三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究

目的 :应用体外培养的肝癌细胞株 (SMMC 772 1)观察砷剂 (As2 O3)的凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法检测As2 O3对肝癌细胞增殖的影响 ,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2 O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结果 :As2 O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量 -时效关系 ;As2 O3可使肝癌细胞周期改变 ,与浓度有关 ,与作用时间未见明显关系 ;As2 O3诱导肝癌细胞发生凋亡 ,并与浓度、时间有关。结论 :As2 O3能抑制肝癌细胞增殖 ,改变肝癌细胞周期 ,诱导肝癌细胞凋亡     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的：探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法：经不同浓度的As2O3和(或)5-FU处理Lovo细胞后，采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应；AO／EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化；免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-Fu联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用，联合用药后细胞周期分布发生改变，S期和G2／M期细胞比例下降，G0／G1。期细胞比例上升，癌细胞bcl-2基因表达明显下降，bax和Fas基因表达显著增强。结论：As2O3与5-FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用．其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷应用于肝癌治疗的实验研究进展

三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）是中药砒霜的主要成分，有剧毒，但近年来人们研究发现其具有显著的抗肿瘤作用。综述其在肝癌治疗方面的实验研究进展，阐明As2O3的抗肿瘤机制主要为通过调控多种基因选择性诱导肝癌细胞凋亡、选择性细胞毒作用、抗肿瘤血管形成作用、改变肝癌细胞核基质蛋白成分及抑制肝癌细胞增殖细胞抗原（PCNA）的表达等；细胞周期分析显示As2O3可以阻滞肝癌细胞于S＋G2／M期；与ADM、DDP等化疗药物联合应用可明显提高对肝癌细胞的杀伤率，丁硫氨酸亚矾氨（BSO）可增加肝癌细胞对As2O3敏感性。     

As2O3对人膀胱癌细胞凋亡和MDR1表达及细胞周期的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌细胞株BIU-87的凋亡诱导作用及对多药耐药基因(MDR1)蛋白表达、细胞周期的影响。方法：采用四氮唑蓝(MTT)法检测As2O3不同浓度、不同作用时间对BIU-87细胞的生长抑制率；流式细胞术(FCM)检测不同浓度As2O3作用72h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、bcl-2及MDR1蛋白表达、细胞周期变化。结果：As2O3可有效抑制BIU-87细胞的生长增殖，与浓度、时间相关，P＜0．05；Fas、bcl-2的表达分别与浓度增高呈正、负相关，P＜0．05，且二者随浓度增高呈负相关，P＜0．05；MDR1蛋白表达与对照组相比As2O3 1 μmol／L作用后升高，P＜0．05，2、5 μmol／L作用后降低，P＜0．05；随As2O3浓度升高，细胞周期被阻滞在G0／G1期。结论：As2O3可有效抑制人膀胱癌细胞的生长增殖，诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期可能起了重要作用。     

三氧化二砷诱导人鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究三氧化二砷(As2O3)体外抑制人鼻咽癌细胞株(CNEl)增殖及诱导凋亡的作用。方法：以不同浓度的As2O3处理CNEl，用四甲基噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况，细胞染色方法现察细胞凋亡的形态，原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞的DNA含量。结果：As2O3明显抑制人鼻咽癌细胞株CNEl细胞的增殖，其抑瘸作用优于颇铂(DDP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)。As2O3作用于细胞后，可见典型凋亡细胞的形态学改变：细胞核固缩，染色质凝集，核碎裂，凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA线条图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”。结论：As2O3可明显抑制人鼻咽癌细胞株CNEl的生长和促进细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷应用于肝癌治疗的实验研究进展

三氧化二砷(arsenictrioxide, As2O3)是中药砒霜的主要成分,有剧毒,但 近年来人们研究发现其具有显著的抗肿瘤作 用。综述其在肝癌治疗方面的实验研究进 展,阐明As2O3的抗肿瘤机制主要为通过调 控多种基因选择性诱导肝癌细胞凋亡、选择 性细胞毒作用、抗肿瘤血管形成作用、改变肝 癌细胞核基质蛋白成分及抑制肝癌细胞增殖 细胞抗原(PCNA)的表达等;细胞周期分析 显示As2O3可以阻滞肝癌细胞于S+G2/M 期;与ADM、DDP等化疗药物联合应用可明 显提高对肝癌细胞的杀伤率,丁硫氨酸亚矾 氨(BSO)可增加肝癌细胞对As2O3敏感性。     

