镧系元素时间分辨荧光免疫分析

一、概述 应用镧系元素的时间分辨荧光(TRF)分析技术,已在免疫检测中显示出它的优越性。在医学各学科中;如内分泌激素的检查、肿瘤标志物的检测,以及体内各种内或外源     

CEA时间分辨荧光免疫分析

以ＣＥＡ单克隆抗体Ｃ５０包被微孔板,异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Ｅｕ＾３＋标记Ｃ１７单抗。采用平衡法建立ＣＥＡ时间分辨荧光免疫分析,数据采用Ｌｏｇ＝Ｌｏｇｉｔ函数数据自理程序处理。方法的批内和批间ＣＶ分别为２．９７％和１．６０％,平均回收率为１０１．９８％,灵敏度为０．２０μｇ／Ｌ,可测范围为２．３９～５０８．９μｇ／Ｌ,ＥＤ５０为６０．９１μｇ／Ｌ。本方法与ＡＦＰ和ＣＡ１２５和ＣＡ１５３无交     

时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的：通过内质控的定量分析，对时间分辨荧光分析的方法学进行客观评价。方法：以促甲状腺激素检测为例，对系统探测灵敏度 ，低、中、高持控血清的批内和批间精密度，批间稳定性参数Slope、ED20、ED50、ED80等4项指标，系统探测的准确度（回收试验），系统探测的有效性（平行试验），受试者工作特性曲线（receiver operator characteristic,ROC）等进行定量测定和描述。结果；TSH的最小测定值为0．002μU/mL.低、中、高3种质控样品批内和批间变异系数均小于5％，批间稳定性参数各变异系数均小于5％，与统计学要求相一致，且符合标准曲线质控参数的重现性。回收试验满足临床要求，符合检验统计结果。理论值与实测值间作回归分析，相关系数r=0．999。ROC显示，甲亢诊断的最佳阈值为0．3μU/mL，甲低诊断的最佳阈值为5．0μU/mL。甲亢敏感度为89．3％，特异度为93．3％，准确度为90．1％，阳性似然比为13．4，甲低敏感度为83．8％，特异率为90．9％，准确度为86．4％，阳性似然比为9．2。结论：时间分辨荧光免疫分析方法是一种效果好、准确度高、灵敏度高、特异性强、测试精度良好的自动化免疫分析方法。     

铁蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立

用夹心法建立铁蛋白(FER)时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),测定血清FER的含量。以FER单克隆抗体(McAb)806#包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu^3 及标记FERMcAb 803#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用双对数函数数据处理程序,方法的批内和批间CV分别为2．2％和3．7％,平均回收率为118％,灵敏度为0．5μg／L,可测范围为0．5-1000μg／L。ED20、ED50和ED80分别为27．8μg／L、88．5μg／L和247μg／L。Eu^3 FER McAb于-30℃保存至少4个月,免疫反应性基本无损失,同批试剂连续分析4个月结果稳定。本法与PE公司的FER-TRFIA试剂盒所得样品的测定值的相关系数为0．98。本文建立的FER-TRFIA法,是一种适用于人群贫血普查和各种肝脏疾病及肿瘤的联合诊断的良好方法,分析范围、灵敏度和稳定性均较理想,值得推广应用。     

时间分辨荧光免疫分析技术在寄生虫病诊断中的应用

时间分辨荧光免疫分析（Time—resolved fluoroimmunoassay，TRFIA）是一种新型的体外超微量分析技术．被公认为是目前灵敏度最高的分析方法之一，并以其独特的优势近些年迅速发展，已延伸至生物医学、临床医学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及在某些寄生虫病检测诊断中的相关应用作一简要综述。     

时间分辨荧光免疫分析方法建立中有关问题的探讨

本文报告了时间分辨荧光免疫分析技术建立中有关问题的实验研究结果。包括对Eu~(3+)标记技术的改进,增强液的配制和检定,抗体包被固相材料的选择及操作中必须注意的防止稀土元素污染的措施。     

血清铁蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 血清铁蛋白(sFER)时间分辨荧光免疫(TRFIA)分析试剂盒的研制.方法 采用双抗体夹心法建立sFER-TRFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价.结果 试剂盒的线性测量范围为2.2～1 070 ng/mL,灵敏度为0.22 ng/mL,批内、批间的精密度分别为4.6%～7.2%、5.4%～8.9%,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和人白蛋白无交叉反应.86份血清样本用本试剂盒与国外其他试剂盒同时检测,其相关系数为0.994.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.     

