肺炎衣原体感染增强C57BL/6J小鼠氧化应激加速动脉粥样硬化发展

目的研究肺炎衣原体感染对C57BL/6J小鼠氧化应激及动脉粥样硬化形成的影响。方法48只C57BL/6J小鼠分为感染高脂组、高脂组、感染组和对照组,每组12只,喂养40周,作血清抗CP抗体和血脂水平检测,取主动脉根部标本分析动脉粥样硬化斑块面积,主动脉弓部标本检测超氧阴离子的产生。结果所有接种CP的小鼠,抗CP抗体IgG滴度均大于1∶128,未接种CP者抗CP抗体阴性,感染高脂组和高脂组小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白水平明显高于对照组,感染高脂组、高脂组和感染组超氧阴离子的产生明显高于对照组[(1974.25±650.49)、(701.00±105.16)、(455.62±77.54)counts·mg-1·min-1比(142.25±31.82)counts·mg-1·min-1,P<0.001],氧化荧光染料定位分析发现感染高脂组、高脂组和感染组小鼠主动脉超氧阴离子产生明显增多,且感染高脂组小鼠平均粥样硬化斑块面积大于高脂组[(135249±43748)μm2比(96378±30945)μm2,P<0.05]。结论肺炎衣原体感染可加速高脂饮食C57BL/6J小鼠的主动脉粥样硬化发展,并引起C57BL/6J小鼠主动脉超氧阴离子产生增多,提示活性氧产生增多、氧化应激增强可能是肺炎衣原体感染加速动脉粥样硬化发展的机制之一。     

Orai1在载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成中的表达

目的探讨Orai1在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中的表达。方法选取7~8周龄雄性Apo E-/-小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物。取主动脉制备连续切片,HE、Masson染色计算机图像分析仪测定斑块面积占管腔面积百分比,及胶原成分占斑块面积百分比;油红O染色分析斑块中脂质含量;免疫组织化学染色测定平滑肌细胞阳性表达Orai1的百分比;Western Blot定量分析Orai1在易损斑块形成过程中的动态表达。结果与同周龄C57BL/6J小鼠相比,Apo E-/-小鼠主动脉Orai1表达增高,且随着其周龄增加,Orai1在Apo E-/-小鼠主动脉的表达动态升高(P0.05)。结论 Orai1参与动脉粥样硬化斑块形成的病理过程,在其形成过程中其表达上调。     

瞬时受体电位通道M2在动脉粥样硬化小鼠血管高反应性中的作用

目的探究瞬时受体电位通道M2(TRPM2)在动脉粥样硬化(AS)小鼠主动脉5-羟色胺高反应性中的作用。方法将40只小鼠随机分为C57BL/6J普通饲料组(C57+nd)、C57BL/6J高脂饲料组(C57+hfd)、载脂蛋白E基因敲除(APOE~(-/-))普通饲料组(APOE~(-/-)+nd)和APOE~(-/-)高脂饲料组(APOE~(-/-)+hfd),喂养16周。比较4组小鼠主动脉TRPM2基因表达变化,运用血管环张力检测技术测定小鼠主动脉对5-羟色胺的反应性变化,观察TRPM2抑制剂处理对5-羟色胺反应性的作用。结果 APOE~(-/-)+hfd组小鼠体质量、血糖和血脂显著增高,主动脉斑块形成明显,模型制备成功。APOE~(-/-)+hfd组小鼠主动脉TRPM2 mRNA(3.20±0.97)与蛋白(2.82±0.35)相对表达水平高于其他3组(mRNA:C57+nd组0.92±0.42、C57+hfd组0.74±0.37、APOE~(-/-)+nd组0.87±0.42;蛋白:C57+nd组1.39±0.23、C57+hfd组1.35±0.34、APOE~(-/-)+nd组1.22±0.23);APOE~(-/-)+hfd组主动脉对5-羟色胺反应性增强,半最大效应浓度(EC_(50))减小,且可被TRPM2抑制剂N-苯基邻氨基苯甲酸(ACA,1μmol/L)和2-氨基乙酯二苯基硼酸(2-APB,10μmol/L)显著抑制[ACA抑制率:C57+nd组(16.62±1.28)%、C57+hfd组(19.20±5.55)%、APOE~(-/-)+nd组(14.72±2.30)%、APOE~(-/-)+hfd组(38.15±1.13)%,F=12.58,P0.01;2-APB抑制率:C57+nd组(27.68±5.24)%、C57+hfd组(28.75±3.67)%、APOE~(-/-)+nd组(50.40±7.74)%、APOE~(-/-)+hfd组(62.81±5.99)%,F=98.83,P0.01]。结论 APOE基因敲除和高脂喂食处理可能通过上调TRPM2基因表达,增强TRPM2在5-羟色胺高反应性中的作用,促进小鼠AS的产生。     

