大黄素对大鼠急性胰腺炎的治疗作用

目的 探讨大黄素诱导细胞凋亡对大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的治疗作用.方法 45只SD大鼠分为对照组、胰腺炎组、治疗组,每组15只.观察胰腺组织内腺泡细胞凋亡指数、NF-κB mRNA、Bax mRNA、外周血中中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophii,PMN)凋亡指数及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3、caspase-8)的变化情况.结果 与胰腺炎组比较,治疗组腺泡细胞和PMN凋亡指数及胰腺组织内NF-κB mRNA、Bax mRNA、PMN caspase-3与caspase-8表达均明显增加(F=853.199,327.126,143.586,48.857,231.750,96.552,P＜0.05).治疗组中,胰腺组织病理学评分与胰腺腺泡细胞凋亡指数、PMN凋亡指数均呈负相关(r=-0.96,-0.94,P＜0.05);胰腺腺泡细胞凋亡指数与胰腺组织内NF-κB mRNA、Bax mRNA表达呈正相关(r=0.73,0.76,P＜0.05);胰腺组织内NF-κB mRNA与Bax mRNA表达呈正相关(r=0.94,P＜0.05);PMN凋亡指数与PMN caspase-3、caspase-8表达均呈正相关(r=0.99,0.99,P＜0.05).结论 大黄素能有效治疗AP,其机制是通过Bax途径诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并通过caspase途径来诱导外周血中PMN凋亡,从而明显减轻AP病情程度.     

芍药苷对椎间盘内紊乱兔Fas介导的凋亡通路的调节作用

目的 探讨芍药苷在兔椎间盘内紊乱（internal disc disruption,IDD）发生过程中,是否干预死亡受体介导的信号传导途径,影响髓核细胞的凋亡,及其发生的可能机制.方法 取新西兰大白兔96只,雌雄不限,体重（3.0±0.5） kg.随机分为4组,每组24只.其中3组行纤维环穿刺造模（分别在L3/L4,L4/L及L5/L6椎间盘进行穿刺）.造模后各组分别采用芍药苷高剂量每天120 mg/kg、低剂量每天30 mg/kg及生理盐水灌胃治疗,正常对照组采用生理盐水灌胃,分笼常规饲养.分别在术后的3周、6周和10周将各组大白兔处死取材,每个时间点8只,离断腰椎,分离椎间盘.免疫组化法检测Fas、FasL、Caspase-8的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 造模组Fas、FasL、Caspase-8的表达较正常对照组升高（P＜0.05）.高、低剂量组Fas、FasL、Caspase-8的表达较生理盐水组降低（P＜0.05）.各造模组细胞凋亡率均高于正常对照组（P＜0.05）;高、低剂量组细胞凋亡率低于生理盐水组（P＜0.05）.结论 芍药苷可以抑制Fas表达,进而抑制Caspase-8的激活,最终起到抑制髓核细胞凋亡的作用.     

力学刺激对软骨细胞凋亡信号转导分子Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达的影响

目的 观察力学刺激对软骨细胞凋亡信号转导分子半胱氨酸酶-3( Caspase-3)及B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bax mRNA表达和凋亡的影响.方法 兔膝关节软骨分离培养,在第3代软骨细胞培养瓶中加入不同剂量的Caspase-3、bcl-2、bax抑制剂,力学刺激诱导凋亡,然后检测软骨细胞凋亡率,聚合酶链反应(PCR)半定量分析Caspase-3 bcl-2、bax mRNA表达.结果 力学刺激诱导软骨细胞凋亡,在加入抑制剂的各组和空白组的凋亡率差异有统计学意义(P＜0.05);各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达和空白组差异有统计学意义(P＜0.05).Caspase-3抑制剂组的凋亡率和Caspase-3表达明显相关(r=0.69,t=3.41,P＜0.01);bcl-2抑制剂组和bcl-2的表达明显相关(r=0.73,t=3.97,P＜0.01);bax抑制剂组和bax的表达明显相关(r=0.89,t =6.69,P＜0.01);各组差异均有统计学意义.结论 Caspase-3、bax抑制剂能对抗力学刺激诱导的凋亡,而bcl-2抑制剂使凋亡增加,各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达发生相应改变.     