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。     

孕期甲状腺功能相关检测参考范围研究

目的 建立北京地区健康妊娠妇女不同妊娠时期的血清甲状腺激素水平的正常参考范围,为正确评价孕期甲状腺功能和诊断甲状腺疾病提供了依据.方法 按照美国国家临床生化研究院(NACB)的标准,随机选择20 ～ 35岁健康妊娠期妇女360名作为研究组,并按孕周分为妊娠早、中、晚期,同时随机选取符合标准的非妊娠健康妇女135名作为对照组,检测比较三碘甲状腺素(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺素(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的水平.结果 妊娠期妇女甲状腺激素水平与非妊娠期妇女多组比较差异有统计学意义(P＜0.01).非妊娠期妇女血清各项检测指标的参考范围分别为:TT3:1.26～2.07nmol/L,TT4:83.34 ～ 136.21 nmol/L,FT3:4.27～6.29pmol/L,FT4:9.35～15.23pmol/L,TSH:0.60 ～5.99μIU/mL.妊娠期妇女血清TT3水平在妊娠早、中、晚期的参考范围分别为:1.54～2.91nmol/L、1.48～2.85nmol/L、1.48～2.65nmol/L;血清TT4水平在妊娠早、中、晚期的参考范围分别为:96.74～178.53nmol/L、84.44～ 172.07nmol/L、84.60 ～ 151.29 nmol/L;血清FT3水平在妊娠早、中、晚期的参考范围分别为:3.86～5.81 pmol/L、3.57～ 5.54pmol/L、3.47 ～ 5.13pmol/L;血清FT4水平在妊娠早、中、晚期的参考范围分别为:6.87～14.42pmol/L、6.27 ～ 10.86pmol/L、6.63～11.05pmol/L;血清TSH在妊娠早、中、晚期参考范围分别为:0.60 ～3.98 μIU/mL、0.22～4.69μIU/mL、0.44～ 5.02μIU/mL.结论 妊娠期妇女血清甲状腺激素水平与非妊娠期妇女存在明显差异,且妊娠各期之间亦存在明显差异.因此,目前临床上通常应用非孕期甲状腺检测的参考范围评价孕期甲状腺功能是不正确的,建立北京地区妊娠期妇女甲状腺激素参考范围具有重要意义.     

正常孕妇早中晚孕期甲状腺激素参考值范围的研究

目的 建立正常孕妇孕早中晚期参考值范围.方法 用化学发光免疫测定方法测定健康妊娠妇女及年龄匹配的非妊娠妇女甲状腺激素水平,其中孕早期(T1)204例,孕中期(T2)238例,孕晚期(T3) 172例,非妊娠妇女193例,分别建立甲状腺激素参考值范围.结果 以中位数(M)及双侧限值P2.5％ ～ P97.5％区间的方式表示,T1、T2及T3期的T3、T4、FT4、FT3及T1、T2期的TSH不同于非妊娠妇女(P＜0.05).T3期的TSH与对照组比较没有统计学意义(P＞0.05).①TSH值在不同孕期间两两比较差异显著(P＜0.01),T1期最低,随着孕周的增加,TSH水平逐渐回升,至孕晚期达到最高;②FT3值在不同孕期间两两比较差异显著(P＜0.05),T1最高,随着孕周的增加,FT3水平逐渐降低,至T3达到最低,T1高于非妊娠妇女,T2、T3期低于非妊娠妇女(P＜0.05);③FT4值在不同孕期间两两比较差异显著(P＜0.05),T1期最高,随着孕周的增加,FT4水平逐渐降低,至T3期达到最低,T1、T2高于非妊娠妇女,T3期低于非妊娠妇女(P＜0.05);④T3、T4值在不同孕期间两两比较差异不显著(P＞0.05),不同孕期均高于非妊娠妇女(P＜0.05).结论 妊娠期血清甲状腺激素随不同孕期有明显的变化,与正常非妊娠妇女不同,建立孕期甲状腺激素参考范围有助于临床及时、准确判断孕期甲状腺疾病.     