三氧化二砷对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对喉癌Hep-2细胞株增殖的影响及细胞周期的改变。方法 体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的As2O3作用24、48、72小时，通过MTT还原法检测细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果 As2O3可有效抑制Hep-2细胞的生长，呈时间和浓度依赖性特点。2μmol/L As2O3作用24h时，S期细胞比例增高，72小时后，S期细胞明显下降，细胞大量凋亡。As2O3 在低浓度时，阻滞细胞通过S期，高浓度时诱导S期细胞凋亡。结论 As2O3可抑制Hep-2细胞的增殖，与细胞周期阻滞有关。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的: 探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5 FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法:经不同浓度的As2O3 和(或)5- FU处理Lovo细胞后,采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应;AO/EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化;免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果:与As2O3 或5 -FU单药作用相比,As2O3 与5- FU联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用,联合用药后细胞周期分布发生改变,S期和G2/M期细胞比例下降,G0/G1 期细胞比例上升,癌细胞bcl- 2基因表达明显下降, bax和Fas基因表达显著增强。结论:As2O3与5 -FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用,其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

丁酸钠对体外培养的卵巢癌细胞生长影响及其机制探讨

目的：观察丁酸钠(sodilium butyrate，NaB)对体外培养的卵巢癌细胞3AO生长的影响，初步探讨其作用机制。方法：以人卵巢上皮癌细胞株3AO为肿瘤模型。采用不同浓度的NaB对其进行干预。MTT比色法测定NaB对3AO细胞增殖活性的影响，进一步通过光镜、电镜观察3AO细胞的形态学改变，进行DNA降解分析，并采用流式细胞技术分析细胞周期动力学变化。结果：NaB作用下3AO细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制。一定浓度的NaB作用一定时间，可诱导3AO细胞发生凋亡。光镜和电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变。DNA降解分析中出现典型的梯形条带。流式细胞技术分析发现NaB作用首先引起细胞周期分布的改变，随剂量的加大和用药时间的延长。凋亡率逐渐升高。结论：NaB通过诱导凋亡而抑制体外培养的3AO细胞生长，其机制可能与细胞G1期阻滞有关。     

三氧化二砷对人白血病细胞株NB4和K562及MOLt4的增殖、周期及凋亡的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人白血病细胞株NB4、K562、MOLt4的增殖，周期及凋亡的影响。方法：采用台盼蓝拒染法计数活细胞数．并计算细胞生长率；细胞涂片经Wright-Giemsa染色，光镜下观察细胞的形态；流式细胞仪解析细胞周期。结果：1)As2O3能够抑制NB4、K562、MOLt4细胞的增殖。2)4μmol/L As2O3能够使K562细胞发生M期阻滞。但NB4、MOLt4细胞未见明显改变。3)2、4μmol/L的As2O3处理NB4、MOLt4和K562细胞48h．NB4、MOLt4细胞株的凋亡细胞明显增多。但是．K561细胞未见明显改变。结论：As2O3不但对NB4细胞具有抑制增殖．诱导细胞凋亡的作用．而且对非，t(15：17)的K562、MOLt4细胞也具有抑制增殖的作用．同时诱导MOLt4细胞凋亡．使K562细胞发生M期阻滞。     

氧化砷对NB4和Jurkat细胞周期的影响

目的：研究氧化砷(As2O3)对白血病细胞系NB4、Jurkat细胞周期的影响及对细胞周期及凋亡相关蛋白的调节作用。方法：以MTT、基因组DNA电泳、蛋白／DNA双参数流式细胞术等方法研究As2O3对白血病细胞的作用及机制。结果：随着As2O3作用时间的延长，白血病细胞增殖明显受到抑制，DNA电泳出现“梯”状条带，流式细胞术检出亚G1峰，细胞周期阻滞于G1和G2／M期，部分细胞周期及凋亡相关的调控蛋白表达改变。结论：As2O3通过改变细胞周期及凋亡相关蛋白的表达而抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

