糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的检测

目的 :评价载脂蛋白E(apoE)基因多态性与糖尿病危险性的关系。方法 :采用PCR -RFLP对 6 7例糖尿病患者和135例正常人进行apoE基因多态性检测。结果 :糖尿病组ε3基因频率和ε3/ 3基因型频率较正常人对照组明显降低 (P <0 .0 1) ;ε4基因频率明显比正常人对照组增强 (P <0 .0 5 )。结论 :ε4基因与糖尿病危险性相关。     

载脂蛋白E遗传多态性及其与疾病的关系

目的:分析载脂蛋白E遗传多态性及其与疾病的关系.方法:采用PCR-RFLP的方法,检测了67例糖尿病患者、114例冠心病患者及135例正常人ApoE基因型.结果:在基因型频率比较中,糖尿病和冠心病患者组ε3/3基因型频率均有明显下降,其中冠心病患者组ε3/4基因型频率明显升高;在基因频率比较中,二组ε4基因频率均有明显上升,ε3基因频率均有明显下降.结论:以上数据表明ApoE的ε4等位基因可能为糖尿病、冠心病的生物性风险因子,ε3/4基因型与冠心病密切相关.     

宁夏回、汉族老年人非酒精性脂肪肝与载脂蛋白E基因多态性的相关性

目的分析回、汉族老年人非酒精性脂肪肝（NAFLD）与载脂蛋白E基因多态性的相关性,为探索NAFLD的发病机制提供依据。方法对1022名符合纳入、排除标准的城市社区55岁及以上人群行问卷调查和B超检查,以符合NAFLD诊断标准者为病例组,其他人群为对照组。采用高分辨率溶解曲线法检测APOE基因多态性,APOE基因多态性与NAFLD发病风险采用非条件logistic回归模型估计。结果共有925人完成了所有研究内容,其中NAFLD组251人,对照组674人,两组年龄、性别构成差异有统计学意义（P〈0.001）;APOE基因E3/3型在NAFLD组和对照组分别为76.9%和77.6%,等位基因E2频率在NAFLD组和对照组分别为9.6%和8.5%,等位基因E4频率分别为3.0%和4.5%,各基因型和等位基因频率分布在两组间差异无统计学意义;控制年龄和性别后,携带E2和E4等位基因OR（95%CI）分别为1.20（0.81～1.79）和0.89（0.48～1.63）。结论 APOE基因多态性与回、汉族老年人非酒精性脂肪肝的发病无显著性相关。     

型特异性引物PCR技术在HBV基因分型中的应用

目的 应用乙型肝炎病毒（HBV）型特异性引物PCR的基因分型方法，了解武汉地区HBV基因型的分布及其临床意义。方法 选择298例HBV感染者，分成表面抗原携带者（ASC）、急性肝炎（AH）、慢性肝炎（CH）、重型肝炎（SH）、肝硬化（LC）和原发性肝癌（HCC）6组，用多对型特异性引物PCR方法检测HBV的基因型；并对4份血清HBVDNA进行序列分析。结果多对型特异性引物PCR法可简便、快速、准确地鉴定HBV基因型；298份HBVDNA阳性的血清标本中，B基因型197例（66．1％），BC混合型68例（22．8%），C基因型33例（11．1％）；B基因型在ASC、AH、CH、SH和HCC组患者中均占绝对优势，分别为63．6％、71．9％、68．7％、89．5％和65．9%，C基因型在各组患者中的分布差异无显著性意义，BC混合基因型在各组患者中的分布存在差异，更多见于肝硬化患者；各基因型在ALT水平、HBeAg阳性率及HBV DNA水平上差异无显著性意义（均P〉0．05）。结论 多对型特异性引物PCR扩增法能快速准确地进行HBV基因分型检测，可用于大规模的流行病学调查；武汉地区HBV感染者中，优势基因型为B型，其次为BC混合型和c型，BC混合型更多见于肝硬化患者。     

