大鼠正畸牙移动过程中牙周组织内CGRP的表达变化

目的:建立SD大鼠正畸牙移动模型,观察牙移动过程中牙周组织内降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)的表达变化,探讨其在正畸疼痛的外周神经机制中的作用.方法:将60只SD大鼠随机分为实验组(54只)和对照组(6只)2组,实验组大鼠施加50 g力后,分别在4h、8h、1d(1d组根据据力值大小分为1 d-30 g、1d-50g、1 d-80g3个亚组)、3 d、5 d、1周、2周,随机处死6只SD大鼠,收集牙周组织,进行实时定量PCR检测,观察牙周膜内CGRP随时间及力值大小的表达变化,采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:大鼠正畸牙移动过程中,牙周组织内CGRP表达随加力时间发生改变,加力4h后开始增强,1d后达到高峰并逐渐减弱,2周后与对照组相比无显著差异.不同力值组加力1d后,CGRP表达随加力力值增大而升高,80 g力组＞50 g力组＞30 g力组.结论:正畸牙移动过程中,牙周组织内CGRP表达随加力时间增加及加力力值增大出现规律性变化,提示CGRP可能在正畸疼痛的外周神经机制中具有重要作用.     

大鼠正畸牙移动过程中TRPV1和CGRP在三叉神经节中的表达变化

目的建立SD大鼠正畸牙移动模型,研究牙移动过程中,三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)中瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）及降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)的表达位置及表达量的变化规律,进而探讨其在正畸疼痛中的作用机制。方法将66只SD大鼠随机分为空白对照组（6只）、假手术组（6只）和实验组（54只）。建立正畸牙移动模型,实验组大鼠施加50 g力后,分别于4、8 h、1 d（1 d组按力值大小分为1 d-30 g、1 d-50 g、1 d-80 g 3个亚组）、3、5、7、14 d,随机处死6只,切取三叉神经节,采用免疫荧光技术分别检测大鼠三叉神经节中TRPV1及CGRP的表达位置及表达量变化。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果免疫荧光染色显示,TRPV1及CGRP主要表达于小型及中型神经元。随着加力时间的延长,三叉神经节中TRPV1免疫反应阳性（TRPV1-IR）神经元百分比及CGRP免疫反应阳性（CGRP-IR）神经元百分比增加,1~3 d相继达到高峰,之后逐渐降低,回落至初始水平,且两者随加力力值增大而呈现增高趋势。结论大鼠正畸牙移动过程中,三叉神经节内TRPV1及CGRP的表达随加力时间及加力力值改变呈现规律性变化,提示TRPV1及CGRP可能在正畸疼痛的发生机制中具有重要作用。     

大鼠正畸牙移动中HIF-1_α的表达

目的：探讨正畸牙齿移动过程中牙周组织内低氧诱导因子（hypoxia inducible factor,HIF）-1α的表达变化及作用。方法：将45只雄性SD大鼠随机分为9组,每组5只,分别为：实验加力0、3、6、12、24h和3、5、7、14d组。选择左上第一磨牙作为实验牙,右上颌第一磨牙不加力设为自身对照。制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,进行免疫组织化学研究。结果：正畸牙移动过程中,牙周组织内HIF-1α表达发生改变。HIF-1α表达量在正畸模型加载后迅速上调,实验组于5d、对照组于1d时表达水平达到最高,所有观察区域牙周膜内HIF-1α表达显著增加,且实验组高于对照组。结论：HIF-1α在正畸牙移动过程中牙周组织改建的多个阶段起作用,参与了牙周膜早期的炎症反应及修复和晚期的改建。     

