女性外阴尖锐湿疣HPV感染类型及其与临床复发关系研究

目的探讨女性外阴尖锐湿疣（vulval condyloma acuminatum,VCA）组织中不同类型人乳头状瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染及其与临床复发的关系。方法采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法检测女性外阴尖锐湿疣疣体组织中的HPV6、11、16、18、31、33,并对VCA患者行局部病灶电灼＋α-2b干扰素凝胶外涂,随访3个月,观察HPV感染者低危组和高危组的复发率。结果 VCA患者中各型HPV的阳性率为HPV6（88.1%）、HPV11（90.5%）、HPV16（7.1%）、HPV18（23.8%）、HPV31（0%）、HPV33（2.4%）,低危型（LR-HPV,HPV6/11）的阳性率90.5%（38/42）、高危型（HR-HPV,HPV16/18/31/33）的阳性率31.0%（13/42）。其中,大部分高危型（HPV16、18、31、33）感染伴有低危型（HPV6和/或11）的双重感染（11/13）。低危组（即单纯低危型HPV6或11感染的29例）和高危组（即HPV16、18、31、33任一型感染的13例）复发率分别为27.6%（8/29）、38.5%（5/13）,两者差异无统计学意义（F=0.495）。结论 VCA中主要感染的HPV型为低危型HPV,部分VCA同时伴有高危型HPV的混合感染。尚无证据表明VCA中高危型HPV感染者较低危型HPV感染容易复发。     

MDM2和p53在宫颈鳞癌中的表达及与高危型HPV感染的关系

目的 探讨宫颈鳞癌组织中MDM2、p53的表达及与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法 选取实验组30例宫颈鳞癌组织及对照组20例正常宫颈组织,石蜡包埋后,采用免疫组化法检测组织中MDM2、p53蛋白的表达;采用杂交捕获二代实验(HC2)的方法检测实验组及对照组宫颈分泌物中高危型HPV的表达.结果 MDM2、p53在宫颈鳞癌组织中的表达阳性率分别为90％、86.7％,高危型HPV(HR-HPV)在宫颈鳞癌患者宫颈分泌物中的检出率为83.3％;p53在HR-HPV阳性的宫颈鳞癌患者中阳性表达率为92％,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);经Spearman相关分析显示,P53与高危型HPV在宫颈鳞癌中的表达呈正相关(r =0.822,P＜0.05).结论 MDM2、p53与宫颈鳞癌的发生有关;高危型HPV感染可能是p53由抑癌基因转变为癌基因的关键因素.     

p53和ras基因突变及HPV感染与喉鳞癌的关系

①目的　探讨人乳头瘤病毒 16 ,18型 (HPV16 ,18)感染 ,抑癌基因p5 3和癌基因ras突变与喉鳞癌的关系 ,并初步分析 3种致癌因素的相互关系。②方法　应用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术 ,检测 40例喉鳞状细胞癌组织中 p5 3基因第 5 ,7外显子及ras基因 (N ras ,K ras,H ras)第 12密码子的突变情况 ,同时用PCR技术检测 40例标本中HPV16 ,18的感染情况。③结果　 40例标本检出HPV16阳性标本 14例 ,HPV18阳性标本 4例。 4例标本 p5 3基因第 5外显子第 143密码子发生突变 ,其中 1例HPV16阳性 ,p5 3基因第 7外显子未发现突变。 9例标本ras基因发生突变 (N ras 6例 ,K ras 2例 ,H ras 1例 ) ,其中 2例HPV16阳性 ,但未见 p5 3与ras基因同时发生突变者。HPV阳性和阴性标本中p5 3基因突变率、ras基因突变率的差异均无显著性(χ2 =0 .10 1,1.392 ,P >0 .0 5 )。④结论　HPV感染、p5 3和ras基因突变与喉鳞癌的发生密切相关 ,三者之间的关系尚待进一步探讨。     

β2-微球蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及与HPV16感染的关系

目的:研究新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈鳞癌组织中β2-微球蛋白(β2-MG)的表达及其与人乳头状瘤病毒(HPV)16亚型感染的关系。方法:采用免疫组化方法和聚合酶链反应(PCR)技术检测75例宫颈炎及127例宫颈鳞癌组织中β2-MG的表达和HPV16感染情况。结果:汉族、维吾尔族宫颈鳞癌组织中β2-MG阳性表达率分别为78.95%、53.93%,明显低于宫颈炎组织中的阳性表达率(93.48%、100.00%,P<0.05);维吾尔族宫颈鳞癌组织中β2-MG阳性表达率(53.93%)明显低于汉族(78.95%)(P<0.05)。维吾尔族宫颈鳞癌组织中β2-MG的表达与HPV16感染呈正相关(r=0.162,P<0.05)。结论:宫颈鳞癌组织中β2-MG表达量下降,且在维吾尔族和汉族间表达有差异,提示HPV感染的宫颈鳞癌组织由于β2-MG表达量下降,影响了主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ类分子的正确组装,不能有效地呈递抗原,可能是肿瘤细胞逃逸免疫监视的一种机制。     