甲状腺激素对大鼠脾淋巴细胞内ACTH的影响

本实验通过药物诱发SD大鼠发生甲亢和甲低，研究甲状激素对脾淋巴细胞内免疫反应性ACTH（irACTH)的影响，甲亢组大鼠体重显著低于甲低组和对照组；血清TT3，FT3，TT4，FT4在甲亢组和甲低组间有显著差异；相同细胞数内irACTH量，甲亢组略高于对照组，而甲低组则显著低于另两组，表明甲状腺激素对淋巴细胞内irACTH的合成有正调节作用。     

岐山县中老年人群甲状腺功能指标生物参考区间变化研究

目的 观测陕西省岐山县食用碘盐干预前已成年健康居民的甲状腺功能指标生物参考区间变化.方法 按照美国临床生化研究院(NACB)建议标准选取了从2012年1月至2014年12月期间在本院进行健康体检的1480名35～92岁健康中老年人作为研究对象,按照检测年度、性别分组,检测促甲状腺激素(thyrotropin hormone,TSH)、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,TT3)、甲状腺素(tetraiodothyronine,TT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free tetraiodothyronine,FT4)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺微粒体抗体(thyromicrosomal antibody,TMAb)七项指标,并建立和比较各分组间甲状腺功能指标生物参考区间的差异.结果 本地区中老年男性人群甲状腺功能指标中TSH、TT3、TT4、TGAb、TMAb三个年度间均存在显著性差异,中老年女性人群甲状腺功能指标中只有TT3、TGAb、TMAb三个年度间存在显著性差异.其中,TGAb、TMAb两项指标随年度增长趋势明显,TGAb、TMAb的Pg5生物参考区间已由2012年的＜4％分别变为2014年的＜10％及＜8％,整体变化幅度达到或超过100％.结论 2012年至2014年期间,在社会经济环境、生活习惯、地理气候没有发生明显改变的情况下,岐山县研究人群甲状腺自身抗体基线水平的逐年增高,印证了人为干预因素(全民食盐加碘)对陕西省省内自身免疫性甲状腺相关疾病谱的长期影响.同时表明,实时监测并适时调整本地区甲状腺功能检测指标的生物参考区间,对于区域内相关疾病的准确诊断和流行趋势判断具有重要意义.     

化学发光免疫分析、放免分析和磁珠酶免疫分析测定血清甲状腺激素的评价

为比较化学发光免疫分析(CLIA)、放射免疫分析(RIA)和磁珠酶免疫分析(MSP -ELISA)测定血清TT3、TT4、FT3、FT4和TSH的方法学特性,分别用CLIA、RIA和MSP-ELISA测定标准品、质控品及40份患者血清中TT3、TT4、FT3、FT4和TSH含量, 进行线性、相关性、精密度、回收率等实验结果分析评价.结果显示: CLIA、RIA和MSP-ELISA检测TT3、TT4、FT3、FT4和TSH的线性和相关性无显著性差异, CLIA检测的精密度、回收率优于RIA、MSP-ELISA,且具有快速的特点.     

阿尔茨海默病患者甲状腺激素测定的临床意义

为探讨阿尔茨海默病(AD)与甲状腺激素的关系和AD患者应用胆碱酯酶抑制剂治疗6个月后甲状腺激素水平的变化,将61例AD患者分为治疗组(27例,使用选择性胆碱酯酶抑制剂,连续治疗6个月)和未治疗组(34例),并以58名健康者作为对照组,分别于AD患者治疗前及治疗后第6个月检测血清FT、FT.、TT3和TT4浓度.结果显示,①治疗前全部AD患者FT3、TT3浓度明显低于对照组(P＜0.01,P＜0.05);②AD患者中治疗组与未治疗组比较,治疗前两组各激素水平无差异(P＞0.05),治疗组血清FT3、TT4水平6个月后和治疗前比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05).这提示甲状腺功能异常可能与AD发病有关,用胆碱酯酶抑制剂治疗后可上调甲状腺激素水平.     

The Relationships between Thyroid Hormones and Thyroid-stimulating Hormone with Lipid Profile in Euthyroid Men

Background and Aim: Alteration in lipid profile is a common observation in patients with thyroid dysfunction, but the current knowledge on the relationship between lipids and thyroid hormone levels in euthyroid state is insufficient. The current study aimed to determine the association between thyroid hormones and thyroid-stimulating hormone (TSH) with lipid profile in a euthyroid male population.Methods: A total of 708 Chinese and Malay men aged 20 years and above were recruited in this cross-sectional study. Their blood was collected for the determination of total cholesterol (TC), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), triglyceride (TG), free thyroxine (FT4), free triiodothyronine (FT3) and TSH levels. The association was analyzed using multiple regression and logistic regression models with adjustment for age, ethnicity, body mass index and FT4/FT3/TSH levels.Results: In multiple regression models, TSH was positively and significantly associated with TG (p<0.05). Free T4 was positively and significantly associated with TC, LDL-C and HDL-C (p<0.05). Free T3 was negatively and significantly associated with HDL-C (p<0.05). In binary logistic models, an increase in TSH was significantly associated with higher prevalence of elevated TG in the subjects (p<0.05), while an increase in FT4 was significantly associated with higher prevalence of elevated TC but a lower prevalence of subnormal HDL in the subjects (p<0.05). Free T3 was not associated with any lipid variables in the logistic regression (p>0.05).Conclusions: In euthyroid Malaysian men, there are positive and significant relationships between TSH level and TG level, and between FT4 level and cholesterol levels.     