正畸力作用下大鼠前扣带皮质层中信号转导与转录激活因子1的表达变化

目的 研究正畸力加力后大鼠前扣带皮质层信号转导与转录激活因子1(STAT1)表达水平的变化规律,以探讨STAT1及其所在的JAK-STAT1信号通路在正畸牙移动疼痛中的介导和调控作用.方法 将112只8周龄体质量(225±25)g雄性SD大鼠随机分为实验组(96只)和对照组(16只).将实验组又分为4 h组、12h组、24h组、2d组、3d组、7d组,每组各16只.实验组和对照组均采用镍钛拉簧在双侧上颌建立大鼠正畸牙移动模型,实验组双侧均施加80 g正畸力;对照组仅安装相同正畸装置,但不施加正畸力.加力后4 h、12h、24h、2d、3d、7d分别取不同组别大鼠大脑前扣带回皮质组织,应用免疫荧光染色法和实时荧光定量PCR法进行研究.结果 对照组与实验组6个亚组之间的STAT1及p-STAT1相对表达量差异均有统计学意义;与对照组相比,STAT1表达量在加力4 h时降低(P<0.05);至加力2 d时,差异仍有统计学意义(P<0.01).4 h组、12 h组、24 h组相对表达量明显低于3 d组和7 d组,差异均有统计学意义(P<0.05);2 d组明显低于7 d组,差异有统计学意义(P<0.05).对照组与实验组之间的p-STAT1表达量差异均有统计学意义;对照组表达量低于不同时间组;4h组表达量明显低于12h组和24h组,但高于2d组、3d组和7d组;12h组表达量低于24h组,但高于2d组、3d组和7d组,2d组高于3d组和7d组,3d组高于7d组,差异均有统计学意义(P<0.05).在STAT1 mRNA表达量上,4 h、12 h、24 h、2 d、3 d、7 d的对照组与实验组的两两比较结果均无统计学差异(P>0.05).结论 正畸力作用下,大鼠前扣带皮质层中STAT1表达水平一过性降低,p-STAT1表达水平一过性升高.推测正畸疼痛的产生可能与前扣带皮质层STAT1活化为p-STAT1有关.     

大鼠正畸牙移动过程中牙周组织NGF的表达变化

目的了解大鼠正畸牙移动过程中牙周组织内神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的变化,探讨NGF在正畸牙移动过程中的作用。方法将85只雄性SD大鼠随机分为17组,其中空白对照组(0d组)、实验加力和对照不加力组各6h、12h、24h、3d、5d、7d、14d、21d组。选择左上第一磨牙作为实验牙,制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,进行免疫组织化学研究。结果正畸牙移动过程中,牙周组织内NGF表达发生改变。NGF表达量在正畸模型加载后迅速上调,实验组和对照组分别于5d、1d时表达水平达到最高,所有观察区域牙周膜内NGF表达显著增加,且实验组明显高于对照组。结论NGF在正畸牙移动过程中牙周组织改建的多个阶段起作用,参与了牙周膜早期的炎症反应及修复和晚期的改建。     

大鼠正畸性牙根吸收及牙齿移动差异的研究

目的建立大鼠正畸性牙根吸收模型,比较一个加力周期内不同加力时间及不同加力力值时大鼠牙齿的移动差异及牙根吸收情况。了解时间、力值与牙齿移动及牙根吸收的关系。方法选择月龄相同,体质量相近的SD雄性成年大鼠建立正畸牙移动模型,按不同加力时间分为1、3、5、7、10、14d组,按加力大小分为40g、60g、80g力组。测量不同组别正畸牙移动量,采用连续切片观察牙根吸收情况。结果各组牙齿移动距离不同;牙根吸收主要表达在根中1/3区域;吸收程度与加力时间及力值有关。结论1、成功建立大鼠正畸性牙根吸收模型。2、不同加力时间及不同力值各组牙齿移动距离存在显著差异。3、不同加力时间及不同力值组牙根吸收存在规律性。     