动脉粥样硬化斑块内FIZZ1表达促进平滑肌细胞清道夫受体-A上调

目的探讨ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化斑块内FIZZ1表达情况及其对平滑肌细胞清道夫受体A(SR-A)表达的影响.方法C57BL/6J ApoE基因敲除鼠及C57BL/6J野生型小鼠各9只,分别喂养高脂饲料及普通饲料,24周后处死小鼠,石蜡包埋血管后做连续切片,行HE染色及FIZZ1免疫组化.用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)以及终浓度分别为3×10-6mmol/L、9×10-6mmol/L、2.7×10-5mmol/L的FIZZ1刺激培养的平滑肌细胞,激光共聚焦显微镜确认SR-A表达后,流式细胞术检测FIZZ1对ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达的影响.结果ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部明显形成动脉粥样硬化,可见FIZZ1在动脉粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠正常血管壁内,未见FIZZ1表达,重组FIZZ1能明显促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达(与对照组比较,P<0.01).结论C57BL/6J野生型小鼠正常血管不表达FIZZ1,C57BL/6JApoE基因敲除鼠动脉粥样斑块表达FIZZ1,FIZZ1促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达,提示FIZZ1可能在ApoE基因敲除鼠动脉粥样硬化进展中起一定的促进作用.     

生长素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块与炎症因子的影响

目的观察生长素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠血浆白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和血管壁核转录因子κBp65(NFκBp65)表达及动脉粥样斑块的影响。方法8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠12只饲以西方类型膳食12周建立动脉粥样硬化模型,遗传背景相同的6只8周龄雄性C57BL/6J小鼠饲以同类型膳食作对照。第8周时模型组分为腹腔内注射生长素(100μg/kg)组(n=6)和注射生理盐水(0.1mL)组(n=6),C57BL/6J小鼠亦给予生理盐水(0.1mL)腹腔内注射。第12周时眼眶取血,分离血浆,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-8、MCP-1、TNF-α水平。取小鼠主动脉进行苏丹Ⅳ染色,观察主动脉粥样硬化病变面积占主动脉内膜面积的比例,行主动脉窦HE及油红O染色,观察主动脉窦动脉粥样斑块面积占管腔总面积的比例,行主动脉免疫组化染色,观察NFκBp65的表达。结果与C57BL/6J小鼠比较,ApoE~(-/-)小鼠和ApoE~(-/-)+生长素小鼠总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇高[(6.7±0.5),(7.6±2.0)比(5.5±0.2)mmol/L,(5.6±0.3),(6.0±0.5)比(2.2±0.1)mmol/L,均P0.05],ApoE~(-/-)+生长素小鼠高密度脂蛋白胆固醇比ApoE~(-/-)组高[(0.5±0.1)比(0.3±0.1)mmol/L,P0.05]。与C57BL/6J小鼠比较,ApoE~(-/-)小鼠主动脉粥样硬化病变面积占主动脉内膜面积比例增加[(15.1±1.7)%比0],ApoE~(-/-)+生长素小鼠主动脉粥样病变面积占主动脉内膜面积比例较ApoE~(-/-)小鼠降低[(10.1±0.5)%比(15.1±1.7)%,P0.05];C56BL/6J小鼠主动脉窦无动脉斑块形成(0%),ApoE~(-/-)组和ApoE~(-/-)+生长素组均有动脉斑块形成,但ApoE~(-/-)+生长素组小鼠主动脉窦斑块面积占管腔总面积的比例较ApoE~(-/-)组低[(22.6±2.2)%比(32.4±3.2)%,P0.01]。ApoE~(-/-)小鼠TNF-α、IL-8和MCP-1水平较C57BL/6J小鼠增高[分别为(24.5±1.7)比(10.1±0.5)ng/L,(33.5±16.7)比(16.8±8.8)ng/L,(78.0±5.6)比(13.5±1.8)ng/L;均P0.05],ApoE~(-/-)+生长素组TNF-α、IL-8和MCP-1水平较ApoE~(-/-)组降低[分别为(15.5±1.0)比(24.5±1.7)ng/L,(22.0±1.2)比(33.5±16.7)ng/L,(45.5±4.5)比(78.0±5.6)ng/L;均P0.05]。ApoE~(-/-)小鼠血管壁NF-κBp65表达较C57BL/6J增高,ApoE~(-/-)小鼠+生长素组血管壁NF-κBp65表达较ApoE~(-/-)小鼠组降低(P0.05)。结论生长素通过抑制炎症反应减少ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样斑块形成。     