新疆维吾尔族长寿老人载脂蛋白E基因多态性与血压关系的临床研究

目的 探讨新疆地区维吾尔族长寿老人载脂蛋白E基因多态性与血压的关系。方法 以课题组1997-2003年多次流行病学调查所得维吾尔族长寿老人144例为研究对象,根据24 h动态血压测量结果将其分为正常组(107例)和高血压组(37例)。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测两组人群的载脂蛋白E（ApoE）基因多态性。结果 正常组与高血压组ApoE基因型分布间差异无统计学意义(P＞0.05),两组中E3/3占的比例均较其他基因型高,分别为76.6%（82/107）、64.9%（24/37）|两组ApoE等位基因分布间差异有统计学意义（P＜0.05）,高血压组中携带ApoE ε4频率（9.5%,7/37）高于正常组（2.3%,5/107）。不同ApoE表型的高血压患者的收缩压间差异有统计学意义（P＜0.05）,带有ε4等位基因的高血压患者收缩压比带有其他等位基因者高。结论 ApoE基因多态性与新疆地区维吾尔族长寿老人收缩压相关。     

PCR-RFLP检测Apo CIII基因T-455C多态性的反应条件优化

目的:探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)反应体系中各种成分的优化,建立检测载脂蛋白CIII(Apo CIII)T-455C多态性的方法。方法:采用PCR-RFLP检测ApoCIII基因T-455C多态性,同时通过对参与反应体系的成分,在一定范围内设置不同的浓度或参数组,进行正交试验和单因素逐项试验,观测各成分在不同条件下对结果的影响。结果:Apo CIII基因检测到3种基因型。PCR反应体系中不同模板含量、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、退火温度和酶切体系中PCR产物量、内切酶量、酶切时间等对反应结果均有不同程度的影响。结论:该研究建立的PCR-RFLP体系检测Apo CIII基因T-455C多态性技术,是一种高效快速、简单敏感、准确可靠的分析方法,适合常规实验室开展。     

辽宁地区人乳头瘤病毒的感染状态及其高危基因型的分布情况

  目的 研究辽宁地区人乳头瘤病毒（HPV）的感染状态和其主要高危基因型别的分布情况。方法 应用特异PCR检测辽宁地区24 041名女性HPV DNA及其主要高危型别的分布。结果 辽宁地区女性人群中HPV总感染率为45.6%（95%CI 44.97%~46.23%）,其中28.25%（95%CI 27.68%~28.82%）为HPV机会性感染,17.35%（95%CI 16.87%~17.83%）为持续性感染率。持续感染性HPV的主要高危基因型别依次为HPV-16（18.21%,95%CI 17.04%~19.38%）、HPV-58（13.2%,95%CI 12.17%~14.23%）、HPV-18（8.66%,95%CI 7.81%~9.51%）、HPV-52（7.06%,95%CI 6.28%~7.84%）及 HPV-33（6.78%,95% CI 6.02%~7.54%）。结论 在辽宁地区女性人群中主要持续感染HPV-16、HPV-58、HPV-18、HPV-52和HPV-33五种高危基因型别。     

应用PCR-RFLP方法进行载脂蛋白E基因分型的研究

目的：对１３４例患者随机进行载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因分型初探。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术用特异性探针对氨基酸１１２和１５８多形基因区基因组的ＤＮＡ扩增,产物用Ｈｈａｎｌ进行酶切后,聚丙烯酰胺凝胶核酸电泳和银染进行结果分析。结果：经聚丙烯酰胺凝胶核酸电泳和银染的ＡｐｏＥ片段：Ｅ２／Ｅ２为９１,８１和３８ｂｐ,Ｅ３／Ｅ３为９１,４８,３８和３３ｂｐ。Ｅ２／Ｅ３为９１,８１,４８,３８和３３ｂｐ,Ｅ３／Ｅ４为９１,７２,４８,３８和３３ｂｐ,１３４例其ＡｐｏＥ分布频率分别为：Ｅ２／Ｅ２１％,Ｅ３／Ｅ３５４％,Ｅ２／Ｅ３３９％,Ｅ３／Ｅ４３％,Ｅ４／Ｅ４和Ｅ２／Ｅ４均为０。结论：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法进行ＡｐｏＥ基因分型是一种简便、可靠、快速的方法。     

正常人群载脂蛋白E基因多态性的研究

为研究载脂蛋白E在正常汉族人体内的分布,应用聚合酶链-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,共检测197例正常汉族人Apo E基因频率。结果纯合子ε_（3/3）基因型频率及ε_3等位基因频率最高,ε_2随年龄增长有增加趋势;证明该法检测快速、准确,分辨率高,并为Apo E生理功能的研究及临床应用打下基础。     

用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ,再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８）,与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）,两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型,其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％）,各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率,ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率,其所示基因型也有所不同。