正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3的表达

目的 探究正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3（LC3Ⅱ）的表达。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组和9个实验组,实验组正畸加力0.392 N近中移动右上第一磨牙,加力时间分别为15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d,空白对照组不做任何处理。处死大鼠后,行苏木精-伊红（HE）染色观察压力区牙周膜形态学变化、免疫组织化学染色检测Beclin-1与LC3Ⅱ的表达、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色计数破骨细胞。结果 HE染色显示,加力1 d后压力区牙周膜透明样变出现,并随加力时间延长逐渐加重。免疫组织化学染色显示,实验组Beclin-1和LC3Ⅱ表达均上调,1 h达峰值,随后逐渐降低,1 d时再次增强达一小峰值,后又回降,7 d时降低至基线水平。破骨细胞中也可见Beclin-1和LC3Ⅱ的表达。TRAP染色提示,加力1 d后破骨细胞数量开始增加。结论 自噬或许通过介导牙周膜透明样变发生和影响破骨细胞生物学作用参与正畸牙压力区牙周膜改建的过程。     

正畸牙移动过程中高迁移率族蛋白B1的改变

目的:研究高迁移率族蛋白B1(High Mobility Group Box-1,HMGB1)在正畸牙移动过程中的表达,以指导正畸临床加力。方法:30只Wistar大鼠,分为0、1、3、5和7 d组,每组6只;左侧施加0.6 N以近中移动上颌第一磨牙,右侧放置正畸装置但不加力作为对照;HE染色观察正畸牙移动过程中牙周组织的变化,免疫组织化学染色观察牙周支持组织中HMGB1的变化,以平均光密度法检测组织中HMGB1的表达量。结果:HE染色显示,加力1 d~7 d,大鼠第一磨牙牙周组织呈现正畸牙移动的典型变化:压力侧牙周膜变窄,呈现纤维排列紊乱,破骨细胞数目逐渐增多;张力侧牙周膜增宽,纤维排列整齐,成骨细胞数目逐渐增多。免疫组织化学染色显示,压力侧1 d时HMGB1表达量最低(0.0012 ± 0.0009),显著低于1 d对照组(0.0239 ± 0.011),从1~7 d,压力侧HMGB1逐渐增加,到7 d时到达加力后最高值(0.0127 ± 0.0014);张力侧1 d时HMGB1表达量(0.0193 ± 0.0012)低于1 d对照组(0.0284 ± 0.009),到5 d时,张力侧HMGB1达到最高值(0.0324 ± 0.0014),但与5 d对照组(0.0289 ± 0.0012)无显著差别。结论:过大的正畸矫治力减少压力侧牙周组织内HMGB1的表达,减慢透明样组织清除和正畸牙移动。     

大鼠实验性牙移动牙周组织Ⅰ型胶原的表达变化

目的 研究正畸力作用下大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原的表达变化,探讨正畸牙移动过程中牙周组织的改建机理.方法 将56只SD大鼠一侧上颌第一磨牙和前牙间用结扎丝拴结正畸用Ni-Ti螺旋弹簧,按正畸力大小分成施加50 g正畸力的轻力组28只、施加 150 g正畸力的重力组28只.对侧未做处理的磨牙作为对照组.分别于加力后3 、 6、 12、 24 h和3、 7、 14 d分7次处死,每次每组处死4只.采用免疫组织化学染色技术分别观察大鼠牙周膜中Ⅰ型胶原在机械力刺激下的免疫阳性表达变化及相互关系.结果 加力侧与对照侧牵张区之间的染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),轻力组与重力组压缩区与牵张区染色强度差异有统计学意义(P＜0.05),牵张区染色强度明显高于压缩区.牵张区1～3 d开始强表达,一直持续到14 d;压缩区1 d后开始表达减弱, 7 d后开始回升.另外发现50～150 g正畸力对大鼠牙周组织无明显破坏.结论 机械力作用下,大鼠牙周膜Ⅰ型胶原代谢发生变化,牵张区表达增强,压缩区表达减弱;机械力作用下Ⅰ型胶原表达变化与时间密切相关; 50～150 g的机械力范围是实验鼠正畸用力的安全范围.     