HPV16型E6蛋白在外阴上皮内非瘤样病变和外阴鳞癌中的表达

目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)16-E6蛋白在外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)、外阴鳞癌(VSCC)中的表达,探讨HPV16-E6蛋白是否为NNEDV病因及与VSCC的相关性.方法:采用免疫组织化学SP法检测HPV16-E6在15例正常外阴组织,40例NNEDV及45例VSCC中的蛋白表达情况.结果:HPV16-E6蛋白在正常外阴皮肤组无表达,在NNEDV及VSCC中阳性表达率分别为30％和66.67％,差异均有统计学意义(P＜0.05).在NNEDV组中,HPV16-E6蛋白在鳞状上皮增生(SH)型及硬化性苔藓(LS)型阳性率分别为35％和25％,差异无统计学意义(P＞0.05),但均较正常外阴皮肤组升高(P＜0.05),较VSCC组降低(P＜0.05).HPV16-E6在VSCC的表达阳性率为66.67％,阳性率随临床分期的增高而增高,Ⅰ期和Ⅱ期,Ⅰ期和Ⅲ期比较差异均有统计学意义(P＜0.017),但Ⅱ期和Ⅲ期比较差异无统计学意义(P＞0.0l7).随着肿瘤分化程度的增高,阳性率逐渐降低,高分化和低分化,中分化和低分化比较差异均有统计学意义(P＜0.017),但高分化和中分化比较差异无统计学意义(P＞0.017).有淋巴结转移者HPV16-E6阳性表达率高于无淋巴结转移者(P＜0.05).结论:HPV感染可能是NNEDV的病因之一.HPV16-E6蛋白表达升高可能与VSCC发生、发展相关.     

人乳头瘤病毒感染和ras基因突变与喉鳞癌的关系

①目的 探讨人乳头瘤病毒１６．１８型（ＨＰＶ１６．１８）感染及ｒａｓ基因突变与喉鳞癌的关系。②方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析技术,检测４０例喉鳞状细胞癌组织中ｒａｓ基因（Ｎ－ｒａｓ,Ｋ－ｒａｓ,Ｈ－ｒａｓ）第１２密码子的突变情况及ＨＰＶ１６．１８的感染情况。③结果 ４０例标本中检出ＨＰＶ１６阳性１４例（３５％）,ＨＰＶ１８阳性４例（１０％）,９例标本ｒａｓ基     

维吾尔族口腔鳞癌患者HPV感染及PCNA表达的临床病理学意义

目的：探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染及增殖细胞核抗原（PCNA）在维吾尔族口腔鳞癌中的异常表达与肿瘤病理生物学特征问的关系及临床意义，为有效防治口腔鳞癌提供实验科学依据。方法：对66例维吾尔族口腔鳞癌标本应用免疫组化（LSAB）法检测PCNA的表达及变化，采用PCR技术检测HPV感染率。结果：PCNA在口腔鳞癌中阳性率为84．8％，在口腔正常组织中阳性率为16．7％，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。HPV在口腔鳞癌中阳性率为42．4％．在口腔正常组织中阳性率为8．3％，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：（1）PCNA在细胞内的过度表达可能在口腔鳞状上皮组织良性病变的恶性转化过程起关键性的作用，可对良、恶性病变从分子水平进行评估，并可作为早期诊断及临床治疗鳞癌的分子生物学指标。（2）HPV16、18型感染与口腔鳞癌的发生密切相关，可能是口腔鳞癌发生中的重要环节。     