三氧化二砷诱导HeLa细胞凋亡与其抑制HPV18 E6表达和端粒酶活性有关

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡时,对14PV18 E6致瘤基因和端粒酶活性的影响。方法 用不同浓度的As2O3作用于HeLa细胞不同时间段后,光镜和电镜观察细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞周期改变,MTT法测定细胞生长抑制情况。RT-PCR方法检测HPV18 E6的表达,TRAP-ELISA方法测定细胞内端粒酶活性变化。结果 2μmol／L As2O3处理HeLa细胞48h后,可降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,抑制HPV18 E6的表达,细胞内端粒酶活性明显下降。As2O3对HeLd细胞的这种作用呈时间-剂量依赖关系。结论 As2O3诱导HeLa细胞凋亡可能与其抑制HPV18 E6致瘤基因的表达有关,细胞内端粒酶活性的抑制可能与这种E6致瘤基因的抑制有关。     

抑制端粒酶活性对As2O3诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的： 〖HT5"SS〗观察端粒酶反义寡核苷酸、As2O3对肝癌细胞生长的影响,寻找低剂量、低毒、高效、安全的抗肝癌新疗法。〖HT5W〗方法：〖HT5"SS〗 自行设计合成靶向端粒酶模板区的20 nt硫代反义寡核苷酸,观察端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞端粒酶活性的影响及两者协同对肝癌细胞生长的影响,采用HE染色、流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳观察端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞的凋亡诱导作用,以流式细胞术检测肝癌细胞的Fas、FasL、bcl2蛋白的表达。〖HT5W〗结果： 〖HT5"SS〗5 μmol/L的端粒酶反义寡核苷酸作用24h可显著抑制肝癌细胞端粒酶活性（P<0.01）;肝癌细胞端粒酶活性被抑制后对As2O3诱导凋亡的敏感性显著增加,表现为低浓度、短时间即可诱导肝癌细胞凋亡（P<0.01）,端粒酶反义寡核苷酸与As2O3对肝癌细胞的凋亡诱导作用是通过Fas、FasL途径实现的。〖HT5W〗结论：〖HT5"SS〗抑制肝癌细胞端粒酶活性可显著增强其对As2O3诱导凋亡的敏感性,减少砷剂用量,两者协同有潜在的临床应用前景。     

黄芩素通过PI3K/AKT通路增强三氧化二砷对肝癌细胞的促凋亡作用

目的:探讨黄芩素增强As2O3对肝癌细胞的促凋亡作用及其可能的作用机制。方法:采用MTT方法检测不同作用浓度及作用时间的黄芩素、As2O3单用和联用对肝癌高转移细胞HCCLM9、肝癌低转移细胞MHCC97L的增殖抑制率,并根据联合用药q值判断两药联用的性质;流式细胞术检测肝癌细胞的周期分布;Tunel技术检测肝癌细胞的凋亡情况;Real-Time PCR和Western blot检测肝癌细胞凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-6、caspase-9的mRNA和蛋白质水平以及PI3K、AKT和P-AKT蛋白的表达情况。结果:黄芩素、As2O3单药及联合后均能明显抑制HCCLM9和MHCC97L细胞增殖能力,但两药联合作用更强,且呈明显时间和剂量依赖性效应。两药单用及联合均能够明显导致肝癌细胞G0/G1期停滞,Tunel检测到细胞凋亡率升高,且两药联合作用强于单药。两种药物同时处理后肝癌细胞的caspase-3、caspase-6及caspase-9 的mRNA和蛋白水平表达显著升高而PI3K、p-AKT蛋白表达下降。结论:黄芩素增强As2O3对肝癌细胞的促凋亡的作用,同时引起PI3K、p-AKT表达的下调及caspase-3、caspase-6及caspase-9表达的上调。推测黄芩素可能是通过激活Caspase 凋亡信号,同时抑制PI3K/AKT通路增强As2O3对肝癌细胞促凋亡的作用。     

PTEN在三氧化二砷诱导肝癌细胞(SMMC-7721)凋亡中的作用

目的 研究PTEN在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪定量检测各组细胞的凋亡率;Western blot方法检测各组细胞中PTEN蛋白的表达情况;用PTEN siRNA转染SMMC-7721细胞,观察其对As2O3诱导细胞凋亡作用的影响.结果 As2O3能显著抑制SMMC-7721细胞存活率,其抑制率呈剂量依赖关系;As2O3剂量依赖性诱导肝癌细胞凋亡;Western blot检测显示As2O3明显增加细胞中PTEN蛋白的表达;PTEN siRNA转染可减弱As2O3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.结论 As2O3诱导SMMC-7721细胞凋亡可能与其诱导PTEN表达有关.     