核心结合因子α1与正畸牙移动中牙槽骨改建的相关性研究

目的:通过对大鼠实验性正畸牙移动过程中牙周组织内的核心结合因子α1(core binding factor α1,cbfα1)进行定性及定量分析,研究cbfα1在牙槽骨改建过程中与成骨细胞分化的相关性。方法:选用8周龄雄性成年Wistar大鼠42只,随机分为加力0、1、3、5、7、10、14d组,每组6只。分别在固定加力装置后0、1、3、5、7、10、14d时处死动物,制备标本,进行免疫组化染色。采用SPSS11.0软件包进行Dunnett检验,研究正畸牙移动过程中cbfα1的表达变化。结果:在正常大鼠的牙周组织中,cbfα1呈弱阳性表达。各加力组中cbfα1的阳性表达随时间变化呈先升高后回降的趋势,压力区的牙槽骨表面cbfα1阳性表达显著低于张力区牙槽骨表面(P<0.01)。结论:cbfα1参与了正畸牙移动的骨改建过程,与成骨细胞的分化密切相关,从而促进了牙周组织的改建和稳定。     

辛伐他汀对牙周炎大鼠正畸牙移动保持阶段MMP-1表达影响的研究

目的 在牙周炎大鼠正畸牙移动后保持阶段,观察辛伐他汀对牙周组织中MMP-1表达的影响.方法 55只4周龄牙周炎大鼠分为11组,每组5只,近中移动双侧上颌第一磨牙21天后,分为空白对照组(1组,加力后直接处死),阴性对照组(5组),实验组(5组).阴性对照组和实验组内各小组分别保持1、3、7、14、21天,阴性对照组于保持前一天开始每天腹腔注射生理盐水,实验组每天注射辛伐他汀.免疫组化染色定量检测大鼠第一磨牙牙周组织中的MMP-1的表达.结果 各组近中侧牙周组织中MMP-1的表达量,早期呈逐渐增加的趋势,7天后逐渐减少.各组远中侧未保持者表达量在加力结束7天后逐渐增加,14天后开始减少.在同一时间点,实验组MMP-1表达量明显低于对照组.结论 牙周炎大鼠正畸保持阶段,全身给予辛伐他汀能降低炎症反应,抑制牙周膜纤维的降解,可能缩短正畸牙移动后的保持时间.     

大鼠正畸牙移动中Osterix的表达

目的：通过观察大鼠正畸牙移动过程中牙周膜内转录因子Osterix（Osx）的表达,初步探讨Osx与正畸矫治过程中牙周组织改建的关系。方法：将54只雄性SD大鼠随机分为9组,每组6只,即正畸加力0、3、6、12、24 h和3、5、7、14 d组,以右侧上颌第一磨牙不加力为自身对照组,左侧上颌第一磨牙为实验组,使用自制的加力装置移动磨牙并制备组织标本。SABC免疫组织化学法检测实验性大鼠正畸牙齿移动过程中牙周组织Osx的表达。结果：对照组大鼠牙周组织中Osx低表达,实验组于加力5 d时Osx表达水平达到最高,且张力区整体上比压力区阳性染色深。结论：正畸力作用下Osx参与牙周组织的改建,是正畸成骨的调控途径之一。     

大鼠正畸牙齿移动过程中Wnt3a和DKK1的表达

目的:观察Wnt3a和DKK1在大鼠正畸牙移动时牙周组织中的表达变化。方法:将30只健康雄性SD大鼠随机分为6组,即正畸加力1,3,5,7,10,14 d组。使用镍钛拉簧施加50 g力近中移动左侧上颌第一磨牙,以右侧上颌第一磨牙不加力为自身对照。通过免疫组化方法检测牙周组织中Wnt3a和DKK1蛋白的表达。结果:Wnt3a和DKK1在加力组和未加力组的牙周膜中都有表达。在张力区,Wnt3a和DKK1都先增加后减少,分别在第5天和第10天达到高峰;在压力区,Wnt3a先减少后增加,DKK1先增加后减少,分别在第5天和第10天达峰值。结论:Wnt3a和DKK1参与牙周组织的改建,提示Wnt信号通路可能是正畸牙周改建的调控途径之一。[关键词] Wnt3a DKK1 正畸牙齿移动 牙周组织改建     