核转录因子抑制蛋白α突变体对大鼠急性胰腺炎的保护作用

目的 观察核转录因子抑制蛋白α突变体(IκBαM)对大鼠急性胰腺炎的保护作用.方法 蛙皮素诱导建立SD大鼠急性胰腺炎模型.分4组:空白对照组A组、急性胰腺炎组B组、转染PcDNA3.0组C组、转染PcDNA 3.0-IκBαM组D组.分别于24 h检测各组血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、淀粉酶的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织中Fas、FasL、Caspase-3、mRNA的表达;组织学检测胰腺腺泡细胞坏死情况.结果 D组与B、C组比较:血清TNF-α、淀粉酶表达水平明显降低,差异有统计学意义[TNF-α(587±93比915±102;587±93比897±116);淀粉酶(6773±663比8973±825;6773±663比9021+_763),P＜0.05];胰腺组织Fas、FasL、Caspase-3 mRNA表达明显升高,差异有统计学意义[Fas(0.572±0.103比0.473±0.084;0.572±0.103比0.468±0.071);FasL(0.627±0.124比0.397±0.084;0.627±0.124比0.391±0.072);Caspase-3 (0.893±0.142比0.513±0.122;0.893±0.142比0.508±0.130),P＜0.05];胰腺组织腺泡细胞坏死明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).B、C、D组与A组表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IκBαM通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡对大鼠急性胰腺炎发挥保护作用.     

滋肾化毒饮联合环磷酰胺对狼疮性肾炎患者外周血淋巴细胞Fas、FasL、Bcl-2表达的影响及临床疗效观察

目的:观察滋肾化毒饮联合间断性环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法对活动期狼疮性肾炎(LN)患者外周血淋巴细胞(PBL)凋亡调控因子及临床指标的影响.方法:将活动性LN患者40例,随机分为治疗组和对照组,每组各20例.治疗组予滋肾化毒饮联合间断性CTX静脉冲击疗法,对照组予间断性CTX静脉冲击疗法.观察治疗3个月前后的PBL的Fas、FasL、Bcl-2表达及临床指标变化,Fas、FasL、Bcl-2用免疫组化法测定.结果:治疗后两组Fas、FasL及治疗组Bcl-2表达下调(P＜0.05),而Fas、FasL表达下调幅度大于对照组(P＜0.05).治疗组SLEDAI、24 h尿蛋白、Hgb、Ccr、C3指标的改善优于同期对照组(P＜0.05).治疗组肝功能受损、白细胞减少、舌苔厚腻、失眠、痤疮发生率明显少于对照组(P＜0.05).结论:调控Fas、FasL介导的凋亡可能是CTX、激素、滋肾化毒饮有效治疗活动狼疮性肾炎机制之一.     

Fas/FasL在罗哌卡因致PC12细胞凋亡中的表达

目的检测Fas、FasL在罗哌卡因诱导PC12细胞凋亡中表达的变化,探讨罗哌卡因的神经毒性机制。方法采用不同浓度罗哌卡因(0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)处理PC12细胞24 h以建立细胞的神经毒性模型,CCK-8法测定细胞活力。最终将细胞随机分为三组:0.5 mmol/L组、2mmol/L组和正常对照组。各组细胞培养24 h后用光学显微镜观察细胞形态学变化(加上1 mmol/L组),流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫荧光检测Fas、FasL表达。结果与正常对照组比较,0.5 mmol/L组和2 mmol/L组细胞活力明显降低(P0.05),细胞形态明显异常(包括1 mmol/L组),凋亡率明显升高(P0.05),Fas、FasL表达明显增强(P0.05);与0.5 mmol/L组比较,2 mmol/L组细胞凋亡率和Fas、FasL表达明显增加(P0.05)。结论罗哌卡因可诱导PC12细胞凋亡,其机制可能与Fas/FasL上调有关。     

