胚胎干细胞定向分化为运动神经元

最近研究表明胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESC）在体内外均可以发育分化出运动神经元细胞,这对于了解神经发育的机制和再生细胞治疗运动神经元的疾病具有重要的意义。本文就胚胎干细胞定向分化为运动神经元基因表达特点及其应用前景作一综述。     

美国纽约州为干细胞研究开绿灯

据《科学时报》2007年4月报道，美国纽约州加入了干细胞研究的大军。该州将在2008年度斥资1亿美元用于该领域的研究，而干细胞研究的支持者们希望在未来的10年中，这一金额最终能达到10亿美元。这也使纽约州成为全美国继加利福尼亚州之后的第二个州。     

美国施行全球首例人类胚胎干细胞临床试验

美国杰龙生物医药公司（Geron Corporation）10月11日宣布,佐治亚州亚特兰大“牧者中心”医院已于10月8日利用该公司培植的GRNOPC1人类胚胎干细胞,展开全球首宗人类胚胎干细胞治疗的人体临床试验。     

体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经干细胞的实验研究

目的:探讨体外诱导小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为神经干细胞(NSCs)的可能性。方法: ESCs经胚胎体阶段, 以视黄酸及视网膜müller细胞诱导, 在NSCs选择性培养基中筛选培养扩增7d, 观察形态变化, 采用RT-PCR法检测nestin、glutaminase、Brn-3基因表达及免疫细胞化学法检测nestin等NSCs特异性标志物, 并对其扩增及分化能力进行观察。 结果:ESCs经初级诱导, NSCs选择性培养基筛选培养7d后, 形成大量神经球样结构, 可扩增传代。绝大部分神经球样结构呈nestin抗原阳性, 整合BrdU, 表达nestin、glutaminase、Brn-3基因, 且可分化为神经元及神经胶质样细胞。结论:视黄酸及müller细胞诱导的ESCs, 经选择性培养基筛选培养可获得NSCs, 有望为青光眼等神经变性疾病提供新的治疗途径。     

体外定向诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

目的　探索体外定向诱导小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES)分化为表皮样干细胞的条件 ,为胚胎干细胞来源的表皮样干细胞的临床应用 ,及ES细胞的定向分化机制的研究奠定基础。　方法　采用与人羊膜共培养法对小鼠胚胎干细胞进行定向诱导。实验分 3组 :1 羊膜上皮面向上 ,铺布全孔底 ;2 羊膜上皮面向上 ,铺布半孔底 ;3 以不加羊膜组为对照。用流式细胞仪、免疫组织化学技术对分化后的细胞进行鉴定。　结果　共培养 3～ 4d后 ,在第 1、2实验组中的人羊膜上皮面上 ,小鼠ES细胞形成表皮样干细胞集落 ,表达高水平的表皮干细胞特异标志物整合素 β1 、CK19和CK15。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 、CK19和CK15阳性细胞比率均较对照组有显著差异 (P <0 0 1)。而在第 2实验组中无羊膜覆处 ,细胞贴壁生长 ,形成表皮样细胞单层 ,细胞呈多边形 ,排列紧密 ,表达整合素 β1 ,仅见少数CK19和CK15阳性细胞散布于表皮样细胞之间。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 阳性细胞率与对照组有显著差异 (P <0 0 1) ,而CK19和CK15阳性细胞率与对照组差异不明显。　结论　人羊膜可诱导小鼠胚胎干细胞向表皮样细胞定向分化 ,并提示生长在羊膜上皮面上的细胞克隆可能是表皮样干细胞 ,而贴壁生长的细胞可能是表皮样细     

体外分化胚胎干细胞为造血干细胞重建造血功能的研究

目的：探讨体外定向分化胚胎干细胞（ESCs）为造血干细胞（HSCs）对体内造血功能的重建作用。方法：将小鼠E14.1胚胎干细胞采用“三步诱导法”在体外分化发育为HSCs，造血克隆形成(CFU)实验观察其体外造血集落形成情况，免疫磁珠分选纯化HSCs移植给经亚致死剂量γ射线照射的雌性SCID小鼠，观察其植入及小鼠造血功能恢复情况。结果: 经过分阶段诱导，多种造血刺激因子联合应用能有效促进ESCs定向分化发育为HSCs,流式细胞仪检测HSCs特异性表面标志物CD34+/Sca-1+表达最高为（58.64±4.20）%，CFU培养能形成较多的红系、粒系/巨噬细胞系及混合细胞集落, Wright-Giemsa 染色显示为原始的造血细胞。此阶段的HSCs经分选纯化后移植给经γ射线照射后的小鼠，移植组小鼠+10 d造血功能开始恢复，观察40 d后除血小板恢复较慢外，白细胞、红细胞、血红蛋白等指标已接近正常，植入率为71.4%，存活率为43.0%，染色体检测证实已由受体鼠的XX转为供体鼠的XY。结论: 采用分阶段诱导的方法，可在体外定向诱导小鼠ESCs分化发育为HSCs，此来源的HSCs可以有效重建体内造血功能。     

胚胎干细胞和间充质干细胞分化为内皮细胞的研究现状

内皮细胞对于维持血管正常功能具有重要作用,然而其来源有限.因此,寻找内皮细胞的其他丰富来源一直为研究者们所关注.干细胞在体外培养具有能大量增殖、并在合适的条件下定向分化的特性.近年来,各种类型的干细胞诱导分化为内皮细胞的研究不断深入并各有优缺点.对胚胎干细胞和各种来源的间充质干细胞诱导分化为内皮细胞的研究现状作一综述.     