大鼠正畸牙移动中HIF-1α的表达

目的:探讨正畸牙齿移动过程中牙周组织内低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF) -1α的表达变化及作用.方法:将45只雄性 SD大鼠随机分为9组,每组5只,分别为:实验加力0、3、6、12、24 h和3、5、7、14 d组.选择左上第一磨牙作为实验牙,右上颌第一磨牙不加力设为自身对照.制...     

正畸力作用下大鼠牙周组织中CCR1及其相关配体的表达

目的 研究正畸力加力后CC类趋化因子受体1（CCR1）及其相关配体（CCL3、CCL5、CCL7）的mRNA在大鼠牙周组织中的表达变化规律,以探讨CCR1在正畸牙移动的作用.方法 将35只8周龄体重（220±25）g雄性SD大鼠随机分为7组,每组5只,空白对照组大鼠不安装实验装置,其余大鼠安装实验装置.安装实验装置大鼠随机选择一侧上颌第一磨牙为实验牙,对侧第一磨牙作为对照牙,采用镍钛拉簧建立大鼠正畸牙移动模型,力值50 g.实验动物分别于加力后0h、12h、1d、3d、7d、14 d处死,取大鼠上颌第一磨牙周围牙周组织应用实时荧光定量PCR法进行研究.结果 大鼠牙齿加力后,观察到牙周组织内CCR1及其配体的mRNA表达量呈现一定的时间规律：加力后12 h,CCR1、CCL3、CCL5、CCL7的mRNA表达均开始上升,CCR1 mRNA表达在3d达高峰（F=1.745,P=0.021）,CCL3、CCL5mRNA表达在1d达高峰（F=19.976,PCCL3 =0.019; F=17.114,PCCL5=0.008）,CCL7表达差异无统计学意义.CCR1及其配体的mRNA转录水平在加力时7d均下降至与对照组基本一致.结论 正畸力作用下,大鼠牙周组织中CCR1及其相关配体mRNA表达出现一过性变化,呈现短时上调规律,推测CCR1及其相关配体表达与正畸牙移动过程及牙周骨改建可能相关.     

大鼠正畸牙移动过程中牙周组织内降钙素基因相关肽的变化

目的：了解大鼠正畸牙移动过程中牙周组织内降钙素基因相关肤(Calctionin gene—related peptide CGRP)的变化，探讨CGRP对正畸牙移动过程中的作用。方法：将35只雄性Wistar大鼠(体重240-280g)分为7组，其中一组未加力为对照组。选择右上第一磨牙作为实验牙，制备大鼠正畸牙移动12h、24h、3d、7d、14d、21d时牙周组织切片，进行免疫组织化学研究。结果：正畸牙移动过程中，牙周组织不同区域CGRP表达发生改变。加力3d时，根尖牙周膜CGRP表达稍增加；加力7d时，所有观察区域牙周膜内CGRP表达显著增加。结论：CGRP在正畸牙移动过程中组织重建的多个阶段起作用，参与了牙周膜早期的重建和晚期的再生。     

