋白表达的相关性。方法SD大鼠56只随机分为假手术对照组、脑出血6、247、2 h组,7、14和21 d组,每组8只。采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量。结果脑出血组HIF-1α蛋白阳性表达率60.4%（29/48）,对照组HIF-1α蛋白阳性表达率为0%,二者相比有统计学意义（P〈0.01）;脑出血后,HIF-1α蛋白阳性表达率随时间进行性增加,并于出血后72 h达到高峰且维持到第7天,此后HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血后不同时间阳性率比较具有显著性差异（P〈0.01）;脑出血后3 d内,脑组织含水量进行性增加,此后逐渐下降。对照组与出血组脑组织含水量比较P〈0.01,出血组之间比较P〈0.01,均有统计学意义。结论HIF-1α在脑内血肿周边神经组织中有表达,随出血时间延长HIF-1α蛋白在细胞内的表达程度和脑组织水肿程度呈正相关。     

喉癌肿瘤组织HIF-1α与COX-2蛋白和mRNA的表达及意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白质和mRNA的表达,以期有助于喉鳞状细胞癌发生、发展和转移机制的进一步阐明。方法:用免疫组织化学和RT-PCR方法检测76例喉鳞状细胞癌组织和9例癌旁正常组织中HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达,并按T分期、病理分级分别探讨HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达与各临床病理参数的关系。结果:①HIF-1α、COX-2蛋白表达在喉癌标本的表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05),随T分期的增加而增高;中、低分化的喉癌组织中HIF-1α表达显著高于高分化喉癌;COX-2蛋白表达与病理分级无关。②HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率分别是67.11%和75.00%,明显高于癌旁正常组织(P<0.05),癌旁正常组织未检测到COX-2mRNA表达。HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率与T分期有关(P<0.05),标本的表达量随T分期的增加而增高,但是与病理分级无关(P>0.05)。③HIF-1α蛋白表达阳性病例中,COX-2的阳性率为78.72%。结论:HIF-1α与COX-2在喉鳞状细胞癌组织的表达增高并密切相关,可能是喉癌发生发展的原因之一。     

血管生成拟态和上皮-间质转化相关标志物在鼻咽癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的：研究鼻咽癌中血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）和上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关标记物的表达及与淋巴结转移的关系。方法免疫组化检测82例鼻咽癌和20例鼻咽慢性炎组织E-cadherin、Twist和Vimenitn表达,CD31联合PAS染色检测VM。结果 VM在鼻咽癌组织的阳性率为28.05%,与淋巴结转移具有正相关关系（χ2=6.927, P=0.008）。27例出现E-cadheirn表达减弱甚至缺失,23例和35例出现Vimentin和Twist阳性表达,E-cadherin表达与淋巴结转移具有密切负相关关系（χ2=9.694,P=0.002）, Vimentin和Twist表达均与淋巴结转移具有密切正相关关系（χ2=6.411,P=0.011;χ2=14.576,P=0.000）,VM和EMT标志物具有密切相关性（P均<0.000）。结论鼻咽癌中存在VM和EMT,存在VM和发生EMT的鼻咽癌易发生淋巴结转移,VM和EMT具有密切相关性,两者对鼻咽癌转移具有一定的预测价值。