胚胎干细胞诱导发育为树突状细胞的研究

目的：探讨胚胎干细胞（ESC）诱导分化为树突状细胞（DC）的实验方法，实现体外大规模扩增高纯度DC用于临床免疫治疗。方法：E14小鼠胚胎干细胞系在GM-CSF与IL-3联合作用下经胚胎体（EB）诱导分化为DC。不成熟DC （im-DC）流式细胞仪检测CD11c、CD80、CD86、MHC II-DR表达。用磷酸脂多糖（LPS）促进DC的成熟，收获细胞后观察细胞形态及摄片并做扫描电镜检查，分析细胞表型并与不成熟DC细胞表型做对比，异体淋巴细胞增殖实验行功能检测。结果：ES细胞来源DC呈典型DC形态学表现。im-DC CD11c、CD80、CD86、MHC-II表达低,m-DC CD11c、CD80、CD86、MHC-II的表达均较前明显升高。功能检测发现，ES细胞来源的DC具有强烈的激发同种异体淋巴细胞增殖的作用，证实ES细胞来源的DC具备正常的免疫学功能。结论：使用GM-CSF联合IL-3能成功诱导E14胚胎干细胞发育为DC。故ES细胞可作为DC来源的一条新途径，对于体外大规模制备DC用于免疫过继治疗提供了一个较好的方法。     

胚胎干细胞研究及应用

胚胎干细胞是来源于胚胎的多能干细胞，具有分化的多向性和长期增殖的能力，巳被广泛用于生命科学的各个领域。本综述了胚胎干细胞的概念、研究进程、生物学特点及应用，尤其着重论述了目前的主要应用情况，并指出存在的一些问题。     

胚胎干细胞研究及应用

胚胎干细胞是来源于胚胎的多能干细胞 ,具有分化的多向性和长期增殖的能力 ,已被广泛用于生命科学的各个领域。本文综述了胚胎干细胞的概念、研究进程、生物学特点及应用 ,尤其着重论述了目前的主要应用情况 ,并指出存在的一些问题     

人类胚胎干细胞研究信息

1.美国国家卫生研究院得到政府支持,于2010年7月出台了＂胚胎干细胞研究规范＂。2.国内、外著名专家编著,并翻译出版了《细胞治疗》一书,共31章,全面介绍了＂细胞治疗＂当今状况。     

胚胎干细胞分化为肝细胞的研究进展

急性肝衰竭和晚期肝病严重危害人类的健康,原位肝移植是目前治疗这类疾病惟一有效的治疗方法,却受到了供肝缺乏的限制.肝细胞移植、生物人工肝以及组织工程肝是潜在的解决办法,而获取足量有功能的肝细胞是成功的关键.鉴于其强大的自我更新能力及多向分化潜能,胚胎干细胞可能成为一种无限的肝细胞来源.胚胎干细胞在临床肝病应用前需首先在体外进行有效的严格控制的分化、鉴定及纯化.主要对目前研究胚胎干细胞分化为肝细胞的各种诱导体系及存在的问题作一概述.     

胚胎干细胞蛋白质组学

胚胎干细胞（embryonic stem cells,ES细胞）具有自我复制和无限增殖的潜能,在发育生物学和再生医学中具有重要的研究价值,ES细胞蛋白质组学研究对揭示ES细胞增殖、分化的机制具有重大意义。     

胚胎干细胞研究进展

胚胎干细胞来源于着床前的囊胚内细胞团或早期胎儿的原始生殖细胞，具有全能分化和无限增殖的潜力。在适当条件下，胚胎干细胞可被诱导分化为各种细胞组织，这一特性使其在基础研究、移植治疗和基因治疗中具有诱人的应用前景。     

胚胎干细胞定向分化为垂体样细胞的研究

目的探讨胚胎干细胞定向分化为垂体细胞的潜能。方法129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d,定向诱导其分化为上皮样干细胞克隆,取成年129小鼠新鲜垂体,用生长有上皮样干细胞克隆的人羊膜将其包裹,无菌手术下移植入129小鼠双侧背部皮下,术后4周取材,对移植后细胞的分化情况进行形态学观察。结果129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d后,在人羊膜上皮面形成上皮样干细胞集落,表达高水平的β1整合素、CK15和CK19,移植物在小鼠皮下生长4周后体积明显增大,苏木精-伊红染色表明,人羊膜表面有垂体样细胞形成。结论胚胎干细胞在适当的条件下有分化为垂体样细胞的潜能。     