Decorin对肝癌细胞株凋亡作用的研究

目的：探讨decorin对肝癌细胞株增殖及细胞凋亡的作用。方法；用不同浓度的decorin和正常肝细胞株（L-02细胞），肝癌细胞株（SMMC-7721，MM45）共同孵育一定时间后，观察细胞的存活情况，形态学改变，用流式细胞仪分析DNA的分布。结果：Decorin在体外能抑制肝癌细胞的存活情况，形态学改变，用流式细胞仪分析DNA的分布，结果：Decorin在体外能抑制肝癌细胞的增殖，诱导肝癌细胞出现典型的凋亡细胞特征；细胞核浓缩，细胞皱Xie，凋亡小体形成，而且其诱导凋亡作用呈剂量效应。结论：Decorin作为一种生物制剂可诱导肝癌细胞凋亡。     

As2O3对人膀胱癌细胞凋亡和MDR1表达及细胞周期的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌细胞株BIU 87的凋亡诱导作用及对多药耐药基因 (MDR1)蛋白表达、细胞周期的影响。方法 :采用四氮唑蓝 (MTT)法检测As2 O3 不同浓度、不同作用时间对BIU 87细胞的生长抑制率 ;流式细胞术(FCM )检测不同浓度As2 O3 作用 72h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、bcl 2及MDR1蛋白表达、细胞周期变化。结果 :As2 O3 可有效抑制BIU 87细胞的生长增殖 ,与浓度、时间相关 ,P <0 0 5 ;Fas、bcl 2的表达分别与浓度增高呈正、负相关 ,P <0 0 5 ,且二者随浓度增高呈负相关 ,P <0 0 5 ;MDR1蛋白表达与对照组相比As2 O3 1μmol/L作用后升高 ,P <0 0 5 ,2、5 μmol/L作用后降低 ,P <0 0 5 ;随As2 O3 浓度升高 ,细胞周期被阻滞在G0 /G1期。结论 :As2 O3 可有效抑制人膀胱癌细胞的生长增殖 ,诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期可能起了重要作用     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长增殖的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人BEL7402肝癌细胞株的作用及其机制。方法采用MTF法检测As2O3对BEL7402细胞的生长抑制率;流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后的BEL7402细胞周期及增殖细胞核抗原（PCNA）变化,同时Annexin V—FITC／PI双染法检测细胞凋亡。结果三氧化二砷可显著抑制BEL7402细胞生长,且剂量-效应关系显著（r=0．9650,P〈0．01）,半数抑制浓度（IC50）为4．93μmol／L;BEL7402经As2O3处理后可发生凋亡。As2O3能显著下调PCNA蛋白表达（P〈0．01）,并使细胞周期阻滞在G2／M期。结论三氧化二砷可有效抑制人肝癌BEL7402细胞生长增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调PCNA表达及阻滞细胞周期有关。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡效应及抑制细胞ERK的活性

目的：初步探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）促进HL-60细胞凋亡及其可能机制。方法：不同浓度的As2O3（0、2.5、5、10μmol/L）作用于HL-60细胞24h后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Caspase-3活化、ERK活性和cyclinD1蛋白的表达,RT-PCR法检测cyclinD1mRNA的表达。结果：As2O3可抑制HL-60细胞增殖,诱导HL-60细胞的凋亡,并呈浓度依赖性（P〈0.05）;As2 O3可使HL-60细胞Caspase-3激活,并抑制ERK活性,但不能下调cyclinD1的表达（P〉0.05）。结论：As2 O3能抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,其效应可能与As2 O3抑制HL-60细胞ERK活性有关。