激动β_3肾上腺素受体对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血脂、动脉粥样硬化(AS)斑块、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的影响。方法选择10周龄C57BL/6小鼠10只作为正常对照组(A组,等量生理盐水腹腔注射),10周龄apoE-/-小鼠50只,高脂饮食至36周龄时随机分为高脂模型组(B组,等量生理盐水腹腔注射)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组,10mg/kg灌胃)、β3-AR激动剂小剂量组(D组,1.65μg/kg腹腔注射)、β3-AR激动剂大剂量组(E组,3.0μg/kg腹腔注射)与β3-AR拮抗剂组(F组,5.0μg/kg腹腔注射),分别给予β3-AR激动剂或β3-AR拮抗剂腹腔注射2次/周,共12周。48周龄时全自动生化仪检测小鼠血脂,取胸主动脉行病理观察,Western blot测定SR-BⅠ蛋白表达水平的变化。结果与B组比较,C组、D组、E组TC、VLDL/LDL-C显著下降(P<0.01);胸主动脉粥样斑块面积减小(P<0.01);SR-BⅠ蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。D组、E组TG水平显著下降(P<0.01)。结论激动β3-AR通过改善apoE-/-高脂小鼠血脂代谢,上调SR-BⅠ,促进胆固醇逆转运,进而起到了减小胸主动脉斑块面积、抗AS的作用。     

养心氏片对动脉粥样硬化模型小鼠的作用机制研究

目的探讨养心氏片治疗动脉粥样硬化(AS)的可能作用机制。方法以高脂饲料喂养雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠12周,复制AS模型。将AS小鼠随机分成模型组,养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组,每组8只。另设雄性C57BL/6J小鼠8只作为正常对照组。养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组给药量分别相当于70 kg成人临床剂量的2倍、1倍、0.5倍及1倍。养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组给予养心氏片,剂量分别为1.40 g/(kg·d)、0.70 g/(kg·d)、0.35 g/(kg·d)灌胃,阳性对照组给予阿托伐他汀剂量为2.57 mg/(kg·d)灌胃,共给药12周。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠升主动脉病理学变化,Image J软件测定小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积。采用实时定量PCR(qPCR)法检测各组小鼠主动脉组织核转录因子-κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达。结果与模型组比较,养心氏片高剂量组、中剂量组、低剂量组及阳性对照组升主动脉斑块校正后斑块面积呈现不同程度的降低(P0.05),以养心氏片高剂量组小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积最低,而养心氏片高剂量组小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积与阳性对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠主动脉组织NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA的表达水平明显升高(P0.05),各药物干预组小鼠主动脉组织NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达水平较模型组均显著降低(P0.05),与养心氏片高剂量组相比,养心氏片中剂量组及低剂量组小鼠主动脉NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达升高(P0.05),而养心氏片高剂量组小鼠主动脉NF-κB、MCP-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达与阳性对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论养心氏片可抗动脉粥样硬化,并具有剂量依赖性,养心氏片给药组以养心氏片高剂量组抗AS效果最佳,其机制可能与降低AS小鼠升主动脉斑块校正后斑块面积及下调主动脉NF-κB信号通路相关因子mRNA表达有关。     