Fas/FasL在乳头状甲状腺癌组织中的表达

目的：探讨凋亡相关基因Fas/FasL在甲状腺癌组织中的表达与细胞凋亡的关系。方法：采用流式细胞技术检测43例乳头状甲状腺癌癌细胞凋亡及相关基因Fas及FasL表达。同时检测Fas及FasL在甲状腺癌组织肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中的表达。结果：43例乳头状甲状腺癌细胞中Fas低表达者19例,细胞凋亡率为3．71％,高表达者24例,细胞凋亡率为7．26％,高表达组癌细胞凋亡率明显高于低表达组（P＜0．05）,癌细胞中FasL表达明显高于甲状腺腺瘤组织（P＜0．01）,乳头状甲状腺癌组织TLL表达Fas及FasL的水平明显高于甲状腺腺瘤组织（P＜0．01）。结论：Fas系统参与乳头状甲状腺癌细胞中细胞凋亡的调节,Fas/FasL表达异常使甲状腺癌癌细胞逃避免疫监视,诱导Fas敏感的TIL凋亡,有助于癌细胞发生浸润及转移。     

大黄素通过非Caspase依赖通路诱导膀胱癌细胞BIU87凋亡的机制

目的 研究大黄素对人膀胱癌细胞BIU87凋亡及凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)和核酸内切酶G( Endonuclease G,Endo G)的mRNA和蛋白表达的影响,探讨大黄素的抗癌机制. 方法 取对数生长期的人膀胱癌细胞株BIU87,分别加入大黄素和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养.实验分为4组:空白对照组、Z-VAD-FMK组、大黄素组、大黄素+Z-VAD-FMK组.采用甲基噻唑(MTT)比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对体外培养的BIU87细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测各组细胞AIF和Endo G mRNA的表达,蛋白质印迹法检测各组细胞AIF和Endo G蛋白的表达. 结果 MTT检测显示,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强.根据IC50值,选择80 μmol/L的大黄素干预72 h作为干预条件.大黄素组细胞凋亡率为(44.57±1.52)％,大黄素+Z-VAD-FMK组为(35.58±1.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR和蛋白质印迹结果显示,大黄素+Z-VAD-FMK组中AIF mRNA和蛋白为1.74±0.11、2.59±0.13,大黄素组为1.36±0.08、1.89±0.14,空白对照组为0.37±0.02、0.53±0.11,Z-VAD-FMK组为0.42±0.06、0.44 ±0.07,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);大黄素+ Z-VAD-FMK组中Endo G mRNA和蛋白为2.28±0.15、3.31±0.36,大黄素组为1.85±0.13、2.15 ±0.27,空白对照组为0.53±0.07、0.71 0.16,Z-VAD-FMK组为0.61±0.04、0.67±0.22,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡.     

肾上腺髓质素对缺氧复氧诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)对缺氧复氧(HR)诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的影响及其机制.方法 体外培养的NRK-52E细胞,随机分为4组:正常对照组、HR组、空质粒+HR组、ADM质粒+HR组.采用Fugene HD转染试剂,将pcDNA3.1-myc-his B空质粒和ADM真核表达质粒分别转染至NRK-52E细胞内,应用免疫细胞化学的方法检测转染效率,转染成功48 h后制作HR模型.锥虫蓝摄取法进行细胞计数并计算细胞存活率,分光光度法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量评价细胞活力;Annexin V和PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测ADM、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达;Western印迹法检测活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、8、9(Caspase-3、8、9)的蛋白表达.结果 HR组ADM的表达显著高于正常对照组(P＜0.05).ADM质粒+HR组的ADM表达显著高于空质粒+ HR组(P＜0.05).与正常对照组相比,HR组活细胞计数和细胞存活率显著降低,LDH含量及细胞凋亡率显著升高,Bax、Bcl-2、Fas、活性Caspase-3、8、9表达显著上调,Bax上调更明显,故Bax/Bcl-2升高(均P＜0.05).与HR组相比,ADM质粒+HR组活细胞计数和细胞存活率显著升高,LDH含量及细胞凋亡率显著降低,Bax、Fas、活性Caspase-3、8、9表达显著下调,Bcl-2表达进一步上调,Bax/Bcl-2降低(均P＜0.05).空质粒+HR组和HR组比较,上述各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 ADM在NRK-52E细胞中的高表达可以减轻HR诱导的细胞凋亡,其机制至少部分是通过抑制线粒体通路和死亡受体通路实现的.     