不同正畸力值下人龈沟液白细胞介素-1β和可溶性细胞黏附分子-1水平的变化

目的:探讨不同正畸力值下龈沟液内白细胞介素-1β(IL-1β)和可溶性细胞黏附分子-1(sICAM-1)水平的动态变化及其临床意义。方法:收集正畸科门诊中符合实验条件的32例病人,随机分成4组(A,B,C,D组),每组8人。分别对其一侧的尖牙施加0、100、150、250 g的远中移动的初始力。分别在加力前0 d及加力后1、3、7、14、21、28 d收集龈沟液(GCF),应用ELISA法测定GCF中IL-1β和sICAM-1的含量。结果:B组和C组GCF中IL-1β含量在加力后1、3、7 d持续升至高峰,然后下降,28 d基本恢复到基线水平;sICAM-1含量在加力后1、3 d持续升至高峰,然后下降,28 d基本恢复到基线水平。D组GCF中IL-1β含量在加力后1 d开始明显增高,于3 d升至高峰,之后7 d维持在较高水平,14 d开始下降,28 d基本恢复到基线水平;D组GCF中sICAM-1含量在加力后1、3 d持续升至高峰,然后下降,28 d基本恢复到基线水平。D组加力后1、3、7、14、21 d时GCF中IL-1β和sICAM-1含量明显高于其余3组(P<0.05)。结论:牙齿正畸过程中龈沟液内IL-1β和sICAM-1含量与正畸力大小及力的持续时间密切相关,两者含量的检测有助于临床了解和监测正畸病人牙周情况。     

牙齿移动过程中Piezo1对压力侧牙周组织内IL-1β、IL-6及IL-17的影响

目的:通过大鼠正畸牙齿移动模型,探究Piezo1在压力侧牙周组织内的表达变化及其对IL-1β、IL-6、L-17表达的影响,进一步了解正畸过程中Piezo1在牙周组织改建中的作用。方法:选用60只6～8周龄雄性SD大鼠,随机分为A组(对照组)、B组(加力组)、C组(加力+抑制剂组),另按1、3、5、7、14 d分为5个亚组。B组、C组大鼠构建牙齿移动模型,C组局部注射Piezo1抑制剂。在规定时间点处死大鼠,测量牙齿移动距离,HE染色观察压力侧牙周组织形态学变化,免疫组织化学染色观察压力侧牙周组织内Piezo1及IL-1β、IL-6、IL-17表达情况。结果:B组和C组的牙齿移动距离随时间而增加,牙周组织形态变化明显,B组的Piezo1及IL-1β、IL-6、IL-17表达均较对照组明显(P<0.05),C组与B组相比,除Piezo1表达无明显差异外(P>0.05),IL-1β、IL-6、IL-17的表达水平在3、5、7 d均较低(P<0.05),但仍高于对照组水平(P<0.05)。结论:Piezo1参与正畸牙移动过程,影响炎性因子的表达水平,参与正畸牙移动过程...     

iNOS在大鼠正畸牙牙周膜中的表达

[摘要] 目的 观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthasesi,NOS)在大鼠正畸牙移动牙周膜中的表达分布,探讨iNOS在正畸牙牙周组织改建中的意义。方法 通过正畸力牵引大鼠左上颌第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动模型。随机分为9组,每组5只,分别为:实验加力0 h、3 h、6 h、12 h2、4 h和3 d5、d7、d1、4 d。大鼠右上颌第一磨牙不加力设为自身对照组。制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,免疫组化方法检测iNOS表达分布。结果对照组有少量iNOS表达,实验组压力区iNOS阳性表达大于张力区,且随牙齿移动时间不同表达分布发生变化。3 d时iNOS即开始表达增强,7 d时iNOS阳性表达达到最高峰值1,4 d时iNOS表达值开始减少。结论 iNOS参与正畸牙移动牙周组织改建。     

大鼠正畸牙移动中牙周组织内STRO-1动态变化的研究

目的:通过观察大鼠正畸牙移动中牙周组织内STRO-1的动态变化,研究大鼠牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)在正畸牙周组织改建中的作用及表达变化的规律.方法:选用幼年SD大鼠,建立正畸牙移动的模型,分别在加力后1、3、5、7、10、14 d处死动物,制备标本.应用EnVision系统两步法和图像分析进行半定量分析.结果:正常大鼠牙周组织中STRO-1表达较低.STRO-1在加力组牙周膜中的表达与对照组比较,差异有显著性,在正畸牙移动过程中STRO-1阳性显色细胞明显增多.结论:STRO-1的表达强度与牙周改建的活跃程度相关,揭示了在正畸力作用下牙周组织改建的可能机制和牙周膜干细胞的作用.