L-4F对载脂蛋白E缺失小鼠高密度脂蛋白抗炎抗氧化功能的影响

目的观察载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)模拟肽L-4F对高脂喂养apoE缺失小鼠HDL抗炎、抗氧化功能的影响,探讨L-4F的抗动脉粥样硬化(AS)机制。方法 8周龄C57BL/6J小鼠18只,普通饲料喂养作为对照组;8周龄apoE缺失小鼠30只,高脂饲料喂养,喂养4周后,随机处死2种小鼠各6只,检测相应指标作为研究基线(第4周)。其余apoE缺失小鼠随机分为AS组和L-4F组[L-4F1mg/(kg.d)腹腔注射)],每组12只。实验第8、16周末取标本测定血脂水平、血清对氧磷酯酶1(PON1)、髓过氧化物酶(MPO)活性、高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量及HDL炎症指数(HII),观察主动脉斑块面积。结果实验16周后,与AS组比较,L-4F组血脂水平无明显变化,血清PON1活性明显升高,MPO活性、hs-CRP、HII显著下降,主动脉斑块/血管内膜表面积比值明显减小(P<0.05,P<0.01)。结论 L-4F可通过升高PON1活性、降低MPO活性,抑制炎性反应、降低HII等,改善HDL抗炎抗氧化功能,从而减少主动脉内中膜厚度和斑块面积,发挥抗AS作用。     

黄连解毒汤通过抑制ApoE-/-小鼠巨噬细胞极化和炎症减轻高脂饮食诱导的动脉粥样硬化

目的 探讨黄连解毒汤(HLJDD)抑制巨噬细胞极化和炎症对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及作用机制。方法 构建ApoE-/-小鼠AS模型,随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量(HLJDD-H)组和黄连解毒汤低剂量(HLJDD-L)组,另设C57BL/6J小鼠为正常(Control)组,每组6只,分别给予相应浓度药物及生理盐水灌胃,每日1次,连续6 w。给药结束后,收集小鼠血清和主动脉组织,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察主动脉组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-4和IL-10水平;荧光染色和免疫组化检测主动脉M1、M2型巨噬细胞标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD197和CD206分子的表达。结果 与Model组比较,HLJDD不同剂量组主动脉斑块面积和脂滴明显减少,血清TC、TG、LDL-C、hs-CRP、TNF-α和IL-6...     

兔斑块内血管生成与动脉粥样硬化形成和发展关系的探讨

目的:观察兔斑块内血管内皮生长因子(VEGF)与动脉粥样硬化(AS)斑块形成和发展的关系。方法:15只日本大耳白兔随机分为3组:对照组用普通饲料喂养,高脂组及VFGF组给高胆固醇饲料喂养3周(21 d)后,对照组及高脂组肌内注射清蛋白2μg/kg,VEGF组肌内注射VEGF165 2μg/kg,继续以前方式饲养3周(共42 d)处死动物,截取胸主动脉进行计量组织学及免疫组织化学分析,测定不同组别不同时间点兔血清白细胞介素-8(IL-8)浓度和血脂浓度。结果:①斑块面积(PA)[对照组0,高脂组(1.81±0.61)%,VEGF组(24.12±3.58)%]、斑块周径[对照组0,高脂组(6.05±1.62)%,VEGF组(25.71±2.97)%]及斑块的最大厚度[对照组0,高脂组(0.06±0.002)mm,VEGF组(0.16±0.007)mm],各组间比较差异有统计学意义(P<0.05);②42 d 时,新生血管的密度对照组、高脂组、VEGF组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);③电镜显示:新生血管与AS斑块相邻,新生血管腔内可见淋巴细胞。④VEGF组CD34阳性细胞数与PA之间呈正相关(r=0.989,P< 0.01)。⑤血清IL-8浓度各组间比较差异有统计学意义,但血清TC浓度高脂组与VEGF组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:斑块内血管生成是AS斑块的重要病理特征,该过程可能与炎性反应有关。     

老龄载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂及病理组织学观察

目的:观察用普食喂养而非以往研究中的高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除小鼠(Apo E-/-)的血脂及病理组织学变化特点。方法:各选取20只8周龄雄性小鼠和同龄同性C57BL/6J小鼠为对照,普食喂养6~8个月,测定血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的含量。常规制备主动脉的病理切片,进行HE染色,观察病理学变化。结果:Apo E-/-小鼠血清中TC、TG、LDL含量明显高于对照组(P0.05),且Apo E-/-小鼠主动脉根部病理切片明显脂质斑块形成。结论:普食喂养8月龄Apo E-/-小鼠是研究动脉粥样硬化(AS)的理想动物模型,为AS性心血管疾病研究者提供了参考资料。     