半胱天冬蛋白酶-3在高迁移率族蛋白B1诱导小鼠巨噬细胞凋亡中的作用

目的 观察半胱天冬蛋白酶(Caspase)-3与核转录因子(NF)-KB在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡中的作用.方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,随机分为对照组、HMCB1组与抑制剂组(HMGB1作用前1 h加入Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK).采用Hoeehst33342染色观察凋亡的形态学变化、流式细胞术检测巨噬细胞凋亡百分率的变化;应用原位荧光染色及流式细胞术检测Caspase-3活性的变化;同时应用酶联免疫吸附试验检测NF-KB p65蛋白的变化.结果 HMGB1组巨噬细胞凋亡率为(38.21±4.85)%、抑制剂组为(16.47±3.91)%,均显著高于对照组(4.21±1.64)%(P＜0.01).经Hoechst33342染色,荧光显微镜观察HMGB1组凋亡细胞明显增多;原位荧光染色观察到HMGB1组Caspase-3荧光强度明显增强,Caspase-3阳性细胞百分率(29.74±4.55)%显著高于抑制剂组(3.02±1.91)%与对照组(7.19±2.46)%(P＜0.01).同时,HMGB1组、抑制剂组细胞核NF-KB活性较对照组显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 Caspase-3和NF-KB是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的重要途径,Caspase-3抑制剂可部分阻断HMGB1诱导的巨噬细胞凋亡.     

Dopamine induces neutrophil apoptosis through a dopamine D-1 receptor-independent mechanism.

BACKGROUND: For the normal resolution of an acute inflammatory response, neutrophil (PMN) apoptosis is essential to maintain immune homeostasis and to limit inappropriate host tissue damage. A delay in PMN apoptosis has been implicated in the pathogenesis of the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). Dopamine, a biogenic amine with known cardiovascular and neurotransmitter properties, is used in patients with SIRS to maintain hemodynamic stability. We sought to determine whether dopamine may also have immunoregulatory properties capable of influencing PMN apoptosis, function, and activation state in patients with SIRS. METHODS: PMNs were isolated from healthy volunteers and patients with SIRS and treated with varying doses of dopamine and a dopamine D-1 receptor agonist, fenoldopam. PMN apoptosis was assessed every 6 hours with use of propidium iodide DNA staining and PMN function was assessed with use of respiratory burst activity, phagocytosis ability, and CD11a, CD11b, and CD18 receptor expression as functional markers. RESULTS: There was a significant delay in PMN apotosis in patients with SIRS compared with controls. Treatment of isolated PMNs from both healthy controls and patients with SIRS with 10 and 100 mumol/L dopamine induced apoptosis. PMN ingestive and cytocidal capacity were both decreased in patients with SIRS compared with controls. Treatment with dopamine significantly increased phagocytic function. Fenoldopam did not induce PMN apoptosis. CONCLUSION: Our data demonstrate for the first time that dopamine induces PMN apoptosis and modulates PMN function both in healthy controls and in patients with SIRS. These results indicate that dopamine may be beneficial during SIRS through a nonhemodynamic PMN-dependent proapoptotic mechanism.     

