柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7的影响

目的：探讨柴芩肾安方对IgAN大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7表达的影响。方法：采用灌服并定时静脉注射BSA复合感染SEB的方法制成大鼠IgAN模型,并用柴芩肾安方治疗,以氯沙坦为对照。第15周末,观察肾组织形态学变化和免疫复合物的沉积情况;采用免疫组化和RT—PCR的方法,分别检测肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达。结果：与正常组相比,模型组大鼠肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生,伴见弥漫的IgA和少量IgG沉积;TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA表达均明显升高（P〈0．01）。柴芩肾安方治疗后上述指标均明显减轻（P〈0．01）,且作用效果与氯沙坦类似。结论：抑制肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达,可能是柴芩肾安方延缓IgAN肾脏病变进展的机制之一。     

肾康灵胶囊对IgA肾病大鼠的实验研究

肾康灵胶囊为临床治疗ＩｇＡ肾病的中药中试产品 ,由黄芪、当归、生地、丹参、三七参、丹皮、黄柏、五倍子等组成 ,具有补气活血、清热养阴之功效。近年来对ＩｇＡ肾病治疗的观察表明 ,本品疗效显著 ,本文以具有改善微循环作用的保肾康片为对照药 ,观察了不同剂量的肾康灵胶囊对ＩｇＡ肾病大鼠的影响。资料与方法1　实验材料1 1　实验动物　ＳＤ系雄性大鼠 ,体重 (180± 10 ) ｇ ,由中国辐射防护研究院提供。1 2　药物与试剂　牛血清白蛋白 (ＢＳＡ) (上海生物制品厂 ,批号为 990 80 1) ,葡萄球菌肠毒素Ｂ(ＳＥＢ) (解放军军事医学科学院提…     

黏膜方对IgA肾病小鼠免疫学机制的影响

目的：探讨以中医和解清热立法组方的黏膜方治疗实验性IgA肾病的作用机制。方法：采用口服牛血清白蛋白（BSA）、尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B（SEB）及腹腔注射免疫佐剂的方法诱发小鼠IgA肾病模型。随机分为正常组、模型组、中药组及对照组4组,观察治疗后各组尿蛋白、血清IgA及循环免疫复合物、肾组织肠组织IgA的表达、肾组织病理学的改变。结果：模型组小鼠尿蛋白和尿白蛋白较正常组增加,中药组较模型组尿蛋白降低;正常组肾脏无IgA沉积、肠黏膜IgA微弱表达,模型组肾脏有IgA沉积,其中主要是多聚IgA1（pIgA1）沉积、肠黏膜IgA强表达,各治疗组肾脏IgA沉积较模型组减弱、肠黏膜IgA强表达;各治疗组在肾组织中系膜细胞和系膜基质均较模型组明显降低（P〈0.01）,而中药组更优于对照组（P〈0.01）。结论：中药黏膜方能有效改善尿蛋白并抑制IgA沉积至肾小球系膜区,表明中医和解法能成为治疗IgA肾病的有效方法之一。     

氯沙坦在大鼠IgA肾病小管间质损伤中的保护作用

目的应用氯沙坦对大鼠IgA肾病模型进行干预,观察其对IgA肾病小管间质损害的影响。方法采用牛血清白蛋白（BSA）＋脂多糖（LPS）＋四氯化碳（CCl4）方法建立IgA肾病大鼠模型,设立正常对照组（A组）、IgA模型组（B组）、氯沙坦治疗组（C组）,每组6只,实验前后进行相关生化指标的测定,光学显微镜观察肾脏的组织形态学改变;免疫组织化学法观察各组转化生长因子β1（TGF-β1）、α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达;逆转录聚合酶链（RT-PCR）方法检测TGF-β1、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）变化。结果B组尿蛋白量增高,C组则有所降低（P〈0．05）;实验前、后,B组肾功能改变显著,C组变化无统计学意义（P〉0．05）;B组大鼠肾脏组织中存在不同程度的系膜细胞增生,肾小管上皮细胞肿胀、空泡变及间质炎细胞浸润,而C组上述变化减轻;免疫组织化学法及RTPCR检测显示TGF-β1、α-SMA及MCP-1在A组肾小管及间质中微量表达,B组高表达,C组表达减少。结论IgA肾病存在肾小管间质的损伤;氯沙坦减少IgA肾病大鼠尿蛋白的排泄,抑制炎症及纤维化因子的表达,对IgA肾病小管间质的损伤起保护作用。     