巨噬细胞内胆固醇酯含量评价动脉粥样硬化的研究

目的:探讨巨噬细胞内胆固醇酯含量与LDL-C评价动脉粥样硬化(AS)的优劣性。方法:8周龄C57BL/6J小鼠作为对照组,普通饲料喂养;apo E基因缺失小鼠均高脂饲料喂养4周作为研究基线,随机分为AS组和辛伐他汀组。在第4周、第8周、第16周分别检测其腹腔巨噬细胞内胆固醇酯/细胞内总胆固醇(CE/TC)、血脂水平、血清脂氢过氧化物(LOOH)水平、血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量。观察主动脉病理变化及主动脉内中膜厚度(IMT)。结果:在第8周与第16周,与对照组相比,AS组CE/TC与hs-CRP水平均升高,LOOH含量升高,IMT明显增厚(均P<0.01)。与LDL-C相比,巨噬细胞内CE/TC和主动脉IMT具有更好的相关性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:与传统指标LDL-C相比,巨噬细胞内CE/TC可更好地评价AS。     

阿司匹林对小型猪动脉粥样硬化的影响

目的探讨阿司匹林对早期动脉粥样硬化的干预作用。方法健康小型猪22头,随机分为对照组(n=6):给予正常猪饲料;高脂组(n=8):给予3%胆固醇高脂饮食;阿司匹林组(n=8):给予3%胆固醇高脂饮食 阿司匹林150 mg/d。高脂饮食4个月和6个月时,每组随机处死一半,定量测量动脉粥样硬化斑块厚度和斑块面积。结果3.0%胆固醇高脂饮食4个月就可以引起小型猪明显的动脉粥样硬化。高脂饮食4个月时,高脂组冠状动脉斑块厚度和截面积分别为107.2±45.7μm和0.113±0.05 mm2;阿司匹林组主动脉粥样硬化面积无明显减少,冠状动脉斑块厚度和截面积分别为74.2±24.7μm和0.093±0.05 mm2,与高脂组相比无统计学差异。高脂饮食6个月时,高脂组冠状动脉动脉粥样硬化斑块厚度为152.9±86.1μm、斑块/中膜厚度比0.85±0.49、斑块截面积为0.188±0.207 mm2、内膜/中膜面积比0.235±0.249;阿司匹林组主动脉粥样硬化面积明显减少,冠状动脉粥样硬化斑块厚度(47.8±19.8μm)、斑块/中膜厚度比(0.33±0.09)、斑块截面积(0.017±0.012 mm2)、内膜/中膜面积比(0.030±0.019),均明显低于高脂组(P<0.05或P<0.01)。结论阿司匹林对早期动脉粥样硬化有抑制作用。     

艾塞那肽对糖尿病肾病小鼠足细胞的保护作用

目的:探讨艾塞那肽对糖尿病肾病小鼠足细胞的作用。方法:通过给予C57BL/6J小鼠高脂饮食并注射链脲佐菌素建立糖尿病肾病模型,按随机数字表法将其分为糖尿病肾病对照组(DN组, n＝8)、艾塞那肽干预组(DN＋Ex组, n＝8)。同时将普通饲料喂养的C57BL/6J小鼠作为正常对照组(NC组, ...     

Th22型免疫反应在动脉粥样硬化疾病中的动态变化

目的:探讨Th22型免疫反应与动脉粥样硬化(AS)之间的关系,为治疗AS提供新的理论依据。方法:8周龄C57BL/6J背景的载脂蛋白E缺陷型(Apo E~(-/-))小鼠为实验组(n=24),同龄C57BL/6J小鼠为对照组(n=24),两组小鼠均给予高脂饮食,分别于0周、4周、8周、12周处死,并采用油红O染色检测不同时间点主动脉根部斑块的进展,流式细胞术检测Th22细胞在两组小鼠脾脏中比例变化,实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测主动脉中白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-22受体1(IL-22R1)及其转录因子芳香烃受体(Ah R)、T盒21转录因子(T-bet)的信使核糖核酸(mRNA)表达量变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中的IL-22含量变化。结果:实验组小鼠主动脉根部粥样斑块面积[主动脉根部斑块面积/主动脉管腔面积(%)]、Th22细胞[CD4+IL-22+/CD4~+(%)]数量、IL-22、IL-22R1、AhR、T-bet的mRNA在主动脉中的表达量以及IL-22在血清中的含量均高于同时间点对照组小鼠,且各时间点(0周除外)差异有统计学意义(P0.05)。实验组组内前后两时间点对比,主动脉粥样斑块面积及AhR、T-bet的mRNA表达量:4周与0周、8周与4周、12周与8周比较差异均有统计学意义;Th22细胞数量:4周与0周、8周与4周比较差异均有统计学意义,12周与8周比较差异无统计学意义;IL-22、IL-22R1的mRNA表达量及血清中IL-22含量:4周与0周比较差异有统计学意义,8周与4周、12周与8周比较差异无统计学意义。结论:亢进的Th22型免疫反应具有促进AS进程的作用,其机制有待进一步探讨。     