狼疮肾炎患者外周血单核细胞表达有功能的Fas

目的 探讨狼疮肾炎（ＬＮ）患者单核细胞凋亡加速的机制。方法 对灯例ＬＮ患者进行观察及以 １５例正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞 ＦａＳ和 Ｆａｓ Ｌｉｇａｎｄ（ＦａｓＬ）的表达；单核细胞与重组人ＦａＳＬ共孵育，碘化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡，四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法观察单核细胞体外存活率。结果ＬＮ患者单核细胞Ｆａｓ的表达较正常人明显上调（Ｐ＜０．０５）；处于狼疮活动期的ＬＮ患者与狼疮静止期的ＬＮ患者之间Ｆａｓ的表达差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。正常人和ＬＮ患者的单核细胞表面均未检测出ＦａｓＬ的表达。单核细胞与重组人ＦａｓＬ在体外共同培养２ｈ后，ＬＮ者单核细胞的凋亡较正常人明显增加（Ｐ＜０．０５），单核细胞与重组人 ＦａｓＬ在体外共同培养６ｈ后，ＬＮ患者单核细胞的存活率较正常人明显低下（Ｐ＜０．０５）。结论 ＬＮ患者单核细胞表面功能性Ｆａｓ表达上调是ＬＮ患者单核细胞凋亡加速的可能机制。     

Effects of hyperparathyroidism patients’ serum and klotho protein on the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells

Objective To investigate the effects and underlying mechanism of secondary hyperparathyroidism (SHPT) patients’serum and klotho protein on the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods Three types of mixed serum from 15 patients with SHPT (serum S), 10 CKD stage 5 patients without SHPT (serum C) and 15 healthy volunteers (serum H) were collected. HUVECs were incubated with 10% serum H,10% serum C, 10% serum S and 10% serum S plus klotho respectively. The apoptosis rate of endothelial cells was evaluated by flow cytometry. The activity of Caspase-3 was measured by spectrophotometry. The levels of AKT and phosphorylated forms of AKT (p- AKT) were detected by Western blotting (with or without PI3K/AKT inhibitor LY294002). Results The apoptosis of HUVECs was both induced by the serum S and serum C. The apoptosis rate was greater in serum S group than that in serum C group (P＜0.05). The apoptosis was partly inhibited when klotho protein (50-100 μg/L) was added (P＜0.05), accompanying the up-regulation of p-AKT. The above effects could be blocked by LY294002. The activity of Caspase-3 was up-regulated in SHPT group compared to healthy control group (P＜0.05) and the up-regulation could also be inhibited by klotho protein (P＜0.05). Conclusions The apoptosis of HUVECs is induced by the serum from CKD stage 5 patients without SHPT and SHPT patients. Klotho protein can protect the HUVECs from apoptosis by up-regulating p-AKT and inhibiting Caspase-3.     

Fas及Caspase家族在泡球蚴感染宿主肝脏中的表达及其意义

目的 探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义.方法 16例配对泡型包虫患者(AE)肝脏标本,16只雌性BALB/C小鼠.分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达.结果 AE患者病灶周围肝细胞水肿,汇管区周围纤维化,肝细胞造型坏死;病灶周围肝细胞发生显著凋亡[(74.0±15.0)％比(4.2±3.3)％],Fas[ (71.3±19.0)％比(5.2±1.6)％]、Caspase-3[ (39.4±18.3)％比(3.3±2.9)％]、Caspase-8[ (37.6±3.5)％比(4.0±1.8)％]和Caspase-9[ (24.7±13.8)％比(2.0±1.4)％]高表达(P＜0.05).泡球蚴感染小鼠病灶处可见囊泡,肝组织纤维化严重;肝细胞发生显著凋亡[(37.5±5.2)％比(13.9±2.7)％],Fas[ (48.3±6.2)％比(4.6±1.2)％]、Caspase-3[(29.7±6.3)％比(5.2±1.9)％]、Caspase-8[ (23.1±2.9)％比(3.5±1.4)％]和Caspase-9[( 16.7±3.2)％比(2.3±1.1)％]高表达(P＜0.05).结论 泡球蚴感染引起宿主肝细胞凋亡,提示Fas及Caspase家族介导的细胞凋亡信号通路可能参与了泡球蚴所致肝损伤进程.     