黏膜方对IgA肾病大鼠异常糖基化IgA1及肾间质纤维化的干预及机制研究

目的:研究血清和肾组织中的异常糖基化IgA1水平与IgA肾病的间质纤维化程度的相关性;阐明黏膜方治疗IgA肾病的作用机制。方法:采用口服牛血清白蛋白、四氯化碳皮下注射和尾静脉注射脂多糖免疫复合法建立IgA肾病大鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药组(黏膜方)及西药组(福辛普利钠)、中西医结合组(黏膜方+福辛普利),观察治疗后各组血清和肾组织异常糖基化的IgA1水平、血清IgA-纤维连接蛋白(IgA-FN)、肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及其mRNA的表达量。结果:血清IgA-FN,中药组及中西医结合组低于模型组(P<0.001);血清异常糖基化IgA1量,中药组及西药组均低于模型组(P<0.05);肾组织中的异常糖基化IgA1水平,模型组高于正常组(P<0.05),各治疗组低于模型组(P<0.05);肾组织中TGF-β1mRNA及蛋白表达量模型组均显著高于正常组(P<0.01),各治疗组TGF-β1mRNA及蛋白表达均低于模型组(P<0.05);模型组α-SMAmRNA高于正常组(P<0.05),各治疗组低于模型组(P<0.001),模型组α-SMA蛋白表达阳性面积高于正常组(P<0.001),中西医结合组和西药组阳性面积低于模型组(P<0.05);肾组织α-SMAmRNA及蛋白表达与血清及肾组织中异常糖基化IgA1呈正相关(P<0.005);肾组织TGF-β1mRNA与血清及肾组织异常糖基化IgA1呈正相关(P<0.005)。结论:血清中异常糖基化IgA1与肾间质纤维化程度密切相关,黏膜方能减轻实验性IgAN大鼠血清及肾脏异常糖基化的IgA1水平,改善肾间质纤维化。     

益气清利化瘀方对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化作用机制研究

目的:研究益气清利化瘀方对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的影响及可能作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,分别为假手术组、模型组、科素亚组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组;大鼠采用UUO模型;中药组用益气清利化瘀方小、中、大剂量配方颗粒,西药用氯沙坦钾片,术后2 d开始给药,2周后处死大鼠,肾脏组织予光镜观察及免疫组化法检测α-SMA、TGF-β₁、Smad2和Smad7的表达;Western Blot方法检测肾组织TGF-β₁、Smad7蛋白的表达;血清予检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)和白蛋白(Alb)。结果:与模型组比较,中药大剂量组肾小管正常结构存在,炎症细胞浸润少。治疗后各组Scr、UA较模型组均有下降,其中血Scr下降明显,中药大剂量组和中剂量组优于其他组(P<0.01);免疫组化显示各治疗组α-SMA、TGF-β₁减少,Smad2表达减弱,Smad7的表达升高,以中药大剂量组改变最明显(P<0.01);Western Blot检测显...     

原发性IgA肾病肾组织及血中转化生长因子-β1表达的相关性

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）在肾组织的表达与原发性IgA肾病（IgAN）各病理类型关系及其与血中的TGF-β1之间的关系。方法：分析了2003年1月～2008年6月的67例原发性IgAN患者肾组织中TGF-β1的表达与其各病理类型关系,及其与血中TGF-β1之间的关系。结果：IgA肾病患者各病理分级肾组织中TGF-β1的表达量差异有统计学意义（P〈0.01）,随病理分级增高,TGF-β1表达量越多。IgA肾病患者肾组织中TGF-β1的表达量与血中TGF-β1显著相关（r=0.918,P〈0.01）。结论：原发性IgA肾病患者可通过检测血中的TGF-β1来反映肾组织中TGF-β1水平,从而预测其肾脏病理等级,有助于预测其预后,避免反复肾活检。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾小球足细胞nephrin表达的影响