外阴鳞癌组织中脆性组氨酸三联体缺失与人乳头状瘤病毒感染状态的关系

目的：探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因缺失与人乳头状瘤病毒（HPV）感染在外阴鳞癌发生发展中的作用和意义。方法：采用免疫组化SP法检测42例外阴鳞癌中的FHIT蛋白的表达,以PCR方法检测HPV感染情况,并以10例正常外阴组织作为对照,分析HPV阳性组和阴性组外阴鳞癌组织中FHIT蛋白的表达与其临床病理特征的关系。结果：FHIT在正常外阴组织中呈阳性表达;FHIT在外阴鳞癌组中阴性率为71.4%（30/42）,明显高于正常组（P=0.000）,且随着细胞分化程度的降低,FHIT阴性率上升。FHIT基因的表达在HPV阳性组和阴性组间比较,差异具有统计学意义（P=0.030）。结论：FHIT基因缺失与外阴鳞癌发生发展有关。HPV感染可能是引起FHIT异常的原因。     

HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用EnVision免疫组织化学法检测72例喉鳞癌、24例喉癌前病变、15例声带息肉和8例癌周正常喉组织标本中HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的表达并比较,对喉鳞癌与临床病理因素进行相关性分析.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中 HPV16/18-E6蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、12.5%(3/24)和 37.5%(27/72),p53蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、13.3%(2/15)、25.0%(6/24)和52.8%(38/72),MDM2蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、37.5%(9/24)和70.8%(51/72),HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的阳性表达在声带息肉、喉癌前病变与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白和MDM2蛋白的阳性表达在病理Ⅰ～Ⅲ级肿瘤之间呈明显升高趋势,有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白的阳性表达与临床分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05).p53蛋白阳性表达与HPV16/18-E6蛋白、MDM2蛋白阳性表达有显著正相关性(P＜0.05).结论:HPV16/18-E6、MDM2蛋白的过表达和p53的失活与人喉鳞癌的发生发展密切相关.     

MDM2蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达意义

目的　初步探讨 MDM2在喉癌发生发展中的机制 .方法　采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶 (S- P)免疫组织化学法 ,检测 1 2例声带息肉 ,1 5例喉癌旁组织 ,1 1例喉不典型性增生及 41例喉鳞状细胞癌组织中 MDM2蛋白的表达 ,并研究蛋白表达与肿瘤病理分级、临床分期、临床分型、淋巴结转移的关系 .MDM2蛋白阳性表达为核着色 .结果　 MDM2蛋白表达阳性率在各个组分别为声带息肉 0 .0 % ,喉癌旁组织40 .0 % ,喉不典型性增生 72 .7% ,喉鳞状细胞癌组织 39.0 % .MDM2蛋白表达在声带息肉组与癌旁组织组、声带息肉组与喉不典型性增生组、声带息肉组与喉鳞状细胞癌组织组、喉不典型性增生组与喉鳞状细胞癌组织组 (P<0 .0 5)均有显著性差异 .喉鳞状细胞癌组 MDM2蛋白表达与临床分期有关 ,与病理分级、临床分型、淋巴结转移无关 .结论　 MDM2基因在喉癌发生、发展中有重要作用 ,其异常表达是喉癌发生中早期分子事件 ,检测 MDM2蛋白有助于喉癌早期诊断     

MDM2基因多态性与鲁西南汉族人群食管鳞状细胞癌风险性关联研究

目的研究MDM2基因多态性在鲁西南汉族人群中的分布并分析其与食管鳞状细胞癌的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析检测132例食管鳞状细胞癌患者(病例组)和132例健康人群(对照组)MDM2 SNP309的基因多态性,并比较不同基因型与食管鳞状细胞癌发病风险的关系。结果 MDM2 SNP309位点在鲁西南汉族群体中的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。对照组和病例组MDM2 SNP309基因座位上突变等位基因频率分别为37.50%和45.45%,差别无统计学意义(P>0.05);SNP309基因座中突变等位基因G的纯合子G/G基因型频率分别为10.61%和18.94%,差别具有统计学意义(P<0.05);MDM2 SNP309的G/G基因型可增加食管鳞状细胞癌的发病风险(OR=2.27;95%CI:1.04～4.97)。结论 MDM2基因SNP309位点的G/G基因型可能与鲁西南地区食管鳞状细胞癌的发病风险增高具有相关性。     

口腔鳞癌不同取材方法对HPV检出率影响的研究

目的：探讨口腔鳞状细胞癌（鳞癌）不同的取材方法对人乳头瘤病毒（HPV）检出率的影响。方法：应用PCR-反向斑点杂交法检测19例口腔鳞癌患者病变组织HPV阳性的瘤体表面上皮细胞、血标本的DNA,对3组的阳性率进行比较。结果：瘤体上皮组,18例标本HPV呈阳性,HPV分型与瘤体组织组一致,血标本组,仅有2例HPV阳性,HPV分型与瘤体组织组一致,瘤体组织组与瘤体上皮组比较,χ^2=.000,P〉0.05,瘤体组织组与血标本组比较,χ^2=0.7619,P〈0.05,瘤体上皮组与血标本组比较,χ^2=7.0222,P〈0.05。结论：不同的取材方法会影响口腔鳞癌HPV的检出率,用瘤体本身或其表面上皮细胞均为临床适用的取材方法。     