人胚胎干细胞研究及其应用

1998年 11月ＳＣＩＥＮＣＥ和ＰＮＡＳ杂志上分别报道了两个实验室以不同手段几乎同时成功地建立起人胚胎干细胞系(ＥＳ) [1,2 ] ,引起科学界的强烈反响。胚胎干细胞研究成了科学界最热门的话题之一。 1999年底ＳＣＥＮＣＥ将此项研究列为当年十大科学进展榜首 ,认为ＥＳ细胞研究和人类基因组计划同样将成为新世纪最具发展和应用前景的领域。本文主要探讨人胚胎于细胞研究的历史、生物学特征及其应用前景。1.人ＥＳ细胞系的建立1884年Ａｎｄｒｅｗｓ和Ｔｈｏｍｐｓｏｎ等[3 ,4 ] 报道了从人畸胎瘤分离繁殖的细胞系可在体外分化为神经元和其…     

胚胎干细胞定向诱导分化为心肌细胞进展

在个体发育过程中，通常把那些具有自我复制能力并能在一定条件下分化形成一种以上类型细胞的多潜能细胞称为干细胞。根据其发育阶段，干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。由于胚胎干细胞具有在体外培养下保持未分化状态的增殖能力及分化为多种细胞类型的潜能，使之成为一种研究哺乳动物细胞分化、组织形成过程的基本体系，以及临床移植治疗的新的细胞来源。人们利用胚胎干细胞建立了各种体外分化模型，本文将概述现今对胚胎干细胞定向诱导分化为心肌细胞方面的主要进展和趋势。     

胚胎干细胞分化为表皮样干细胞基因启动子区差异甲化研究

 目的： 用全基因组甲基化芯片探讨可能参与小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为表皮样细胞(ELCs)的基因DNA甲基化调控机制。方法： 利用人羊膜建立体外诱导体系,将小鼠ESCs诱导定向分化为ELCs,分别取未分化的ESCs和诱导分化后的ELCs进行芯片分析,利用甲基化免疫共沉淀技术将每组染色质DNA的甲基化片段共沉淀下来,和本底对照 (input)分别标记Cy3和Cy5荧光,一同上样于Roche NimbleGen高密度(2.1M,芯片覆盖22 425个启动子)甲基化芯片,启动子区采用UCSC数据库进行注释,启动子覆盖转录起始位点上游8 200 bp、下游3 000 bp,通过对这些启动子区甲基化谱的分析,筛选出甲基化调控可能与ESCs向ELCs定向分化相关的基因。结果： 小鼠ESCs和ELCs 两组细胞在基因组水平上有17 500个启动子存在甲基化,其中有3 435个启动子发生甲基化差异变化,高CpG岛的启动子有894个发生差异甲基化,中度CpG岛的启动子有974个发生差异甲基化,低CpG岛的启动子有1 567个发生差异甲基化。结论： 在ESCs向ELCs定向分化的过程中,众多的基因启动子区发生了甲基化程度的变化,说明细胞分化是一个复杂的表观遗传学事件。这些基因启动子的差异甲基化在ESCs向ELCs定向分化过程中所起的作用及其机制尚有待进一步的功能学研究阐明。     

体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的初步研究

目的：5-氮胞苷作为分化诱导剂，初步探讨其单独或联合全反式维甲酸应用时对小鼠胚胎干细胞（mESC）分化为心肌细胞的影响，旨在建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的实验方法。方法： 采用 MTT法确定5-氮胞苷的非细胞毒性参考剂量。设计不同条件培养基（5-氮胞苷单独或配伍全反式维甲酸应用）对mESC 进行诱导分化，并通过免疫组化技术及RT-PCR方法等对分化细胞进行鉴定。结果： 5-氮胞苷的非细胞毒性参考剂量为8 μmol/L，能够诱导mESC分化为心肌合胞体（与阴性对照组比较，P<0.01），诱导分化率可达50%。配伍全反式维甲酸持续诱导的结果等同于单独应用全反式维甲酸的作用效果（P>0.05）：即对ESC向心肌细胞的诱导分化没有促进作用。结论：5-氮胞苷能够诱导mESC分化为心肌合胞体，从而得以建立一种体外诱导mESC分化为心肌细胞的方法。     

从胚胎干细胞诱导发育为浆细胞的体外实验研究

目的：建立胚胎干细胞体外定向诱导分化为浆细胞的体系,为研究造血发生的基因调控及Ｂ淋巴细胞发育过程奠定基础。方法：分阶段培养,第一、二阶段使用半固体培养,分组加入细胞因子、２－巯基乙醇和胚胎细胞条件培养液,用流式细胞仪、免疫组化及Ｗｒｉｇｈｔ’ｓ染色鉴定细胞,第三阶段移入骨髓基质细胞滋养层。结果：第一阶段：加入ＳＣＦ、ＴＰＯ、ＩＬ－６、ＩＬ－３、Ｅｐｏ和Ｇ－ＣＳＦ,４ｄ后细胞大片坏死,仅加入２－巯基