肺部感染中STING炎症信号通路的免疫作用机制研究

目的 探讨干扰素基因刺激物(STING)炎症信号通路在金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导的肺部感染和免疫中的作用机制。方法 72只小鼠随机分为3组：对照组、C57BL/6J WT和STING-/-组，每组24只。C57BL/6J WT组和小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌(1×10⁹CFU)。对照组小鼠腹腔注射1 mL PBS。分别在注射前和注射后6 h和24 h,各组随机选取8只小鼠收集血清和肺组织。采用ELISA试剂盒检测TNF-α、IL-10和RANTES水平，以及免疫荧光测定高迁移率组框蛋白1(HMGB1)水平。结果 与对照组相比，C57BL/6J WT小鼠腹膜内注射S.aureus后42 h的存活率为50%。然而，STING-/-小鼠在腹腔注射S.aureus后42 h的存活率为23%。与C57BL/6J WT小鼠相比，STING-/-组小鼠在S.aureus感染后6 h肺和血清TNF-α、IL-10和RANTES水平均显著降低(P<0.05),而STING-/-组小鼠在S.aureus感染后24 h肺和血清TNF-α、IL-10和RANTES水平均显...     

肺炎衣原体感染对高脂血症小鼠主动脉内皮细胞过氧化体增殖物激活型受体γ、P50和c-Fos表达的影响

目的探讨肺炎衣原体感染对高脂血症小鼠主动脉内皮细胞过氧化体增殖物激活型受体γ、核因子κB和激活蛋白1表达的影响。方法48只C57BL/6J雌性小鼠分成对照组、感染组、高脂组和感染高脂组。14周后,通过间接免疫荧光标记法检测主动脉内皮细胞过氧化体增殖物激活型受体γ、P50(核因子κB亚单位)和c-Fos(激活蛋白1亚单位)表达情况。用苏丹Ⅳ对主动脉窦冰冻切片进行脂染色以检测主动脉窦动脉粥样硬化病灶情况并进行评分。结果主动脉窦动脉粥样硬化病灶评分在对照组和感染组无升高,而在高脂组和感染高脂组显著升高(P<0.01),且感染高脂组和高脂组相比差异有显著性(P<0.01)。和对照组相比,感染组、高脂组和感染高脂组小鼠主动脉内皮细胞过氧化体增殖物激活型受体γ、P50和c-Fos的表达是升高的,而在感染组、高脂组和感染高脂组3组之间过氧化体增殖物激活型受体γ、P50和c-Fos的表达差异无显著性。结论在肺炎衣原体感染和高脂血症的早期,小鼠主动脉内皮细胞的炎症通路已经激活。单独肺炎衣原体感染不能引起动脉粥样硬化的形成,但肺炎衣原体感染能加速高脂饮食引起的动脉粥样硬化形成。     

复方普洱茶饮料对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平的影响

目的探讨复方普洱茶饮料对高脂喂养的Apo E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及血清血栓素(TX)A2/前列环素(PG)I2比值和DNA甲基化水平的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6 w后随机分为模型组、立普妥(阳性对照组)和茶饮料组(n=10),给予药物干预6 w,另设正常组同品系小鼠(C57BL/6J家系)6只。检测其血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT)水平和DNA甲基化水平。HE染色和VG染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分和胶原成分。结果与模型组相比,茶饮料组和立普妥组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(均P0.01),校正后主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分显著降低(P0.05);小鼠血清DNA甲基化、DNMT及胰岛素水平、小鼠血清TXA2水平显著降低而血清PGI2水平显著升高(均P0.01)。结论复方普洱茶饮料可以降低血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平,从而达到抗ApoE~(-/-)小鼠主动脉As斑块的作用。     