人食管鳞癌组织中促血管生成素-2的表达

目的:探讨食管鳞癌及癌旁组织中促血管生成素-2(Ang-2)的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测56例食管鳞癌、13例原位癌、11例重度不典型增生和47例食管断端正常鳞状上皮组织中Ang-2的表达.结果:Ang-2的表达主要定位于肿瘤细胞的胞浆和胞膜.食管鳞癌、原位癌组织中Ang-2的表达高于食管正常鳞状上皮组织(P＜0.01)和癌旁重度不典型增生上皮组织(P＜0.05);重度不典型增生上皮组织中Ang-2的表达也高于食管正常鳞状上皮(P＜0.01),但食管鳞癌组织和原位癌组织中Ang-2的表达差异无统计学意义(P＞0.05).Ang-2的表达与食管鳞癌的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移无关(P均＞0.05).结论:Ang-2的阳性表达是食管癌鳞癌发生的早期事件.     

肺鳞癌与人乳头瘤病毒及p53表达的关系

目的 探讨肺鳞癌组织中人乳头瘤病毒（HPV）感染与p53蛋白表达的关系并分析作用机制。方法 收集84例肺鳞癌和18例支气管粘膜慢性炎症标本，采用地高辛标记的HPV－DNA探针，用原位杂交法检测组织中的HPV－DNA存在情况，并用免疫组化SABC法检测肺鳞癌组织中p53及HPVE6,E7蛋白的表达，将二者进行对照观察。结果 ①HPV原位杂交阳性信号位于细胞核内，肺鳞癌HPV检出率为49％，对照组慢性炎为6％，差异显著。②肺鳞癌组织中存在HPVE6，E7蛋白表达，免疫组化方法与原位杂交方法结果相符。③84例肺鳞癌中30例检出p53蛋白表达，其中17例HPV阳性，13例HPV阴性，HPV阳性组与阴性组差异不显著。结论 肺鳞癌与HPV感染关系密切，肺鳞癌组织中也存在p53基因表达，p53蛋白积聚与HPV感染无明显相关性。     

舌鳞癌中IL-8的表达与微血管生成

目的探讨白细胞介素-8(IL-8)的表达与舌鳞癌血管形成的关系。方法应用免疫组织化学技术检测60例舌鳞癌手术切除标本和10例正常舌黏膜标本中IL-8的表达及肿瘤内微血管密度(iMVD)。结果舌鳞癌标本中36例(60·00%)IL-8呈阳性表达,舌鳞癌iMVD为38·30±12·87;IL-8评分为高级的舌鳞癌组织iMVD高于IL-8评分为阴性和低级的舌鳞癌组织。iMVD与IL-8呈正相关(rs=0·735,P<0·01)。结论IL-8表达与肿瘤内iMVD明显相关,同时与舌鳞癌的临床分期关系密切。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作 探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋 标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为 ８／４４（１８． ２％），喉息肉组为２／１６ （１２．５％）（Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ １６／１８杂交阳性者在喉癌组为 １９／４４（４３．２％），喉息肉组为 ２／１６ （１２．５％）（Ｐ＜０．０５）。提示：ＨＰＶ １６／１８型感染与喉癌的发生有密切关系，是喉癌发病学中一个不 容忽视的致癌因素。     

口腔白斑和鳞状细胞癌中人乳头瘤病毒感染分析

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)16/18感染与口腔鳞状细胞癌(OSCC)临床病理特征间的关系.方法 原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)分别检测10例正常口腔黏膜,26例口腔白斑(OLK)和56例OSCC中的HPV16/18水平,分析不同组间HPV16/18阳性率间的差异和OSCC中HPV16/18感染与性别、年龄、TNM分期、组织学分化、淋巴结转移、吸烟的关系.结果 ISH和IHC检测HPV16/18阳性率差异无统计学意义(P＞0.05);OSCC和OLK患者中HPV16/18阳性率高于正常口腔黏膜(P＜0.05);OSCC中吸烟者HPV16/18阳性率明显高于非吸烟者(P＜0.05).结论 HPV16/18感染是部分OSCC的发病因素,其与吸烟对OSCC发病具有协同作用.