目的：探讨柴芩肾安方对IgA肾病（IgAN）大鼠肾小球足细胞nephrin表达的影响。方法：通过切除单侧肾并反复静脉注射葡萄球菌肠毒素B（SEB）复制大鼠IgAN模型,分为正常组、切肾组、IgAN组、柴芩肾安方组和氯沙坦组。第12周末,检测各组大鼠24h尿蛋白量（Upr）,观察肾小球形态学和超微结构变化,并采用免疫组化和实时定量PCR法检测肾小球足细胞nephrin蛋白及mRNA的表达。结果：与正常组相比,IgAN组大鼠Upr显著升高（P〈0.01）,肾小球系膜增生,足突融合明显,足细胞nephrin蛋白及mRNA表达均明显下调（P〈0.01）。经柴芩肾安方治疗后上述指标均明显改善,与IgAN组比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。结论：柴芩肾安方能减轻IgAN大鼠蛋白尿及肾小球病变,这可能与其恢复肾小球足细胞nephrin表达有关。     

基于Notch信号通路探讨黄葵总黄酮对IgA肾病大鼠的治疗作用机制研究

目的:基于Notch信号通路探讨黄葵总黄酮对IgA肾病大鼠的治疗作用机制研究。方法:建立IgA肾病大鼠模型,分成6组,黄葵总黄酮高、中、低(5. 0,10. 0,20. 0 mg/kg)剂量组、贝那普利组(3. 0 mg/kg);分别于尾静脉注射。对照组和模型组尾静脉注射等体积的生理盐水,连续治疗8周。治疗结束后,检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿红细胞、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、湿肾/体重和干肾/体重、(湿肾-干肾)/体重,Notch1、Jagged1、TGF-β_1、p-Smad3蛋白表达量以及Notch1、Jagged1 mRNA水平。结果:与模型组比较,黄葵总黄酮各剂量组尿红细胞、BUN、24 h UTP、Scr、湿肾/体重、干肾/体重、(湿肾-干肾)/体重、Notch1、Jagged1、TGF-β_1、p-Smad3、Notch1mRNA、Jagged1 mRNA均降低,差异有统计学意义(P <0. 05);与对照组及贝那普利组相比,黄葵总黄酮低、中组尿红细胞、BUN、24 h UTP、Scr、湿肾/体重、干肾/体重、(湿肾-干肾)/体重、Notch1、Jagged1、TGF-β_1、p-Smad3、Notch1mRNA、Jagged1 mRNA明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05); Notch1mRNA与Notch1、Jagged1 mRNA、TGF-β_1、p-Smad3; Jagged1 mRNA与Jagged1、TGF-β_1、p-Smad3均为正相关关系(P <0. 05)。结论:黄葵总黄酮能阻断Notch信号通路通传导,抑制Notch1、Jagged1、TGF-β_1、p-Smad3蛋白的表达,进而抑制成肾小球肿大,降低肾脏蛋白的沉淀,最终对IgA肾病起治疗作用。     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾小管间质损害的实验研究

目的：探讨IgA肾病大鼠肾小管间质损害及中药复方肾络宁的干预作用。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾络宁组、肾炎康复片组。采用牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B复合感染的方法建立大鼠IgA肾病模型；实验共16周，药物干预后常规检测尿红细胞、尿蛋白、血尿素氮、肌酐、尿NAG酶，以及免疫荧光观察肾组织病理；原住杂交，免疫组化及计算机图像分析系统观察大鼠肾小管间质损害的病理变化，以及Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）、转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的表达情况。结果：模型组出现肾小管上皮细胞变性，线粒体结构消失，数量减少，间质成纤维细胞增生及胶原纤维形成；尿红细胞、尿蛋白、NAG酶、血肌酐、尿素氮明显增高，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI-1、TIMP-1表达明显增高，MMP-1表达明显降低。肾络宁及肾炎康复片组小管间质损害明显减轻；血尿、蛋白尿、血肌酐、尿素氮、尿NAG明显降低，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI—1、TIMP—1表达明显降低，MMP—1表达明显升高。结论：肾络宁可明显减轻IgA肾病大鼠肾小管间质损害，改善肾功能，延缓间质纤维化及肾衰竭的进程。     