输注转染人IL-10基因的骨髓间充质干细胞减轻大鼠异种移植肝脏的细胞凋亡

目的 探讨转染人白细胞介素10(Hil-10)基因的骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠异种移植肝脏细胞凋亡的影响.方法 以携带Hil-10基因的慢病毒Hil-10/LOX-cwGFP转染豚鼠的MSC.以豚鼠为供者,Wistar大鼠为受者,利用两套管法行原位肝移植.空白对照组的受者分别于术前24 h和术后24 h经股静脉注射生理盐水2 ml+地塞米松0.5 ml(2 mg/ml)各1次;MSC组的受者分别于上述时间点自股静脉注射2.0×106/ml的MSC单细胞悬液2 ml+地塞米松0.5 ml(2mg/ml)各1次;Hil-10-MSC组的受者分别于上述时间点自股静脉注射2.0×106/ml的Hil-10-MSC单细胞悬液2 ml+地塞米松0.5 ml(2 mg/ml)各1次.术后12 h切取移植肝脏,观察移植肝组织学变化,测定肝组织中Hil-10、凋亡蛋白酶-3(Caspase-3)、Fas和FasL的表达,观察肝细胞的凋亡情况.结果 与空白对照组、MSC组相比,Hil-10-MSC组的病理改变最轻,IL-110表达明显增加,FasL明显减少.Hil-10-MSC组的Fas和Caspase-3的阳性区域面积分别为11.5%和25.1%,明显低于空白对照组的35.3%和70.8%(P＜0.05).Hil-10-MSC组的凋亡指数为32.5%,明显低于空白对照组的74.1%和MSC组的50.3%(P＜0.05).结论 Hil-10-MSC可明显减轻大鼠异种移植肝脏的细胞凋亡,其机制可能与其抑制Fas/FasL的表达有关.     

硒对淋巴细胞杀伤大肠癌细胞过程中Fas/FasL表达的影响

目的　探讨硒对淋巴细胞抗大肠癌过程中凋亡相关基因Fas/FasL表达的影响。方法　以半胱氨酸硒作为影响因素,人T淋巴细胞为效应细胞及人结肠癌细胞（LoVo细胞株）为靶细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、凋亡细胞荧光计数检测凋亡细胞的数量,逆转录-聚合酶链(RT-PCR)反应、原位杂交技术检测,硒对效应细胞杀伤肿瘤细胞过程中Fas/FasL表达的影响。结果　不同浓度的半胱氨酸硒（0.5、1.0　mg/L）作用48h后,可增强人T淋巴细胞抗肿瘤活性［分别为（25.12±3.91）%,（46.17±3.68）%,P＜0.05］,且肿瘤细胞的凋亡比例上升［分别为(18.6±4.1)%,（32.7±2.1）%,P＜0.05］;能使免疫效应细胞和肿瘤细胞表达FasL和Fas水平增高。结论　硒可提高淋巴细胞的抗肿瘤作用,可能通过Fas/FasL途径起作用。     

FasL、抗DR5单克隆抗体对结肠癌细胞株HT29的杀伤作用及其机制

目的 探讨FasL、抗DR5单克隆抗体(Anti-DR5 mAb)对结肠癌细胞株HT29的杀伤作用及机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、噻唑蓝(MTT)比色法、DNA倍体分析,Western blot等.结果 HT29细胞表面Fas mRNA的表达低于DIL5 mRNA的表达.50 mg/L FasL和Anti-DR5 mAb对HT29细胞的杀伤率分别为(25.49±0.90)%和(48.90±3.15)%,这种作用呈剂量依赖性.流式细胞术分析细胞周期和凋亡实验表明FasL和Anti-DR5 mAb能够抑制HT29细胞的生长,并且诱导它的凋亡.25 mg/L FasL和Anti-DR5 mAb对HT29细胞的凋亡指数分别为(13.8±1.5)%和(22.6±1.1)%.FasL和Anti-DR5 mAb作用HT29细胞后,Caspase-3蛋白表达上升,bcl-2蛋白表达水平下降.结论 FasL、Anti-DR5 mAb能不同程度的诱导结肠癌细胞株HT29凋亡,其机制与其受体和Caspase-3、bcl-2的表达有关.