不同甲状腺功能状态下甲状腺CT值及甲状腺摄131I率变化规律

目的 通过观察不同甲状腺功能状态下甲状腺CT值和甲状腺摄131I率间变化规律,为进一步探讨Graves病(GD)患者甲状腺CT值与甲状腺摄131I率间关系奠定基础.方法 受检者选自廊坊市人民医院核医学科2007年3月至2009年12月门诊首诊患者及我院正常体检人群,按甲状腺功能不同分为甲亢组、甲减组和正常组,分别测定甲状腺激素水平、甲状腺CT值和摄131I率,其结果分别与甲状腺功能正常组做对照,各组数据以均数±标准差((x)±s)表示,行方差分析.结果 与正常组比较:①甲亢组,甲状腺激素TT36.38±2.34nmol/L、TT4 195±37.25nmol/L、FT3 10.17±2.76pmoL/L、FT438.94±11.23 pmol/L均明显升高,TSH0.11±0.88 μU/mL降低,P均＜0.01;甲状腺摄131I率2h 44±9％、4h 58±16％、24h 76±15％,各时间点均明显增高,P均＜0.01;甲状腺CT值78±13HU降低,P＜0.01.②甲减组,甲状腺激素水平TT30.57±0.14nmol/L、TT426.03±8.55nmol/L、FT3 1.37±0.84pmol/L、FT44.72±1.39pmol/L均明显降低,TSH 15.67±8.95μU/mL增高,P均＜0.01;甲状腺摄131Ⅰ率2h5.7±2.3％、4h3.8±1.3％、24h 2.6±1.1％,各时间点均明显降低,P均＜0.01;甲状腺CT值53±16HU降低,P＜0.01.结论 不同甲状腺功能状态下甲状腺CT值和甲状腺摄131I率间存在一定变化规律,该规律与甲状腺病理改变和甲状腺滤泡内I-含量变化密切相关.     

High Incidence of Thyroid Dysfunction in Preterm Infants

To determine the validity of a repeat thyroid function test for preterm infants, and to investigate factors that influence thyroid function of preterm infants, thyroid functions of 105 infants born at <32 weeks'' gestational age were evaluated. Initial serum free thyroxine (fT4) and thyrotropin (TSH) levels were measured during the first 10 days of life, and repeated tests were performed more than 2 weeks apart. We analyzed the effects of gestational age, systemic diseases, and nutrition on the development of thyroid dysfunction. Thirty-one infants (30%) had low fT4 levels (<0.7 ng/dL) in the absence of elevated TSH levels (<7 µU/mL). Thirteen infants (12%) had hypothyroidism (fT4 <0.7 ng/dL, TSH ≥10 µU/mL) and mean age at diagnosis was 28±17 days. Twelve infants had moderately elevated TSH (TSH 10-30 µU/mL) with normal fT4 levels after 1 week of postnatal life. The history of undergone surgical procedure which needed iodine containing disinfectants was significantly frequent in the infant with hypothyroidism and transient TSH elevation. Repeated thyroid function tests are necessary for preterm infants, even though they initially show normal thyroid function, and are especially important for infants who have been exposed to excessive or insufficient levels of iodine.     

桥本甲状腺炎患者外周血白细胞性激素受体的改变及其意义

应用放射配体结合法检测３８例则性淋巴细胞性甲状腺炎（桥本甲状腺炎）患者外周血白细胞雄性激素受体（ＡＲ）及雌激素受体（ＥＲ）。同时用方向免疫分析检测血浆黄体生成素（ＬＨ）、卵泡刺激素（ＦＳＨ）、睾酮（Ｔ）、雌二醇（Ｅ２）及Ｔ３、Ｔ４和ＴＳＨ。结果表明桥末甲状腺炎患者ＬＨ、ＦＳＨ、Ｅ２和Ｔ无明显改变；白细胞ＥＲ明显升高，ＡＲ无明显改变；ＥＲ／ＡＲ比值明显升高。以上结果提示ＥＲ及ＥＲ／ＡＲ比值的升高与桥