固本通络冲剂治疗IgA肾病的临床疗效观察

目的：研究中药复方固本通络冲剂治疗IgA肾病的治疗效果及疗效特点。方法：对肾活检证实的IgA肾病患随机分为固本通络冲剂治疗组（50例）及潘生丁对照组（30例）进行疗效观察及疗效特点分析，疗程3个月。结果：固本通络冲剂治疗IgA肾病病人总有效率为88％，对照组为30％，有显性差异（P＜0．01）。结论：固本通络冲剂是治疗IgA肾病的有效中药复方制剂。     

Genetic Polymorphism of C3 and Bf in IgA Nephropathy

C3 and Bf alleles were examined in the general population, in67 patients with biopsy-confirmed mesangial IgA nephropathyand 81 patients with other types of glomerulonephritis, fromthe Heidelberg and Leiden renal programmes respectively. In both populations, a significant excess of homozygous phenotypeC3FF (3.4% in controls; 10.4% in IgA nephropathy) and a deficitof C3FS heterozygous phenotype (35.8% in controls; 19.4% inIgA nephropathy) were observed in patients with IgA nephropathy,but not in other types of glomerulonephritis. No differenceof C3 gene frequencies was found. C3FF was associated with anadverse clinical outcome (a higher prevalence of renal failureand hypertension). A significant excess of Bf-F gene frequency was noted (0.20in controls; 0.33 in IgA nephropathy). In addition, an excessof phenotype BfFF was found (none in controls; 10.4% in IgAnephropathy). BfFF homozygotes also carried a higher risk ofan adverse outcome (renal failure and hypertension). The data suggest a role for genetically coded (presumably) immunologicalfactors in the genesis and course of IgA nephropathy.     

Influence of Cytokine Gene Polymorphisms on IgA Nephropathy

Aims. Recently, polymorphisms of cytokine genes have been associated with altered gene expression and modified cytokine production. We evaluated the impact of TGF-β1 gene Arg²⁵→Pro, TNFα gene G-308A and IL-6 gene G-174C polymorphisms on the clinical manifestations of IgA nephropathy. Patients and methods. The clinical course of 127 patients with biopsy-proven IgA nephropathy followed up for 6.6 ± 6.0 years was studied. Patients were classified according to the slope of reciprocal serum creatinine into group A (slow progressors, n?=?78) and group B (fast progressors, n?=?49). TGF-β1 gene Arg²⁵→Pro, TNFα gene G-308A and IL-6 gene G-174C polymorphisms were determined by PCR amplification followed by restriction digestion with the endonucleases Sau96 I, Nco I, and Lwe I respectively. Results. The genotype distribution of the investigated polymorphisms was similar in patients and control subjects (ns). Age, initial renal function, proteinuria, and blood pressure did not differ significantly between patients with different genotypes. The investigated polymorphisms were not associated with the progression of the IgA nephropathy, as shown by the similar genotype distribution in group A and group B (slow progressors: TGF-β1, 92.3%; TNFα, 25.6%; IL-6, 74.4%; fast progressors: TGF-β1, 85.7%; TNFα, 22.4%; IL-6: 81.6%, ns). Furthermore, these polymorphisms had no impact on renal survival in the Kaplan Meier analysis (ns). Conclusion. Our results suggest that TGF-β1 gene Arg²⁵→Pro, TNFα gene G-308A, and IL-6 gene G-174C polymorphisms are not risk factors or markers of progression in Caucasian patients with IgA nephropathy.     

固本通络冲剂治疗IgA肾病的实验研究

目的：在中药复方固本通络冲剂治疗IgA肾病取得显临床疗效的基础上，进行动物实验以探讨其临床疗效作用机理。方法：采用口服0．1％牛血清白蛋白及静注葡萄球菌肠毒素B制成的小鼠IgA肾病模型。并用固本通络冲剂进行治疗并分析其作用机理。结果：动物实验表明固本通络冲剂降低蛋白尿作用与临床结果一致，对肾组织病理损害、肾组织SOD、GSH—PX活性、MDA含量亦有显改善作用。结论：固本通络冲剂作用机理可能与提高活性氧清除酶类的活性，减少肾组织过氧化脂质，从而减轻肾组织病理损害有关。