嗜黏蛋白阿克曼菌对高脂饲料诱导的肥胖ApoE基因敲除小鼠血脂代谢及炎症因子的影响

目的 观察嗜黏蛋白阿克曼(AKK)对高脂饲料喂养的肥胖ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠血脂代谢及炎症因子相关指标的影响。方法 选取健康SPF级雄性C57BL/6J及ApoE-/- 4周龄小鼠,均给予高脂饲料喂养。喂养6周后,选取高于C57BL/6J小鼠平均体质量10%的ApoE-/-小鼠20只,随机编号,奇数为模型组(n=10),偶数为AKK干预组(n=10),C57BL/6J小鼠作为对照组(n=10)。对照组与模型组小鼠灌胃不含AKK的甘油制剂,AKK干预组灌胃含1×10⁹CFU AKK的甘油制剂。每日灌胃1次,每次0.1ml。灌胃4周后,称量小鼠空腹体质量,采集血清及附睾脂肪组织。检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等血脂代谢指标水平,白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-10、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等炎症因子指标水平。称量附睾脂肪组织质量,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠附睾脂肪组织细胞形态及大小,测量脂肪组织细胞平均面积。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析。多组间比较采用单因素方差分析。结果 灌胃4周后,与模型组相比,AKK干预组小鼠空腹体质量、附睾脂肪组织质量及体脂百分比均有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05);AKK干预组血脂代谢指标TG[(0.85±0.17)和(1.65±0.15)、(1.08±0.09)mmol/L]及LDL-C[(3.20±0.85)和(6.47±0.87)、(4.89±0.56)mmol/L]均显著低于模型组及对照组,HDL-C[(919.89±116.19)和(433.59±183.85)、(721.11±222.70)mmol/L]显著高于模型组及对照组,TC[(3.00±0.64)和(5.12±0.71)mmol/L]显著低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);AKK干预组炎症因子指标IL-1[(74.10±25.28)和(191.42±31.36)、(123.91±25.29)pg/ml]、IL-6[(63.10±9.53)和(100.76±11.42)、(77.76±8.20)pg/ml]、IL-8[(64.34±10.36)和(104.59±8.46)、(82.64±11.79)pg/ml]、CRP[(88.85±24.33)和(172.53±25.41)、(122.72±22.08)ng/ml]、TNF-α[(372.30±47.05)和(672.13±66.18)、(509.97±54.50)pg/ml]及MCP-1[(11.90±1.58)和(25.18±2.03)、(18.59±2.11)pg/ml]均显著低于模型组及对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),IL-10有升高趋势,但3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色观察显示,AKK干预组较模型组小鼠附睾脂肪组织细胞平均面积[(330.45±55.84)和(879.58±36.74)μm²)]显著减小(P＜0.05),形态规整,单个视野下脂肪细胞数量明显增多。结论 AKK可改善高脂饲料喂养的肥胖ApoE-/-小鼠的血脂异常,并降低肥胖ApoE-/-小鼠血清炎症因子水平。     

FIZZ1在ApoE基因敲除鼠动脉粥样斑块中的表达

背景FIZZ1是一种与炎症相关的缺氧诱导的有丝分裂因子,在肺部疾病缺氧状态下具有刺激肺动脉平滑肌细胞增殖等作用。目的探讨FIZZ1在ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达情况及其对平滑肌细胞增殖的影响。方法应用C57BL/6J ApoE基因敲除鼠构建动脉血管粥样硬化模型并与普通C57BL/6J野生型小鼠进行对照研究,通过对动脉血管HE染色及FIZZ1免疫检测斑块FIZZ1表达,同时给以不同浓度FIZZ1刺激培养的平滑肌细胞,MTT法测定FIZZ1对平滑肌细胞增殖的影响。结果ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部明显形成动脉粥样硬化,斑块体积较大,免疫组化可见FIZZ1在粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠血管壁内,未见FIZZ1表达,重组FIZZ1能促进体外培养的平滑肌细胞增殖(与对照组比较,差别具有统计学意义,P<0.05)。结论C57BL/6J野生型小鼠正常血管不表达FIZZ1,C57BL/6J ApoE基因敲除鼠粥样斑块表达FIZZ1,FIZZ1具有促进平滑肌细胞增殖的作用,提示其可能在动脉粥样硬化进展中起一定的作用。